本發(fā)明屬于醫(yī)用材料制備領(lǐng)域，具體涉及一種珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法。
背景技術(shù)：
制備適宜的具備生物活性的體內(nèi)可替代材料來幫助修復(fù)人體缺損組織，一直是組織工程研究的熱點。珍珠層粉(NP)是腹足類軟體動物貝殼最內(nèi)層磨成的粉末，主要成分為95％的文石型碳酸鈣及5％的蛋白質(zhì)、糖蛋白、多糖等有機質(zhì)。NP在食品科技及醫(yī)藥領(lǐng)域廣受研究人員的青睞，用NP復(fù)合多種藥物的研究已取得較為理想的成果，近年來，NP的成骨性能也逐漸受到組織工程研究者的重視。NP具有良好的生物相容性、骨傳導(dǎo)作用及潛在的骨誘導(dǎo)性，是一種新型可降解的骨修復(fù)生物替代材料，但其降解能力有限，有研究表明NP單獨植人體內(nèi)在9個月后方可觀察到向心性降解現(xiàn)象。
殼聚糖(CS)廣泛存在于自然界中，由甲殼素經(jīng)濃堿處理脫去N-乙酰基得到。CS具有良好的生物相容性，能促進傷口的愈合，但由于其自身可形成的多孔結(jié)構(gòu)使其力學(xué)性能較差。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法，力學(xué)性能好。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法，包含以下步驟：
（1）取2.0g 殼聚糖，加入100 mL濃度為0.1 mol/L的醋酸溶液中，攪拌12h后，得到殼聚糖溶液，靜置24-36h；
（2）稱14.0g β-甘油磷酸鈉，加蒸餾水定容至25mL，混合均勻，得到β-甘油磷酸鈉溶液；
（3）將步驟（1）和步驟（2）的溶液按照體積比7:1混合，冰浴下攪拌2h，用36％乙酸和4％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=6.5-7.5；
（4）加入珍珠層粉，珍珠層粉與殼聚糖的質(zhì)量相同，攪拌后，在200W的功率下超聲2h，冰浴下攪拌48h，注入模具在-20℃下靜置12h，然后置于真空冷凍干燥機中在-20℃下冷凍干燥48h，滅菌，得到珍珠層粉-殼聚糖多孔支架，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
優(yōu)選地，步驟（1）中殼聚糖溶液靜置30h。
優(yōu)選地，步驟（1）中攪拌的速度為500rpm。
優(yōu)選地，步驟（3）中調(diào)節(jié)溶液的pH值為7.0。
優(yōu)選地，步驟（4）中的滅菌是以20 kGy鈷-60輻照進行滅菌的。
本發(fā)明的優(yōu)點：
本發(fā)明操作簡單，生產(chǎn)成本低，制備得到的復(fù)合支架具有多孔結(jié)構(gòu)，孔徑大小均一，生物安全性良好，力學(xué)性能好，可以作為組織缺損修復(fù)過程中非承重骨部位的組織工程支架的應(yīng)用。
具體實施方式
實施例1
珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法，包含以下步驟：
（1）取2.0g 殼聚糖，加入100 mL濃度為0.1 mol/L的醋酸溶液中，攪拌12h后，得到殼聚糖溶液，靜置24h；
（2）稱14.0g β-甘油磷酸鈉，加蒸餾水定容至25mL，混合均勻，得到β-甘油磷酸鈉溶液；
（3）將步驟（1）和步驟（2）的溶液按照體積比7:1混合，冰浴下攪拌2h，用36％乙酸和4％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=6.5；
（4）加入珍珠層粉，珍珠層粉與殼聚糖的質(zhì)量相同，攪拌后，在200W的功率下超聲2h，冰浴下攪拌48h，注入模具在-20℃下靜置12h，然后置于真空冷凍干燥機中在-20℃下冷凍干燥48h，滅菌，得到珍珠層粉-殼聚糖多孔支架，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
實施例2
珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法，包含以下步驟：
（1）取2.0g 殼聚糖，加入100 mL濃度為0.1 mol/L的醋酸溶液中，攪拌12h后，其中，攪拌的速度為500rpm，得到殼聚糖溶液，靜置36h；
（2）稱14.0g β-甘油磷酸鈉，加蒸餾水定容至25mL，混合均勻，得到β-甘油磷酸鈉溶液；
（3）將步驟（1）和步驟（2）的溶液按照體積比7:1混合，冰浴下攪拌2h，用36％乙酸和4％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7.5；
（4）加入珍珠層粉，珍珠層粉與殼聚糖的質(zhì)量相同，攪拌后，在200W的功率下超聲2h，冰浴下攪拌48h，注入模具在-20℃下靜置12h，然后置于真空冷凍干燥機中在-20℃下冷凍干燥48h，以20 kGy鈷-60輻照進行滅菌的，得到珍珠層粉-殼聚糖多孔支架，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
實施例3
珍珠層粉-殼聚糖多孔支架的制備方法，包含以下步驟：
（1）取2.0g 殼聚糖，加入100 mL濃度為0.1 mol/L的醋酸溶液中，攪拌12h后，其中，攪拌的速度為500rpm，得到殼聚糖溶液，靜置30h；
（2）稱14.0g β-甘油磷酸鈉，加蒸餾水定容至25mL，混合均勻，得到β-甘油磷酸鈉溶液；
（3）將步驟（1）和步驟（2）的溶液按照體積比7:1混合，冰浴下攪拌2h，用36％乙酸和4％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7.0；
（4）加入珍珠層粉，珍珠層粉與殼聚糖的質(zhì)量相同，攪拌后，在200W的功率下超聲2h，冰浴下攪拌48h，注入模具在-20℃下靜置12h，然后置于真空冷凍干燥機中在-20℃下冷凍干燥48h，以20 kGy鈷-60輻照進行滅菌，得到珍珠層粉-殼聚糖多孔支架，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>