一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法與流程

本發(fā)明屬于中藥制劑領(lǐng)域，具體涉及一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法。

背景技術(shù)：

艾（artemisiaargyil.）是菊科蒿屬的一種多年生草本植物,是一種常用的藥用植物。臨床應(yīng)用的艾葉，即艾的葉。我國應(yīng)用艾葉有著非常悠久的歷史,最早出現(xiàn)在公元前的《詩經(jīng)》中。中醫(yī)典籍《黃帝內(nèi)經(jīng)》中對于艾葉也有記載。《中國藥典》2015年版收載，艾葉溫經(jīng)止血，散寒止痛。外用祛濕止癢；用于吐血，衄血，崩漏，月經(jīng)過多，胎漏下血，少腹冷痛，經(jīng)寒不調(diào)，宮冷不孕；外治皮膚瘙癢。醋艾炭溫經(jīng)止血，用于虛寒性出血。艾葉的化學(xué)成分主要有揮發(fā)油、黃酮類、桉葉烷類、三萜類等?，F(xiàn)代藥理研究證明，艾葉具有平喘、鎮(zhèn)咳、祛痰、止血抗凝、抗炎、抗過敏和鎮(zhèn)痛等作用，其揮發(fā)油和水提物都有抑菌活性。目前可搜索到的相關(guān)文獻(xiàn)與專利，均存在各種不足，如大量使用有機(jī)溶劑，除了有易燃易爆風(fēng)險(xiǎn)外，也可能有溶劑殘留，給產(chǎn)品安全性帶來隱患；或者只提取其中揮發(fā)油成分，水溶性的有效成分被棄置，造成藥材資源的浪費(fèi)。專利cn101549001b《艾葉有效組分及其制備方法》，其中記錄艾葉提取方法為：使用乙酸乙酯和乙醇為提取溶劑，提取液再經(jīng)色譜柱層析洗脫。其中乙酸乙酯就是一種易揮發(fā)、易燃、有可能造成刺激性的有機(jī)溶劑，會造成安全隱患。且色譜柱層析比較耗時(shí)，操作繁雜。cn104337853a《一種艾葉提取物及制備工藝》，這篇專利提出的技術(shù)方案是：用乙酸乙酯作為溶劑浸泡提取。同樣有使用大量有機(jī)溶劑的問題。并且浸泡法提取通常需要很大的溶劑量和較長的時(shí)間。低極性溶劑提取所得的為低極性揮發(fā)油成分，而水溶性成分被棄置，提取物不能綜合反映藥材的效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，該方法步驟簡單，成本低廉，操作方便，安全、高效地得到同時(shí)含有揮發(fā)油、黃酮等有效成分的產(chǎn)品；液體制劑用途廣泛；質(zhì)量可控并且穩(wěn)定；可用于規(guī)模化生產(chǎn)。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機(jī)中進(jìn)行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發(fā)油2~5小時(shí)，收集揮發(fā)油，同時(shí)得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質(zhì)量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2~4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8~12倍，提取時(shí)間為1~2小時(shí)；

步驟三、提取完成后進(jìn)行過濾，并對濾液進(jìn)行減壓濃縮，至相對密度至1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、調(diào)節(jié)濃縮液的ph至4~5，在0~4℃溫度下冷藏2~4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發(fā)油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機(jī)溶劑溶入步驟一收集得到的揮發(fā)油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

作為本發(fā)明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進(jìn)一步優(yōu)化，步驟四所述調(diào)節(jié)濃縮液的ph采用的是稀鹽酸。

作為本發(fā)明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進(jìn)一步優(yōu)化，步驟五所述向艾葉提取儲備液中加水稀釋時(shí)，水的加入量為艾葉提取儲備液重量的1~10倍。

作為本發(fā)明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進(jìn)一步優(yōu)化，步驟五所述的有機(jī)溶劑為乙醇、丙二醇中的一種或兩種。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明至少具有下述優(yōu)點(diǎn)及有益效果：

本發(fā)明的艾葉提取物制備工藝步驟簡單，成本低廉，操作方便，安全、高效地得到同時(shí)含有揮發(fā)油、黃酮等有效成分的制劑產(chǎn)品，該制劑具有顯著的平喘、鎮(zhèn)咳、祛痰、止血抗凝、抑菌抗炎等作用，液體制劑用途廣泛，且自身具有抑菌作用，質(zhì)量可控并且穩(wěn)定；可用于規(guī)?；a(chǎn)。

本發(fā)明采用20%乙醇為提取溶劑，可明顯提高黃酮類成分的提取效率，同時(shí)安全風(fēng)險(xiǎn)大大降低。濃縮液采用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph，能加快雜質(zhì)聚集，縮短冷藏時(shí)間，且當(dāng)ph為4.14時(shí)，黃酮保留率為94.78%。

附圖說明

圖1為桉油精的高效液相色譜檢測譜圖；

圖2為黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素的高效液相色譜檢測譜圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的內(nèi)容更明顯易懂，以下結(jié)合具體實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機(jī)中進(jìn)行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發(fā)油2~5小時(shí)，收集揮發(fā)油，同時(shí)得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質(zhì)量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2~4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8~12倍，提取時(shí)間為1~2小時(shí)；

步驟三、提取完成后進(jìn)行過濾，并對濾液進(jìn)行減壓濃縮，至相對密度至1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的ph至4~5，在0~4℃溫度下冷藏2~4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發(fā)油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，水的加入量為艾葉提取儲備液重量的1~10倍，并用有機(jī)溶劑溶入步驟一收集得到的揮發(fā)油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

步驟五所述的有機(jī)溶劑為乙醇、丙二醇中的一種或兩種。

步驟五中所述的高效液相色譜檢測條件：

（1）桉油精

色譜柱：agilentinertsilods-3（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：乙腈-水（70∶30，v/v）；

檢測波長：203nm；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：5~10μl。

譜圖如圖1所示。

（2）黃酮類

色譜柱：agilentinertsilods-3（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：乙腈-0.2％磷酸溶液（37∶63，v/v）；

檢測波長：330nm；

流速：1.0ml/min；

柱溫：25℃；

進(jìn)樣量：5~10μl。

譜圖如圖2所示。

本發(fā)明得到的抗菌制劑需冷藏保存，無法保證冷藏條件時(shí)需加入防腐劑，如質(zhì)量濃度為1%的苯氧乙醇、1%nikkogoardol等。

實(shí)施例1：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機(jī)中進(jìn)行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發(fā)油2小時(shí)，收集揮發(fā)油，同時(shí)得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質(zhì)量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8倍，提取時(shí)間為1小時(shí)；

步驟三、提取完成后進(jìn)行過濾，并對濾液進(jìn)行減壓濃縮，至相對密度為1.05，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的ph至4.15，在0~4℃溫度下冷藏2天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發(fā)油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機(jī)溶劑乙醇溶入步驟一收集得到的揮發(fā)油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經(jīng)檢測，本發(fā)明得到的產(chǎn)品中，桉油精不少于0.0012mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0168mg/ml。

實(shí)施例2：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機(jī)中進(jìn)行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發(fā)油3小時(shí)，收集揮發(fā)油，同時(shí)得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質(zhì)量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的10倍，提取時(shí)間為1.5小時(shí)；

步驟三、提取完成后進(jìn)行過濾，并對濾液進(jìn)行減壓濃縮，至相對密度為1.06，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的ph至4.50，在0~4℃溫度下冷藏4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發(fā)油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機(jī)溶劑乙醇溶入步驟一收集得到的揮發(fā)油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經(jīng)檢測，本發(fā)明得到的產(chǎn)品中，桉油精不少于0.0011mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0154mg/ml。

實(shí)施例3：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機(jī)中進(jìn)行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發(fā)油5小時(shí)，收集揮發(fā)油，同時(shí)得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質(zhì)量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取3次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8倍，提取時(shí)間為2小時(shí)；

步驟三、提取完成后進(jìn)行過濾，并對濾液進(jìn)行減壓濃縮，至相對密度到1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的ph至4.88，在0~4℃溫度下冷藏3天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發(fā)油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機(jī)溶劑丙二醇溶入步驟一收集得到的揮發(fā)油，得到混合液，然后采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進(jìn)行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經(jīng)檢測，本發(fā)明得到的產(chǎn)品中，桉油精不少于0.0013mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0158mg/ml。