本發(fā)明涉及一種增強(qiáng)機(jī)體免疫力的蜂膠有效部位及其復(fù)方制品，屬于功能性食品技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人體的免疫功能與生俱來，可防御外來物質(zhì)的侵犯，保護(hù)機(jī)體的穩(wěn)態(tài)，對維持人體健康具有重要意義。免疫系統(tǒng)是人體抵御疾病的天然屏障，若免疫系統(tǒng)遭到破壞，人體免疫力下降，就容易導(dǎo)致患病、病情恢復(fù)緩慢、反復(fù)感染等重大健康威脅。
蜂膠是蜂蜜從外界的膠源植物的嫩芽或樹皮傷口上采集的樹脂，并混入蜜蜂上領(lǐng)腺物和蜂蠟而成的一種棕紅色、棕黃色、棕褐色或帶有青綠色的粘性固體。蜂膠素有“紫色黃金”的美譽(yù)，具有多項生物活性，包括抗腫瘤、抗病原微生物、保護(hù)肝臟、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、改善心血管系統(tǒng)等。現(xiàn)階段，人們普遍處于壓力大、生活節(jié)奏緊張的狀態(tài)中，亞健康人群的數(shù)量逐年上升，長年累月的亞健康狀態(tài)會使免疫功能降低，還極易引發(fā)一些慢性病如心血管和糖尿病等，而蜂膠能有效地增強(qiáng)人體的免疫能力，促進(jìn)吞噬細(xì)胞的作用，刺激身體產(chǎn)生抗體，抵抗多種疾病。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種蜂膠有效部位及其復(fù)方制品。
本發(fā)明的另一目的是提供上述蜂膠有效部位的提取方法。
本發(fā)明還有一個目的是利用蜂膠有效部位、維生素e和蜂王漿制備可增強(qiáng)機(jī)體免疫力的蜂膠復(fù)方制品。
本發(fā)明實現(xiàn)過程如下：
一種蜂膠有效部位，其中蜂膠有效部位中活性成分組成與含量為：阿魏酸：151.8±6.8mg/100g，槲皮素：2858.9±125.3mg/100g，坎菲醇：275.2±14.7mg/100g，芹菜素：336.6±20.1mg/100g，松屬素：2838±85.4mg/100g，白楊素：6168.5±159.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：1287±48.5mg/100g，高良姜素：3082±153.8mg/100g。
上述蜂膠有效部位的提取方法：將蜂膠原料加熱到80℃，去除浮在上面的蜂蠟，然后將去除蜂蠟的蜂膠原料置于-20℃--30℃環(huán)境中冷凍8-10小時，用帶制冷的粉碎機(jī)將其粉碎成20-30目，用8-10倍重量，體積比為85-95%的乙醇提取2-3次，提取溫度為0-4℃，每次提取時間6-10小時，合并提取液，過濾；將濾液減壓濃縮到無醇味，然后將蜂膠提取物置于真空干燥箱中干燥，得到蜂膠有效部位。
含有上述蜂膠有效部位的蜂膠復(fù)方制品，其活性組分為蜂膠有效部位、蜂王漿和維生素e，具體生產(chǎn)工藝包括以下步驟：將重量份為30~35份的蜂膠有效部位在-10~-15℃條件下粉碎成20~30目顆粒，然后與3~6份蜂王漿凍干粉、0.5~1.5份維生素e油、28~33份大豆色拉油、25~31份的藥用級聚乙二醇400、2~4份單硬脂酸甘油酯混合，置于超微粉碎機(jī)中在-12~-20℃條件下研磨、乳化和粉碎10-15分鐘，得到顆粒直徑在10-20微米的可以裝填軟膠囊的蜂膠復(fù)方制品。
通過hplc測定，上述蜂膠復(fù)方制品中活性成分組成及含量為：阿魏酸：46±2.8mg/100g，槲皮素：866±61.3mg/100g，坎菲醇：82±5.7mg/100g，芹菜素：102±7.1mg/100g，松屬素：860±28.4mg/100g，白楊素：1868±68.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：390±16.5mg/100g，高良姜素：934±61.8mg/100g，維生素e：935±16.5mg/100g，10-羥基2-癸烯酸：250±20.9mg/100g。
上述蜂膠有效部位或蜂膠復(fù)方制品可用于制備增強(qiáng)免疫力保健食品。
上述蜂王漿凍干粉是在低溫真空條件下，將蜂王漿脫水粉碎得到的白色粉狀物質(zhì)。低溫真空處理的蜂王漿凍干粉最大限度的保留了蜂王漿中蛋白質(zhì)、維生素a、維生素bl、維生素b2、葉酸、泛酸、酶類及乙酰膽堿等多種活性成分，可提高小鼠單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)和細(xì)胞免疫系統(tǒng)功能。
維生素e，又稱生育酚，具有抗氧化、維持生育和調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等諸多生物學(xué)功能。健康人群長期服用低劑量的維生素e非但不會對體重、血液常規(guī)生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)、激素及慢性病有不良影響，甚至或可降低前列腺癌和乳腺癌的發(fā)病率。
本發(fā)明蜂膠復(fù)方制品經(jīng)動物藥效學(xué)實驗證實，對動物具有顯著的增強(qiáng)免疫力功能。
具體實施方式
一種蜂膠有效部位的提取方法：將蜂膠原料加熱到80℃，去除浮在上面的蜂蠟，然后將去除蜂蠟的蜂膠原料置于-20℃--30℃環(huán)境中冷凍8-10小時，用帶制冷的粉碎機(jī)將其粉碎成20-30目，用8-10倍重量，體積比為85-95%的乙醇提取2-3次，提取溫度為0-4℃，每次提取時間6-10小時，合并提取液，過濾；將濾液減壓濃縮到無醇味，然后將蜂膠提取物置于真空干燥箱中干燥，得到蜂膠有效部位。
通過hplc測定，上述蜂膠有效部位中活性成分組成與含量為：阿魏酸：151.8±6.8mg/100g，槲皮素：2858.9±125.3mg/100g，坎菲醇：275.2±14.7mg/100g，芹菜素：336.6±20.1mg/100g，松屬素：2838±85.4mg/100g，白楊素：6168.5±159.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：1287±48.5mg/100g，高良姜素：3082±153.8mg/100g。
一種蜂膠復(fù)方制品，其活性組分為蜂膠有效部位、蜂王漿和維生素e，具體生產(chǎn)工藝包括以下步驟：將重量份為30~35份的蜂膠有效部位在-10~-15℃條件下粉碎成20~30目顆粒，然后與3~6份蜂王漿凍干粉、0.5~1.5份維生素e油、28~33份大豆色拉油、25~31份的藥用級聚乙二醇400、2~4份單硬脂酸甘油酯混合，置于超微粉碎機(jī)中在-12~-20℃條件下研磨、乳化和粉碎10-15分鐘，得到顆粒直徑在10-20微米的可以裝填軟膠囊的蜂膠復(fù)方制品。
通過hplc測定，上述蜂膠復(fù)方制品中活性成分組成及含量為：阿魏酸：46±2.8mg/100g，槲皮素：866±61.3mg/100g，坎菲醇：82±5.7mg/100g，芹菜素：102±7.1mg/100g，松屬素：860±28.4mg/100g，白楊素：1868±68.4mg/100g，咖啡酸苯乙酯：390±16.5mg/100g，高良姜素：934±61.8mg/100g，維生素e：935±16.5mg/100g，10-羥基2-癸烯酸：250±20.9mg/100g。
藥效學(xué)研究
（1）試驗材料和給藥方法：
受試物為用1%的變性淀粉溶液分散的蜂膠復(fù)方制品，受試物設(shè)置353mg/kg、706mg/kg、1059mg/kg三個劑量組（以下表述為低劑量組、中劑量組、高劑量組），以1%的羧甲基纖維素鈉溶液為對照組。試驗動物為雌性昆明種小鼠144只，體重18~21g，每組36只，按0.2ml/10g體重經(jīng)口灌胃，每天一次，連續(xù)灌胃30天后測定免疫指標(biāo)、小鼠體重變化。
免疫指標(biāo)的測定：小鼠分為免疫一組、二組、三組及對照組，其中一組用于臟器/體重比值影響試驗、遲發(fā)型態(tài)反應(yīng)試驗、抗體生成細(xì)胞檢測、血清溶血素測定和巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞測定；二組用于nk細(xì)胞活性測定和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗；三組用于小鼠碳廓清測定。試驗均按照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003版）中的方法進(jìn)行。
表1給出了該蜂膠復(fù)方制品對免疫小鼠體重增長的影響，各劑量組下的小鼠體重的增長與對照組均無顯著性差異（p>0.05）。
表2為該蜂膠復(fù)方制品對小鼠臟器/體重比值的影響，由表2可知三個劑量組動物的臟/體比值與對照組相比較均無顯著性差異（p>0.05）。
表3和表4分別為蜂膠復(fù)方制品對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力和cona誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗的影響。結(jié)果表明，連續(xù)灌胃30天后，低、中、高劑量組動物的足跖腫脹度和淋巴細(xì)胞增殖能力與對照組相比均無顯著性差異（p>0.05），對小鼠細(xì)胞免疫試驗結(jié)果呈陰性。
表5和表6分別為蜂膠復(fù)方制品對抗體生成細(xì)胞和小鼠半數(shù)溶血值（hc50）的影響。同樣，連續(xù)灌胃30天后，低、中、高劑量組動物的溶血空斑數(shù)和hc50與對照組相比無顯著性差異（p>0.05），表明該蜂膠復(fù)方制品對小鼠體液免疫試驗結(jié)果呈陰性。
表7和表8分別為蜂膠復(fù)方制品對小鼠單核—巨噬細(xì)胞碳廓清功能和小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響。表7、表8數(shù)據(jù)結(jié)果表明，連續(xù)灌胃30天后，蜂膠復(fù)方制品對小鼠單核—巨噬細(xì)胞免疫試驗結(jié)果為陽性，即蜂膠復(fù)方制品對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力有提高作用。
表9給出了該蜂膠復(fù)方制品對小鼠nk細(xì)胞活性的影響，由表9可知，中、高劑量組動物的nk細(xì)胞活性顯著增強(qiáng)，與對照組有顯著性差異（p<0.05），蜂膠復(fù)方制品對nk細(xì)胞活性有促進(jìn)作用。
結(jié)論：表1~6結(jié)果表明，連續(xù)灌胃30天后，蜂膠復(fù)方制品對小鼠的體重、臟/體比值以及細(xì)胞免疫功能、體液免疫結(jié)果均無影響。表7~9結(jié)果表明，蜂膠復(fù)方制品對小鼠的單核—巨噬細(xì)胞功能結(jié)果、nk細(xì)胞活性測定結(jié)果均為陽性。依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》能夠判定：蜂膠復(fù)方制品對動物具有增強(qiáng)免疫力的功能。