一種用于治療脫發(fā)的制劑的制作方法

本發(fā)明屬于治療脫發(fā)的藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療脫發(fā)的制劑。

背景技術(shù)：

毛發(fā)由毛囊生成，毛囊具有周期性再生的特性，即經(jīng)歷生長期、退化期、靜止期的循環(huán)。其中，由靜止期向生長期的轉(zhuǎn)換，即生長期啟動為最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。當(dāng)毛囊的周期性再生功能發(fā)生障礙時，就會出現(xiàn)脫發(fā)、斑禿等毛囊相關(guān)疾病。人類的頭發(fā)不僅具有生物學(xué)和生理學(xué)功能，而且由于頭發(fā)的濃密程度以及發(fā)型對人外貌有明顯影響，所以頭發(fā)還有重要的心理學(xué)和社會學(xué)作用。當(dāng)前，隨著生活水平的提高，人們對美的要求日益迫切。由于脫發(fā)影響外表，對患者心理產(chǎn)生負(fù)面影響，因此會降低患者的生活質(zhì)量。

對于脫發(fā)的治療，臨床應(yīng)用的方法主要包括以下幾種：

1.使用中藥或中成藥：其缺點是為復(fù)方制劑，成分不明確，難于在全球范圍內(nèi)推廣，且療效不穩(wěn)定；

2.西醫(yī)療法：使用免疫調(diào)節(jié)劑和激素，激素會帶來明顯的副作用和藥物依賴；

3.利用針灸或者脫發(fā)治療儀：需要設(shè)備昂貴，療效不穩(wěn)定；

4.手術(shù)植發(fā)：價格昂貴且有創(chuàng)傷，療效也不穩(wěn)定。

在國家自然科學(xué)基金面上項目(81472895)的支持下，前期進行了大量理論研究，發(fā)現(xiàn)了調(diào)控毛囊生長的兩個關(guān)鍵靶點：在靜止期時，通過Wnt配體激活經(jīng)典Wnt信號通路后，能夠誘導(dǎo)毛囊進入生長期；在生長期啟動時，通過BMP配體處理后，則毛囊無法進入生長期。由于配體的成本高昂，需要通過生物學(xué)方法獲得，存在潛在的風(fēng)險。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

基于背景技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種用于治療脫發(fā)的制劑，該制劑成分明確，作用機理清楚，在動物上取得的療效明顯。

為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種用于治療脫發(fā)的制劑，包括氯化鋰、LDN-193189、載體或賦形劑。

采用上述技術(shù)方案的發(fā)明，氯化鋁為無色透明晶體或白色而微帶淺黃色的結(jié)晶性粉末，極易吸收水分并部分水解放出氯化氫從而形成噴霧，味咸，易溶于水，溶于乙醇、丙酮、吡啶等有機溶劑，低毒，氯化鋰主要用于空氣調(diào)節(jié)領(lǐng)域，用作助焊劑、干燥劑、化學(xué)試劑，并用于制焰火、干電池和金屬鋰等。LDN-193189是一種選擇性的BMP信號通路抑制劑，抑制BMP I型受體ALK2和ALK3的轉(zhuǎn)錄活性，在C2C12細(xì)胞中IC50分別為5nM和30nM，作用于BMP比作用于TGF-β選擇性高200倍。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的氯化鋰和LDN-193189的重量比例為1：0.001～1，這樣的設(shè)計，使得該制劑治療脫發(fā)的效果較好。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的氯化鋰和LDN-193189的重量比例為1：0.025～0.1，這樣的設(shè)計，使得該制劑預(yù)防或治療脫發(fā)效果較好，容易吸收。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的載體或賦形劑包括甘油、凡士林、聚山梨酯80、石蠟、羊毛脂、二甲基硅油、硬脂酸中的一種或多種，這樣的設(shè)計，該制劑性能較好，容易吸收，適于經(jīng)皮給藥。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述制劑為軟膏劑、凝膠劑、膜劑、溶液劑、乳劑、注射劑和噴霧劑中的一種，這樣的設(shè)計，可以滿足不同人的使用需求，選擇性較強，適于經(jīng)皮給藥。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述制劑為噴霧劑，所述的制劑中加入表面活性劑和潤濕劑，所述的表面活性劑和潤濕劑為聚山梨酯80，且所述的載體或賦形劑為甘油，所述的氯化鋰、LDN-193189、聚山梨酯80、甘油的重量比為20:1:53:12.6，這樣的設(shè)計，可以將該制劑做成噴霧劑，裝于噴霧瓶中，使用方便，有利于藥物分散均勻。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述制劑為注射劑，所述的制劑中加入pH調(diào)節(jié)劑，所述的pH調(diào)節(jié)劑為碳酸氫鈉，所述碳酸氫鈉、氯化鋰、LDN-193189的重量比為5:40:1，這樣的設(shè)計，可以將該制劑做成注射劑，易于吸收，療效較佳，碳酸氫鈉為pH調(diào)節(jié)劑，提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述制劑為軟膏劑，所述的制劑中加入乳化劑、穩(wěn)定劑、液狀石蠟、凡士林、羊毛脂、甘油和防腐劑，所述的乳化劑為三乙醇胺與硬脂酸反應(yīng)生成的有機銨皂，所述的硬脂酸為油相基質(zhì)，所述的穩(wěn)定劑為單硬脂酸甘油酯，以增加油相吸水性，所述的液狀石蠟、凡士林用來調(diào)節(jié)稠度，所述的羊毛脂用于增加基質(zhì)吸水性，所述的甘油為保濕劑，所述的防腐劑為羥苯乙酯，所述的硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、凡士林、羊毛脂、液狀石蠟、羥苯乙酯、三乙醇胺、甘油、氯化鋰、LDN-193189的重量比為12:3.5:1:5:6:0.15:0.4:5:55:5，這樣的設(shè)計，使用方便，療效較佳。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的制劑為溶液劑，所述的制劑中加入第一溶劑兼透皮劑、第二溶劑，所述的第一溶劑兼透皮劑為乙醇，所述的第二溶劑為二甲基亞砜，所述的氯化鋰、LDN-193189、乙醇、二甲基亞砜的重量比為20:1:39.5:11，這樣的設(shè)計，可以將該制劑做成溶液劑，易于吸收，療效較佳。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的制劑還可以用于治療白發(fā)。

本發(fā)明的有益效果是：針對毛囊生長的靜止期和生長期啟動時的兩個靶點進行了研究，該制劑利用化合物氯化鋰激活經(jīng)典Wnt信號通路，化合物L(fēng)DN-193189抑制BMP信號通路，將氯化鋰和LDN-193189同時聯(lián)合應(yīng)用于毛囊生長方面，即聯(lián)合利用化合物同時激活經(jīng)典Wnt信號和拮抗BMP信號，模擬生物大分子的作用，達(dá)到了誘導(dǎo)毛囊生長的目的。動物實驗證明，該制劑具有明顯的誘導(dǎo)毛囊生長的作用，制劑用于毛囊生長的有效率為50％～100％，可用于生產(chǎn)治療脫發(fā)疾病的藥物。本發(fā)明治療脫發(fā)的制劑利用化合物，成分明確，作用機理清楚，療效穩(wěn)定，在動物上取得的療效明顯，無激素，避免了激素帶來的明顯副作用和藥物依賴，成本較低。本發(fā)明的藥物組合物在C57小鼠上誘導(dǎo)再生的毛囊為黑色，說明本發(fā)明還可以用于治療白發(fā)。

附圖說明

本發(fā)明可以通過附圖給出的非限定性實施例進一步說明；

圖1為實施例一中局部給藥9天后，制劑區(qū)域和對照區(qū)域毛發(fā)生長情況圖；

圖2為實施例一中局部給藥14天后，制劑區(qū)域和對照區(qū)域毛發(fā)生長情況圖；

圖3為實施例二中局部給藥14天后，制劑點部位和對照點部位毛發(fā)生長情況圖。

具體實施方式

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明技術(shù)方案進一步說明。

實施例一

一種用于治療脫發(fā)的噴霧劑的制備方法如下：按照常規(guī)方法，稱取20g氯化鋰、1g LDN-193189制成極細(xì)粉末，加入50ml聚山梨酯80作為表面活性劑和潤濕劑，混合均勻，再加入量取10ml甘油作為增稠劑，最后加入蒸餾水至100ml，并攪拌混合均勻，分裝于噴霧瓶中，制得以氯化鋰和LDN-193189為活性成分的噴霧劑。

檢測方法如下：取處于出生56天的C57BL/6小鼠4只，該小鼠的毛囊處于絕對靜止期，腹腔注射150ul的1％戊巴比妥鈉，待小鼠麻醉后，用剪刀剪除小鼠背部毛發(fā)，需要注意的是不要剪傷皮膚，并用記號筆沿背中線將背部皮膚畫出一個直徑約3cm的圓形區(qū)域作為制劑區(qū)域，剩余剪除毛發(fā)的部位作為對照區(qū)域，制劑區(qū)域使用含氯化鋰和LDN-193189的噴霧劑，對照區(qū)域使用不含氯化鋰和LDN-193189的噴霧劑，分別噴于小鼠所畫出的不同區(qū)域，每天3次，每次間隔8小時，持續(xù)7天。

檢測結(jié)果如下：在給藥后的第9天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的皮膚變黑，而對照區(qū)域的皮膚呈紅色或灰白色，毛囊仍處于靜止期，見圖1；在給藥后的第11天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域長出毛發(fā)，呈黑色，而對照區(qū)域的皮膚仍為紅色或灰白色，無毛發(fā)長出；在給藥后的第14天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域部位的毛發(fā)生長明顯，而對照區(qū)域的毛囊仍處于靜止期，見圖2。本實施例共處理4只小鼠，有2只出現(xiàn)上述現(xiàn)象，制劑的有效率為50％。

實施例二

一種用于治療脫發(fā)的注射劑的制備方法如下：按照常規(guī)方法，分別稱取25g碳酸氫鈉、200g氯化鋰、5g的LDN-193189，在配置容器中加處方量80％的注射用水，通入CO₂至飽和，加入氯化鋰溶解后，緩緩加入碳酸氫鈉，攪拌使其完全溶解，再加入LDN-193189攪拌均勻，調(diào)節(jié)混合液的pH值在6.0～6.2范圍內(nèi)，加入經(jīng)CO₂飽和的注射用水至1000ml后，用微孔濾膜反復(fù)過濾，并在CO₂氣流下灌封，最后于100℃的流通蒸汽中滅菌15min，制得以氯化鋰和LDN-193189作為活性成分的注射劑。

檢測方法如下：取處于出生56天的C57BL/6小鼠3只，腹腔注射150ul的1％戊巴比妥鈉，待小鼠麻醉后，用剪刀剪除小鼠背部毛發(fā)，需要注意的是不要剪傷皮膚，并用記號筆沿小鼠背中線選取兩個點，一個為制劑點，另外一個為對照點，制劑點皮內(nèi)注射50ul含有氯化鋰和LDN-193189的注射劑，對照點皮內(nèi)注射不含氯化鋰和LDN-193189的注射劑，用苦味酸將隆起的皮丘做好標(biāo)記，每兩天注射1次，共注射3次，持續(xù)6天。

檢測結(jié)果如下：在給藥后的第9天，發(fā)現(xiàn)制劑點部位的皮膚變黑，與實施例一中的圖1相似，而對照點部位的皮膚呈紅色或灰白色，毛囊仍處于靜止期；在給藥后的第11天，發(fā)現(xiàn)制劑點部位長出毛發(fā)，呈黑色，而對照點部位的皮膚仍為紅色或灰白色，無毛發(fā)長出；在給藥后的第14天，發(fā)現(xiàn)制劑點部位的毛發(fā)生長明顯，見圖3，而對照點部位的毛囊仍處于靜止期，見圖2。本實施例共處理3只小鼠，3只出現(xiàn)上述現(xiàn)象，制劑的有效率為100％。

實施例三

一種用于治療脫發(fā)的軟膏劑的制備方法如下：按照常規(guī)方法，稱取120g硬脂酸、35g單硬脂酸甘油酯、10g凡士林、50g羊毛脂、60g液狀石蠟、1.5g羥苯乙酯、4g三乙醇胺、50g甘油、550g氯化鋰、50g的LDN-193189、69.5g蒸餾水，其中三乙醇胺與部分硬脂酸反應(yīng)生成有機銨皂作為乳化劑，部分硬脂酸為油相基質(zhì)，單硬脂酸甘油酯增加油相吸水性，作為穩(wěn)定劑，液狀石蠟、凡士林用來調(diào)節(jié)稠度，羊毛脂用于增加基質(zhì)吸水性，甘油為保濕劑，羥苯乙酯為防腐劑。將稱量好的硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、凡士林、液狀石蠟、羊毛脂置于配置容器中，水浴加熱至70～80℃使其熔化作為油相；另取稱量好的羥苯乙酯、三乙醇胺、甘油、氯化鋰和LDN-193189加入蒸餾水中溶解，加熱至與油相相同溫度作為水相，然后攪拌下將水相緩緩加入油相中，直至乳化完全，室溫冷卻即得以氯化鋰和LDN-193189作為活性成分的軟膏劑。

檢測方法如下：取處于出生56天的C57BL/6小鼠3只，腹腔注射150ul的1％戊巴比妥鈉，待小鼠麻醉后，用剪刀剪除小鼠背部毛發(fā)，需要注意的是不要剪傷皮膚，并用記號筆沿小鼠背中線將背部皮膚劃出兩個直徑約1cm的圓形區(qū)域，一個為制劑區(qū)域，另外一個為對照區(qū)域。制劑區(qū)域涂抹含有氯化鋰和LDN-193189的軟膏劑，對照區(qū)域涂抹不含氯化鋰和LDN-193189的軟膏劑，每天3次，每次間隔8小時，持續(xù)7天。

檢測結(jié)果如下：在給藥后的第9天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的皮膚變黑，與實施例一中的圖1相似，而對照區(qū)域和周邊部位的皮膚呈紅色或灰白色；在給藥后的第11天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域長出毛發(fā)，呈黑色，而對照區(qū)域和周邊部位的皮膚仍為紅色或灰白色，無毛發(fā)長出；在給藥后的第14天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的毛發(fā)生長明顯，與實施例2的圖3相似。本實施例共處理3只小鼠，3只出現(xiàn)上述現(xiàn)象，制劑的有效率為100％。

實施例四

一種用于治療脫發(fā)的溶液劑的制備方法如下：用乙醇和二甲基亞砜作為溶劑，乙醇也是透皮劑。按照常規(guī)方法，稱取200g氯化鋰加入500ml乙醇中溶解作為溶液一，稱取10g的LDN-193189加入100ml的二甲基亞砜中溶解作為溶液二，將溶液一和溶液二混合，并攪拌均勻，最后加蒸餾水至1000ml，混勻即得以氯化鋰和LDN-193189作為活性成分的溶液劑。

檢測方法如下：取處于出生56天的C57BL/6小鼠4只，腹腔注射150ul的1％戊巴比妥鈉，待小鼠麻醉后，用剪刀剪除小鼠背部毛發(fā)，需要注意的是不要剪傷皮膚，用苦味酸沿小鼠背中線將背部皮膚劃出兩個直徑約2cm的圓形區(qū)域，一個為制劑區(qū)域，另外一個為對照區(qū)域。制劑區(qū)域逐滴滴加100ul含有氯化鋰和LDN-193189的溶液劑，對照區(qū)域逐滴滴加100ul不含氯化鋰和LDN-193189的溶液劑，待前一滴液體稍干后，滴加下一滴。每天1次，持續(xù)7天。

檢測結(jié)果如下：在給藥后的第9天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的皮膚變黑，與實施例一中的圖1相似，而對照區(qū)域和周邊部位的皮膚呈紅色或灰白色；在給藥后的第11天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域長出毛發(fā)，呈黑色，而對照區(qū)域和周邊部位的皮膚仍為紅色或灰白色，無毛發(fā)長出；在給藥后的第14天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的毛發(fā)生長明顯，與實施例2的圖3相似。本實施例共處理4只小鼠，3只出現(xiàn)上述現(xiàn)象，制劑的有效率為75％。

實施例五

一種用于治療脫發(fā)的軟膏劑的制備方法如下：按照常規(guī)方法，稱取100g硬脂酸、29g單硬脂酸甘油酯、8g凡士林、40g羊毛脂、50g液狀石蠟、1.25g羥苯乙酯、3.75g三乙醇胺、40g甘油、500g氯化鋰、50g的LDN-193189、50g蒸餾水，將稱量好的硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、凡士林、液狀石蠟、羊毛脂置于配置容器中，水浴加熱至70～80℃使其熔化作為油相；另取稱量好的羥苯乙酯、三乙醇胺、甘油氯化鋰和LDN-193189加入蒸餾水中溶解，加熱至與油相相同溫度作為水相，然后攪拌下將水相緩緩加入油相中，直至乳化完全，室溫冷卻即得以氯化鋰和LDN-193189作為活性成分的軟膏劑。

檢測方法如下：取處于出生56天的C57BL/6小鼠4只，腹腔注射150ul的1％戊巴比妥鈉，待小鼠麻醉后，用剪刀剪除小鼠背部毛發(fā)，需要注意的是不要剪傷皮膚，并用記號筆沿小鼠背中線將背部皮膚劃出兩個直徑約1cm的圓形區(qū)域，一個為制劑區(qū)域，另外一個為對照區(qū)域。制劑區(qū)域涂抹含有氯化鋰和LDN-193189的軟膏劑，對照區(qū)域涂抹不含氯化鋰和LDN-193189的軟膏劑，每天3次，每次間隔8小時，持續(xù)7天。

檢測結(jié)果如下：在給藥后的第9天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的皮膚變黑，與實施例一中的圖1相似，而對照區(qū)域的皮膚呈紅色或灰白色；在給藥后的第11天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域長出毛發(fā)，呈黑色，而對照區(qū)域和周邊部位的皮膚仍為紅色或灰白色，無毛發(fā)長出；在給藥后的第14天，發(fā)現(xiàn)制劑區(qū)域的毛發(fā)生長明顯，與實施例2的圖3相似。本實施例共處理4只小鼠，3只出現(xiàn)上述現(xiàn)象，制劑的有效率為75％。

如圖2和圖3所示，本發(fā)明的藥物組合物在C57小鼠上誘導(dǎo)再生的毛囊為黑色，說明本發(fā)明還可能用于治療白發(fā)。

需要說明的是，上述檢測數(shù)據(jù)只針對上述檢測樣品。另外，本發(fā)明的藥物組合物的經(jīng)皮給藥劑量為0.01～10mg/cm²，當(dāng)然，確切的給藥劑量應(yīng)根據(jù)待治療的病癥或病理狀態(tài)的性質(zhì)、嚴(yán)重程度、病人的年齡、體重、一般健康狀態(tài)，以及病人對所用藥物的敏感性、耐受性和給藥方式等因素，按照個體化的原則由臨床醫(yī)生確定。

進一步討論，藥物安全性實驗顯示，長期(30天)給予大鼠100mg/cm²，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)動物有任何毒性反應(yīng)；小鼠急性毒性試驗結(jié)果顯示，經(jīng)皮給藥達(dá)到100mg/cm²時，動物仍未出現(xiàn)可見的毒性反應(yīng)。

本發(fā)明藥物組合物，還可以按照保健品的通常制作方法，用于保健品的生產(chǎn)，可以起到預(yù)防脫發(fā)和白發(fā)的作用。

本發(fā)明治療脫發(fā)的制劑利用化合物，成分明確，作用機理清楚，療效穩(wěn)定，在動物上取得的療效明顯，無激素，避免了激素帶來的明顯副作用和藥物依賴，成本較低。可以預(yù)見，用其他Wnt信號通路激活劑或BMP信號抑制劑進行組合，可能達(dá)到相同或相似的作用。

以上對本發(fā)明提供的一種用于治療脫發(fā)的制劑進行了詳細(xì)介紹。具體實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護范圍內(nèi)。