本發(fā)明屬于保健品技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種提高精力抗疲勞的瑪咖組合物。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代社會(huì)中，生活節(jié)奏加快，亞健康狀態(tài)人群越來越多，由此導(dǎo)致身體疲勞、精神倦怠、記憶力減退、工作效率下降、失眠多夢、免疫力下降等嚴(yán)重影響了人們的工作和生活質(zhì)量。研究表明，由于肌肉過度疲憊，或因憂郁、不安、焦慮、緊張等所致的腦力性疲憊，會(huì)擾亂機(jī)體正常的運(yùn)行系統(tǒng)，干擾生理功能，抑制與生理功能相關(guān)的中樞神經(jīng)，降低垂體的促性腺激素和雄性激素的分泌量；同時(shí)，過度疲勞會(huì)產(chǎn)生過氧化脂質(zhì)，這種脂質(zhì)可直接引起生物膜的損傷，久而久之，對(duì)生理系統(tǒng)造成不可逆的病理損害，最終導(dǎo)致性功能障礙的發(fā)生。研究表明，瑪咖對(duì)亞健康狀態(tài)人群恢復(fù)健康有很好的調(diào)整作用。
瑪咖（lepediummeyeniiwalp），又名瑪卡，原產(chǎn)于海拔4000米以上的秘魯安第斯山區(qū)，屬十字花科獨(dú)行菜屬?，斂且环N藥食兩用植物，可食用部分為其根部。我國在21世紀(jì)初開始引進(jìn)和種植瑪咖，主要以云南和西藏等地為主，2011年衛(wèi)生部第13號(hào)公告批準(zhǔn)瑪咖粉作為新資源食品。
瑪咖干根中含有10%以上的蛋白質(zhì)，8.5%的纖維，其內(nèi)含豐富的鋅、鈣、鐵、鈦、銣、鉀、鈉、銅、錳、鎂、鍶、磷、碘等礦物質(zhì)，并含有維生素c、b1、b2、b6、a、e、b12、b5，脂肪多為不飽和脂肪酸，亞油酸和亞麻酸的含量達(dá)脂肪含量的53%以上，天然活性成分包含瑪咖酰胺、瑪咖稀、生物堿、多糖、芥子油苷及其分解產(chǎn)物異硫氰酸芐酯、甾醇、多酚類物質(zhì)。研究表明，瑪咖能夠改善性功能障礙，提高記憶力和學(xué)習(xí)的能力，減輕焦慮；可以調(diào)節(jié)機(jī)體能量消耗、代謝紊亂、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能失調(diào)，起到緩解疲勞、增強(qiáng)體力的功效；瑪咖提取物能夠增強(qiáng)精子活力，調(diào)節(jié)血清中的荷爾蒙分泌，降低血壓等。
目前市場上充斥著各種各樣、質(zhì)量參差不齊的抗疲勞產(chǎn)品，效果各異，其中瑪咖組合物的保健品也逐漸成為研究熱點(diǎn)，但是市面上的大多數(shù)產(chǎn)品療效不明顯，見效緩慢，一方面是由于其配方優(yōu)化不夠，另一方面是由于瑪咖中的一些功能性成分在提取過程中被破壞，失去功效；瑪咖的功效性成分既有水溶性成分，也有脂溶性成分，單一溶媒對(duì)功效成分提取不完全，現(xiàn)有的瑪咖提取方法不能對(duì)其活性成分有效提取，造成資源的浪費(fèi)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，溫性滋補(bǔ)、益氣活血、增強(qiáng)機(jī)體抗病抗壓的免疫力。
本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的。
一種具有提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖40~50份，牡蠣8~12份，肉桂6~9份，黃精5~10份，覆盆子6~8份，茯苓4~6份，山藥5~8份，葛根3~5份，羅漢果3~5份，金銀花3~5份。
牡蠣富含蛋白質(zhì)、氨基酸，谷胱甘肽，維生素a、b1、b2、d，糖原，?；撬?，ω-3脂肪酸，無機(jī)質(zhì)等，其中還包括人體所缺乏的鋅，牡蠣能夠補(bǔ)充多種營養(yǎng)元素，幫助維持人體正常食欲、促進(jìn)吸收、增強(qiáng)人體免疫力。
肉桂味辛、甘，性大熱，對(duì)于常見于亞健康人群中常見的身體冷痛、腎虛作喘、虛陽上浮、眩暈?zāi)砍?、虛寒吐瀉、寒疝腹痛等具有補(bǔ)中益氣、補(bǔ)火助陽，引火歸元、散寒止痛、溫通經(jīng)脈的功效。
黃精含有大量淀粉、糖分、脂肪、蛋白質(zhì)、胡蘿卜素、維生素和多種其他營養(yǎng)成分，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾潤肺，壯筋骨，益精髓，補(bǔ)精氣之功能，用于脾胃虛弱，體倦乏力，口干食少，肺虛燥咳，精血不足，內(nèi)熱消渴之癥。而且，黃精還具有降血壓、降血糖及抗病原微生物感染的功效，對(duì)傷寒桿菌、金黃色葡萄球菌、抗酸桿菌、病毒有抑制作用，可以增加冠狀動(dòng)脈血流量，起降低血脂和延緩動(dòng)脈粥樣硬化等作用。
覆盆子味甘、酸，性溫，具有養(yǎng)肝明目、補(bǔ)腎固精、助陽遺尿的功效，常用于陽痿早泄、遺精、腎虛遺尿等癥的治療。
茯苓，性甘、淡、平，具有滲濕利尿、合胃健脾、寧心安神、增強(qiáng)機(jī)體免疫力及降血糖的功效。藥性平和，利濕而不傷正氣，適用于水腫尿少，脾虛食少，心神不安，失眠多夢等癥，可用于心脾兩虛、心腎不安諸證，并用于脾陽不足，氣陷精泄之遺精。
山藥具有滋養(yǎng)強(qiáng)壯，補(bǔ)脾養(yǎng)胃，助消化，生津益肺，補(bǔ)腎澀精，預(yù)防心血管，病斂虛汗的功效，對(duì)脾虛腹瀉、肺虛咳嗽、糖尿病消渴、小便短頻、遺精及消化不良的慢性腸炎有一定緩解作用。
葛根味甘、辛，涼，能夠解肌退熱，透疹，生津止渴，升陽止瀉；用于表證發(fā)熱，項(xiàng)背強(qiáng)痛，麻疹不透，熱病口渴，陰虛消渴，熱瀉熱痢，脾虛泄瀉等。
羅漢果味甘，性涼；營養(yǎng)價(jià)值高，有清熱解暑、化痰止咳、涼血舒骨、清肺潤腸，滑腸通便和生津止渴等功效。羅漢果對(duì)支氣管炎、高血壓等疾病有顯著療效，還能起到防治冠心病、血管硬化、肥胖癥的作用，對(duì)腸管運(yùn)動(dòng)機(jī)能有雙向調(diào)節(jié)作用。
金銀花性寒，味甘，含有綠原酸、木犀草素苷等藥理活性成分，對(duì)溶血性鏈球菌、金黃葡萄球菌等多種致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有較強(qiáng)的抑制力，用于各種熱性病，另外還可增強(qiáng)免疫力、補(bǔ)虛療風(fēng)的功效。
本發(fā)明組合物基于上述天然植物的特定功效和醫(yī)藥價(jià)值，運(yùn)用自然植物和天然產(chǎn)物，將傳統(tǒng)的養(yǎng)生方法與醫(yī)學(xué)理論相結(jié)合，著眼于提高精力、抗疲勞、改善性功能、增強(qiáng)免疫力等，以瑪咖為主要成份，合理配伍牡蠣、肉桂、黃精、覆盆子、茯苓、山藥、葛根、羅漢果、金銀花藥食同源藥材，對(duì)勞積虛損進(jìn)行溫補(bǔ)，顯著增強(qiáng)了瑪咖提高精力、抗疲勞的功效。只有將上述各組分按照本發(fā)明所述重量份數(shù)比例進(jìn)行合理復(fù)配，才能使其達(dá)到相互協(xié)同增效的目的。
優(yōu)選地，所述瑪咖的重量份數(shù)為45~46份。
優(yōu)選地，由如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖45份，牡蠣10份，肉桂8份，黃精8份，覆盆子6份，茯苓5份，山藥5份，葛根5份，羅漢果4份，金銀花4份。
優(yōu)選地，原料中所述瑪咖的提取步驟包括：
s1.將瑪咖干根切片后粉碎成5～20目的粗粉，然后進(jìn)行亞臨界的浸出處理，壓力為0.5～3mpa，溫度25~40℃，通入丁烷，浸潤2～6h；再進(jìn)行萃取處理，萃取時(shí)間30～60min，萃取1～3次，將萃取液的環(huán)境減壓至常壓，20℃～30℃蒸發(fā)溶劑，得瑪咖脂溶性浸膏；
s2.將瑪咖亞臨界萃取后的剩余物料高溫滅酶，以料液比1:5～1:10加水，40～60℃提取2次，合并提取液減壓濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，得瑪咖濃縮液；
s3.將步驟s1中得到的瑪咖脂溶性浸膏加熱至50～70℃，然后與步驟s2得到的瑪咖濃縮液混合，經(jīng)高壓均質(zhì)乳化成200～400nm的納米乳化溶液，均質(zhì)壓力40～60mpa；
s4.將步驟s3得到的乳化溶液噴霧干燥，進(jìn)料溫度60～70℃，進(jìn)風(fēng)溫度170～190℃，出風(fēng)溫度70～80℃，制得瑪咖提取物。
瑪咖含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、還原糖、礦物質(zhì)、不飽和脂肪酸，尤其是?；撬?、礦物質(zhì)鋅、支鏈氨基酸（亮氨酸，纈氨酸，異亮氨酸)等抗疲勞營養(yǎng)物質(zhì)，它們在消除運(yùn)動(dòng)中樞疲勞和機(jī)體疲勞中有重要作用。此外，瑪咖的次生代謝物質(zhì)主要有瑪咖酰胺、瑪咖烯、芥子油苷、甾醇和生物堿等，其中，瑪咖酰胺和瑪咖烯是瑪咖中的特有成分，是實(shí)現(xiàn)瑪咖抗疲勞功效的核心物質(zhì)。以往的瑪咖提取方法對(duì)瑪咖脂溶性成分提取不夠，并且損失大量的營養(yǎng)成分；而上述方法獲得的瑪咖提取物富含瑪咖脂溶性及水溶性活性成分，其中瑪咖酰胺種類齊全，各種瑪咖酰胺比例與天然瑪咖原料相近，瑪咖總瑪咖酰胺含量達(dá)5～10%。
優(yōu)選地，按所述重量份數(shù)比例取牡蠣、肉桂、黃精、覆盆子、茯苓、山藥、葛根、羅漢果、金銀花，混勻，加水煎煮兩次，過濾，合并濾液，濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，加入95%乙醇，使乙醇濃度達(dá)70%，靜置醇沉，過濾，濾液濃縮至60℃時(shí)比重為1.20～1.30，再噴霧干燥得復(fù)方提取物；將所述復(fù)方提取物與制得的瑪咖提取物混合，即得所述的瑪咖組合物。
優(yōu)選地，所述組合物的劑型為口服液體制劑、顆粒劑、粉劑、散劑、片劑、丸劑或膠囊劑中的任意一種。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果在于：（1）本發(fā)明提供的瑪咖組合物進(jìn)行組方優(yōu)化配比，具有溫性調(diào)理，壯筋骨，益精髓，益氣健脾，補(bǔ)脾養(yǎng)胃益腎的功效，對(duì)亞健康人群的各種癥狀具有明顯的緩解效果。（2）本發(fā)明組合物的制備方法簡單易行，獲得的瑪咖提取物富含瑪咖脂溶性及水溶性活性成分，各種瑪咖酰胺比例與天然瑪咖原料相近，瑪咖總瑪咖酰胺含量5～10%，同時(shí)，在25℃水中的溶解度達(dá)90%以上，可用于制備多種劑型的組合物產(chǎn)品。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。
具體實(shí)施方式中的瑪咖組合物可制成口服液體制劑、顆粒劑、粉劑、散劑、片劑、丸劑或膠囊劑等。
下述實(shí)施例1~4的瑪咖組合物經(jīng)原料篩選，粉碎為粒徑小于100目的細(xì)粉，經(jīng)傳統(tǒng)的水提醇沉法提取，然后添加常規(guī)的固體制劑輔料，制成片劑。實(shí)施例5~6瑪咖組合物的制備方法在具體實(shí)施例中說明。
所述水提醇沉法包括如下步驟：按所述重量份數(shù)比例取瑪咖、牡蠣、肉桂、黃精、覆盆子、茯苓、山藥、葛根、羅漢果、金銀花，混勻，加水煎煮兩次，過濾，合并濾液，濃縮，加入95%乙醇，使乙醇濃度達(dá)70%，靜置醇沉，過濾，濾液濃縮，再噴霧干燥得復(fù)方提取物。
以下以具體實(shí)施條件為例對(duì)本發(fā)明方法進(jìn)行進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1
一種具有提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖45份，牡蠣10份，肉桂8份，黃精8份，覆盆子6份，茯苓5份，山藥5份，葛根5份，羅漢果4份，金銀花4份。
實(shí)施例2
一種具有提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖46份，牡蠣9份，肉桂7份，黃精7份，覆盆子8份，茯苓4份，山藥7份，葛根4份，羅漢果3份，金銀花5份。
實(shí)施例3
一種具有提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖40份，牡蠣12份，肉桂9份，黃精5份，覆盆子6份，茯苓5份，山藥8份，葛根5份，羅漢果5份，金銀花5份。
實(shí)施例4
一種具有提高精力抗疲勞的瑪咖組合物，由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖50份，牡蠣8份，肉桂6份，黃精10份，覆盆子6份，茯苓6份，山藥5份，葛根3份，羅漢果3份，金銀花3份。
實(shí)施例5
本實(shí)施例配方與實(shí)施例1相同，不同之處在于原料中瑪咖的提取步驟包括：
s1.將瑪咖干根切片后粉碎成5目的粗粉，然后進(jìn)行亞臨界的浸出處理，壓力為0.5～3mpa，溫度25~40℃，通入丁烷，浸潤6h；再進(jìn)行萃取處理，萃取時(shí)間30min，萃取3次，將萃取液的環(huán)境減壓至常壓，20℃～30℃蒸發(fā)溶劑，得瑪咖脂溶性浸膏；
s2.將瑪咖亞臨界萃取后的剩余物料高溫滅酶，以料液比1:5加水，40～60℃提取2次，合并提取液減壓濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，得瑪咖濃縮液；
s3.將步驟s1中得到的瑪咖脂溶性浸膏加熱至50～70℃，然后與步驟s2得到的瑪咖濃縮液混合，經(jīng)高壓均質(zhì)乳化成200～400nm的納米乳化溶液，均質(zhì)壓力40～60mpa；
s4.將步驟s3得到的乳化溶液噴霧干燥，進(jìn)料溫度60～70℃，進(jìn)風(fēng)溫度170～190℃，出風(fēng)溫度70～80℃，制得瑪咖提取物。
將制得瑪咖提取物過100目篩，與粉碎為粒徑小于100目細(xì)粉的其他組分混勻，再添加常規(guī)的固體制劑輔料，制成片劑。
所述瑪咖提取物經(jīng)過分光光度計(jì)法和高速液相色譜法檢測，按質(zhì)量分?jǐn)?shù)主要包括8.5%的總瑪咖酰胺、10.6%的芳香族芥子油苷、4.2%的總皂苷、2.8%的腺苷，1.8%的甾醇，其中總瑪咖酰胺中n-芐基亞油酰胺含量占總瑪咖酰胺含量的38.7%。還包含未檢測的其它非活性成分。
實(shí)施例6
本實(shí)施例配方與實(shí)施例1相同，不同之處在于瑪咖組合物的制備方法不同，具體包括以下步驟：
s1.將瑪咖干根切片后粉碎成20目的粗粉，然后進(jìn)行亞臨界的浸出處理，壓力為0.5～3mpa，溫度25~40℃，通入丁烷，浸潤2h；再進(jìn)行萃取處理，萃取時(shí)間60min，萃取1次，將萃取液的環(huán)境減壓至常壓，20℃～30℃蒸發(fā)溶劑，得瑪咖脂溶性浸膏；
s2.將瑪咖亞臨界萃取后的剩余物料高溫滅酶，以料液比1:10加水，40～60℃提取2次，合并提取液減壓濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，得瑪咖濃縮液；
s3.將步驟s1中得到的瑪咖脂溶性浸膏加熱至50～70℃，然后與步驟s2得到的瑪咖濃縮液混合，經(jīng)高壓均質(zhì)乳化成200～400nm的納米乳化溶液，均質(zhì)壓力40～60mpa；
s4.將步驟s3得到的乳化溶液噴霧干燥，進(jìn)料溫度60～70℃，進(jìn)風(fēng)溫度170～190℃，出風(fēng)溫度70～80℃，制得瑪咖提取物。
s5.按所述重量份數(shù)比例取牡蠣、肉桂、黃精、覆盆子、茯苓、山藥、葛根、羅漢果、金銀花，混勻，加水煎煮兩次，過濾，合并濾液，濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，加入95%乙醇，使乙醇濃度達(dá)70%，靜置醇沉，過濾，濾液濃縮至60℃時(shí)比重為1.20～1.30，再噴霧干燥得復(fù)方提取物；將所述復(fù)方提取物與步驟s4制得的瑪咖提取物混合，添加常規(guī)的固體制劑輔料，制成瑪咖組合物片劑。
所述瑪咖提取物經(jīng)過分光光度計(jì)法和高速液相色譜法檢測，按質(zhì)量分?jǐn)?shù)主要包括8.7%的總瑪咖酰胺、12.3%的芳香族芥子油苷、3.8%的總皂苷、2.5%的腺苷，1.5%的甾醇，其中總瑪咖酰胺中n-芐基亞油酰胺含量占總瑪咖酰胺含量的40.6%。還包含未檢測的其它非活性成分。
對(duì)比例1
本對(duì)比例與實(shí)施例6瑪咖組合物的配方不同，具體為由包括如下重量份數(shù)的原料經(jīng)提取制備得到：瑪咖55份，牡蠣5份，肉桂8份，黃精3份，覆盆子6份，茯苓5份，山藥5份，葛根5份，羅漢果4份，金銀花4份。
對(duì)比例2
本對(duì)比例與實(shí)施例6的制備方法不同，具體為：
s1.將瑪咖干根切片后粉碎成20目的粗粉，裝入亞臨界萃取釜，以脫氧去離子水為溶劑，以體積百分比為20~30%的乙醇為夾帶劑，壓力為3mpa，溫度100℃，萃取時(shí)間60min，進(jìn)行瑪咖的亞臨界水提取，萃取2次；
s2.將上述萃取混合物通過減壓冷卻釜進(jìn)行分離，得濾渣和清液，將所述清液在60℃低溫濃縮得濃縮液；
s3.將步驟s2得到的濃縮液經(jīng)高壓均質(zhì)乳化成200～400nm的納米乳化溶液，均質(zhì)壓力40～60mpa；
s4.將步驟s3得到的乳化溶液噴霧干燥，進(jìn)料溫度60～70℃，進(jìn)風(fēng)溫度170～190℃，出風(fēng)溫度70～80℃，制得瑪咖提取物。
s5.按所述重量份數(shù)比例取牡蠣、肉桂、黃精、覆盆子、茯苓、山藥、葛根、羅漢果、金銀花，混勻，加水煎煮兩次，過濾，合并濾液，濃縮至60℃時(shí)比重為1.10～1.20，加入95%乙醇，使乙醇濃度達(dá)70%，靜置醇沉，過濾，濾液濃縮至60℃時(shí)比重為1.20～1.30，再噴霧干燥得復(fù)方提取物；將所述復(fù)方提取物與步驟s4制得的瑪咖提取物混合，添加常規(guī)的固體制劑輔料，制成瑪咖組合物片劑。
所述瑪咖提取物經(jīng)過分光光度計(jì)法和高速液相色譜法檢測，按質(zhì)量分?jǐn)?shù)主要包括2.6%的總瑪咖酰胺、1.2%%的芳香族芥子油苷、1.6%的總皂苷、1.6%的腺苷，0.9%的甾醇，其中總瑪咖酰胺中n-芐基亞油酰胺含量占總瑪咖酰胺含量的28.6%。還包含未檢測的其它非活性成分。
應(yīng)用例1
將本發(fā)明實(shí)施例1、5、6及對(duì)比例1、2的提高精力、抗疲勞的瑪咖組合物進(jìn)行抗疲勞效果評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。
1)、實(shí)驗(yàn)原料：將實(shí)施例1、5、6的組合物配方分別設(shè)為樣品a、b、c組，將對(duì)比例1、2的組合物配方分別設(shè)為陽性對(duì)照組1、陽性對(duì)照組2，以口服蒸餾水空白對(duì)照組。
2)、實(shí)驗(yàn)對(duì)象：選用balb/c小鼠，5周齡雄性，體重20±2g，小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，適應(yīng)性游泳10min，淘汰不能游泳的小鼠，第4天進(jìn)行小鼠負(fù)重(5%體重)游泳試驗(yàn)至力竭，記錄力竭游泳時(shí)間，根據(jù)小鼠的游泳能力和體重進(jìn)行分組。小鼠被分為16組，每組10只，分別是空白對(duì)照組，樣品a/b/c低、中、高劑量組，陽性對(duì)照組1/2低、中、高劑量組。
3)、給藥劑量：實(shí)驗(yàn)劑量的選擇根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置，按小鼠體重計(jì)，樣品低劑量、中劑量和高劑量組分別為0.5g/kg、1g/kg和1.5g/kg。
4)、實(shí)驗(yàn)方法：
力竭實(shí)驗(yàn)：將樣品用蒸餾水溶解，使樣品的濃度分別為5g/l、10g/l和15g/l，樣品組與陽性對(duì)照組每天灌喂0.1l/kg(體重)；空白對(duì)照組灌胃相同體積的蒸餾水，每天上午1次，連續(xù)30天。各組末次灌喂30min后，小鼠被放置到塑料池(80cm×45cm×40cm)中游泳，池水深度為35cm，水溫為(25±1)℃，小鼠尾部負(fù)小鼠體重5%的鉛皮進(jìn)行力竭游泳實(shí)驗(yàn)（力竭標(biāo)準(zhǔn)：負(fù)重小鼠游泳動(dòng)作明顯失調(diào)，不能再堅(jiān)持或沉入水底超過10s不能浮出水面用鼻子呼吸被認(rèn)為達(dá)到力竭狀態(tài)，迅速將其撈起)，并記錄力竭游泳時(shí)間，結(jié)果見表1。
表1小鼠負(fù)重游泳時(shí)間對(duì)比(x±sd，min)
注：*p<0.05，**p<0.01與空白對(duì)照組比。
分析：從表1可以看出，與空白對(duì)照組相比，本發(fā)明瑪咖組合物不同實(shí)施例低、中、高劑量組，及陽性對(duì)照組1、2均能明顯延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，且實(shí)施例1配方的效果要好于對(duì)比例1，說明改變本發(fā)明瑪咖組合物的配方將直接影響其抗疲勞功效；此外，實(shí)施例1為采用傳統(tǒng)方法制備的瑪咖組合物，對(duì)比例2采用現(xiàn)有的亞臨界提取方法，實(shí)施例5、6采用優(yōu)化的亞臨界萃取方法，對(duì)瑪咖提取方法及組合物制備方法的優(yōu)化也將顯著提高本發(fā)明瑪咖組合物的效果；其中，低、中劑量組具有顯著性差異（p<0.05)，高劑量組具有極顯著性差異（p<0.01)中文括號(hào)，說明本發(fā)明的合理配比及提取方法優(yōu)化可明顯增強(qiáng)小鼠在體力負(fù)荷時(shí)的承受能力，具有顯著的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用。
應(yīng)用例2
將實(shí)施例6及對(duì)比例2的瑪咖組合物作為受試樣品，進(jìn)行小鼠抗中樞疲勞的藥理作用實(shí)驗(yàn)。
1）、實(shí)驗(yàn)原料：將本發(fā)明實(shí)施例6瑪咖組合物，0.5g/kg.bw.d作為實(shí)驗(yàn)①組；實(shí)施例6瑪咖組合物，1.0g/kg.bw.d作為實(shí)驗(yàn)②組；對(duì)比例2瑪咖組合物，0.5g/kg.bw.d作為實(shí)驗(yàn)③組；對(duì)比例2瑪咖組合物，1.0g/kg.bw.d作為實(shí)驗(yàn)④組；還設(shè)有空白對(duì)照組、睡眠剝奪致中樞疲勞模型（sd）組
2）、實(shí)驗(yàn)對(duì)象：8周齡雄性昆明種小鼠，體重18g-22g，每組16只，灌胃給藥20天，空白對(duì)照組和sd組灌胃相同體積的溶媒。
3）實(shí)驗(yàn)方法：采用改良的“多平臺(tái)水環(huán)境”方法制備睡眠剝奪致小鼠中樞疲勞（sd）模型，睡眠剝奪箱尺寸為45cm×30cm×20cm，小平臺(tái)尺寸為3cm×5cm。每個(gè)睡眠剝奪箱內(nèi)安置12個(gè)小平臺(tái)，放入6只小鼠于其中6個(gè)小平臺(tái)上；大平臺(tái)尺寸為15cm×5cm，放入3只小鼠于1個(gè)大平臺(tái)上，小鼠在平臺(tái)上可自由攝水?dāng)z食。睡眠剝奪箱體中的水面較平臺(tái)低1cm左右，水溫控制在25℃±1℃，每天更換箱中的水。
采用黑色橡膠板制成（70cm×40cm×30cm），水深22cm，水溫25℃。自制的通道式水迷宮設(shè)有ⅰ、ⅱ、ⅲ等3處盲端，終點(diǎn)處設(shè)有臺(tái)階安全區(qū)，小鼠到達(dá)終點(diǎn)后可爬上平臺(tái)安全區(qū)以避免溺水。實(shí)驗(yàn)第9天灌胃藥品后，對(duì)四組小鼠分別進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練，具體訓(xùn)練方法如下：將小鼠放于終點(diǎn)處10s，讓其感受并了解到這里是安全的；然后在a點(diǎn)處放置隔板，以a點(diǎn)為起點(diǎn)開始訓(xùn)練，讓小鼠自由游泳，記錄其通道式水迷宮實(shí)驗(yàn)的潛伏期，即從放入水中到爬上臺(tái)階所用的時(shí)間；如果在120s內(nèi)未找到終點(diǎn)臺(tái)階者，將被引導(dǎo)至該處，并記錄其潛伏期為120s，每天每只小鼠連續(xù)訓(xùn)練2次。實(shí)驗(yàn)第10、11天分別將隔板置于b點(diǎn)和c點(diǎn)，小鼠分別從這兩處出發(fā)進(jìn)行通道式水迷宮訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)第12天讓小鼠從c點(diǎn)出發(fā)，繼續(xù)鞏固訓(xùn)練1天。第13天灌胃后進(jìn)行小鼠睡眠剝奪72h實(shí)驗(yàn)，同時(shí)每天進(jìn)行通道式水迷宮的測試，記錄小鼠在水迷宮中的潛伏期和進(jìn)入盲端ⅰ、ⅱ、ⅲ的總次數(shù)。各組小鼠在通道式水迷宮實(shí)驗(yàn)中游出潛伏期和盲端錯(cuò)誤數(shù)的數(shù)據(jù)見表2和表3。
表2瑪咖組合物對(duì)小鼠水迷宮游出潛伏期的影響
注：#p<0.05與空白對(duì)照組比較，*p<0.05與睡眠剝奪致中樞疲勞模型組（sd組）比較
睡眠對(duì)記憶的存儲(chǔ)有著非常重要的影響，已有研究顯示一定時(shí)間的睡眠剝奪可導(dǎo)致記憶力和認(rèn)知功能減退，造成腦組織損傷，采用通道式水迷宮實(shí)驗(yàn)可測試睡眠剝奪前后小鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的變化。由表2和表3結(jié)果可知，本發(fā)明的瑪咖組合物②組相較于睡眠剝奪模型組及對(duì)比例2的瑪咖組合物④組，水迷宮游出潛伏期顯著減少，盲端錯(cuò)誤次數(shù)減少，表明本發(fā)明的瑪咖組合物能改善睡眠剝奪引起的小鼠學(xué)習(xí)和記憶力能力的下降。
表3瑪咖組合物對(duì)小鼠盲端錯(cuò)誤數(shù)的影響
注：#p<0.05與空白對(duì)照組比較，*p<0.05與睡眠剝奪致中樞疲勞模型組（sd組）比較
應(yīng)用例3
以下結(jié)合臨床數(shù)據(jù)來進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。
1)、臨床資料：門診和住院患者750例，年齡25~60歲，平均年齡40歲；隨機(jī)分成5組，每組平均年齡和男女比例相近。2)、診斷標(biāo)準(zhǔn)：①面色蒼白、眩暈、肌肉抽搐、呼吸困難、口舌干燥、聲音嘶啞、疲倦乏力等；②頭重、怠惰嗜臥，四肢乏力不收，懶于言語，惡食納少，舌苔薄白膩，或厚膩，或舌質(zhì)偏淡；③肢體酸懶、耳鳴、精神昏憒、記憶力減退、或有腰膝酸軟，足跟酸痛等；④睡眠不足、失眠多夢、夜驚、中間早醒、心悸等；⑤精神不集中，焦躁易怒，脾氣暴躁，沒有耐性，情緒低落，反應(yīng)遲鈍，注意力不集中等；⑥容顏早衰，面色無華，過早出現(xiàn)面部皺紋或色素斑，肢體皮膚粗糙、干澀，脫屑較多；指（趾)甲失去正常的平滑與光澤；毛發(fā)脫落，蓬垢易斷、失光；⑦男子出現(xiàn)遺精、陽痿、早泄、性欲減退；女子出現(xiàn)月經(jīng)不調(diào)或提前閉經(jīng)、性冷淡等。
3)、治療方法：每組分別口服本發(fā)明緩解疲勞、提高精力瑪咖組合物實(shí)施例1~5制備的片劑，每片0.5g，一次2片，每日2~3次，飯前1小時(shí)用蜂蜜水送服，服用2個(gè)月。4)、療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：①臨床痊愈：上述疲勞癥狀完全緩解，即使偶爾有輕度發(fā)作不需用藥即可緩解；②顯效：疲勞狀況較前明顯減輕；③好轉(zhuǎn)：疲勞狀況有所減輕；④無效：疲勞狀況沒有任何改善。5)、治療結(jié)果：服用2個(gè)月后，各組效果如下
表4臨床服用治療效果比較
結(jié)果表明，本發(fā)明瑪咖組合物的緩解疲勞、提高精力效果顯著，且效果比較而言實(shí)施例5＞實(shí)施例1＞實(shí)施例2＞實(shí)施例3~4＞對(duì)比例1，由此可見，本發(fā)明一方面進(jìn)行了瑪咖與其它組分的配方優(yōu)化，另一方面優(yōu)化了其提取方法，充分提取了瑪咖酰胺等活性成分，增強(qiáng)了提高精力、抗疲勞的治療功效。
以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的實(shí)施，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型，這些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。