本發(fā)明涉及一種中成藥制劑制備方法，尤其涉及一種以中草藥為原料的消腫止痛中藥組合物制備方法。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)中藥制劑的制備一般采用煎煮法、回流法、滲漉法等方法進(jìn)行提取，但是有的提取方法在提取過程中溫度升高容易造成熱敏性有效成分發(fā)生變化，有的提取方法提取收率低、提取時(shí)間長(zhǎng)。由于中藥材化學(xué)成分復(fù)雜，傳統(tǒng)提取方法會(huì)破壞藥材中的有效成分。
消腫止痛酊為廣西壯族自治區(qū)花紅藥業(yè)股份有限公司的獨(dú)家產(chǎn)品，該品種收載于《中國(guó)藥典(2015年)》，產(chǎn)品包含二十一味中藥原料。
中國(guó)發(fā)明專利CN101099846A記載了消腫止痛酊的組方及其制備工藝，該制備工藝采用滲漉的工藝富集有效成分，提取時(shí)間長(zhǎng)，且提取不完全，也容易形成沉積物。酶提取技術(shù)，能夠在常溫、常壓下，將中藥成分從中藥材中有效的提取出來，并且提取的純度較高，不會(huì)破壞中藥成分的藥效，可以替代傳統(tǒng)乙醇提取的方法，但酶提取存在低濃度的酶溶液與藥材纖維接觸不充分問題，影響到其提取效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種消腫止痛中藥組合物的制備方法，縮短提取時(shí)間以及提高有效成分的提取率。
為達(dá)到以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下。
一種消腫止痛中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下制備步驟：
步驟1，按以下重量份稱取原料：木香10～50份，防風(fēng)10～50份，荊芥10～50份，細(xì)辛10～50份，五加皮10～50份桂枝10～50份，牛膝10～50份，川芎10～50份，徐長(zhǎng)卿10～50份，白芷20～50份，莪術(shù)10～50份，紅杜仲20～50份，大羅傘30～60份，小羅傘20～50份，兩面針30～60份，黃藤25～60份，梔子30～60份，三棱20～50份，沉香5～60份，樟腦16～50份，薄荷腦16～50份；
步驟2，取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2～3h，得粒徑為100～200微米的藥粉1；
步驟3，取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2～0.5h，得粒徑為100～200微米的藥粉2，與步驟2所得藥粉1混合，真空冷凍干燥，得干燥粉；
步驟4，取纖維素酶液和步驟3所得干燥粉混合，真空負(fù)壓浸漬0.5～1h小時(shí)，離心，收集上清液；
步驟5，利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得上清液進(jìn)行微濾，收集濾液；
步驟6，取樟腦、薄荷腦，加體積百分比為40～90％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻，得消腫止痛中藥組合物。
優(yōu)選的是，步驟1稱取如下重量份數(shù)的原料：木香47份，防風(fēng)47份，荊芥47份，細(xì)辛47份，五加皮47份，桂枝47份，牛膝47份，川芎47份，徐長(zhǎng)卿47份，白芷50份，莪術(shù)47份，紅杜仲50份，大羅傘50份，小羅傘40份，兩面針50份，黃藤50份，梔子50份，三棱30份，沉香50份，樟腦40份，薄荷腦40份。
優(yōu)選的是，所述步驟4真空壓力浸漬，真空壓力0.3～0.6MPa。
優(yōu)選的是，所述步驟4離心，轉(zhuǎn)速為1000～3000rpm，時(shí)間30min。
優(yōu)選的是，所述步驟5微濾，壓力0.3～0.5MPa，流速1.5～2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑50～100nm。
優(yōu)選的是，所述步驟4纖維素酶液，由纖維素酶粉末加入pH值為5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液，調(diào)pH至4.8～6.0，溶解定容而得。
優(yōu)選的是，所述步驟3真空冷凍干燥，溫度為－20～－50℃，時(shí)間2～5h，真空壓力為10～30Pa。
本發(fā)明還提供一種消腫止痛中藥制劑，該制劑由本發(fā)明所述制備方法所得消腫止痛中藥組合物單獨(dú)制成或由消腫止痛中藥組合物和藥學(xué)上可接受的載體組成，以常規(guī)制劑手段制成以下外用制劑：凝膠劑、涂劑、氣霧劑、噴霧劑、膏劑。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和效果：
1、絕大多數(shù)中藥材的細(xì)胞壁由纖維素構(gòu)成，細(xì)胞壁內(nèi)含有多種具有治療效果的有效成分，本發(fā)明應(yīng)用纖維素酶破壞細(xì)胞壁的纖維素，將有效成分從中藥材細(xì)胞壁內(nèi)提取出來，制成各種中藥制劑，提取的純度較高，不會(huì)破壞中藥成分的藥效，在相同的用藥量下比采用常規(guī)乙醇滲漉提取制劑急性扭挫傷患者愈顯率提高10％以上；
2、采用無(wú)機(jī)陶瓷膜分離技術(shù)是基于篩分原理，可分離溶液中0.05～10μm的懸浮顆粒和一些大分子雜質(zhì)，富集有效成分，去除無(wú)效雜質(zhì)，固形物去除率在20.4％～21.7％；
3、真空冷凍干燥一般是用在制劑的最后一個(gè)工序，但本發(fā)明在纖維素酶液與藥粉混合浸漬前，使用真空冷凍干燥對(duì)粉碎后的藥材進(jìn)行干燥，使藥材纖維素初步分離并形成大量孔隙，結(jié)合真空負(fù)壓浸漬技術(shù)，可以使低濃度的酶溶液充分浸漬到藥材纖維孔隙內(nèi)部。
4、耐磨藥材和易磨藥材分開研磨，提高研磨效率，節(jié)約研磨能耗。
5、對(duì)照組所用滲漉法提取時(shí)間為72小時(shí)，而本發(fā)明提取時(shí)間在10小時(shí)以內(nèi)，提取時(shí)間縮短，且在相同的用藥量下比采用常規(guī)乙醇滲漉提取制劑急性扭挫傷患者愈顯率提高10％以上。
具體實(shí)施方式
下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明所說的消腫止痛藥劑制備方法和其應(yīng)用作進(jìn)一步的說明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
實(shí)施例1：
1.稱取以下重量份的原料：木香22g，防風(fēng)50g，荊芥30g，細(xì)辛15g，五加皮45g，桂枝18g，牛膝70g，川芎50g，徐長(zhǎng)卿37g，白芷50g，莪術(shù)36g，紅杜仲48g，大羅傘30g，小羅傘20g，兩面針50g，黃藤35g，梔子30g，三棱50g，沉香9g，樟腦30g，薄荷腦50g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨3h，得粒徑小于200微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.5h，得粒徑小于200微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－20℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉2h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬1h，壓力為0.6MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH4.8，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.5MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為100nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加200mL的90％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成外用涂劑。
以上提取時(shí)間總共為6.5小時(shí)。
實(shí)施例2：
1.稱取以下重量份的原料：木香10g，防風(fēng)10g，荊芥10g，細(xì)辛10g，五加皮10g，桂枝10g，牛膝10g，川芎10g，徐長(zhǎng)卿10g，白芷20g，莪術(shù)10g，紅杜仲20g，大羅傘30g，小羅傘20g，兩面針30g，黃藤25g，梔子30g，三棱20g，沉香5g，樟腦16g，薄荷腦16g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，粒徑小于得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－10℃、壓力10Pa條件下真空冷凍干燥藥粉2h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.5h，壓力為0.3MPa，在轉(zhuǎn)速1000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入pH值為5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH至5.0，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速1.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為75nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加50mL的40％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成外用膏劑。
以上提取時(shí)間總共為4.7小時(shí)。
實(shí)施例3：
1.稱取以下重量份的原料：木香50g，防風(fēng)50g，荊芥50g，細(xì)辛50g，五加皮50g，桂枝50g，牛膝50g，川芎50g，徐長(zhǎng)卿50g，白芷50g，莪術(shù)50g，紅杜仲50g，大羅傘60g，小羅傘50g，兩面針60g，黃藤60g，梔子60g，三棱50g，沉香60g，樟腦50g，薄荷腦50g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2.5h，粒徑小于得粒徑小于150微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.3h，得粒徑小于150微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力20Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.8h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速2000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.4MPa，流速2.0m/s，陶瓷膜過濾孔徑為60nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加100mL的50％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成凝膠劑。
以上提取時(shí)間總共為5.4小時(shí)。
實(shí)施例4：
1.稱取以下重量份的原料：木香50g，防風(fēng)40g，荊芥50g，細(xì)辛10g，五加皮50g，桂枝10g，牛膝50g，川芎50g，徐長(zhǎng)卿50g，白芷45g，莪術(shù)20g，紅杜仲20g，大羅傘30g，小羅傘35g，兩面針60g，黃藤25g，梔子50g，三棱50g，沉香55g，樟腦26g，薄荷腦26g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨3.0h，得粒徑小于180微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.5h，得粒徑小于180微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力20Pa條件下真空冷凍干燥藥粉2.0h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.8h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH6.0，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.4MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加150mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成噴霧劑。
以上提取時(shí)間總共為6.3小時(shí)。
實(shí)施例5
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.6h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成外用氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為4.6小時(shí)。
對(duì)照組1：常規(guī)滲漉法提取
1.木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g。
2.用53％乙醇做溶劑，浸漬28小時(shí)后，緩緩滲漉，收集滲漉液；樟腦40g、薄荷腦40g混合完全共熔，與上述滲漉液混合均勻制成活性成分混合物，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為72小時(shí)以上。
對(duì)照組2：去掉真空冷凍干燥步驟
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香根莖粗壯耐磨藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子易磨藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.6h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為2.8小時(shí)。
對(duì)照組3：真空負(fù)壓浸漬改為常壓浸漬
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香根莖粗壯耐磨藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子易磨藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
4.取與實(shí)施例5相同用量的纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，常壓浸漬0.6h，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為4.6小時(shí)。
對(duì)照組4：酶提取改為乙醇溶液常規(guī)萃取
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
4.取75％濃度乙醇和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.6h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液。
5.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
6.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為4.6小時(shí)。
對(duì)照組5：所有藥材同時(shí)球磨處理
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉，在溫度－15℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
3.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.6h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
4.利用陶瓷膜對(duì)步驟4所得的上清液進(jìn)行微濾，收集濾液，所述微濾的工藝參數(shù)為：壓力0.3MPa，流速2.5m/s，陶瓷膜過濾孔徑為50nm。
5.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟5所得濾液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為4.4小時(shí)。
對(duì)照組6：去掉陶瓷膜過濾步驟
1.稱取以下重量份的原料：木香47g，防風(fēng)47g，荊芥47g，細(xì)辛47g，五加皮47g，桂枝47g，牛膝47g，川芎47g，徐長(zhǎng)卿47g，白芷50g，莪術(shù)47g，紅杜仲50g，大羅傘50g，小羅傘40g，兩面針50g，黃藤50g，梔子50g，三棱30g，沉香50g,樟腦40g，薄荷腦40g。
2.取木香、防風(fēng)、川芎、三棱、沉香等5味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨2h，得粒徑小于100微米的藥粉。
3.取荊芥、細(xì)辛、五加皮、桂枝、牛膝、徐長(zhǎng)卿、白芷、莪術(shù)、大羅傘、小羅傘、紅杜仲、兩面針、黃藤、梔子等14味藥材，粗碎后，采用微米球磨機(jī)研磨0.2h，得粒徑小于100微米的藥粉，與步驟2所得藥粉混合，在溫度－15℃、壓力30Pa條件下真空冷凍干燥藥粉1.8h，備用。
4.取纖維素酶液和步驟3所得藥粉混合，真空浸漬0.6h，壓力為0.5MPa，在轉(zhuǎn)速3000rpm的條件下離心30min，收集上清液，其中，纖維素酶液由纖維素酶粉末加入于pH值5.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，調(diào)pH5.5，溶解定容而得。
5.取樟腦、薄荷腦，加100mL的75％乙醇溶解，與步驟4所得上清液混勻制得活性成分，活性成分以常規(guī)制劑手段制成氣霧劑。
以上提取時(shí)間總共為4.6小時(shí)。
實(shí)驗(yàn)例1：
通過折光計(jì)法可以測(cè)量陶瓷膜濾過前后的提取藥液中可溶性固形物含量的變化情況。其原理是在20℃用折光計(jì)測(cè)量待測(cè)樣液的折光率，并用折光率與可溶性固形物含量的換算表查得或從折光計(jì)上直接讀出可溶性固形物含量。
具體操作方法如下：
1.測(cè)定前校正折光計(jì)。
2.分開折光計(jì)兩面棱鏡，用脫脂棉蘸乙醇擦凈。
3.用末端熔圓之玻璃棒蘸取陶瓷膜處理前后之樣品2～3滴，滴于折光計(jì)棱鏡面中央。
4.迅速閉合棱鏡，靜置約1min，使樣品均勻無(wú)氣泡，并充滿視野。
5.對(duì)準(zhǔn)光源，通過目鏡觀察接物鏡。調(diào)節(jié)指示規(guī)，使視野分成明暗兩部分，再旋轉(zhuǎn)微調(diào)螺旋，使明暗界限清晰，并使其分界線恰在接物鏡的十字交叉點(diǎn)上。讀取目鏡視野中的百分?jǐn)?shù)或折光率，并記錄棱鏡溫度。
6.目鏡讀數(shù)標(biāo)尺為折光率，可按附錄換算為可溶性固形物百分含量，如表1所示。
表1可溶性固形物去除測(cè)試(％)
由表1可知，與對(duì)照組6相比，實(shí)施例所得產(chǎn)品的固形物去除率為20.4％～21.7％，可見采用無(wú)機(jī)陶瓷膜有效分離了溶液中的懸浮顆粒和大分子雜質(zhì)，富集有效成分，提取提取物的純度。
實(shí)驗(yàn)例2(加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn))
取對(duì)照組1、實(shí)施例1－5制備所得藥劑，裝入有蓋刻度試管中和有蓋離心管中，于溫度為38℃±2℃，相對(duì)濕度為55％±5％的條件下放置6個(gè)月，分別于第0、1、2、3、6個(gè)月取樣，以4000r/min轉(zhuǎn)速離心15min混勻后，靜置3h，觀測(cè)沉降體積百分比。結(jié)果見表2。
表2加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)對(duì)比結(jié)果
由表2可知，本發(fā)明藥劑于溫度為38℃±2℃，相對(duì)濕度為55％±5％的條件下放置6個(gè)月，沉降體積百分比仍能維持在5％以下，分層現(xiàn)象不明顯，說明其穩(wěn)定性佳，而對(duì)照組1和對(duì)照組6與實(shí)施例相比，其工藝中未采用無(wú)機(jī)陶瓷膜過濾，所以得到的產(chǎn)品質(zhì)量有顯著差異，其沉降體積百分比達(dá)15％以上，說明其穩(wěn)定性較本發(fā)明差。
實(shí)驗(yàn)例3：(藥效研究)
實(shí)驗(yàn)組：對(duì)照組1－5及實(shí)施例1～5所得產(chǎn)品。
選取300例急性扭挫傷患者，年齡均在30～50歲之間。
將上述300例患者隨機(jī)分成10組，每組30例分別按相同劑量使用對(duì)照組和實(shí)施例組所得制劑，連續(xù)5天，觀察治療效果。
療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：
痊愈：用藥1天內(nèi)疼痛減輕，2天內(nèi)腫脹開始減輕，3天內(nèi)腫痛消失，關(guān)節(jié)功能恢復(fù)正常；
顯效：用藥1天內(nèi)疼痛減輕，2天內(nèi)腫脹開始減輕，5天內(nèi)腫痛消失，關(guān)節(jié)功能恢復(fù)正常；
有效：用藥1天內(nèi)疼痛減輕，2天內(nèi)腫脹開始減輕，5天內(nèi)腫痛顯著減輕，關(guān)節(jié)功能顯著改善；
無(wú)效：達(dá)不到上述標(biāo)準(zhǔn)者。
統(tǒng)計(jì)療效見表3。
表3統(tǒng)計(jì)療效實(shí)驗(yàn)
由表3可以看出，實(shí)施例1～5療效均優(yōu)好于對(duì)照組1-5，即涂用本發(fā)明藥劑治療急性扭挫傷時(shí)療效優(yōu)于對(duì)照組，在使用相同藥量的條件下，本發(fā)明方法制備所得中藥組合物，其作用于急性扭挫的有效成分含量高于對(duì)照組，在提取及制備過程中，有效成分提取完全，且損失極少。
總結(jié)：
1、本發(fā)明與對(duì)照組1相比，本發(fā)明制備過程總時(shí)間為4.6至6.5小時(shí)，對(duì)照組1用時(shí)為72小時(shí)以上，雖然本發(fā)明提取時(shí)間比對(duì)照組1縮短了10倍以上，但臨床療效仍然優(yōu)于對(duì)照組。
2、本發(fā)明與對(duì)照組2相比療效更佳。本發(fā)明使用的真空冷凍干燥技術(shù)，使藥材纖維素初步分離并形成大量孔隙，酶提取過程中酶溶液能順利穿透到纖維素內(nèi)部，提高有效成分的溶出率，使相同治療量的制劑能發(fā)揮更好的治療效果。
3、本發(fā)明與對(duì)照組3相比，采用酶提取技術(shù)使中藥材中的有效成分提取更充分，并且提取物純度較高，提高了藥材的利用率，降低成本。
4、本發(fā)明與對(duì)照組4相比，增加了真空負(fù)壓浸漬技術(shù)，可以使低濃度的酶溶液更充分浸漬到藥材纖維孔隙內(nèi)部，利于提取的充分、完全性。
5、本發(fā)明與對(duì)照組5相比，把耐磨藥材和易磨藥材分開研磨，在達(dá)到相同研磨效果的同時(shí)，節(jié)約了球磨能耗，降低加工成本。
雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、具體實(shí)施方式及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。