本發(fā)明涉及一種可用于治療嬰幼兒血管瘤的藥物凝膠劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
嬰幼兒血管瘤（Infantile hemangioma，IH）是嬰幼兒最常見的先天性良性血管腫瘤，發(fā)病率約為4%，在新生兒中女性多見，男女發(fā)病比例為1:3～1:5，約60%發(fā)生于頭頸部。雖然大部分嬰幼兒血管瘤可于數(shù)年后逐漸消退，但往往留下癲痕組織，引發(fā)功能障礙；發(fā)生于面部的還會影響美觀，給患兒和家長帶來沉重的心理負(fù)擔(dān)。
嬰幼兒血管瘤會導(dǎo)致患兒外觀畸形，難以消除，少數(shù)嬰幼兒血管瘤增殖迅速，可伴發(fā)潰瘍、出血、感染或功能障礙（視力、聽力、呼吸、吞咽等），嚴(yán)重者甚至危及生命。
目前國外只有鹽酸普萘洛爾口服溶液（商品名：Hemangeol）被批準(zhǔn)用于需要全身治療的增殖期嬰幼兒血管瘤，但是還沒有進入中國。迄今為止，國內(nèi)外還沒有專門治療嬰幼兒血管瘤的局部給藥制劑。
自法國醫(yī)師Leaute-Labreze C等于2008年6月在《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》上首次報道使用β-受體阻滯藥（鹽酸普萘洛爾）用于治療嬰幼兒血管瘤，此方法立即引起了各國學(xué)者的關(guān)注，為嬰幼兒血管瘤的治療開辟了新的途徑，開創(chuàng)了β-受體阻滯藥治療嬰幼兒血管瘤的先河。
隨后發(fā)現(xiàn)外用同為β-受體抑制劑的馬來酸噻嗎洛爾（Timolol Maleate）滴眼液同樣可以治療嬰幼兒血管瘤，并獲得非常滿意的療效。并且由于其為局部外用，可以避免口服β-受體抑制劑類藥物導(dǎo)致的心動過緩等副作用，提高用藥安全性，對嬰幼兒安全用藥有著非常重要的意義。
但馬來酸噻嗎洛爾滴眼液為水性溶液，流動性好，難以附著在病患部位；另外馬來酸噻嗎洛爾滴眼液為滴眼劑，難以透過皮膚，使用時需長時間濕敷給藥，十分不便。
氮酮（Azone）又名阿佐恩；月桂氮酮；氮酮；月桂氮卓酮，化學(xué)名為1-十二烷基氮雜環(huán)庚酮-2-酮，CAS注冊號為59227-89-3。氮酮使用安全，在常用濃度0.5%-20%時對皮膚無刺激性，無毒性反應(yīng)。除經(jīng)皮給藥外，還可用于口服給藥，注射給藥和陰道給藥，是一種高效透皮吸收促進劑和新型非離子表面活性劑，在醫(yī)藥、日化、農(nóng)藥、印染、化纖、皮革等行業(yè)中應(yīng)用廣泛，使用效果十分顯著。
苯甲酸鈉（Sodium Benzoate）又名安息香酸鈉，CAS注冊號為532-32-1。苯甲酸鈉是一種經(jīng)典的抗菌防腐劑，安全性好，在化妝品、食品及藥物制劑中應(yīng)用廣泛，并被美國食品藥品管理局（FDA）列入一般公認(rèn)的安全類添加劑（ GRAS）目錄。
本發(fā)明提供一種治療嬰幼兒血管瘤的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑及其制備方法，克服馬來酸噻嗎洛爾滴眼液難以附著在病患部位，透過性差，用藥不便的缺點，提高患者的依從性，更有利于嬰幼兒血管瘤的治療。
評價馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的質(zhì)量指標(biāo)有性狀、pH值、有關(guān)物質(zhì)和含量測定等。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
馬來酸噻嗎洛爾滴眼液在嬰幼兒血管瘤治療中被廣泛應(yīng)用，但其難以附著在病患部位，經(jīng)皮吸收能力差，用藥十分不便。因此，改善其附著力、提高透皮性，提高患者的用藥依從性是很有意義的。
本發(fā)明的目的是提供一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑及其制備方法，相對于已有的馬來酸噻嗎洛爾滴眼液，馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑更方便嬰幼兒血管瘤患者使用，治療效果更好。
本發(fā)明通過對馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑穩(wěn)定性、釋放度、黏附力變化、涂布性、離心穩(wěn)定性、高溫穩(wěn)定性、透皮能力、抑菌效力、pH值、有關(guān)物質(zhì)及含量變化等因素為重點進行大量的試驗研究，驚奇地發(fā)現(xiàn)了一種穩(wěn)定性好，對皮膚無刺激，具有優(yōu)良透皮能力的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑。
本發(fā)明的第一個目的是提供一種穩(wěn)定性好，對皮膚無刺激，具有優(yōu)良透皮能力的治療嬰幼兒血管瘤的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑。
本發(fā)明的第二個目的是提供制備上述馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的方法。
本發(fā)明提供了一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑：
其中，各組分按其質(zhì)量（單位：g）占所制備凝膠劑的全量質(zhì)量（單位：g）的百分比計算。
所述的治療嬰幼兒血管瘤的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑規(guī)格可為20ml:0.5g（按噻嗎洛爾計），透明或半透明水性凝膠，pH值為6.0~8.0之間，質(zhì)量穩(wěn)定。
根據(jù)一個實施例方案，所用的氮酮占所制成凝膠劑的百分比為0.5~2.5%；優(yōu)選占所制成凝膠劑的1.5% 。
根據(jù)一個實施例方案，所用的苯甲酸鈉占所制成凝膠劑的百分比為0.1~0.5%；優(yōu)選占所制成凝膠劑的0.2% 。
根據(jù)一個實施例方案，所用的氫氧化鈉占所制成凝膠劑的百分比為0.3~0.5%。
本發(fā)明提供的一種穩(wěn)定性好，對皮膚無刺激，具有優(yōu)良透皮能力的治療嬰幼兒血管瘤的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法如下：
在該制備方法中，按照以下的配比配制1000g馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑：
其中，各組分的加入量均分別按其質(zhì)量（單位：g）占所制備凝膠劑的全量質(zhì)量（單位：g）的百分比計算。
所述方法包括以下步驟：（1）制備凝膠基質(zhì)：取卡波姆，加入處方水總量65%的水，攪拌，加入氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入甘油和苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取處方量的馬來酸噻嗎洛爾，用處方水總量20%的水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和氮酮，攪拌下用氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.0～8.0，并加水至全量。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
根據(jù)一個實施例方案，以體外經(jīng)皮透過量作為考察項，所用的氮酮占所制成凝膠劑的百分比為0.5~2.5%；優(yōu)選占所制成凝膠劑的1% 。
根據(jù)一個實施例方案，以抑菌能力作為考察項，所用的苯甲酸鈉占所制成凝膠劑的百分比為0.1~0.5%；優(yōu)選占所制成凝膠劑的0.2% 。
在一個實施例中，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值使制備的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑pH的范圍在6.0~8.0，優(yōu)選pH值為6.5~7.5。
具體實施方式
下面通過具體的實施例進行進一步詳細(xì)的說明。本發(fā)明并不僅僅局限于以下實施例。
實施例1
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品1）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和5.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例2
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品2）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例3
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品3）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和25.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例4
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品4）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和1.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例5
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品5）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和5.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例6
制備不含氮酮的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑（樣品6）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例7
制備不含苯甲酸鈉的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑（樣品7）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取10.0g卡波姆，加入650g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取6.68g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于5.00g噻嗎洛爾），用200g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。
實施例8
對實施例制備的樣品1-5進行涂布性、離心穩(wěn)定性和高溫穩(wěn)定性試驗，考察凝膠劑穩(wěn)定性。
涂布性試驗方法：取凝膠適量，在手臂上涂布，評價難易程度。
離心穩(wěn)定性試驗方法：取樣品1~5各5g，分別置10ml離心管中，在轉(zhuǎn)速6000rpm下離心15min，觀察有無分層現(xiàn)象。
高溫穩(wěn)定性試驗方法：取樣品1~5各約10g灌裝于10ml安瓶中，封口后置藥品穩(wěn)定試驗箱中，在溫度60℃±2℃的條件下放置10天。分別于試驗開始后的3天、5天和10天取樣，觀察有無分層現(xiàn)象。
試驗結(jié)果如下：
實驗結(jié)果表明：按照本專利提供的制劑處方和制備方法制備的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的涂布性、離心穩(wěn)定性和高溫穩(wěn)定性良好。
實施例9
對實施例制備的樣品1、樣品2、樣品3和樣品6進行體外經(jīng)皮透過量試驗，對氮酮的添加百分比進行篩選。使用改良的Franz立式擴散池，以小型豬離體皮膚為模型，生理鹽水為接受液，于2，4，6，8小時分別取樣，HPLC法測定馬來酸噻嗎洛爾濃度，計算累積透過量（試驗結(jié)果見附圖1）。由試驗結(jié)果可知，氮酮對馬來酸噻嗎洛爾經(jīng)皮透過量有顯著影響，隨著氮酮濃度的增加，藥物累積透過量逐漸增大。當(dāng)?shù)俜譂舛扔?.5%增大到2.5%時，其累積透過量基本不變，因此選擇氮酮的百分濃度定為1.5%，即可保證具有一定的透皮率，便于發(fā)揮藥效，又可提高馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的安全性，減少皮膚刺激性風(fēng)險。
實施例10
對實施例制備的樣品2、樣品4、樣品5進行抑菌效力檢查，對苯甲酸鈉的添加百分比進行篩選。試驗結(jié)果如下：
實驗結(jié)果表明苯甲酸鈉的百分濃度定0.2%時即有較好的抑菌效力，因此選擇0.2%為馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑中苯甲酸鈉的加入量。
實施例11
參照美國藥典馬來酸噻嗎洛爾片（Timolol Maleate Tablets）含量測定項下方法進行。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以pH 2.8磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鈉22.08g，加水溶解并稀釋至2000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.8±0.05）-甲醇（3:2）為流動相；檢測波長為295nm。理論板數(shù)按噻嗎洛爾峰計算不低于3000。拖尾因子應(yīng)不大于2.0。
測定法 取本品適量，精密稱定，加pH2.8磷酸鹽緩沖液溶解制成每1ml含0.1mg噻嗎洛爾的溶液作為供試品溶液，精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取馬來酸噻嗎洛爾對照品適量，精密稱定，加pH2.8磷酸鹽緩沖液溶解并定量稀釋成每1ml中約含噻嗎洛爾0.1mg的溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
實施例12
對實施例制備的樣品1-5在60℃條件下加熱10天，考察其穩(wěn)定性，結(jié)果如下：
實施例13
一種馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑的制備方法（樣品8、樣品9、樣品10）。
（1）制備凝膠基質(zhì)：取100g卡波姆，加入6500g水，攪拌，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至7.0～9.0， 加入1000g甘油和20.0g苯甲酸鈉，繼續(xù)攪拌至均勻，得到凝膠基質(zhì)。（2）總混：稱取66.8g馬來酸噻嗎洛爾（相當(dāng)于50.0g噻嗎洛爾），用2000g水溶解后加入凝膠基質(zhì)中，再投入50.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和150g氮酮，攪拌下用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH 值至6.5～7.5，并加水至10kg。（3）排氣泡：慢速攪拌下，抽真空30分鐘，除去氣泡。（4）灌裝：將制成的凝膠于灌裝機中灌裝，灌裝時控制最低裝量為20.0g/支。（5）清潔設(shè)備，重復(fù)（1）~（4）操作兩次，得到馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑樣品8、樣品9和樣品10。
實施例14
取樣品8、樣品9和樣品10，按市售包裝，按如下條件進行穩(wěn)定性加速試驗：在溫度30℃±2℃、相對濕度65%±5%的條件下放置，于試驗期間第1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性考察項目檢測，含量和有關(guān)物質(zhì)測定參照實施例11。
檢測結(jié)果如下：
試驗結(jié)果表明：使用本發(fā)明提供的處方及制備方法所制備的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑，按市售包裝，在溫度30℃±2℃、相對濕度65%±5%的條件下放置，于試驗期間第1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性考察項目檢測，各項指標(biāo)與0月比較，無明顯變化，穩(wěn)定性良好。
實施例15
取樣品8、樣品9和樣品10，按市售包裝，按如下條件進行穩(wěn)定性長期試驗：在溫度30℃±2℃、相對濕度65%±5%的條件下放置，于試驗期間第1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性考察項目檢測，含量和有關(guān)物質(zhì)測定參照實施例11。
檢測結(jié)果如下：
結(jié)果表明：使用本發(fā)明提供的處方及制備方法所制備的馬來酸噻嗎洛爾凝膠劑，按市售包裝，在溫度30℃±2℃、相對濕度65%±5%的條件下放置，于試驗期間第1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性考察項目檢測，各項指標(biāo)與0月比較，無明顯變化，穩(wěn)定性良好。
實施例16
為了驗證本發(fā)明的創(chuàng)新性和可行性，我們選取20名1~6 月齡患有嬰幼兒血管瘤的患兒，均取得家長知情和許可，對實施例13制劑進行了初步的臨床試用，進行為期6個月的外用藥物治療，以視覺模擬評分法評價療效，并記錄不良反應(yīng)。
結(jié)果表明，20名病例中，無一例出現(xiàn)局部皮膚發(fā)紅、蛻皮、皮膚破潰、潰瘍或全身反應(yīng)。14名患兒嬰幼兒血管瘤癥狀完全消失，其余6名癥狀雖然沒有完全消退，但均有很大程度的改善。所有患兒家長對治療效果和副作用評價均非常滿意。
這一初步的臨床試用，從臨床用藥的角度證明了本發(fā)明的創(chuàng)新性和可行性。
附圖說明
附圖1：氮酮濃度對透皮的影響。