治療乳腺疾病的中成藥及其制備方法與流程

本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療乳腺疾病的中成藥及其制備方法。

背景技術(shù)：

乳腺病是一種常見病，多發(fā)病，是危害婦女身心健康的主要疾病，分為乳腺炎、乳腺增生、乳腺纖維病、乳腺囊腫、乳腺癌五大類。都市女性中，乳腺疾病成為了頭號大敵。如治療不及時和治療不當，就可能發(fā)生病變，突變隨時導(dǎo)致生命危險。據(jù)統(tǒng)計，70％到90％的女性有乳腺增生問題，發(fā)病率極高。大約有1/4～1/3婦女一生中曾患乳腺疾病。城市婦女的發(fā)病率較農(nóng)村高，可能與文化知識及對疾病的重視程度乃至耐受程度有關(guān)。30～50歲最高峰，青春期及絕經(jīng)后則少見。對于乳腺增生、乳腺纖維瘤、乳腺囊腫，一些患者多采用手術(shù)摘除的辦法，但是手術(shù)痛苦較大，易導(dǎo)致女性激素分泌的失調(diào)，從而過早出現(xiàn)衰老，給患者帶來痛苦和遺憾。乳腺增生危害之一的癌變難以回避：乳腺增生病惡變的危險性較正常婦女增加2～4倍，臨床癥狀和體征有時與乳癌相混。由于乳腺增生病重的人群有發(fā)展成為乳腺癌的可能性，這也是多數(shù)人認為乳腺增生最大的危害。乳腺增生危害之二精神影響：乳腺增生患者，常常會有明顯的情緒改變，此外生活規(guī)律也會被迫顛倒錯亂，身體免疫機能會因勞累而每況愈下，乳房局部會因情緒變化而痛得心煩。乳腺增生危害之三的生理方面：乳腺增生不同癥型及其臨床表現(xiàn)是：(1)肝郁氣滯性：精神抑郁，心煩易怒；(2)沖任不調(diào)型：日久失治者，少數(shù)可發(fā)生癌變。乳腺增生病西醫(yī)認為系內(nèi)分泌障礙性增生病，一是由于體內(nèi)女性激素代謝障礙，體內(nèi)雌激素水平增高或活性增強，孕激素水平降低，雌、孕激素比例失調(diào)，使乳腺實質(zhì)增生過度和復(fù)舊不全；二是由于部分乳腺實質(zhì)成分中女性激素受體的質(zhì)和量異常，使乳房各部分的增生程度參差不齊。

目前國內(nèi)外對于乳腺增生病的治療尚無確切有效的藥物。國外一直采用針對雌激素增高選用抑制雌激素類藥物的治療方法，所用藥物有三苯氧胺、甲狀腺激素類制劑、溴隱亭、丹那唑、酶類、維生素類、小劑量碘劑以及性激素治療等。應(yīng)用這些方法治療本病，止痛、消塊作用好，但因其副作用大，尤其是性激素，應(yīng)用后可能會進一步干擾人體的激素間的平衡，并增加癌變的可能。故盡量少用或不用，僅在癥狀嚴重時，才考慮應(yīng)用。對重度增生有惡變傾向者，則采取手術(shù)療法，但術(shù)后復(fù)發(fā)率較高。國內(nèi)臨床上對于該病的治療主要以中藥為主，包括加味逍遙丸、逍遙散、小金丸、乳癖消、乳塊消等。所有中藥都是止痛，緩解癥狀，且停藥后腫塊與癥狀復(fù)發(fā)的現(xiàn)象；綜上所述，現(xiàn)在臨床上急需治療乳腺增生的有效藥物。專利“2011103546377，治療乳腺疾病的中藥及其制備方法”是一種治療乳腺疾病的中藥，本發(fā)明在此基礎(chǔ)上進一步改進中藥的配方及其制備方法，優(yōu)化藥物療效，用于治療乳腺增生、乳腺纖維瘤、乳腺囊腫等乳腺疾病。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是解決現(xiàn)有治療乳腺疾病中沒有一種見效快，效果好，方便使用的中成藥問題，而提供一種采用口服方式、使用方便、見效快的治療乳腺疾病的中成藥及其制備方法。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡1～7份、皂角刺1～6份、王不留行1～6份、夏枯草1～8份、赤芍1～7份、郁金1～6份、牡蠣1～4份、丹參1～5份、橘核1～5份、三棱1～5份、莪術(shù)0.3～2份、甘草0.3～2份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡2～6份、皂角刺2～5份、王不留行2～5份、夏枯草2～7份、赤芍2～6份、郁金2～5份、牡蠣2～3份、丹參2～4份、橘核2～4份、三棱2～4份、莪術(shù)0.5～2份、甘草0.5～2份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡1份、皂角刺3份、王不留行3份、夏枯草1份、赤芍2份、郁金3份、牡蠣2份、丹參2份、橘核3份、三棱2份、莪術(shù)0.5份、甘草0.5份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡3份、皂角刺4份、王不留行5份、夏枯草5份、赤芍4份、郁金6份、牡蠣3份、丹參4份、橘核3份、三棱3份、莪術(shù)1份、甘草1份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡4份、皂角刺5份、王不留行6份、夏枯草6份、赤芍5份、郁金5份、牡蠣4份、丹參5份、橘核4份、三棱4份、莪術(shù)2份、甘草1份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡6份、皂角刺6份、王不留行6份、夏枯草4份、赤芍6份、郁金6份、牡蠣4份、丹參4份、橘核4份、三棱4份、莪術(shù)2份、甘草2份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡2份、皂角刺3份、王不留行4份、夏枯草2份、赤芍3份、郁金4份、牡蠣2份、丹參3份、橘核2份、三棱5份、莪術(shù)0.5份、甘草2份。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，包括如下步驟：

步驟1、按照重量份數(shù)稱取一定重量的柴胡、郁金、丹參、莪術(shù)、三棱，將稱量好的藥材粉碎后過80目篩備用；

步驟2、將步驟1中粉碎后的藥材細粉經(jīng)微波滅菌后備用；

步驟3、按照重量份數(shù)稱取一定重量的皂角刺、赤芍、王不留行、牡蠣、橘核、夏枯草、甘草，將稱量好的藥材加入8倍的水，浸泡0.5～2h后，煎煮2～3h，煎煮后的藥液濾出保留，濾渣加入6倍的水進行第二次煎煮，煎煮1～2h，煎煮后濾出的藥液與第一次濾出的藥液合并后，待用；

步驟4、將步驟3制備的藥液濃縮至相對密度為1.03～1.10，備用；

步驟5、將步驟4制備的藥液置于離心分離器中離心，離心轉(zhuǎn)速2500r/min，離心時間20min，離心后取上清液濃縮至相對密度為1.10～1.20的清膏備用；

步驟6、將步驟2制備的藥材細粉混勻后，加入步驟5制備的清膏，混勻，在60℃下減壓干燥，整粒；

步驟7、將步驟6制得的顆粒及粉末進行檢驗、檢驗合格后進行膠囊填充、鋁塑后得到治療乳腺疾病的中成藥。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，步驟1中的中藥置于中藥超微粉碎機中粉碎10～30min，粉碎機功率1.8kw，粉碎機轉(zhuǎn)速22000rad/min，粉碎量1～4kg/h。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，步驟2中微波滅菌的微波功率300～1000mhz，微波時間100～180s，微波轉(zhuǎn)速10r/min。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，本發(fā)明方法制備的所述的治療乳腺疾病的中成藥中柴胡皂苷a的含量為1.02mg/g，柴胡皂苷d的含量為4.81mg/g；而水蒸餾法提取中柴胡皂苷a的含量0.62mg/g，柴胡皂苷d的含量為0mg/g；水煎煮提取方法中柴胡皂苷a的含量0.41mg/g，柴胡皂苷d的含量為0mg/g。本發(fā)明方法制備的所述的治療乳腺疾病的中成藥丹參酮ⅱa含量2.82mg/g，粉碎損耗7.6％；而乙醇回流提取的方法丹參酮ⅱa含量0.72mg/g，損耗76.4％。所以本發(fā)明有益效果之一是制備方法的藥材成分提取方法優(yōu)于常規(guī)方法，常規(guī)提取柴胡均為水蒸餾提取揮發(fā)油或直接水煎煮，但無論是何種常規(guī)方式提取，只要用水加熱，則柴胡中的功效成分—柴胡皂苷a含量下降明顯，且柴胡皂苷d全部降解。丹參采用乙醇回流提取丹參酮ⅱa含量也發(fā)生降解。而本發(fā)明將柴胡、郁金、丹參、莪術(shù)和三棱直接粉碎入藥，最大程度的保留了功效成分。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，有益效果之二是將柴胡、郁金、丹參、莪術(shù)、三棱五味藥材的細粉，用微波進行滅菌。丹參藥材中丹參酮ⅱa受熱易分解破壞，因此丹參藥材的滅菌問題，一直沒有好的方法進行。本發(fā)明首創(chuàng)采用微波的方式對丹參藥材的細粉進行滅菌，具有時間短、耗能低、滅菌效率高等特點，最大程度的保留了丹參的功效成分。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，有益效果之三是制備方法的工藝采用高速離心：在工藝上采用高速離心法來純化藥液，既能將細微的藥渣、懸浮物、淀粉等無效成份去除，還能將有效成分進行最大限度的保留。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，有益效果之四是在專利號為201110354637.7，專利名稱為“治療乳腺疾病的中藥及其制備方法”的原有處方的基礎(chǔ)上，經(jīng)過篩選優(yōu)化去除紅花，增加了郁金、丹參、牡蠣、三棱、橘核和甘草六味藥材。組成治療乳腺疾病的最佳處方。郁金為臣藥，辛苦性寒，善行氣解郁，活血止痛?！侗静輦湟吩破洹靶袣?，解郁；泄血，破瘀”。其行氣解郁以助柴胡，活血化瘀又助皂角刺，一物二用，恰適病機。丹參為佐藥，苦而微寒，歸心、肝經(jīng)，活血祛瘀，消癰止痛，《日華子本草》載其能“破宿血，補新生血”。牡蠣為佐藥，咸而微寒，長于軟堅散結(jié)，《湯液本草》云其“咸為軟堅之劑，以柴胡引之，故能去脅下之硬”。三棱為佐藥，與莪術(shù)相須為用，功可破血行氣，消積止痛，《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》謂之：“雖堅如鐵石，亦能徐徐消散”。甘草調(diào)和藥性，為使藥之用。以上新增六味，優(yōu)于紅花的活血止痛的作用，同時即助君藥柴胡行氣解郁，又增強了軟堅散結(jié)、消積止痛的作用。經(jīng)處方優(yōu)化后的本發(fā)明處方增強了功能，提升了主治效果。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，方劑是依疏肝理氣，活血止痛，化痰散結(jié)之法而立。方中以柴胡、皂角刺共為君藥。柴胡辛苦微寒，功善疏肝理氣，使肝氣得以條達。《滇南本草》謂其能“行肝經(jīng)逆結(jié)之氣”。肝調(diào)暢氣機，主藏血，柴胡可“宣暢氣血”(《藥性論》)，尤善治療肝郁氣滯引起的乳房結(jié)癖，為治肝郁氣滯證之要藥。皂角刺辛溫，功可活血消腫，托毒排膿?！侗静菥V目》言其“治癰腫，妨乳”，能消散瘀結(jié)乳絡(luò)之癖，治乳汁瘀滯，不泄結(jié)毒之病。皂角刺與柴胡配伍，一者性溫，一者微寒，合而無寒熱偏盛之弊。柴胡既疏肝行氣，又助皂角刺活血之功，即所謂氣行則血行，兩藥相伍，行氣活血之力倍增。為增方中活血散結(jié)之力，臣以赤芍、郁金、王不留行。赤芍苦而微寒，歸肝經(jīng)，散瘀止痛，《本經(jīng)》即謂之能“除血痹，破堅積”。《本草經(jīng)疏》詳析此功：“其主除血痹，破堅積者，血瘀則發(fā)寒熱，行血則寒熱自止，血痹疝瘕自消?！庇艚鹦量嘈院菩袣饨庥?，活血止痛?！侗静輦湟吩破洹靶袣?，解郁；泄血，破瘀”。其行氣解郁以助柴胡，活血化瘀又助皂角刺，一物二用，恰適病機。王不留行“性走而不住，雖有王命不能留其行”(《本草綱目》)。本品功善活血通經(jīng)，下乳消腫。對乳汁不下，日久結(jié)癖之證，實屬標本兼顧。其于活血行瘀之中，又可消腫斂瘡?！睹t(yī)別錄》用其治“癰疽惡瘡，瘺乳”，對乳癰結(jié)癖，可使“血已順流，自然輕則解散，重則分消矣。”(《本經(jīng)疏證》)。氣機阻滯，血行不暢，易致痰結(jié)癖塊，故方中佐以橘核、牡蠣、夏枯草。橘核苦平，歸肝經(jīng)，功能理氣散結(jié)止痛，為治乳癖結(jié)塊之要藥。《本草備要》云其能“行肝氣，消腫”，與行氣、活血之品相伍，消散痰瘀結(jié)聚。牡蠣、夏枯草皆俱散結(jié)之力。牡蠣咸而微寒，長于軟堅散結(jié)，《湯液本草》云其“咸為軟堅之劑，以柴胡引之，故能去脅下之硬”；夏枯草辛苦而寒，長于清肝瀉火，散結(jié)消腫，《滇南本草》云其“祛肝風，行經(jīng)絡(luò)”，“行肝氣，開郁結(jié)”，“散瘰疬、周身結(jié)核”。為增方中活血散瘀之力，又佐以丹參、三棱、莪術(shù)。丹參苦而微寒，歸心、肝經(jīng)，活血祛瘀，消癰止痛，《日華子本草》載其能“破宿血，補新生血”；三棱、莪術(shù)相須為用，功可破血行氣，消積止痛，《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》謂之：“雖堅如鐵石，亦能徐徐消散”。甘草調(diào)和藥性，為使藥之用。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥，氣血并治，痰瘀兼顧，共奏疏肝理氣，活血止痛，化痰散結(jié)之功。如此，于乳癖結(jié)塊之證，可以漸消緩散，而收全功。依據(jù)臨床效果實驗說明：本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：成本低廉、使用方便、見效快，效果顯著，可達到根治不復(fù)發(fā)。對乳癖結(jié)塊，乳痛；乳腺增生病及乳腺炎疾病有很好的療效。本發(fā)明總有效率為93.9％，相比于原發(fā)明“治療乳腺疾病的中藥及其制備方法”的總有效率為91.3％有所提高。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，長期毒性實驗說明：本發(fā)明連續(xù)用藥90天，用藥后檢測血液學(xué)，血液生化學(xué)指標未發(fā)現(xiàn)異常改變，重要組織臟器病理形態(tài)學(xué)檢查亦未發(fā)現(xiàn)病理性改變。動物試驗結(jié)果分析，該藥毒性低微，臨床用藥安全。

本發(fā)明所述的治療乳腺疾病的中成藥制備方法，臨床試驗證明：本發(fā)明對不同類型的乳腺增生疾病均有明顯的治療作用。本發(fā)明對于乳痛癥型146例患者的治療總有效率為95.9％；對小葉增生型538例患者的治療總有效率為95.2％；對于囊腫病型221例患者的治療總有效率為95.9％。對于纖維腺病型302例患者的治療總有效率為94.4％；對于纖維化型158例患者的治療總有效率為84.2％。終上所述，本發(fā)明對于以上各類型的乳腺增生疾病1365例患者的治療總有效率為93.9％。較原發(fā)明的乳康膠囊對各類型的乳腺增生疾病115例患者的治療總有效率為91.3％有所提高。試驗驗證所述的治療乳腺疾病的中成藥用藥起效時間最短3天，最長14天，除對最常見的小葉增生有效外，對病程長、纖維腺病型療效也好，遠期觀察復(fù)發(fā)少，對伴結(jié)節(jié)、囊性易癌變的患者亦有較好的治療和預(yù)防作用，且祛痛效果快且顯著。

附圖說明

圖1為具體實施方式二中空白對照組的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖2為具體實施方式二中模型組的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖3為具體實施方式二中乳疾靈的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖4為具體實施方式二中乳塊消的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖5為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖6為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥中劑量的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖7為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥高劑量的大鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖8為具體實施方式二中空白對照組的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖9為具體實施方式二中模型組的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖10為具體實施方式二中乳疾靈的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖11為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖12為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片；

圖13為具體實施方式二中所述的治療乳腺疾病的中成藥中劑量的小鼠乳腺增生疾病細胞病理圖片。

具體實施方式

具體實施方式一：

一種治療乳腺疾病的中成藥，由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡1份、皂角刺3份、王不留行3份、夏枯草1份、赤芍2份、郁金3份、牡蠣2份、丹參2份、橘核3份、三棱2份、莪術(shù)0.5份、甘草0.5份。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的制備方法，包括如下步驟：

步驟1、按照重量份數(shù)稱取一定重量的柴胡、郁金、丹參、莪術(shù)、三棱，將稱量好的藥材粉碎后過80目篩備用；

步驟2、將步驟1中粉碎后的藥材細粉經(jīng)微波滅菌后備用；

步驟3、按照重量份數(shù)稱取一定重量的皂角刺、赤芍、王不留行、牡蠣、橘核、夏枯草、甘草，將稱量好的藥材加入8倍的水，浸泡0.5～2h后，煎煮2～3h，煎煮后的藥液濾出保留，濾渣加入6倍的水進行第二次煎煮，煎煮1～2h，煎煮后濾出的藥液與第一次濾出的藥液合并后，待用；

步驟4、將步驟3制備的藥液濃縮至相對密度為1.03～1.10，備用；

步驟5、將步驟4制備的藥液置于離心分離器中離心，離心轉(zhuǎn)速2500r/min，離心時間20min，離心后取上清液濃縮至相對密度為1.10～1.20的清膏備用；

步驟6、將步驟2制備的藥材細粉混勻后，加入步驟5制備的清膏，混勻，在60℃下減壓干燥，整粒；

步驟7、將步驟6制得的顆粒及粉末進行檢驗、檢驗合格后進行膠囊填充、鋁塑后得到治療乳腺疾病的中成藥。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的制備方法，步驟1中的中藥置于中藥粉碎機中粉碎20min，粉碎機功率1.8kw，粉碎機轉(zhuǎn)速22000rad/min，粉碎量4kg/h。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的制備方法，步驟2中微波滅菌的微波功率300mhz，微波時間180s，微波轉(zhuǎn)速10r/min。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的制備方法，柴胡不同提取方法對應(yīng)的柴胡皂苷含量數(shù)據(jù)如表1所示，丹參不同提取方法制得的丹參酮ⅱa含量如表2所示。

表1柴胡不同提取方法對應(yīng)的柴胡皂苷含量數(shù)據(jù)表

表2丹參不同提取方法對應(yīng)的丹參酮ⅱa含量數(shù)據(jù)表

乙醇回流法提取丹參酮ⅱa轉(zhuǎn)移率為23.6％,損耗76.4％，本實施方式中丹參80目細粉的損耗是7.6％，丹參酮ⅱa2.82mg/g。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的制備方法，制備方法的藥材滅菌方法對于微波滅菌的條件通過實驗進行了篩選，并與高溫滅菌進行對比分析，以丹參藥材中丹參酮ⅱa含量和微生物限度為考察指標進行考察。

使用微波滅菌設(shè)備進行滅菌，分別使用10轉(zhuǎn)/分、20轉(zhuǎn)/分和30轉(zhuǎn)/分三種轉(zhuǎn)速，藥粉為0.5cm和1.0cm兩種厚度分別進行考察。

分別取上述五種過篩后的藥材細粉放入自封袋中，使其厚度為1.0cm及0.5cm各三組。開啟機器，設(shè)置轉(zhuǎn)速10轉(zhuǎn)/分開啟微波，取厚度為1.0cm、0.5cm的藥粉各一組依次放在傳送帶上，通過后將轉(zhuǎn)速設(shè)置為20轉(zhuǎn)/分，取厚度1.0cm、0.5cm的藥粉各一組依次放在傳送帶上，通過后將轉(zhuǎn)速設(shè)置為30轉(zhuǎn)/分，取剩下的厚度為1.0cm、0.5cm的藥粉依次放在傳送帶上，通過后關(guān)閉機器。測定不同條件微波滅菌后藥粉的含量以及微生物限度,結(jié)果如表3所示,與高溫滅菌進行對比分析，以丹參藥材中丹參酮ⅱa含量和微生物限度為考察指標進行考察如表4所示。

表3微波滅菌前后藥粉含量及微生物限度

表4高溫滅菌與微波滅菌檢測結(jié)果表

由表3和表4可知，五種生藥粉經(jīng)過微波滅菌后只有10轉(zhuǎn)/分條件下微生物限度均符合規(guī)定而莪術(shù)藥材的含量及丹參酮ⅱa的含量均無明顯變化，采用微波滅菌10轉(zhuǎn)/分；1.0cm厚方法對生藥粉進行滅菌。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥的1365例臨床醫(yī)療效果如下：

一般資料：1365例中年齡25-60歲，中位34.6歲，其中女性1321例，男性44例，病程最短數(shù)日，最長10余年，已婚者占84.2％。入院主訴均有不同程度的乳房脹痛、乳房腫塊、乳頭溢液，部分病人有情緒煩躁、憂絲厭食、月經(jīng)紊亂、睡眠不安等癥狀，女性患者與月經(jīng)有關(guān)的病例占65.4％，與月經(jīng)無關(guān)的病例占34.6％。體征上除單純?nèi)橥窗Y外，多可觸及局限或散在增粗腺體，呈顆粒狀或條索狀。男性患者則在乳頭乳暈下觸及扁平狀腺塊。初治患者為37.6％，既往曾用其他藥物及方法治療效果不佳者占62.4％。

診斷方法：所有病例均經(jīng)臨床手捫，繼續(xù)紅外掃描，鉬靶x線攝片，細胞學(xué)或冰凍切檢等聯(lián)合方法明確診斷，排外乳腺惡性病變。

治療方法：所述的治療乳腺疾病的中成藥每次服用3-4粒，每日3次，40天為一療程，間歇或不間歇繼服第二三療程，經(jīng)期停服。

治療的標準：

結(jié)合臨床癥狀，體征和乳腺紅外掃描綜合判定療效；對患者治療前后作觸診和紅外線掃描，對照患者治療前后的觸診和紅外線掃描結(jié)果進行診斷，判定所述的治療乳腺疾病的中成藥的藥效學(xué)作用；通過對患者性激素等水平治療前后的測定來了解所述的治療乳腺疾病的中成藥對人體內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的調(diào)節(jié)作用，進一步探討所述的治療乳腺疾病的中成藥的用藥機制，同時觀察藥物的劑量和毒副作用。

判斷標準：經(jīng)治療后滿2個療程以上者，分以下4個方面判定療效。

①痊愈乳痛、溢液、增粗腺體或腫塊消失；

②顯效乳痛、溢液明顯減輕，增粗腺體或腫塊縮小1/2以上；

③有效乳痛、溢液有所減輕，增粗腺體或腫塊縮小不到1/2；

④無效乳痛、溢液無明顯改善，增粗腺體或腫塊不縮小，甚至惡變者；

結(jié)果分析：對臨床經(jīng)診斷明確為乳腺增生病的1365例患者進行治療，其中乳痛癥型146例，小葉增生型538例，囊腫病型221例，纖維腺病型302例，纖維化型158例。所述的治療乳腺疾病的中成藥用藥起效時間最短3天，最長14天，除對最常見的小葉增生有效外，對病程長、纖維腺病型療效也好，男性腫塊消失快，遠期觀察復(fù)發(fā)少，對伴結(jié)節(jié)、囊性易癌變的有較好的治療和預(yù)防作用，且祛痛快、效果顯著，具體療效總結(jié)見表5：

表51365例乳腺增生病療效

觀察本組病例，均無明顯毒副反應(yīng)，僅出現(xiàn)二例服藥后胃部不適，經(jīng)停藥對癥處理好轉(zhuǎn)。分析本品成分中除疏肝理氣的藥物外，尚有攻堅散結(jié)之類藥物，此亦正是對纖維化型，瘤樣結(jié)節(jié)病變有效的主因，臨床使用中對嚴重胃炎、潰瘍性病患應(yīng)慎用。

臨床總結(jié)：所述的治療乳腺疾病的中成藥具有疏肝理氣，化瘀散結(jié)。在臨床上用于乳癖結(jié)塊，乳痛；乳腺增生病及乳腺炎。

結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥優(yōu)于原發(fā)明的技術(shù)，更適于乳腺增生病早期及輕中癥狀患者。

安全性：試驗過程中無不良事件發(fā)生。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥可以顯著提高乳腺增生病及乳腺炎患者的臨床療效，與原發(fā)明產(chǎn)品試驗數(shù)據(jù)及同類藥品文獻數(shù)據(jù)相比療效有所提高，口服安全值得在臨床上推廣使用。

具體實施方式二：

本實施方式與具體實施方式一不同的是：本實施方式由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡3份、皂角刺4份、王不留行5份、夏枯草5份、赤芍4份、郁金6份、牡蠣3份、丹參4份、橘核3份、三棱3份、莪術(shù)1份、甘草1份。

本實施方式下進行藥效學(xué)實驗：從肌肉注射苯甲酸雌二醇和黃體酮復(fù)制大鼠乳腺增生的疾病模型和腹腔注射苯甲酸雌二醇復(fù)制小鼠乳腺增生的疾病模型，兩方面進行主要藥效學(xué)試驗，來證明所述的治療乳腺疾病的中成藥具有抑制乳腺增生的作用。并從所述的治療乳腺疾病的中成藥抗炎作用和鎮(zhèn)痛作用兩方面進行試驗研究。

(一)大鼠乳腺增生的疾病模型的藥效試驗

肌肉注射苯甲酸雌二醇和黃體酮復(fù)制大鼠乳腺增生的疾病模型，連續(xù)口服給藥所述的治療乳腺疾病的中成藥，觀察所述的治療乳腺疾病的中成藥對乳腺增生大鼠血清中性激素含量、乳腺組織體積的影響，并對乳腺組織進行病理組織學(xué)檢查。試驗結(jié)果：所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組與模型組相比，乳腺體積均減小，結(jié)果均有顯著差異(p＜0.05)。與陽性藥物比較，結(jié)果未見顯著差異；所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中劑量組與模型組相比，血清中雌二醇含量降低，結(jié)果有顯著性差異(p＜0.05)。與陽性藥物比較，結(jié)果未見顯著差異。所述的治療乳腺疾病的中成藥高、低劑量組與模型組相比，孕酮的含量增高，結(jié)果有顯著差異(p＜0.05)。所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組與陽性藥物乳疾靈相比，孕酮含量增高，結(jié)果有顯著差異(p＜0.05)；所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組與乳疾靈組相比，睪酮含量增高，結(jié)果有顯著差異(p＜0.05)；病理組織學(xué)檢查表明所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中劑量組能夠減小乳腺小葉體積和腺管擴張程度。結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥具有抑制乳腺增生的作用。

1、試驗?zāi)康模河^察所述的治療乳腺疾病的中成藥抗大鼠藥物誘導(dǎo)乳腺增生作用，為評價所述的治療乳腺疾病的中成藥抗乳腺增生作用提供初步證據(jù)。

2、受試藥物：

受試樣品：所述的治療乳腺疾病的中成藥；

陽性對照：乳疾靈(090805)，乳塊消(20090612)。

3、實驗方法：

(1)將大鼠按體重分為實驗組(100只)和空白組(20只)，實驗組肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，1次/d，連續(xù)25d。繼而改用肌注黃體酮5mg/kg，1次/d，連續(xù)5d?？瞻捉M肌注等體積生理鹽水，連續(xù)注射30d。

(2)注射30d，抽取實驗組(5只)和空白組(5只)大鼠，取第三對和第四乳房，經(jīng)乳頭基底部最大切面取下該對完整的乳腺，測量乳腺組織體積。實驗組與模型組相比乳腺組織體積有明顯差異，且實驗組乳腺組織明顯紅腫，證明造模成功。

(3)將造模成功的大鼠按體重分組6組(n＝12只)。分為所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中、低三組(0.4、0.2、0.1g/kg)、乳塊消組(0.2g/kg)、乳疾靈組(0.3g/kg)和模型組。所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中、低劑量組和乳疾靈、乳塊消陽性藥物組灌胃給予藥物1次/日，模型組、空白組灌胃給予等體積生理鹽水10ml/kg，持續(xù)28d。(乳塊消、乳疾靈給藥劑量按臨床用量折算。)

(4)末次給藥后1小時，3％苯巴比妥腹腔麻醉(1.5ml/kg)，腹主動脈取血4-5ml，靜置分離血清。取第三對和第四對乳房，經(jīng)乳頭基底部最大切面取下該對完整的乳腺。

4、評價指標：

測定血清雌二醇(e2)、孕酮(p)、泌乳素(prl)、黃體生成素(lh)、卵泡刺激素(fsh)和睪酮(t)水平；測量乳腺組織的最大直徑、最小直徑和厚度，按照最大直徑×最小直徑×厚度計算出乳腺體積；乳腺用10％的甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋、切片,he染色，在光鏡下觀察小葉腺泡、導(dǎo)管上皮增生情況。

5、試驗結(jié)果：

(1)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠血清中性激素含量的影響

模型組、乳疾靈組、乳塊消組和所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組與空白組相比，雌二醇的含量增高，均有顯著差異(p＜0.05)。

乳疾靈、所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中劑量組與模型組相比，血清中雌二醇含量降低，結(jié)果有顯著性差異(p＜0.05)。

所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組與空白組相比，孕酮的含量增高，有顯著差異(p＜0.05)。

所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組與乳疾靈組相比，睪酮含量增高，有顯著差異(p＜0.05)。

卵泡生成素、黃體生成素、泌乳素，各組未見顯著性差異。

(2)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠乳腺體積的影響

模型組與空白組相比，體積增大，有顯著性差異(p＜0.05)。乳疾靈組、乳塊消組、所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組與模型組相比，乳腺體積減小，均有顯著差異(p＜0.05)。

(3)病理組織學(xué)檢查結(jié)果如附圖1至附圖7所示。

附圖1是空白組：乳腺小葉形態(tài)規(guī)則，腺管排列整齊，未見擴張，腺管上皮細胞無增生。乳腺導(dǎo)管無擴張。

附圖2是模型組：乳腺小葉增生，數(shù)目增多，體積增大，形態(tài)不規(guī)則。乳腺腺泡增大，腺管擴張，上皮增生，上皮細胞質(zhì)中可見較多空泡，腺腔中見較多分泌物。乳腺導(dǎo)管上皮細胞增多呈多層，導(dǎo)管擴張。

附圖3是陽性藥乳疾靈，附圖4是陽性藥乳塊消：乳腺小葉仍有輕度增生，但小葉體積較模型組小，數(shù)量也較之減小。乳腺腺管上皮細胞增生明顯減輕，腺腔內(nèi)可見較多脫落的上皮細胞。

附圖7是所述的治療乳腺疾病的中成藥高劑量組：乳腺小葉體積較模型組小，腺管仍有擴張，但較模型組輕。

附圖6是所述的治療乳腺疾病的中成藥中劑量組：乳腺小葉體積較模型組小，腺管仍有擴張，腺管上皮細胞可見空泡，腺腔內(nèi)分泌物較多。

附圖5是所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組：乳腺小葉體積較大，數(shù)目增多，腺管擴張明顯，腺上皮增生。

6、結(jié)論：

所述的治療乳腺疾病的中成藥高、中劑量組能夠降低乳腺增生模型大鼠血清中雌二醇水平；

所述的治療乳腺疾病的中成藥高、低劑量能夠提高血清中孕酮的水平。

所述的治療乳腺疾病的中成藥各劑量組能夠減小乳腺增生模型大鼠乳腺組織體積。

病理組織學(xué)觀察，所述的治療乳腺疾病的中成藥能夠減小乳腺小葉體積，減輕乳腺導(dǎo)管擴張程度。

通過以上結(jié)果，所述的治療乳腺疾病的中成藥對乳腺增生模型大鼠有治療作用。

(二)小鼠乳腺增生的疾病模型的藥效學(xué)實驗

通過藥效學(xué)實驗表明按本發(fā)明處方工藝制備的藥品除了能具有抑制乳腺增生的作用之外，并且對急慢性炎癥均有較強的抑制作用和鎮(zhèn)痛作用。

腹腔注射苯甲酸雌二醇復(fù)制小鼠乳腺增生的疾病模型，連續(xù)灌胃給藥所述的治療乳腺疾病的中成藥30天，觀察所述的治療乳腺疾病的中成藥對乳腺增生小鼠血清中性激素含量、乳腺高度及直徑的影響，并對乳腺組織進行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果顯示，所述的治療乳腺疾病的中成藥顯著降低乳腺增生小鼠的乳腺高度和直徑，病理組織學(xué)檢查可見所述的治療乳腺疾病的中成藥中、高劑量組乳腺小葉體積較模型組均有減小，腺管擴張程度下降。所述的治療乳腺疾病的中成藥和乳疾靈均對乳腺增生小鼠血清雌二醇含量及孕酮含量未見明顯影響。結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥具有抑制乳腺增生的作用，且其作用強度與乳疾靈無明顯差異。

1、實驗?zāi)康模河^察所述的治療乳腺疾病的中成藥抗小鼠藥物誘導(dǎo)乳腺增生作用，為評價所述的治療乳腺疾病的中成藥抗乳腺增生作用提供初步證據(jù)。

2、受試樣品：

受試樣品：所述的治療乳腺疾病的中成藥；

陽性對照：乳疾靈，西安太極藥業(yè)有限公司，批號：130601。

3、試驗動物：

健康spf級km雌性未孕小鼠72只，體重(20±2)g，遼寧長生生物技術(shù)有限公司。

4、實驗方法：

將小鼠隨機分為實驗組(60只)和空白組(12只)，空白組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1mg/kg，兩天一次；實驗組腹腔注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，兩天一次，直至實驗結(jié)束。造模第四天，以小鼠出現(xiàn)乳頭紅暈、隆起為模型制備成功。

將造模成功的小鼠隨機分為5組，每組12只，分別為所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組(0.25、0.5、1.0g/kg)、乳疾靈組(1.0g/kg)和模型組。所述的治療乳腺疾病的中成藥的低、中、高劑量組和乳疾靈組灌胃給予藥物，模型組、空白組灌胃給予等體積生理鹽水0.1ml/10g，每天一次，持續(xù)30天。

末次給藥30min后收集標本；摘眼球取血2ml，靜置30分鐘后，4℃離心(3000r/min)3min，取血清，置-20℃冰箱保存待測。取血后，完整剝?nèi)⌒∈笮夭浚腥〉?、3、4對乳腺組織，放入10％甲醛溶液固定液中待檢。測量小鼠第2、3、4對乳腺高度及直徑；采用放射免疫法測定血清中雌二醇e2、孕酮p含量；乳腺用10％甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，he染色，在光鏡下觀察小葉腺泡、導(dǎo)管上皮增生情況。

5、結(jié)果：

(1)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠血清性激素含量的影響

動物注射苯甲酸雌二醇之后，與空白對照組比較，模型對照組血清中雌二醇含量明顯升高(p﹤0.001)，孕酮含量明顯降低(p﹤0.001)，數(shù)據(jù)顯示造模成功。連續(xù)給予所述的治療乳腺疾病的中成藥、乳疾靈30天后，各組動物血清雌二醇和孕酮含量與模型組比較未見顯著變化。

(2)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠乳腺高度的影響

與空白組比較，模型組第二、三、四對乳腺高度顯著性增大(p﹤0.001)；所述的治療乳腺疾病的中成藥連續(xù)給藥30天后，所述的治療乳腺疾病的中成藥高劑量組顯著降低第三對乳腺的高度(p﹤0.01)，其作用強度與乳疾靈組相比，無統(tǒng)計學(xué)差異。

(3)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠乳腺直徑的影響

與空白對照組比較，模型對照組第二、三、四對乳腺直徑顯著增大(p﹤0.001)。所述的治療乳腺疾病的中成藥連續(xù)給藥30天后，低、中、高劑量組小鼠乳腺直徑都有不同程度地減小，與模型組比較有顯著性差異，其中高劑量組第二對乳腺直徑減小最明顯(p﹤0.001)，所述的治療乳腺疾病的中成藥各劑量組與陽性藥乳疾靈組相比，無統(tǒng)計學(xué)差異。

(4)病理組織學(xué)檢查結(jié)果如附圖8至附圖13所示：

附圖8為空白組：乳腺小葉形態(tài)規(guī)則，腺管排列整齊，未見擴張，腺管上皮細胞無增生。乳腺導(dǎo)管無擴張。

附圖9為模型組：乳腺小葉增生，數(shù)目增多，體積增大，形態(tài)不規(guī)則。乳腺泡增大，腺管擴張，上皮增生，上皮細胞質(zhì)中可見較多空泡，腺腔中見較多分泌物。乳腺導(dǎo)管上皮細胞增多呈多層，導(dǎo)管擴張。

附圖10為陽性藥(乳疾靈)：乳腺小葉仍有輕度增生，但小葉體積較模型組小。乳腺腺管上皮細胞增生明顯減輕，腺腔分泌物較模型組明顯減少。

附圖13為所述的治療乳腺疾病的中成藥高劑量組：乳腺小葉體積較模型組小，腺管仍有擴張，但較模型組輕，略遜于陽性藥組。

附圖12為所述的治療乳腺疾病的中成藥中劑量組：乳腺小葉體積較模型組小，腺管擴張，腺管上皮細胞可見空泡，腺腔內(nèi)分泌物較多。

附圖11為所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組：乳腺小葉體積較大，腺管擴張較明顯，腺上皮增生。

各組動物乳腺增生腺腔擴張導(dǎo)管擴張程度統(tǒng)計見表6：

表6各組乳腺病理變化程度

6、結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥具有抑制乳腺增生的作用，且其作用強度與乳疾靈無明顯差異。

具體實施方式三：

本實施方式與具體實施方式一或二不同的是：本實施方式由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡4份、皂角刺5份、王不留行6份、夏枯草6份、赤芍5份、郁金5份、牡蠣4份、丹參5份、橘核4份、三棱4份、莪術(shù)2份、甘草1份。

本實施方式制備的所述的治療乳腺疾病的中成藥，抗炎作用研究如下所述：

1、受試藥物：

受試樣品：所述的治療乳腺疾病的中成藥；

陽性對照：乳疾靈，西安太極藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：130601。

2、試驗動物：

健康spf級sd雌性未孕大鼠110只，體重180±20g，購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司。

健康spf級km雌性未孕小鼠50只，體重25-35g，購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司。

3、實驗方法：

(1)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠足趾腫脹的影響

游標卡尺測量各組大鼠的左后足足厚度；給藥1h后分取未孕雌性sd大鼠60只，體重為160-200g，按體重將其隨機分為6組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、乳疾靈組(0.7g/kg)、所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組(0.16g/kg)、中劑量組(0.32g/kg)、高劑量組(0.64g/kg)?？瞻讓φ战M和模型對照組均灌胃給予生理鹽水，給予量為1ml/100g；所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組和乳疾靈陽性藥物組每日灌胃給予藥物一次，大鼠的給藥體積也按照1ml/100g，連續(xù)給藥10天。在最后一天灌胃給藥前1h，用游標卡尺測量大鼠左足的厚度，給藥1h后，用注射器分別向大鼠的左后足爪中部皮下注射雞蛋清，濃度為10％，給予量為0.1ml/爪；觀察大鼠左后足腫脹程度，然后分別于0.5、1、2、4、6h后用ip54游標卡尺各測量一次大鼠左后足的厚度，測量時需要注意必須在相同部位。求出大鼠左后足同一腫脹部位的足腫脹度，計算足腫脹抑制率。

足腫脹度(mm)＝注射蛋清后左后足的厚度-注射蛋清前左后足的厚度；

足腫脹抑制率(％)＝(模型組腫脹度均值-給藥組腫脹度均值)/模型組腫脹度均值×100％；

對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析，試驗結(jié)果以±sd表示，各給藥組與模型組間、模型組與空白組間進行t檢驗。

(2)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠耳廓炎癥的作用

取50只spf級雌性km小鼠，體重為25-35g，用隨機方法按體重將其分為5組，每組10只，分別為模型對照組、乳疾靈組(1.0g/kg)、所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組(0.25g/kg)、中劑量組(0.5g/kg)、高劑量組(1.0g/kg)，連續(xù)給藥3天，每天一次；模型對照組給予生理鹽水，劑量按0.1ml/10g計；各給藥組分別灌胃給藥，給藥量按0.1ml/10g計。于末次給藥1h后，將小鼠右耳的正反兩面涂以二甲苯致炎，每只給予0.1ml。致炎15分鐘后將全部小鼠脫椎處死，沿小鼠耳廓基線將雙耳分別剪下以便打孔，用內(nèi)徑9mm的耳腫打孔器在雙耳的同一部位打孔，收集打下的耳片。分別稱重，計算各組腫脹度及腫脹抑制率。

耳腫脹度(mg)＝右耳重量-左耳重量；

腫脹抑制率(％)＝(模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度×100％；

數(shù)據(jù)處理：腫脹度結(jié)果以x±sd表示，統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間t檢驗進行比較。

(3)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠慢性炎癥性肉芽腫作用

取spf級sd雌性大鼠50只，體重為160-200g，用雙盲法將其隨機分為5組，每組10只，分別為模型對照組、乳疾靈組(0.7g/kg)、所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組(0.16g/kg)、中劑量組(0.32g/kg)、高劑量組(0.64g/kg)。在所有大鼠背部中間處取2cm×2cm面積剃毛，用酒精棉擦拭消毒，皮下注射2ml的2％瓊脂(在55℃水浴中保溫)，注射后立即凸起球狀包塊，即形成了大鼠慢性炎癥肉芽腫模型。第二天開始，各給藥組分別灌胃給予低、中、高劑量所述的治療乳腺疾病的中成藥及陽性藥乳疾靈，模型組灌胃給予生理鹽水，各組給藥容量均為1ml/100g，每天一次，連續(xù)給藥7天，每天觀察大鼠背部肉芽腫的變化。于末次給藥1h后將大鼠處死，剪開其背部肉芽腫部位的皮膚，剝離肉芽腫瓊脂塊并稱其重量，然后計算各組藥物抑制大鼠慢性炎癥性肉芽腫的抑制率。

肉芽腫脹抑制率(％)＝(模型組腫塊重量-各給藥組腫塊重量)/模型對照組腫塊重量×100％；

用t檢驗比較各劑量組與模型對照組之間有無差異。

5、結(jié)果

(1)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠足趾腫脹的影響

注射雞蛋清后，模型對照組大鼠的足腫脹度明顯增加，模型對照組的腫脹度與空白對照組比較差異顯著(p＜0.001)。給予雞蛋清2小時后，所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組大鼠組腫脹度明顯低于模型組；給予雞蛋清4小時后，各給藥劑量組與模型對照組相比較，各劑量組大鼠足腫脹度均明顯低于模型組(p＜0.05)；給予給予雞蛋清6小時后，各劑量組大鼠足腫脹度均明顯低于模型組(p＜0.01)，各劑量組的腫脹抑制率可達38.0％、24.1％、27.8％，所述的治療乳腺疾病的中成藥低劑量組大鼠足腫脹度與乳疾靈組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05)。

(2)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠耳廓炎癥的影響

各劑量的所述的治療乳腺疾病的中成藥對雌性km小鼠耳廓炎癥均有一定的抑制作用，所述的治療乳腺疾病的中成藥中、高劑量作用效果最為明顯。二甲苯致炎15分鐘后，所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組腫脹度由模型對照組的19.82±2.95分別降至17.23±1.95,13.23±0.88,9.56±1.77(p＜0.05,p＜0.001)；腫脹抑制率分別為13.1％，33.2％，51.8％，高劑量所述的治療乳腺疾病的中成藥的作用優(yōu)于乳疾靈(p＜0.001)。陽性藥乳疾靈也有一定的抗炎作用，抑制率為30.9％。

(3)所述的治療乳腺疾病的中成藥對大鼠慢性炎癥性肉芽腫的作用

各組大鼠給藥后的肉芽組織重量經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，與模型對照組相比，所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組對瓊脂所致的雌性sd大鼠慢性炎癥性肉芽腫均有很強的抑制作用。所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組的肉芽組織重量由模型對照組的2.03±0.46g分別下降至0.88±0.36g，1.18±0.28g，1.31±0.47g(p＜0.01,p＜0.001)抑制率分別為56.6％、41.9％、35.5％，低劑量組肉芽腫重量與乳疾靈組有顯著差異(p＜0.05)，中、高劑量組與乳疾靈組未見顯著差異。乳疾靈對慢性炎癥性肉芽腫也有較好的抑制作用(抑制率42.4％)。

6、結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥對急慢性炎癥均有較強的抑制作用。

具體實施方式四：

本實施方式與具體實施方式一至三之一不同的是：本實施方式由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡6份、皂角刺6份、王不留行6份、夏枯草4份、赤芍6份、郁金6份、牡蠣4份、丹參4份、橘核4份、三棱4份、莪術(shù)2份、甘草2份。

本實施方式所述的治療乳腺疾病的中成藥，鎮(zhèn)痛作用的研究如下所述：

1、試驗?zāi)康模翰捎脽岚宸ê团んw法復(fù)制小鼠疼痛的疾病模型，評論所述的治療乳腺疾病的中成藥的鎮(zhèn)痛作用。

2、受試藥物：

受試樣品：所述的治療乳腺疾病的中成藥；

陽性對照：阿司匹林腸溶片，吉林市鹿王制藥股份公司，批號：h22025784

3、試驗動物：

健康spf級雌性km小鼠120只，體重(20±2)g，購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司。

4、給藥途徑：

經(jīng)口灌胃給藥，與臨床給藥途徑一致。

5、試驗方法：

(1)熱板法

取小鼠70只，體重18～22g，用秒表記錄小鼠自投入熱板至出現(xiàn)舔足的時間(s)作為痛閾值，以不超過30s、不少于5s為合格，篩選出小鼠50只，隨機分為5組，空白對照組、阿司匹林組(0.23g/kg)和所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高劑量組(0.25、0.5、1.0g/kg)，每組10只，稱重并標記。將熱板儀恒溫調(diào)至(55±0.5)℃，在室溫為22℃的安靜環(huán)境中，給藥前測定每只小鼠的痛閾值2次，取平均值作為給藥前的閾值。分別灌胃給藥1次，對照組給等容量(0.1ml/10g體重)生理鹽水，給藥60min后同樣在22℃安靜環(huán)境中，分別復(fù)測1次各鼠痛閾值，記錄并計算痛閾值提高百分率。

(2)扭體法

取小鼠50只，按體重隨機分組為5組，空白對照組、阿司匹林組(0.23g/kg)和所述的治療乳腺疾病的中成藥低、中、高(0.25、0.5、1g/kg)劑量組，每組10只?？瞻讓φ战M給等體積0.1ml/10g生理鹽水，每天灌胃1次，連續(xù)3天，末次給藥0.5h后，腹腔注射1.0％乙酸0.2ml。觀察并記錄注射乙酸后15min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)(腹部內(nèi)凹、伸展后肢、臀部高抬)的次數(shù)。

6、結(jié)果：

(1)所述的治療乳腺疾病的中成藥對小鼠痛閾值的影響

結(jié)果可見，阿司匹林可以顯著提高小鼠對熱板引起疼痛的耐受能力，痛閾值從(17.60±2.76)s提高到(24.94±3.41)s，給予所述的治療乳腺疾病的中成藥的各組小鼠的痛閾值也顯著提高，其痛閾值分別從(20.41±3.30)s、(17.97±2.52)s、(17.83±3.43)s增加到(24.89±7.36)s、(27.76±4.48)s、(27.73±6.53)s,與空白對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05，p＜0.01)，與阿司匹林組未見顯著差異。

(2)所述的治療乳腺疾病的中成藥對乙酸引起小鼠扭體反應(yīng)的影響

給予所述的治療乳腺疾病的中成藥3天后，中、高劑量組所述的治療乳腺疾病的中成藥顯著減少乙酸引起的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，與空白對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.001)，其作用強度與阿司匹林0.23g/kg比較仍有顯著差異(p＜0.01)。

7、結(jié)論：所述的治療乳腺疾病的中成藥具有鎮(zhèn)痛作用。

綜上所述，所述的治療乳腺疾病的中成藥對乳腺增生模型大鼠有治療作用，對苯甲酸雌二醇所致的小鼠乳腺增生有較好的抑制作用，并且對急慢性炎癥均有較強的抑制作用和鎮(zhèn)痛作用。

具體實施方式五：

本實施方式與具體實施方式一至四之一不同的是：本實施方式由如下重量份數(shù)的中藥材制備而成：柴胡2份、皂角刺3份、王不留行4份、夏枯草2份、赤芍3份、郁金4份、牡蠣2份、丹參3份、橘核2份、三棱5份、莪術(shù)0.5份、甘草2份。

對本實施方式制備的所述的治療乳腺疾病的中成藥進行急性毒性試驗和長期毒性試驗：

一、所述的治療乳腺疾病的中成藥的急性毒性試驗：

方法：取合格小鼠40只，健康，雌性。隨機分為兩組，即陰性對照組與供試品組，每組20只。取供試品以溶媒配制成濃度為0.2g/ml的供試品溶液，口服灌胃，一日給藥2次，給藥體積每次為40ml/1kg，給藥間隔4h。給藥當日分別于給藥前后觀察小鼠大體狀況，之后一日觀察1次，連續(xù)14日，并分別與給藥第7、14日稱取動物體重。

結(jié)果：小鼠口服灌胃給予所述的治療乳腺疾病的中成藥共16g/kg，給藥完畢后即刻觀察，小鼠毛發(fā)、活動、眼神、進食飲水、二便均未見明顯異常，腔道無異常分泌物。繼續(xù)觀察14日，未見明顯毒性反應(yīng)與動物死亡，供試品組動物的體重與同期的陰性對照組動物相比，亦未見明顯差異。

結(jié)論：小鼠一日2次口服灌胃給予所述的治療乳腺疾病的中成藥共16g/kg，相當于人的一次臨床用劑量(0.06g/kg)的267倍，未見明顯的急性毒性反應(yīng)與動物死亡。

二、所述的治療乳腺疾病的中成藥的長期毒性實驗：

動物自接收當日起適應(yīng)性飼養(yǎng)3日。

首次給藥前所有動物稱重做為本試驗中動物的初始體重。

取合格雌性sd大鼠160只按隨機分為4組，即陰性對照組、高劑量組、中劑量組與低劑量組，每組40只。5只/籠飼養(yǎng)。同籠動物采用苦味酸在體表毛發(fā)上不同位置涂抹標記以備區(qū)分。所有籠具用籠卡清楚表明該動物實驗的專題編號、專題名稱、供試品編號、實驗日期、主要實驗人員，并在籠卡上用色標標明該籠動物所屬劑量組(紅色：高劑量組；黃色：中劑量組；藍色：低劑量組。)，陰性對照組不加色標。

供試液的配制與給予：由于供試品中含有中藥材粗粉，考慮到供試液的抽吸與灌胃效率，故將供試品以溶媒配制成濃度為0.16g/ml、0.08g/ml、0.04g/ml的供試液，給藥體積均為20ml/kg，均為給藥當日臨用現(xiàn)配。經(jīng)計算高、中、低劑量分別為3.2g/kg、1.6g/kg、0.8g/kg，分別相當于人擬臨床用劑量(0.06g/kg)的53倍、27倍和13倍(劑間距為2)，低劑量相當于動物主要藥效學(xué)研究最大有效劑量(大鼠，0.4g/kg)的2倍，基本可以反映供試品的長期毒性。高、中、低三個劑量組口服灌胃給予不同濃度的供試液，陰性對照組同法給予對照品。實驗周期定為一日1次，每周給藥6日，連續(xù)給藥6個月，停藥恢復(fù)期為1個月。

每日2次記錄動物大體狀況，給予供試品前后各1次。主要觀察其外觀體征，行為活動和糞便形狀。發(fā)現(xiàn)有中毒癥狀動物取出單籠飼養(yǎng)，重點觀察。

每周定期稱體重1次，測定耗食量1次。

各組于連續(xù)給藥3個月時分別取10只動物、于末次給予供試品后分別取20只動物，禁食不禁水17小時，腹腔注射烏來糖1g/kg麻醉，腹主動脈取血作血液學(xué)、血清生化學(xué)檢查，并進行大體剖檢，取材作組織病理學(xué)檢查。

剩余動物不再給予供試品，繼續(xù)觀察，每日1次，1個月后禁食不禁水17小時，腹腔注射烏來糖1g/kg麻醉，取血作血液學(xué)、血清生化學(xué)檢查，并進行大體剖檢，取材作組織病理學(xué)檢查。

上述動物處理后所作組織病理學(xué)檢查，均先取高劑量組與陰性對照組進行判讀。如高劑量組無明顯組織病理學(xué)異常或兩組間無明顯差異，則不再對中、低劑量組的組織切片作檢查。如發(fā)現(xiàn)高劑量組動物出現(xiàn)組織病理學(xué)異常改變或與陰性對照組相比有明顯差異，則須對其余兩給藥組動物進行組織切片判讀。

所述的治療乳腺疾病的中成藥長期毒性試驗結(jié)果如下：

1、一般癥狀：

供試品各劑量組與陰性對照組動物在給藥期間精神狀態(tài)良好，毛色、行為活動、采食、飲水、二便、呼吸均未見明顯異常，眼、口鼻與其他腔道均未見明顯異常分泌物。停藥后觀察1個月，供試品各劑量組與陰性對照組動物大體狀況均未見明顯異常。

體重：供試品組大鼠與陰性對照組對比，高劑量組動物于第6-17與19-27周體重較輕(p<0.05，p<0.01)；中劑量組動物于第12與13周體重較輕(p<0.05，p<0.01)。給藥期與恢復(fù)期內(nèi)其余時段體重均未見組間差異(p>0.05)。高劑量組動物于給藥第5周體重增長較慢(p<0.01)；中劑量組動物于給藥第1、5、7與9周體重增長較慢(p<0.05，p<0.01)；低劑量組動物于給藥第7與28周起體重增長較慢(p<0.05，p<0.01)。給藥期與恢復(fù)期內(nèi)其余時段體重增長速度均未見組間差異(p>0.05)。

2、耗食量與食物利用率：供試品組大鼠與陰性對照組相比，高劑量組動物于給藥第2、12、13、20與25周耗食量減少(p<0.05，p<0.01)；中劑量組動物于給藥第12周耗食量減少(p<0.01)；低劑量組動物于給藥第12周耗食量減少(p<0.05)。在給藥期與恢復(fù)期其余時段內(nèi)耗食量均未見明顯組間差異(p>0.05)。高劑量組動物于給藥第5周食物利用率降低(p<0.01)；中劑量組動物于給藥第5與7周食物利用率降低(p<0.05，p<0.01)；低劑量組動物于給藥第7周食物利用率降低(p<0.01)。在給藥期與恢復(fù)期其余時段內(nèi)食物利用率均未見明顯組間差異(p>0.05)。

3、血液學(xué)檢查：

(1)給藥3個月

供試品各劑量組與陰性對照組相比，給藥3個月，血液學(xué)各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)。

(2)給藥6個月

供試品各劑量組大鼠與陰性對照組相比，給藥6個月，高劑量組動物纖維蛋白原(fgb)水平較低(p<0.05)；血液學(xué)其余各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)，上述誤差仍處于該實驗室背景數(shù)據(jù)正常范圍之內(nèi)。

(3)恢復(fù)期

供試品各劑量組大鼠與陰性對照組相比，在恢復(fù)期內(nèi)，中劑量組動物血紅蛋白(hgb)水平升高(p<0.01)。給藥期與恢復(fù)期的血液學(xué)各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)。

上述差異仍處于該實驗室背景數(shù)據(jù)正常范圍之內(nèi)。

4、血液生化學(xué)：

4.1給藥3個月

與陰性對照組動物相比，給藥3個月后供試品中劑量組動物總膽固醇(tcho)水平較高(p<0.05)；結(jié)合其它相關(guān)指標與組織病理學(xué)檢查結(jié)果分析，該差異處于正常范圍之內(nèi)，與藥物本身作用沒有明顯關(guān)系。供試品組與陰性對照組相比，給藥3個月，各組動物的孕酮、雌二醇、睪酮及血液生化學(xué)其余各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)。

4.2給藥6個月

與陰性對照組動物相比，供試品高劑量組動物尿素氮(bun)水平較高(p<0.05)；甘油三酯(tg)水平較低(p<0.05),結(jié)合其他相關(guān)指標與組織病理學(xué)檢查結(jié)果分析，該項數(shù)據(jù)處于正常范圍之內(nèi)，與藥物本身作用沒有明顯關(guān)系。供試品組與陰性對照組相比，給藥6個月，各組動物的孕酮、雌二醇、睪酮及血液生化學(xué)其余各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)。

5、恢復(fù)期：

供試品各劑量組與陰性對照組相比，在恢復(fù)期內(nèi)各組動物的孕酮、雌二醇、睪酮等性激素及其余各項血液生化學(xué)各項指標均未見明顯差異(p>0.05)。

6、臟器重量及其系數(shù)：

6.1給藥3個月

高劑量組雌性大鼠的腦、心臟與腎上腺系數(shù)與陰性對照組相比升高(p<0.05)，但大體剖檢與組織病理學(xué)分析表明，該差異與藥物本身作用沒有明顯關(guān)系。供試品各劑量組與陰性對照組相比，給藥3個月，臟器重量及其系數(shù)其余各項指標均未見明顯的組間差異(p>0.05)。

6.2給藥6個月

與陰性對照組相比，高劑量組雌性大鼠的腎臟重量減輕(p<0.01)，腦系數(shù)升高(p<0.01)，但大體剖檢與組織病理學(xué)分析表明，該差異與藥物本身作用沒有明顯關(guān)系。供試品各劑量組與陰性對照組相比，給藥6個月，臟器重量及其系數(shù)其余各項指標均未見明顯組間差異(p>0.05)。供試品組與陰性對照組相比，給藥6個月后停藥恢復(fù)1個月，臟器重量及其系數(shù)各項指標均未見明顯組間差異。

7組織病理學(xué)檢查：

7.1給藥3個月

按試驗計劃對各組動物進行了病理解剖及大體病理檢查，對高劑量組及陰性對照組的腦、心、肝、脾、肺、腎、腦(大腦、小腦、腦干、垂體等)、脊髓(頸、胸、腰)、胸腺、淋巴結(jié)、主動脈、乳腺、唾液腺、氣管、甲狀腺、胃、胰腺、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、膀胱、卵巢、子宮、肌肉坐骨神經(jīng)、胸骨等器官進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。病變程度的表示方法如下：±：輕微異常；+：輕度異常；++：中毒異常；+++：顯著異常；++++：嚴重異常。

對各組動物進行了大體病理檢查，并對高劑量組及陰性對照組的主要臟器進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。除部分臟器出現(xiàn)的一些自發(fā)、偶發(fā)或非特異性病理改變外，受試大鼠各主要器官均未發(fā)現(xiàn)明顯的藥物毒性相關(guān)的病理改變。

7.2給藥6個月

按試驗計劃對各組動物進行了病理解剖及大體病理檢查，對高劑量組及陰性對照組的腦、心、肝、脾、肺、腎、腦(大腦、小腦、腦干、垂體等)、脊髓(頸、胸、腰)、胸腺、淋巴結(jié)、主動脈、乳腺、唾液腺、氣管、甲狀腺、胃、胰腺、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、膀胱、卵巢、子宮、肌肉坐骨神經(jīng)、胸骨等器官進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。病變程度的表示方法如下：±：輕微異常；+：輕度異常；++：中毒異常；+++：顯著異常；++++：嚴重異常。

對各組動物進行了大體病理檢查，并對高劑量組及陰性對照組的主要臟器進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。除部分臟器出現(xiàn)的一些自發(fā)、偶發(fā)或非特異性病理改變外，受試大鼠各主要器官均未發(fā)現(xiàn)明顯的藥物毒性相關(guān)的病理改變。

8、恢復(fù)1個月

按試驗計劃對各組動物進行了病理解剖及大體病理檢查，對高劑量組及陰性對照組的腦、心、肝、脾、肺、腎、腦(大腦、小腦、腦干、垂體等)、脊髓(頸、胸、腰)、胸腺、淋巴結(jié)、主動脈、乳腺、唾液腺、氣管、甲狀腺、胃、胰腺、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、膀胱、卵巢、子宮、肌肉坐骨神經(jīng)、胸骨等器官進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。病變程度的表示方法如下：±：輕微異常；+：輕度異常；++：中毒異常；+++：顯著異常；++++：嚴重異常。

對各組動物進行了大體病理檢查，并對高劑量組及陰性對照組的主要臟器進行了常規(guī)組織病理學(xué)檢查。除部分臟器出現(xiàn)的一些自發(fā)、偶發(fā)或非特異性病理改變外，受試大鼠各主要器官均未發(fā)現(xiàn)明顯的藥物毒性相關(guān)的病理改變。

使用試驗設(shè)計劑量的所述的治療乳腺疾病的中成藥6個月后恢復(fù)1個月，受試動物各主要器官均未發(fā)現(xiàn)明顯的藥物毒性相關(guān)性病理改變。

試驗結(jié)論：長期毒性試驗結(jié)果表明，大鼠連續(xù)6個月口服灌胃給予所述的治療乳腺疾病的中成藥，動物一般大體狀況、血液學(xué)、血液生化學(xué)、臟器重量及其系數(shù)與組織病理學(xué)檢查結(jié)果均未產(chǎn)生與藥物相關(guān)的異常改變。