本發(fā)明涉及的是水凝膠技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種深海魚膠原白肽水凝膠。
背景技術(shù)：
皮膚是人體與環(huán)境間的天然屏障和溝通橋梁，大面積暴露于外部環(huán)境的皮膚組織，可能因為燒傷、機械創(chuàng)傷以及慢性疾病(如糖尿病)等造成缺損或功能喪失。我國每年各類皮膚缺損患者高達數(shù)千萬，皮膚缺損治療的關(guān)鍵在于盡早封閉創(chuàng)面，減少由于感染而導致的并發(fā)癥。迄今為止，自體皮移植仍然是治療全層皮膚缺損的最有效方法。對于大面積皮膚缺損患者，自體皮移植存在供皮區(qū)不足等問題，需要經(jīng)過多次移植才能最終治愈。大面積全層皮膚缺損患者的高死亡率仍然是臨床上亟待解決的難題之一。組織工程和再生醫(yī)學的發(fā)展使皮膚缺損的完全再生和修復成為可能。皮膚組織工程的研究內(nèi)容主要包括三個方面，即皮膚種子細胞培養(yǎng)、真皮支架材料和體外構(gòu)建活性復合皮。
組織工程皮膚的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是構(gòu)建缺失皮膚的支架結(jié)構(gòu)，動物組織來源的細胞外基質(zhì)大分子由于其能夠提供細胞生存的空間結(jié)構(gòu)、組織相容性較理想并具有細胞附著的結(jié)合點等特點，是目前組織工程皮膚支架所采用的主要材料(clarketal.,2007)。由于從動物提取的膠原蛋白在吸收率方面有一定的局限性，并且隨著對瘋牛病、口蹄疫和禽流感等高致病性傳染病的恐懼，這種較為傳統(tǒng)的方式近趨淘汰。美國食品和藥品管理署(fda)已限制并逐步禁止其臨床使用。且膠原蛋白可細分為：大分子膠原蛋白和小分子膠原蛋白肽。平常我們食用的豬蹄的膠質(zhì)，里面含有的膠原蛋白是大分子蛋白質(zhì)，其分子量在30萬道爾頓以上，并不能被人體直接吸收，并且吸收率很低。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，提供了一種深海魚膠原白肽水凝膠，以魚類提取為主，通過酸堿、酶切等技術(shù)把分子量控制在6000道爾頓以內(nèi)的膠原蛋白肽，具有很好的溶解度和保水能力，以及低的免疫原性和生物可降解性。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
一種深海魚膠原白肽水凝膠，其制備方法是：
1、將3-5克膠原蛋白肽粉溶于100毫升pbs緩沖液；
2、調(diào)節(jié)ph值到6-7.4；
3、在100ml膠原蛋白肽溶液中加入30ml氮氮二甲基間酰胺，充分攪拌溶解；
4、然后加入4-5毫升三乙胺攪拌至充分溶解；
5、再加入8-10毫升甲基丙烯酸酐，攪拌過夜，至充分溶解；
6、間斷攪拌，反應3天；
7、用1000道爾頓分子量大小透析袋透析三天，間斷換水；
8、將透析后的肽溶液置于皿中預凍；
9、放入凍干機凍干；
10、最后收集粉末保存。
本發(fā)明有益效果為：本發(fā)明以魚類提取為主，通過酸堿、酶切等技術(shù)把分子量控制在6000道爾頓以內(nèi)的膠原蛋白肽，具有很好的溶解度和保水能力，以及低的免疫原性和生物可降解性。
具體實施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合具體實施方式，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施方式僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
實施例：
一種深海魚膠原白肽水凝膠，其制備方法是：
1、將5克膠原蛋白肽粉溶于100毫升pbs緩沖液；
2、調(diào)節(jié)ph值到7.4；
3、在100ml膠原蛋白肽溶液中加入30ml氮氮二甲基間酰胺，充分攪拌溶解；
4、然后加入5毫升三乙胺攪拌至充分溶解；
5、再加入10毫升甲基丙烯酸酐，攪拌過夜，至充分溶解；
6、間斷攪拌，反應3天；
7、用1000道爾頓分子量大小透析袋透析三天，間斷換水；
8、將透析后的肽溶液置于皿中預凍；
9、放入凍干機凍干；
10、最后收集粉末保存。
本具體實施方式的使用方法：
1、用培養(yǎng)基配制百分之十五的膠原溶液；
2、調(diào)節(jié)ph值至7.4；
3、過濾除菌；
4、消化細胞，加入培養(yǎng)基終止消化，離心收集；
5、用少量培養(yǎng)基重懸細胞；
6、將少量密度細胞懸液加入肽溶液；
7、每毫升加入10微升百分之10的i2959溶液；
8、迅速接種孔板，365納米波長紫外照射10至20分鐘即可。
本具體實施方式采用的膠原蛋白以魚類提取為主，通過酸堿、酶切等技術(shù)把分子量控制在6000道爾頓以內(nèi)的膠原蛋白，稱之為膠原蛋白肽；膠原蛋白肽較大分子具有一定的溶解度和保水能力，以及低的免疫原性和生物可降解性，將是性能更優(yōu)越的支架材料。
對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領(lǐng)域技術(shù)人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實施方式。