治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物及其制備方法與流程

本發(fā)明涉及一種以中藥為原料的藥物，特別是一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物；本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。

背景技術(shù)：

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一種多發(fā)的自身免疫性疾病，在臨床上比較常見的，其主要特征是慢性骨膜炎癥和軟骨破壞，它的發(fā)病由多種物質(zhì)及路徑的參與，包括滑膜增生，自體抗體的產(chǎn)生，軟骨和骨破壞，關(guān)節(jié)畸形和系統(tǒng)功能，系統(tǒng)功能包括心血管、肺、心理和骨骼疾病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患病率在0.3％和1％之間。目前傳統(tǒng)改善病情抗風(fēng)濕藥雖然能在一定程度上阻止骨質(zhì)破壞，但是毒副作用明顯，患者不易耐受。針對腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的生物制劑能快速抑制癥狀，但是藥效持續(xù)時間短，價格昂貴而且存在感染等風(fēng)險，導(dǎo)致患者長期使用依從性差，不利于疾病控制。中醫(yī)藥因其治療的全面性，低副作用，顯著的療效而逐漸進(jìn)入人們的視野，從傳統(tǒng)中藥中尋找和開發(fā)高效、低毒的抗風(fēng)濕新藥是臨床的迫切需求。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)中藥效持續(xù)時間短，價格昂貴的缺點，提供了一種高效、低毒的治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案得以解決：

治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，它是由以下重量份數(shù)的中藥原料制成：

桂枝15～30份、酒白芍25～35份、肉桂8～12份、威靈仙20～30份、防風(fēng)15～25份。

治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，它是由桂枝、酒白芍、肉桂、威靈仙和防風(fēng)制成的凍干粉。

一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，按重量配比取全部中藥進(jìn)行第一次煎煮后過濾得煎煮液A和濾渣，將濾渣進(jìn)行第二次煎煮后得煎煮液B；

步驟二，將煎煮液A或煎煮液B濃縮后冷凍干燥制成凍干粉，或者將煎煮液A和煎煮液B合并，濃縮后冷凍干燥制成凍干粉。

一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，按重量配比取桂枝、酒白芍進(jìn)行第一次煎煮得煎煮液，再將肉桂、威靈仙、防風(fēng)進(jìn)行第二次煎煮得煎煮液，之后將第一次煎煮所得煎煮液和第二次煎煮所得煎煮液合并，經(jīng)紗布過濾后抽濾，得到濃縮煎煮液，對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥，制成凍干粉。

一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，按重量配比取肉桂、威靈仙、防風(fēng)中的任意一種或兩種和桂枝、酒白芍進(jìn)行第一次煎煮得煎煮液，再將余下中藥原料進(jìn)行第二次煎煮得煎煮液，之后將第一次煎煮所得煎煮液和第二次煎煮所得煎煮液合并，經(jīng)紗布過濾后抽濾，得到濃縮煎煮液，對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥，制成凍干粉。

一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：按重量配比取桂枝、酒白芍進(jìn)行第一次煎煮得煎煮液，過濾后將濾渣備用；

步驟二：將濾渣和肉桂、威靈仙、防風(fēng)合并進(jìn)行第二次煎煮得煎煮液；

步驟三：將第一次煎煮所得煎煮液和第二次煎煮所得煎煮液合并，經(jīng)紗布過濾后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥，制成凍干粉。

一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：按重量配比取肉桂、威靈仙、防風(fēng)中的任意一種或兩種和桂枝、酒白芍進(jìn)行第一次煎煮得煎煮液，過濾后將濾渣備用；

步驟二：將濾渣和余下中藥原料合并進(jìn)行第二次煎煮得煎煮液；

步驟三：將第一次煎煮所得煎煮液和第二次煎煮所得煎煮液合并，經(jīng)紗布過濾后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥，制成凍干粉。

作為優(yōu)選，第一次煎煮、第二次煎煮的時間均為1.5～2.5h。

作為優(yōu)選，第一次煎煮、第二次煎煮時的水用量為煎煮材料重量的8倍～12倍。

本發(fā)明由于采用了以上技術(shù)方案，具有顯著的技術(shù)效果：本發(fā)明由桂枝、酒白芍、肉桂、威靈仙和防風(fēng)，按照君臣佐使和一定配比組方而成，桂枝、芍藥祛風(fēng)通絡(luò)，調(diào)和營衛(wèi)，共為君藥；威靈仙祛風(fēng)通絡(luò)、除濕止痛，宣通五臟，助君藥暢達(dá)內(nèi)外為臣藥；防風(fēng)乃風(fēng)藥中之潤劑，能行經(jīng)絡(luò)，逐濕淫，通關(guān)節(jié)，止疼痛，舒筋脈；肉桂以助桂枝通脈止痛，溫經(jīng)，助陽，為使藥，與防風(fēng)俱為佐助藥。五味藥相結(jié)合既可鎮(zhèn)痛，減輕患者癥狀，又可清熱、祛風(fēng)、溫經(jīng)、散寒、化濕，從根本上治療RA，更可降低該病的致殘率，提高患者的生存和生活能力。

附圖說明

圖1是WJHL對CIA小鼠狀態(tài)和體重的影響趨勢圖；

圖2是WJHL對CIA小鼠主要臟器指數(shù)的影響趨勢圖；

圖3是WJHL對CIA小鼠足腫脹厚度的影響趨勢圖；

圖4是ELISA法檢測小鼠血清中炎癥因子及抗炎因子含量趨勢圖。

具體實施方式

下面實施例是對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)描述，但不是限制本發(fā)明的范圍。

實施例1

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，25g酒白芍，8g肉桂，30g威靈仙，22g防風(fēng)。其制備方法是：將上述中藥加入到為原料總重量10倍量的去離子水浸泡28min，煎煮1.8h后倒出煎煮液，過濾，濾渣再次加入去離子水煎煮1.2h，去離子水的重量為濾渣重量的8倍，合并兩次的煎煮液，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為27％(即100g藥材得到27g凍干粉)。

實施例2

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為30g桂枝，35g酒白芍，12g肉桂，22g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例1。

實施例3

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，30g酒白芍，10g肉桂，30g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法是：將上述中藥加入到為原料總重量10倍量的去離子水浸泡30min，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾，濾渣再次加入去離子水煎煮1.5h，去離子水的重量為濾渣重量的8倍，合并兩次煎煮液，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為25％。

實施例4

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，35g酒白芍，10g肉桂，20g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法是：將上述中藥加入到為原料總重量10倍量的去離子水浸泡35min，煎煮2.5h后倒出煎煮液，過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為20％。

實施例5

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為30g桂枝，20g酒白芍，15g肉桂，25g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法如實施例1。

實施例6

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為25g桂枝，20g酒白芍，15g肉桂，25g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法是：將上述中藥加入到為原料總重量10倍量的去離子水浸泡25min，煎煮1.5h后倒出煎煮液，過濾，濾渣再次加入去離子水煎2.0h，去離子水為濾渣的8倍，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為16％。

實施例7

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，30g酒白芍，10g肉桂，20g威靈仙，25g防風(fēng)。其制備方法如實施例6。

實施例8

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為30g桂枝，26g酒白芍，8g肉桂，20g威靈仙，16g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝和酒白芍加入去離子水浸泡30min，去離子水的用量為桂枝和酒白芍總重量的12倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將肉桂、威靈仙、防風(fēng)加入去離子水煎1.5h，去離子水的用量為肉桂、威靈仙、防風(fēng)三者重量之和的8倍，將兩次的煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為22％。

實施例9

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，32g酒白芍，12g肉桂，25g威靈仙，22g防風(fēng)。其制備方法如實施例8。

實施例10

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為18g桂枝，32g酒白芍，8g肉桂，25g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和肉桂加入去離子水浸泡26min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和肉桂總重量的10倍，煎煮2.2h后倒出煎煮液，過濾；將威靈仙、防風(fēng)加入去離子水煎1.8h，去離子水的用量為威靈仙和防風(fēng)總重量的8倍，將兩次的煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為23％。

實施例11

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為25g桂枝，20g酒白芍，13g肉桂，20g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法如實施例10。

實施例12

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為22g桂枝，28g酒白芍，12g肉桂，20g威靈仙，25g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和威靈仙加入去離子水浸泡28min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和威靈仙總重量的9倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將肉桂、防風(fēng)加入去離子水煎1.5h，去離子水的用量為肉桂和防風(fēng)總重量的8倍，將兩次的煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為23％。

實施例13

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，35g酒白芍，8g肉桂，25g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例12。

實施例14

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為27g桂枝，30g酒白芍，9g肉桂，22g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和防風(fēng)加入去離子水浸泡32min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和防風(fēng)總重量的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將肉桂、威靈仙加入去離子水煎1.5h，去離子水的用量為肉桂和威靈仙總重量的10倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為24％。

實施例15

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，25g酒白芍，15g肉桂，26g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例14。

實施例16

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，30g酒白芍，10g肉桂，28g威靈仙，18g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、肉桂和威靈仙加入去離子水浸泡30min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、肉桂和威靈仙總重量的12倍，煎煮2.5h后倒出煎煮液，過濾；將防風(fēng)加入去離子水煎1.5h，去離子水用量為防風(fēng)重量8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為22％。

實施例17

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為25g桂枝，25g酒白芍，15g肉桂，20g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例16。

實施例18

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為30g桂枝，25g酒白芍，10g肉桂，22g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、肉桂和防風(fēng)加入去離子水浸泡25min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、肉桂和防風(fēng)總重量的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將威靈仙加入去離子水煎1.6h，去離子水用量為防風(fēng)重量8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為23％。

實施例19

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，30g酒白芍，15g肉桂，30g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法如實施例18。

實施例20

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為20g桂枝，33g酒白芍，7g肉桂，24g威靈仙，17g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、威靈仙和防風(fēng)加入去離子水浸泡32min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、威靈仙和防風(fēng)總重量的9倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將肉桂加入去離子水煎1.8h，去離子水用量為肉桂重量的10倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為24％。

實施例21

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，25g酒白芍，14g肉桂，30g威靈仙，22g防風(fēng)。其制備方法如實施例20。

實施例22

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為16g桂枝，27g酒白芍，8g肉桂，30g威靈仙，23g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝和酒白芍加入去離子水浸泡30min，去離子水的用量為桂枝和酒白芍總重量的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣、肉桂、威靈仙、防風(fēng)加入去離子水煎1.6h，去離子水用量為濾渣、肉桂、威靈仙、防風(fēng)總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為25％。

實施例23

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為24g桂枝，32g酒白芍，14g肉桂，20g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例22。

實施例24

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為26g桂枝，30g酒白芍，10g肉桂，20g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和肉桂加入去離子水浸泡28min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和肉桂總重量的12倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣、威靈仙、防風(fēng)加入去離子水煎1.5h，去離子水用量為濾渣、肉桂、威靈仙、防風(fēng)總重量的10倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為24％。

實施例25

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為16g桂枝，25g酒白芍，15g肉桂，28g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例24。

實施例26

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為25g桂枝，25g酒白芍，15g肉桂，20g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和威靈仙加入去離子水浸泡25min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和威靈仙總重量的12倍，煎煮1.8h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣、肉桂、防風(fēng)加入去離子水煎1.2h，去離子水用量為濾渣、肉桂、防風(fēng)總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為23％。

實施例27

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為30g桂枝，32g酒白芍，8g肉桂，25g威靈仙，15g防風(fēng)。其制備方法如實施例26。

實施例28

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為24g桂枝，29g酒白芍，11g肉桂，23g威靈仙，18g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍和防風(fēng)加入去離子水浸泡28min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍和防風(fēng)的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣、肉桂、威靈仙加入去離子水煎1.6h，去離子水用量為濾渣、肉桂、威靈仙總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為25％。

實施例29

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為18g桂枝，25g酒白芍，15g肉桂，28g威靈仙，24g防風(fēng)。其制備方法如實施例28。

實施例30

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為21g桂枝，32g酒白芍，8g肉桂，20g威靈仙，16g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、肉桂和威靈仙加入去離子水浸泡32min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、肉桂和威靈仙總重量的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣和防風(fēng)加入8倍量的去離子水煎1.5h，去離子水用量為濾渣和防風(fēng)總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為26％。

實施例31

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為29g桂枝，26g酒白芍，13g肉桂，25g威靈仙，22g防風(fēng)。其制備方法如實施例30。

實施例32

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為15g桂枝，25g酒白芍，10g肉桂，20g威靈仙，25g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、肉桂和防風(fēng)加入10倍量的去離子水浸泡30min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、肉桂和防風(fēng)總重量的9倍，煎煮2.2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣和威靈仙加入去離子水煎1.5h，去離子水用量為濾渣和威靈仙總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為25％。

實施例33

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為26g桂枝，32g酒白芍，14g肉桂，26g威靈仙，17g防風(fēng)。其制備方法如實施例32。

實施例34

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為23g桂枝，27g酒白芍，14g肉桂，26g威靈仙，20g防風(fēng)。其制備方法是：將桂枝、酒白芍、威靈仙和防風(fēng)加入去離子水浸泡30min，去離子水的用量為桂枝、酒白芍、威靈仙和防風(fēng)總重量的10倍，煎煮2h后倒出煎煮液，過濾；將濾渣和肉桂加入8倍量的去離子水煎1.5h，去離子水用量為濾渣和肉桂總重量的8倍，將兩次煎煮液合并，經(jīng)5層紗布過濾，而后抽濾，得到濃縮煎煮液，之后對濃縮煎煮液進(jìn)行冷凍干燥得到凍干粉，密封保存，得率為27％。

實施例35

一種治療治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其中藥原料組分為18g桂枝，33g酒白芍，9g肉桂，20g威靈仙，24g防風(fēng)。其制備方法如實施例34。

以下為發(fā)明人所做的藥效作用實驗。

實驗過程及結(jié)果

CIA造模：將一定量牛Ⅱ型膠原(collagen typeⅡ，CⅡ)溶于0.1M的冰醋酸，濃度為2mg·mL-1，在4℃下攪拌充分溶解，置4℃冰箱過夜，再與弗氏完全佐劑在冰水浴中1∶1充分混和乳化，制成CⅡ乳劑(即CⅡ濃度為1mg·mL-1)，置4℃冰箱保存?zhèn)溆?。造模時每只小鼠于尾根部皮內(nèi)注射CⅡ乳劑0.1mL，21天時在尾根部加強注射0.1ml。

隨機選取6只DBA/1小鼠作為正常對照組(Control)。將造模成功的CIA小鼠隨機分為CIA模型組(CIA)、Leflunomide組(Leflunomide)、WJHL低劑量組(WJHL-L)、WJHL中劑量組(WJHL-M)和WJHL高劑量組(WJHL-H)，每組各6只。WJHL凍干粉溶于0.5％的梭甲基纖維素鈉(CMC-Na)，在初次免疫后31d起，WJHL組給予WJHL湯劑灌胃，WJHL-L給予WJHL湯劑為10g/Kg·d(實施例6或?qū)嵤├?所得的凍干粉)，WJHL-M給予WJHL湯劑為20g/kg/d(實施例8～21中任意一實施例所得的凍干粉)，WJHL-H給予WJHL湯劑為40g/kg/d(實施例1～5、實施例22～35中的任意一實施例所得的凍干粉)，Leflunomide組給予Leflunomide(來氟米特)(6g/Kg·d)灌胃，正常組和CIA模型組大鼠分別給予生理鹽水0.2ml/10g·d灌胃，分別于給藥的第69d犧牲動物，取小鼠血漿進(jìn)行研究。將血液離心后-80℃凍存。另取小鼠右后踝關(guān)節(jié)滑膜組織、脾臟和胸腺組織，置于10％多聚甲醛中固定待測。WJHL為本發(fā)明所得的治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物。

1.WJHL對CIA小鼠狀態(tài)和體重的影響

正常組小鼠狀態(tài)良好，毛發(fā)光澤，體重增加，飲食正常動作自如，反應(yīng)靈敏。由圖1可以得到，正常對照組小鼠體重平穩(wěn)增長，與正常對照組相比，在飼養(yǎng)第14天時，模型組及其它處理組小鼠毛發(fā)枯槁，進(jìn)食量減少，體重明顯開始出現(xiàn)降低現(xiàn)象，并開始緩慢的增加狀態(tài)，在34天時，Leflunomide處理組小鼠體重在處理組小鼠中居于最高，但58天時，WJHL高劑量組小鼠體重明顯增加，逐漸超過Leflunomide處理組小鼠體重，而低劑量組在34天之后體重低于WJHL中、高劑量組及Leflunomide組，高于模型組，說明WJHL具有明顯緩解小鼠體重降低的作用。

2.WJHL對CIA小鼠主要臟器指數(shù)的影響

胸腺和脾臟是機體主要的免疫器官，胸腺和脾臟臟器指數(shù)可反映免疫器官的發(fā)育和免疫細(xì)胞的功能狀態(tài)，間接反映了機體的免疫水平。圖2(圖中的##P<0.01vs Control；*P<0.05,**P<0.01vs CIA.A:Spleen；B:Thymus)結(jié)果顯示，CIA小鼠與正常比較，脾臟和胸腺重量明顯減輕，胸腺和脾臟指數(shù)顯著下降，差別有顯著意義(P<0.01)。WJHL各劑量組與Leflunomide陽性組均能恢復(fù)CIA小鼠胸腺和脾臟重量及指數(shù)，結(jié)果有顯著意義(P<0.05，P<0.01)。

3.WJHL對CIA小鼠足腫脹厚度的影響

CIA小鼠造模后關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟組織腫脹和炎癥逐漸開始，病情隨著時間的增加而加重。由圖3可知，免疫第30天時，模型組及藥物處理組小鼠足腫脹厚度十分明顯。第31天開始相應(yīng)給藥治療，藥物處理組小鼠足腫脹情況開始緩解。各組小鼠踝足趾腫脹厚度改善情況，采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行方差分析，比較模型組與正常組及各治療組與模型組的差異。在造模第0天，各組間足趾腫脹厚度無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。免疫第30天，造模組與對照組比較具有高度統(tǒng)計學(xué)差異(###P<0.001)，小鼠足趾表現(xiàn)紅腫、關(guān)節(jié)輕微變形癥狀。免疫第34天，模型組與對照組差異高度顯著(###P<0.001)、Leflunomide組與模型組有極顯著性差異(**P<0.01)、溫WJHL-H組與模型組差異顯著(*P<0.05)。免疫第44天，模型組與對照組差異高度顯著(###P<0.001)、Leflunomid組、WJHL-M和WJHL-H劑量組與模型組比較，具有極顯著性差異(*P<0.05，**P<0.01)。免疫第62天，模型組與正常對照組比較，差異高度顯著(###P<0.001)、Leflunomide組及WJHL-H劑量組與模型組比較，具有高度顯著性差異(***P<0.001)、WJHL-M劑量與模型組比較，具有極顯著性差異(**P<0.01)、WJHL-L劑量組與模型組比較，具有顯著性差異(*P<0.05)。免疫第69天觀察末期發(fā)現(xiàn)，模型組與正常對照組差異高度顯著(###P<0.001)、WJHL各劑量組與模型組相比，具有顯著性差異(***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05)。從關(guān)節(jié)足趾腫脹度看，WJHL可以顯著改善類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)腫脹，呈劑量相關(guān)性，且WJHL高劑量組在疾病末期療效要優(yōu)于來氟米特組，說明WJHL具有顯著抑制小鼠足腫脹的作用。

3.ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)法檢測小鼠血清中炎癥因子及抗炎因子含量

由圖4結(jié)果可知，模型組血清中TNF-α、IL-1β(白細(xì)胞介素1β)、IL-6(白細(xì)胞介素6)和IL-17(白細(xì)胞介素17)含量顯著升高，OPG(骨保護(hù)素)含量顯著降低，說明TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17和OPG在CIA的發(fā)病中起一定的作用，并且TNF-α及IL-1β，IL-17可能在RA的免疫反應(yīng)和組織損害過程中有協(xié)同作用，互相促進(jìn)。Leflunomide和WJHL各劑量組可明顯降低TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17水平，升高OPG水平，且WJHL高劑量優(yōu)于Leflunomide，說明Leflunomide和WJHL組可以通過降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17的水平和提高OPG含量水平來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。其機理可能是通過降低細(xì)胞因子的水平減少關(guān)節(jié)局部滑膜炎和軟骨的破壞，并抑制滑膜細(xì)胞對蛋白酶類的分泌來減輕關(guān)節(jié)損傷及軟骨的破壞，達(dá)到治療目的。

總之，以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所作的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明專利的涵蓋范圍。