本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體的說，是具有藥理活性的藥物組合物。
背景技術(shù)：
金花茶Camellia nitidissima是山茶科Theaceae山茶屬Camellia的常綠灌木或小喬木，其花和葉為廣西壯族民間的傳統(tǒng)用藥，2010年已被納入新資源食品(衛(wèi)生部公告2010年第9號)。在《廣西民族藥簡編》、《中國本草國錄》、《廣西中藥材標準》和《藥用植物辭典》等書籍中有藥理作用記載，可用于防治咽喉炎，腎炎，痢疾，腫瘤，便血，高血壓和月經(jīng)不調(diào)等病癥。
紫芝為多孔菌科真菌Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang的干燥子實體，別名：黑芝、玄芝。從古至今許多經(jīng)典醫(yī)學書籍將紫芝列為上品中藥，對其有詳細記載?！吨袊幍洹?2015版)記載紫芝的性味與歸經(jīng)：甘，平。歸心、肺、肝、腎經(jīng)。其功能與主治為：補氣安神，止咳平喘。用于心神不寧，失眠心悸，肺虛咳喘，虛勞短氣，不思飲食。具有極高的營養(yǎng)、保健和醫(yī)藥價值?，F(xiàn)代藥理研究已證明，靈芝有抗腫瘤，延緩衰老，抗炎癥，降血糖，降血脂等療效。
補體(complement，C)是由30余種廣泛存在于血清、組織液和細胞膜表面的蛋白質(zhì)組成的，具有精密調(diào)控機制的蛋白質(zhì)反應系統(tǒng)，其活化過程表現(xiàn)為一系列絲氨酸蛋白酶的級聯(lián)酶解反應。在正常生理狀態(tài)下，補體系統(tǒng)對外來入侵物起到調(diào)理、溶解清除的作用。在病理情況下，補體被過度激活，并對入侵的病毒、細菌及機體本身造成非特異性損傷。
補體能使溶血素敏化的紅細胞發(fā)生溶血，其溶血程度與血清中補體的含量有關(guān)。補體含量與溶血程度之間呈正相關(guān)，但不是直線關(guān)系，而呈S曲線關(guān)系，故通常取反應曲線中間部位即50％溶血(CH50)為判定終點。將供試品做不同濃度稀釋后與補體混勻，與紅細胞反應，測定溶血程度，以導致50％溶血所需最小供試品濃度(CH50)評價供試品的抗補體活性。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，是提供一種對補體系統(tǒng)有抑制作用的藥物組合物。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：
1.金花茶用乙醇水溶液提取后依次過大孔樹脂、聚酰胺、Sephadex LH-20柱，得到提取物(1)；紫芝依次用乙醇水溶液和水提取，濃縮后得到提取物(2)；
2.制備補體，分別用提取物(1)、提取物(2)以及兩者的組合物制備供試品；兩者的組合物比例范圍是提取物(1)∶提取物(2)＝1∶0.2～5；
3.測定供試品的抗補體活性。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步描述。
實施例1
1)金花茶提取物制備：干燥的金花茶花朵5kg，用10倍重量的80％乙醇水溶液(乙醇與水的體積百分數(shù)，下同)回流提取2次，每次回流2小時。合并提取液，在45℃下減壓濃縮回收乙醇，得浸膏573g。將浸膏混懸于適量水中得到混懸液，依次用與混懸液大致相等體積的環(huán)己烷、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，分別合并，減壓回收溶劑后分別得環(huán)己烷層CH(43g)、乙酸乙酯層CE(92g)、正丁醇層CB(150g)、水層CW(273g)。
正丁醇層CB過D101大孔樹脂柱，依次用30％、50％、70％、90％的乙醇水溶液梯度洗脫，等量接收洗脫液，根據(jù)薄層層析結(jié)果合并，減壓濃縮后得到五個部分：CB-1(24.8g)、CB-2(15.6g)、CB-3(25.1g)、CB-4(30.3g)、CB-5(27.2g)。
將CB-3過聚酰胺柱，依次用10％、30％、50％、70％、90％的乙醇水溶液梯度洗脫，等量接收洗脫液，根據(jù)薄層層析結(jié)果合并，減壓濃縮后得到三個部分：CB-3-1(8.8g)、CB-3-2(6.2g)、CB-3-3(7.4g)。
將CB-3-1過Sephadex LH-20柱，用氯仿∶甲醇＝1∶1洗脫，按色帶接收洗脫液，根據(jù)薄層層析結(jié)果合并，減壓濃縮后得到兩個部分：CB-3-1-1(3.5g)、CB-3-1-2(4.9g)。
詳細的分離流程圖如圖1所示。
2)紫芝提取物制備：干燥的紫芝2kg，打成粗粉，用8倍重量的80％乙醇水溶液回流提取2次，每次回流2小時，再用8倍重量水回流提取2次，每次回流2小時。分別合并提取液，減壓濃縮得到醇提浸膏和水提浸膏，合并兩種浸膏，50℃下減壓干燥，得到紫芝提取物GS 171克。
3)補體制備：取豚鼠股動脈血約10ml，4℃下放置1h使其凝固，4000rpm離心10min，取上清液，加入以5×巴比妥緩沖液(BBS)洗滌后的2％羊紅細胞(SRBC)約2ml，吹打混勻，4000rpm離心5min，取上清液作為補體，分裝后于-70℃冷凍保存。
4)供試品溶液：稱取金花茶提取物CB-3-1-1和紫芝提取物GS適量(約3mg)，加入3×20μl DMSO和800μl BBS，超聲溶解得到1∶1溶液，加入BBS對倍稀釋，配成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128，共計8個濃度的供試品溶液。
5)補體制備及效價測定：補體(豚鼠血清)40μl加入EP管，再加入BBS至400μl。另取7支EP管，分別加入200μl BBS，一次從前一支EP管取200μl至下一管，得到1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280的溶液。這8支管分別加入200μl BBS、100μl溶血素、100μl SRBC，對照管A為0.4ml BBS+0.1ml SRBC+0.1ml溶血素(自身溶血不能用)。這10支管分別混勻，于37℃水浴30min后，在4000rpm、4℃的條件下離心5min。分別取每管上清0.2ml于96孔板，在405am測定吸光度。以三蒸水溶血管的吸光度作為全溶血標準，計算溶血率。以補體稀釋度為X軸，各稀釋濃度補體造成的溶血百分率為Y軸作圖。選擇達到相似高溶血率的最低補體濃度作為確保體系能正常溶血所需的臨界補體濃度。
取上述測得的臨界補體濃度的補體與供試品混勻，于37℃預水浴10min后，按照表1加入適量BBS、溶血素和2％SRBC。
表1補體經(jīng)典途經(jīng)溶血實驗中所加各成分的體積(ml)
將每管37℃水浴30min后4000rpm、4℃條件下離心5min，分別取每管上清0.2ml于96孔板，用酶標儀在405nm下測定吸光度。實驗同時設置對照組、補體組和全溶血組。將測定組吸光度值扣除相應中藥對照組吸光度值后計算溶血率。以樣品濃度作為X軸，溶血抑制率作為Y軸作圖。計算CH50值。
6)結(jié)果：金花茶提取物CB-3-1-1、靈芝提取物GS以及它們的組合物均表現(xiàn)出不同程度的抗補體活性，其中CB-3-1-1與GS的1∶2.5組合物(提取物的質(zhì)量之比)抗補體活性最好。具體活性結(jié)果見表2。
表2不同藥物抗補體活性結(jié)果