本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法；還涉及一種上述制備方法所制得的復(fù)方制劑。
背景技術(shù)：
大菱鲆，又稱多寶魚，屬于鰈形目鲆科，英文名Turbot，俗稱歐洲比目魚，身體扁平近似圓型，雙眼位于左側(cè)，有眼側(cè)呈青褐色，具少量皮刺；無眼側(cè)光滑白色，背鰭與臀無硬體且較長。大菱鲆生長迅速，肉味鮮美，具有較高的經(jīng)濟價值。20世紀90年代大菱鲆被引入我國，現(xiàn)今已經(jīng)成為我國北方沿海工廠化養(yǎng)殖的主導(dǎo)品種之一。大菱鲆屬于北歐冷水魚類，對溫度等海水指標要求較嚴格，大菱鲆最高致死溫度為28～30℃，最低致死溫度為1～2℃，最適生長溫度為14～17℃，其對溫度的耐受力最高為40‰，最低為12‰。
弧菌病是由弧菌屬細菌引起的一類細菌性疾病?；【鷮?Vibrio)廣泛分布于河口、海灣、近岸海域的海水和海洋動物體內(nèi)?；【】赡芪：Ω鼾g大菱鲆，不過，主要危害仔魚和稚魚，一旦幼魚發(fā)病，死亡接踵而至，死亡率可能高達50％以上，水溫10℃～16℃時更易發(fā)病。其主要發(fā)病癥狀為：大菱鲆反應(yīng)變慢，患病魚體明顯發(fā)黑，眼球突出或混濁，角膜下方出現(xiàn)白圈，體表潰爛，患病魚鰭糜爛，鰭基出血，腹部膨脹，解剖檢查，腸道有炎癥，附黃色或黃紅色黏液，內(nèi)臟出血。目前，大菱鲆弧菌病的主要防治手段還是以抗生素類藥物為主，但大量抗生素用于病害防治，會導(dǎo)致細菌耐藥性增強及大菱鲆體內(nèi)藥物殘留等問題，嚴重制約著大菱鲆養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的之一是提供一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，其原料組分均為綠色純天然原料，能有效防治大菱鲆弧菌病。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉22-27份、豆秸30-35份、蒼耳子12-18份、蛇床子11-16份、南瓜子11-16份、山楂葉15-20份、敗醬草9-15份、桑白皮7-10份、車前子8-11份、澤蘭4-6份、紫云英5-8份、葡萄籽3-5份、金錢草15-20份、青蒿8-13份、夏枯草8-13份、梧桐子1-2份、蘆薈5-7份、大青葉9-14份、月季花10-15份、紫蘇葉6-9份。
本發(fā)明的各原料組分天然無毒，不會給池塘帶來二次污染，而且以上述比例、按本發(fā)明的制備方法所制得的復(fù)方制劑對大菱鲆弧菌病的病原菌弧菌屬細菌具有很好地抑制作用，能很好地治療和預(yù)防大菱鲆的弧菌病，可以代替抗生素類藥物，而且不會產(chǎn)生藥物殘留和耐藥性問題，有利于大菱鲆的健康生長和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。
優(yōu)選地，所述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉22份、豆秸35份、蒼耳子14份、蛇床子15份、南瓜子12份、山楂葉20份、敗醬草13份、桑白皮7份、車前子9份、澤蘭4份、紫云英6份、葡萄籽3份、金錢草16份、青蒿10份、夏枯草9份、梧桐子1份、蘆薈7份、大青葉9份、月季花10份、紫蘇葉9份。
優(yōu)選地，所述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉24份、豆秸34份、蒼耳子12份、蛇床子14份、南瓜子11份、山楂葉19份、敗醬草15份、桑白皮8份、車前子10份、澤蘭6份、紫云英5份、葡萄籽4份、金錢草15份、青蒿13份、夏枯草8份、梧桐子1份、蘆薈5份、大青葉11份、月季花11份、紫蘇葉9份。
優(yōu)選地，所述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉25份、豆秸33份、蒼耳子16份、蛇床子11份、南瓜子15份、山楂葉17份、敗醬草12份、桑白皮9份、車前子9份、澤蘭5份、紫云英8份、葡萄籽5份、金錢草20份、青蒿12份、夏枯草12份、梧桐子2份、蘆薈6份、大青葉10份、月季花14份、紫蘇葉6份。
優(yōu)選地，所述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉26份、豆秸32份、蒼耳子15份、蛇床子16份、南瓜子14份、山楂葉16份、敗醬草9份、桑白皮10份、車前子8份、澤蘭5份、紫云英6份、葡萄籽4份、金錢草18份、青蒿11份、夏枯草13份、梧桐子1份、蘆薈5份、大青葉12份、月季花15份、紫蘇葉7份。
優(yōu)選地，所述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉27份、豆秸30份、蒼耳子18份、蛇床子12份、南瓜子16份、山楂葉15份、敗醬草10份、桑白皮8份、車前子11份、澤蘭6份、紫云英7份、葡萄籽3份、金錢草17份、青蒿8份、夏枯草11份、梧桐子2份、蘆薈6份、大青葉14份、月季花12份、紫蘇葉8份。
用法用量：發(fā)病時或在弧菌病的流行季節(jié)，根據(jù)病害流行情況，每畝池塘中投放100-300ml本發(fā)明的復(fù)方制劑。治療大菱鲆弧菌病時首次量加倍，連續(xù)使用直至病愈；預(yù)防時連續(xù)使用3-5天，可有效預(yù)防弧菌病的發(fā)生。
本發(fā)明還公開了一種上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法，其包括以下步驟：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.6-0.8倍的食用醋，浸泡20-30分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸干燥至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的15-20倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮30-40分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以100-120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12-15h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
制備方法中，用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸的作用是洗去荷葉和豆秸上的食用醋，烘干后粉碎放馬弗爐中不同溫度下反復(fù)灼燒的作用是可以改變荷葉和豆秸的分子結(jié)構(gòu)，灼燒后的灰分具有很好的吸附效果，可以有效吸附池塘中的病原菌弧菌以及殘餌、糞便等有機物，改善池塘水質(zhì)環(huán)境，降低COD含量，降低病害的發(fā)生幾率，尤其是降低弧菌病病原菌弧菌屬細菌的發(fā)生，有利于大菱鲆的健康生長。步驟(4)中將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎的作用是有利于增大蒼耳子和蛇床子的接觸面積，且有利于后續(xù)步驟中充分浸泡出蒼耳子和蛇床子中的有效成分，提高蒼耳子和蛇床子的利用率。將南瓜子曬干、粉碎的作用是可更好地發(fā)揮南瓜子的作用。將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻的作用是增大其接觸面積，有利于其在后續(xù)步驟中更好地反應(yīng)，且有利于充分浸出和煎出其有效成分，提高本發(fā)明的各組分的利用率；加入蒸餾水后常溫浸泡24小時的作用是有利于上述各組分中的有效成分被充分浸出和煎出；文火煎煮30-40分鐘的作用是改善藥物的刺激作用，使其更溫和地作用于大菱鲆。將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液超聲波處理20分鐘的作用是充分混勻，放振蕩器中以100-120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12-15h的作用是進一步混勻，并使其充分反應(yīng)，可更好地發(fā)揮其對大菱鲆弧菌病病原菌弧菌屬細菌的殺菌抑菌作用。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
(1)本發(fā)明的各原料組分天然無毒，不會給池塘帶來二次污染，而且以上述比例、按本發(fā)明的制備方法所制得的復(fù)方制劑對大菱鲆弧菌病的病原菌弧菌屬細菌具有很好地抑制作用，能很好地治療大菱鲆的弧菌病，可以代替抗生素類藥物，而且不會產(chǎn)生藥物殘留和耐藥性問題，有利于大菱鲆的健康生長和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。
(2)制備方法中，用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸的作用是洗去荷葉和豆秸上的食用醋，烘干后粉碎放馬弗爐中不同溫度下反復(fù)灼燒的作用是可以改變荷葉和豆秸的分子結(jié)構(gòu)，灼燒后的灰分具有很好的吸附效果，可以有效吸附池塘中的病原菌弧菌以及殘餌、糞便等有機物，改善池塘水質(zhì)環(huán)境，降低COD含量，降低病害的發(fā)生幾率，尤其是降低弧菌病病原菌弧菌屬細菌的發(fā)生，有利于大菱鲆的健康生長。步驟(4)中將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎的作用是有利于增大蒼耳子和蛇床子的接觸面積，且有利于后續(xù)步驟中充分浸泡出蒼耳子和蛇床子中的有效成分，提高蒼耳子和蛇床子的利用率。將南瓜子曬干、粉碎的作用是可更好地發(fā)揮南瓜子的作用。將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻的作用是增大其接觸面積，有利于其在后續(xù)步驟中更好地反應(yīng)，且有利于充分浸出和煎出其有效成分，提高本發(fā)明的各組分的利用率；加入蒸餾水后常溫浸泡24小時的作用是有利于上述各組分中的有效成分被充分浸出和煎出；文火煎煮30-40分鐘的作用是改善藥物的刺激作用，使其更溫和地作用于大菱鲆。將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液超聲波處理20分鐘的作用是充分混勻，放振蕩器中以100-120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12-15h的作用是進一步混勻，并使其充分反應(yīng)，可更好地發(fā)揮其對大菱鲆弧菌病病原菌弧菌屬細菌的殺菌抑菌作用。
具體實施方式
以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
實施例1
一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉22份、豆秸35份、蒼耳子14份、蛇床子15份、南瓜子12份、山楂葉20份、敗醬草13份、桑白皮7份、車前子9份、澤蘭4份、紫云英6份、葡萄籽3份、金錢草16份、青蒿10份、夏枯草9份、梧桐子1份、蘆薈7份、大青葉9份、月季花10份、紫蘇葉9份。
上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法如下：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.6倍的食用醋，浸泡30分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸放入烘干機中60℃干燥至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的15倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮30分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
實施例2
一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉24份、豆秸34份、蒼耳子12份、蛇床子14份、南瓜子11份、山楂葉19份、敗醬草15份、桑白皮8份、車前子10份、澤蘭6份、紫云英5份、葡萄籽4份、金錢草15份、青蒿13份、夏枯草8份、梧桐子1份、蘆薈5份、大青葉11份、月季花11份、紫蘇葉9份。
上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法如下：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.8倍的食用醋，浸泡20分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸放入烘干機中60℃干燥至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的16倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮40分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以100r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
實施例3
一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉25份、豆秸33份、蒼耳子16份、蛇床子11份、南瓜子15份、山楂葉17份、敗醬草12份、桑白皮9份、車前子9份、澤蘭5份、紫云英8份、葡萄籽5份、金錢草20份、青蒿12份、夏枯草12份、梧桐子2份、蘆薈6份、大青葉10份、月季花14份、紫蘇葉6份。
上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法如下：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.7倍的食用醋，浸泡20分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸放入冷凍干燥劑中干燥48小時至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的18倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮30分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩14h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
實施例4
一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉26份、豆秸32份、蒼耳子15份、蛇床子16份、南瓜子14份、山楂葉16份、敗醬草9份、桑白皮10份、車前子8份、澤蘭5份、紫云英6份、葡萄籽4份、金錢草18份、青蒿11份、夏枯草13份、梧桐子1份、蘆薈5份、大青葉12份、月季花15份、紫蘇葉7份。
上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法如下：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.6倍的食用醋，浸泡30分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸放入冷凍干燥劑中干燥至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的20倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮40分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以100r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩15h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
實施例5
一種防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑，由下列質(zhì)量份數(shù)的各組分制備而成：荷葉27份、豆秸30份、蒼耳子18份、蛇床子12份、南瓜子16份、山楂葉15份、敗醬草10份、桑白皮8份、車前子11份、澤蘭6份、紫云英7份、葡萄籽3份、金錢草17份、青蒿8份、夏枯草11份、梧桐子2份、蘆薈6份、大青葉14份、月季花12份、紫蘇葉8份。
上述防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑的制備方法如下：
(1)按照配比稱取本發(fā)明的各原料組分，備用；
(2)向荷葉和豆秸中加入重量為荷葉和豆秸總重量的0.7倍的食用醋，浸泡30分鐘，過濾去除濾液，然后用純化水沖洗浸泡后的荷葉和豆秸，將沖洗好的荷葉和豆秸放入冷凍干燥劑中干燥至含水率為15％以下；
(3)將步驟(2)所得的干燥混合物粉碎放入坩堝中，然后放入馬弗爐內(nèi)，于450℃-550℃灼燒2-3h，冷卻至室溫，再于600℃-650℃灼燒50-60分鐘；
(4)將蒼耳子和蛇床子混合均勻并研磨粉碎，加入重量為蒼耳子和蛇床子總重的15倍的蒸餾水，70-80℃水浴條件下浸泡60-70分鐘，過濾取浸泡液；
(5)將南瓜子曬干，粉碎；
(6)將山楂葉、敗醬草、桑白皮、車前子、澤蘭、紫云英、葡萄籽、金錢草、青蒿、夏枯草、梧桐子、蘆薈、大青葉、月季花、紫蘇葉研磨粉碎并混合均勻，得混合組分，向混合組分加入重量為混合組分總重量的16倍的蒸餾水，常溫浸泡24小時，然后加熱至沸騰后再文火煎煮30分鐘，過濾取煎煮液；
(7)將步驟(3)所得的灼燒產(chǎn)物、步驟(4)所得的浸泡液、步驟(5)所得的南瓜子以及步驟(6)所得的煎煮液混合均勻，超聲波處理20分鐘，然后放振蕩器中以120r/min的轉(zhuǎn)速常溫震蕩12h；
(8)將步驟(7)所得的混合物于壓力為-0.06～-0.08Mpa、溫度為40～45℃條件下濃縮至相對密度為45℃時1.14～1.16，裝瓶。
治療效果試驗
實驗于煙臺某大菱鲆養(yǎng)殖廠進行，在大菱鲆弧菌病流行時段，選取10個大小和形狀相同或相似、患病情況相似的池塘，兩兩一組，分為5組，分別為試驗A組、試驗B組、試驗C組、試驗D組、試驗E組。每個處理組處理如下：
實驗A組的處理如下：每畝池塘中投放200ml本發(fā)明實施例1的復(fù)方制劑，首次量加倍，每24小時換水一次，換水后按相同比例加入本發(fā)明實施例1的復(fù)方制劑，連續(xù)使用直至病魚痊愈。
實驗B組的處理如下：每畝池塘中投放200ml本發(fā)明實施例2的復(fù)方制劑，首次量加倍，每24小時換水一次，換水后按相同比例加入本發(fā)明實施例2的復(fù)方制劑，連續(xù)使用直至病魚痊愈。
實驗C組的處理如下：每畝池塘中投放200ml本發(fā)明實施例3的復(fù)方制劑，首次量加倍，每24小時換水一次，換水后按相同比例加入本發(fā)明實施例3的復(fù)方制劑，連續(xù)使用直至病魚痊愈。
實驗D組的處理如下：每畝池塘中投放200ml本發(fā)明實施例4的復(fù)方制劑，首次量加倍，每24小時換水一次，換水后按相同比例加入本發(fā)明實施例4的復(fù)方制劑，連續(xù)使用直至病魚痊愈。
實驗E組的處理如下：每畝池塘中投放200ml本發(fā)明實施例5的復(fù)方制劑，首次量加倍，每24小時換水一次，換水后按相同比例加入本發(fā)明實施例5的復(fù)方制劑，連續(xù)使用直至病魚痊愈。
施藥前后分別取樣調(diào)查每個池塘的大菱鲆的治愈率和存活率，并記錄結(jié)果，試驗結(jié)果見表1-表2。治愈率的測定方法為：每個池塘每次取30-35條大菱鲆幼魚作為樣品，統(tǒng)計同一組兩個平行池塘的所取樣品中治愈的數(shù)量，計算治愈率并取其平均值。其中治愈的標準為：大菱鲆反應(yīng)靈敏，體色恢復(fù)正常，體表潰爛現(xiàn)象得到控制并開始好轉(zhuǎn)，魚鰭糜爛現(xiàn)象得到控制并開始好轉(zhuǎn)，鰭基出血現(xiàn)象消失。存活率的測定方法為：采用比容法計算池塘中大菱鲆仔魚的生物量，存活率等于檢測時的生物量與實驗開始前的生物量的比值，計算平均值。
表1
表2
實驗結(jié)果表明：本發(fā)明的防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑對大菱鲆弧菌病有很好的治療效果。
抑菌試驗檢查
實驗于煙臺某大菱鲆養(yǎng)殖廠進行，在大菱鲆弧菌病流行時段，選取6個大小和形狀相同或相似的池塘，分成兩組，實驗池塘和對照池塘分別設(shè)三個。向其中三個池塘中投放本發(fā)明實施例3所制得的復(fù)方制劑，每畝池塘中投放200ml；另外三個池塘不投放本發(fā)明的復(fù)方制劑，其他操作和日常管理相同。
試驗開始時，取水樣，對實驗池塘進行弧菌數(shù)量的檢測。檢測方法：采用TCBS培養(yǎng)基，取水樣然后進行平板涂布計數(shù)的方法。投放本發(fā)明實施例3的復(fù)方制劑24小時后，分別再對試驗組池塘和對照組的弧菌數(shù)量進行檢測，實驗結(jié)果見表3：
表3 本發(fā)明的復(fù)方制劑對池塘中弧菌數(shù)量的影響結(jié)果
由表3可知，本發(fā)明所制得的防治大菱鲆弧菌病的復(fù)方制劑可有效降低池塘中弧菌的數(shù)量，對大菱鲆養(yǎng)殖池塘中病原菌弧菌屬細菌的抑制率高達82.26％以上，可以代替抗生素類藥物，有利于大菱鲆的健康生長和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。
在弧菌病的流行季節(jié)，根據(jù)病害流行情況，每畝池塘中投放100-300ml本發(fā)明的復(fù)方制劑，連續(xù)使用3-5天，可有效預(yù)防弧菌病的發(fā)生。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出：對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進，這些改進應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。