Cftr調(diào)節(jié)劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的組合物用作ATP-結(jié)合彈夾(“ABC”)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白或其片段，包括囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(“CFTR”)的調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明也涉及使用本發(fā)明的化合物治療CFTR介導(dǎo)的疾病的方法。
【專利說明】CFTR調(diào)節(jié)劑
[0001] 本申請是申請日為2008年05月09日、申請?zhí)枮?01210355068. 2、發(fā)明名稱為 "CFTR調(diào)節(jié)劑"的專利申請的分案申請。
[0002] 本發(fā)明的【技術(shù)領(lǐng)域】
[000引本發(fā)明涉及囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子（"CFTR")的調(diào)節(jié)劑，其組合物及其使 用方法。本發(fā)明還涉及使用該類調(diào)節(jié)劑治療CFTR介導(dǎo)的疾病的方法。
[0004] 發(fā)明背景
[000引 ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是一族膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，它們調(diào)節(jié)多種藥理活性劑，潛在毒性藥物和異生 物質(zhì)W及陰離子的轉(zhuǎn)運(yùn)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是同源性膜蛋白，它們結(jié)合和利用細(xì)胞H磯酸腺巧 (AT巧供它們的特異性活性。該些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白中有些被發(fā)現(xiàn)是多藥耐藥性蛋白（象MDR1-P糖 蛋白或多藥耐藥性蛋白MRP1)，為惡性癌細(xì)胞防御化療劑。直到現(xiàn)在，已經(jīng)鑒別了 48種ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，基于它們的序列同一性和功能分為7個家族。
[0006] ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白調(diào)節(jié)體內(nèi)多種重要的生理作用，并且提供對來自環(huán)境的有害化合物 的防御。由于該一原因，所W它們代表用于治療與該轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白缺陷相關(guān)的疾病，防止藥物從 祀細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)出來和干預(yù)其中調(diào)節(jié)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可能是有益的其他疾病的重要的潛在藥 物祀。
[0007] 通常與疾病相關(guān)的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族中的一個成員為cAMP/ATP-介導(dǎo)的陰離子通 道CFTR。CFTR在各種細(xì)胞類型中表達(dá)，包括可吸收型和分泌型上皮細(xì)胞，其中它調(diào)節(jié)通過 膜的陰離子流量W及其它陰離子通道和蛋白質(zhì)的活性。在上皮細(xì)胞中，CFTR的正常起作用 對維持整個身體，包括呼吸和消化組織內(nèi)的電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)而言是關(guān)鍵的。CFTR的一個成員由 大約1480個氨基酸組成，它們編碼由跨膜結(jié)構(gòu)域的串聯(lián)重復(fù)構(gòu)成的蛋白質(zhì)，所述跨膜結(jié)構(gòu) 域各自包含六個跨膜螺旋和一個核巧酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域。兩個跨膜結(jié)構(gòu)域被一個大的極性調(diào)節(jié) 性（時-結(jié)構(gòu)域連接，后者含有多個調(diào)節(jié)通道活性和細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的磯酸化位點(diǎn)。
[000引編碼CFTR的基因已被鑒別和測序（參見Gregory, R.J.等，（1990)化Uire 347 : 382-386 ;Rich，D.P.等，（1990)化Uire 347:358-362)，巧iordan，J.R.等，（1989) Science 245:1066-1073)。該種基因的缺陷引起CFTR突變，導(dǎo)致囊性纖維化（"CF")，該是人類最 常見的致命性遺傳疾病。囊性纖維化影響大約兩千五百分之一在美國出生的嬰兒。在全部 美國人口中，多達(dá)一千萬人攜帶有缺陷性基因的單一副本，沒有明顯的疾病效應(yīng)。相反，帶 有兩個CF相關(guān)性基因副本的個體患有CF的致虛弱和致命效應(yīng)，包括慢性肺病。
[0009] 在囊性纖維化患者中，在呼吸上皮中內(nèi)源性表達(dá)的CFTR中的突變造成頂端陰離 子分泌減少，導(dǎo)致離子和流體轉(zhuǎn)運(yùn)失衡。產(chǎn)生的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)減少促成了肺中粘液蓄積增加 且附帶微生物感染，最終導(dǎo)致CF患者死亡。除了呼吸問題W外，CF患者通常患有胃腸問題 和膜腺機(jī)能不全，如果不進(jìn)行治療，那么就會導(dǎo)致死亡。此外，存在囊性纖維化的男性不育， 且存在囊性纖維化的女性生育力降低。與兩個CF相關(guān)基因副本的嚴(yán)重效應(yīng)相反，帶有單一 CF相關(guān)基因副本的個體表現(xiàn)對霍亂和腹瀉所致脫水的抗性增加一該也許解釋了人群內(nèi)相 對高頻率的CF基因的原因。
[0010] CF染色體CFTR基因的序列分析已經(jīng)掲示了多種致病性突變（化tting，G. R.等， (1990)化Uire ：M6;366-369;Dean，M.等，（1990)Cell 61:863:870;且 Kerem，B-S.等， (1989)Science245;1073-1080;Kerem，B-S 等，（1990)Proc.化tl.Acad. Sci.USA 87: 8447-8451)。迄今為止，已經(jīng)鑒別了〉1000種導(dǎo)致疾病的CF基因突變化ttp://WWW. genet, sickkids. on. ca/cftr/)。最普遍的突變?yōu)镃FTR氨基酸序列508位苯丙氨酸的缺失且通常 被稱為A巧08-CFTR。該種突變發(fā)生在大約70%囊性纖維化病例中并且與嚴(yán)重性疾病相 關(guān)。
[0011] A巧08-CFTR中508殘基的缺失妨礙了初生蛋白正確地折疊。該導(dǎo)致該突變蛋白 不能退出邸和運(yùn)輸至質(zhì)膜。其結(jié)果是，膜中通道數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于表達(dá)野生型CFTR的細(xì)胞。 除了轉(zhuǎn)運(yùn)減低W外，突變還導(dǎo)致有缺陷的通道口控?？傊?，膜中通道數(shù)量減少和有缺陷的口 控引起跨越上皮的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)減少，引起有缺陷的離子和體液轉(zhuǎn)運(yùn)（Quinton,P.M. (1990)， FASEB J.4;2709-2727)。不過，研究已經(jīng)顯示，膜中A巧08-CFTR的數(shù)量減少是功能性的， 盡管少于野生型 CFTR值alemans 等，（1991)，化1:腳6 Lond. 354 ;526-528 ;Denning 等，文獻(xiàn) 同上；Pasyk 和化skett (1995)，J. Cell. Biochem. 270:12347-50)。除了 A 巧08-CFTR W外， 其它導(dǎo)致有缺陷的轉(zhuǎn)運(yùn)，合成和/或通道口控的致病性CFTR突變可能被增量或減量調(diào)節(jié)， W改變陰離子分泌和改變疾病進(jìn)展和/或嚴(yán)重性。
[001引盡管CFTR除了陰離子W外還轉(zhuǎn)運(yùn)多種分子，不過顯然該種作用（陰離子的轉(zhuǎn)運(yùn)） 代表了跨越上皮轉(zhuǎn)運(yùn)離子和水的重要機(jī)理中的一種要素。其它要素包括上皮Na+通道， E化C，Na72Cr/r共同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，Na+-K+-ATP酶粟和基底外側(cè)膜r通道，它們負(fù)責(zé)攝取氯化 物進(jìn)入細(xì)胞。
[0013] 該些要素一起發(fā)揮作用，經(jīng)由它們在細(xì)胞內(nèi)的選擇性表達(dá)和定位實(shí)現(xiàn)跨越上皮的 定向轉(zhuǎn)運(yùn)。借助存在于頂端膜上的腳aC與CFTR和在細(xì)胞基底外側(cè)表面上表達(dá)的Na+-K+-ATP 酶粟與C廠通道的協(xié)調(diào)活性，發(fā)生氯化物的吸收。氯化物從腔側(cè)的次級主動轉(zhuǎn)運(yùn)引起細(xì)胞 內(nèi)氯化物的蓄積，然后可W被動地經(jīng)由C廠通道離開細(xì)胞，導(dǎo)致向量轉(zhuǎn)運(yùn)。Na72cr/r共同 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，Na+-K+-ATP酶粟和基底外側(cè)膜r通道在基底外側(cè)表面上的排列和腔側(cè)上的CFTR 協(xié)調(diào)氯化物經(jīng)由腔側(cè)上CFTR的分泌。因?yàn)樗赡軓牟恢鲃愚D(zhuǎn)運(yùn)其本身，它跨越上皮的流動 依賴于由軸和氯的大量流動所生成的微小跨上皮滲透梯度。
[0014] 除了囊性纖維化W外，CFTR活性的調(diào)節(jié)也可W有益于其它不直接由CFTR突變所 導(dǎo)致的疾病，例如分泌性疾病和其它由CFTR介導(dǎo)的蛋白質(zhì)折疊疾病。該些疾病包括但不限 于慢性阻塞性肺疾病（C0PD)，干眼病和斯耶格倫氏綜合征。
[0015] coro是W氣流受限為特征的，它是進(jìn)行性的，不是完全可逆的。氣流受限是由于粘 液分泌過多，肺氣腫和細(xì)支氣管炎所致。突變或野生型CFTR的活化劑提供C0PD中常見的 粘液分泌過多和粘液纖毛廓清率減低的潛在治療。具體而言，增加跨越CFTR的陰離子分泌 可W有利于體液轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入氣道表面液體，W水化粘液，優(yōu)化纖毛周圍的體液粘度。該將引起 粘液纖毛廓清率增強(qiáng)和與coro有關(guān)的癥狀減少。干眼病是W巧水產(chǎn)生降低和異常巧膜脂 質(zhì)，蛋白質(zhì)與粘蛋白行為為特征的。干眼有很多原因，其中一些包括年齡，Las化眼手術(shù)，關(guān) 節(jié)炎，藥物治療，化學(xué)/熱灼傷，變態(tài)反應(yīng)和疾病，例如囊性纖維化和斯耶格倫氏綜合征。增 加經(jīng)由CFTR的陰離子分泌將增強(qiáng)體液從角膜內(nèi)皮細(xì)胞和眼周圍分泌腺體的轉(zhuǎn)運(yùn)，W增加 角膜的水化作用。該將有助于緩解與干眼病有關(guān)的癥狀。斯耶格倫氏綜合征是一種自身免 疫疾病，其中免疫系統(tǒng)攻擊體內(nèi)各處產(chǎn)生水分的腺體，包括眼，口，皮膚，呼吸組織，肝，陰道 和腸。癥狀包括眼，口和陰道干燥w及肺疾病。該疾病也與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，系統(tǒng)性狼瘡， 系統(tǒng)性硬化和多肌炎/皮膚肌炎有關(guān)。有缺陷的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)據(jù)信會導(dǎo)致該疾病，治療選擇 是有限的。CFTR活性調(diào)節(jié)劑可W水化各種受疾病影響的器官，幫助改善有關(guān)癥狀。
[0016] 正如上文所討論的，據(jù)信A巧08-CFTR中508殘基的缺失防止初生蛋白正確地折 疊，導(dǎo)致該種突變蛋白不能退出邸和運(yùn)輸至質(zhì)膜。其結(jié)果是，存在于質(zhì)膜的成熟蛋白數(shù)量 不足，上皮組織內(nèi)氯化物的轉(zhuǎn)運(yùn)顯著減少。事實(shí)上，該種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白被邸機(jī)構(gòu)有缺陷 的邸加工的細(xì)胞現(xiàn)象已被顯示不僅是CF疾病的基礎(chǔ)，而且是廣泛的其它孤立性與遺傳 性疾病的基礎(chǔ)。ER機(jī)構(gòu)可能發(fā)生故障的兩種方式要么是與蛋白質(zhì)的ER輸出的偶聯(lián)喪失， 引起降解，要么是該些有缺陷/誤折疊的蛋白質(zhì)的邸蓄積[Aridor M.等，化化re Med.， 5(7)，pp 745-751(1999);化astry，B.S.等，Neurochem. Internat ional，43，ppl-7(2003); Rut ishauser，J.等，Swiss Med Wkly，132,卵 211-222(2002) ;Morello, JP 等，TIPS, 21，卵.466-469(2000) ;Bross P.等，Human Mut. ,14,卵.186-198(1999)]。與前一類邸 故障有關(guān)的疾病有囊性纖維化（由誤折疊的A巧08-CFTR引起，正如上文所討論的），遺 傳性肺氣腫（由al-抗膜蛋白酶非Piz變體引起），遺傳性血色素沉著癥，凝血-纖維蛋 白溶解缺陷癥，例如蛋白C缺陷癥，1型遺傳性血管性水腫，脂質(zhì)加工缺陷癥，例如家族性 高膽固醇血，1型乳糜微粒血癥，無目脂蛋白血癥，溶酶體膽積病，例如I-細(xì)胞疾病/假 性-赫爾勒化urler)綜合癥，粘多糖?。ㄓ扇苊阁w加工酶引起），桑德霍夫/泰-薩克斯 (San化of/Tay-Sachs)?。ㄓ赡?己糖胺酶引起），克里格勒-納賈爾把rigler-Najjar) 綜合癥II型（由UDP-葡糖酵基-sialyc-轉(zhuǎn)移酶引起），多內(nèi)分泌腺病/高膜島素血癥 (hyperinsulemia)，糖尿?。ㄓ赡u素受體引起），拉倫（Laron)誅儒癥（由生長激素受體 引起），髓過氧化物酶（myleoperoxidase)缺乏癥，原發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能減退癥（由前促甲 狀旁腺激素引起），黑色素瘤（由酪氨酸酶引起）。與后一類ER故障有關(guān)的疾病有聚糖病 (glycanosis)CDG 1型，遺傳性肺氣腫（由al-抗膜蛋白酶PiZ變體引起），先天性甲狀腺 功能亢進(jìn)癥，成骨不全（由I，II，IV型前膠原引起），遺傳性低纖維蛋白原血癥（由纖維 蛋白原引起），ACT缺乏癥（由a 1-抗凝乳蛋白酶引起），尿崩癥值I)，后葉激素運(yùn)載蛋白 性（neuro地yseal)DI (由后葉加壓素/V2-受體引起），腎性DI (由水通道蛋白II引起）， 夏-馬-圖H氏綜合征（由外周髓磯脂蛋白22引起），佩-梅二氏病，神經(jīng)變性疾病，例如 阿爾茨海默氏?。ㄓ赡緼PP和早老蛋白引起），帕金森氏病，肌萎縮性側(cè)索硬化，進(jìn)行性核 上性麻瘍，皮克氏病，若干聚谷氨醜胺神經(jīng)障礙，例如亨廷頓氏病，I型脊髓小腦性共濟(jì)失 調(diào)（spinocerebullar ataxia type I)，脊髓與延髓肌肉萎縮，齒狀核紅核（dentatorubal) 蒼白球丘腦下部核萎縮，和肌強(qiáng)直性營養(yǎng)不良，W及海綿狀腦病，例如遺傳性克-雅二氏病 (由化病毒蛋白加工缺陷引起），法布里氏?。ㄓ扇苊阁wa -半乳糖巧酶A引起）和斯-施 二氏綜合征（由Prp加工缺陷引起）。
[0017] 除了 CFTR活性的增量調(diào)節(jié)W外，減少CFTR分泌陰離子也可W有益于分泌性腹瀉 的治療，其中作為促分泌性活化的氯化物轉(zhuǎn)運(yùn)的結(jié)果，上皮水轉(zhuǎn)運(yùn)戲劇性地增加。該機(jī)理牽 涉cAMP的升高和CFTR的刺激。
[0018] 盡管腹瀉有大量原因，不過由過量氯化物轉(zhuǎn)運(yùn)所致腹瀉性疾病的主要后果是共同 的，包括脫水，酸中毒，生長減退和死亡。
[0019] 急性與慢性腹瀉在世界很多地區(qū)代表了主要的醫(yī)學(xué)問題。腹瀉在不到五歲的兒童 中既是營養(yǎng)不良的顯著因素，又是死亡的主導(dǎo)原因巧，000, 000例死亡/年）。
[0020] 分泌性腹瀉也是獲得性免疫缺陷綜合征（AID巧和慢性炎性腸疾?。↖BD)患者中 的危險病癥。每年從工業(yè)化國家到發(fā)展中國家旅行的人中有一千六百萬人患上腹瀉，腹瀉 病例的嚴(yán)重性和數(shù)量因旅行的國家和地區(qū)而異。
[0021] 牲畜和寵物，例如牛，豬，馬，綿羊，山羊，貓和狗的腹瀉也稱為家畜腹瀉病，是該些 動物死亡的主要原因。腹瀉可W由任何重大轉(zhuǎn)變所致，例如斷奶或身體運(yùn)動，W及應(yīng)答于多 種細(xì)菌或病毒感染，一般發(fā)生在動物生命的前幾個小時內(nèi)。
[0022] 最常見的致腹瀉性細(xì)菌是腸毒原性大腸桿菌巧TEC)，具有K99纖毛抗原。腹瀉的 常見病毒原因包括輪狀病毒和冠形病毒。其它感染性成分包括隱抱子蟲，蘭伯氏賈第蟲和 沙n氏菌等等。
[0023] 輪狀病毒感染的癥狀包括水樣便的排泄，脫水和虛弱。冠形病毒導(dǎo)致更嚴(yán)重的新 生動物疾病，具有比輪狀病毒感染更高的死亡率。不過經(jīng)常是年幼動物可能同時感染有一 種W上病毒或者病毒與細(xì)菌微生物的組合。該戲劇性地增加疾病的嚴(yán)重性。
[0024] 對可W用于調(diào)節(jié)哺乳動物細(xì)胞膜中CFTR活性的CFTR活性調(diào)節(jié)劑存在需求。
[002引對使用該類CFTR活性調(diào)節(jié)劑治療CFTR-介導(dǎo)的疾病的方法存在需求。
[0026] 對調(diào)節(jié)哺乳動物離體細(xì)胞膜中CFTR活性的方法存在需求。
[0027] 發(fā)明概述
[0028] 目前發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的組合物用作CFTR調(diào)節(jié)劑。該些化 合物具有式（I):
[0029]
【權(quán)利要求】
1. 式VI的化合物：
或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中：
各自為： m為 0-4 ; Rp為任選取代的C1-C6脂族基，其中至多其中的兩個碳單元任選和獨(dú)立地被-CO-，-CO NRn-，-CO2-, -OCO-，-NRnCO2-, -0-，-OCONRn-, -NRnCO-, -S-，-SO-，-SO2-, -NRn-替代； Rm獨(dú)立地為-ZmR11，其中Zm各自獨(dú)立地為鍵或任選取代的支鏈或直鏈C1-C6脂族基鏈， 其中Zm中的至多兩個碳單元任選和獨(dú)立地被-C0-，-C0NRn-，-C02-，-0C0-，-CHRn-，-NRnCO2-, -0-，-OCONRn-，-NRnC〇-，-S-，-SO-，-S02-，-NRn-替代； R11 獨(dú)立地為RN，鹵素，-0H，-NH2, -CN，-CF3 或-OCF3 ; Rn獨(dú)立地為氫，任選取代的C1-C8脂族基，任選取代的環(huán)脂族基，任選取代的雜環(huán)脂族 基，任選取代的芳基或任選取代的雜芳基； R1為任選取代的C1-C6脂族基，任選取代的CV6烷氧基，任選取代的C3-C10環(huán)脂族 基，-CN,鹵素或輕基； R2為氫或任選取代的C1-C6脂族基； R3和R' 3與結(jié)合它們的碳原子一起形成任選取代的C3-C7環(huán)脂族基或任選取代的雜環(huán) 脂族基； R4為任選取代的芳基；且η為 〇-3。
2. 權(quán)利要求1的化合物，其中R4選自：
3. 權(quán)利要求2的化合物，其中R4為（b)。
4. 權(quán)利要求1的化合物，其中R1為甲基。
5. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物具有式VIA:
或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中： R，d 其中
m為 0-4 ; R1為C1-C6脂族基，鹵素或-CN;且R4選自：
6. 權(quán)利要求5的化合物，其中R1為甲基。
7. 權(quán)利要求5的化合物，其中R'i為：
8. 權(quán)利要求5的化合物，其中R'i為：
9. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物具有式VIB:
或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中：
R，d 其中：m為 0-4 ; R1為C1-C6脂族基，鹵素或-CN;且 R4選自：
10. 權(quán)利要求9的化合物，其中Rl為甲基。
11. 藥物組合物，該組合物包含： (i) 權(quán)利要求1的化合物；和 (ii) 藥學(xué)上可接受的載體。
12. 權(quán)利要求11的組合物，該組合物進(jìn)一步包含溶粘蛋白劑，支氣管擴(kuò)張藥，抗生素， 抗感染劑，抗炎劑，CFTR調(diào)節(jié)劑或營養(yǎng)劑。
13. 權(quán)利要求1的化合物在制備用于調(diào)節(jié)CFTR活性的藥物中的用途。
14. 權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療患者疾病或減輕患者疾病嚴(yán)重性的藥物中 的用途，其中所述疾病選自囊性纖維化，遺傳性肺氣腫，遺傳性血色素沉著癥，凝血-纖維 蛋白溶解缺陷癥，例如蛋白C缺陷癥，1型遺傳性血管性水腫，脂質(zhì)加工缺陷癥，例如家族性 高膽固醇血癥,1型乳糜微粒血癥,無β脂蛋白血癥,溶酶體貯積病,例如I-細(xì)胞疾病/假 性-赫爾勒綜合癥，粘多糖病，桑德霍夫/泰-薩克斯病，克里格勒-納賈爾綜合癥Π型， 多內(nèi)分泌腺病/高胰島素血癥，糖尿病，拉倫侏儒癥，髓過氧化物酶缺乏癥，原發(fā)性甲狀旁 腺機(jī)能減退癥，黑色素瘤，聚糖病CDG1型，先天性甲狀腺功能亢進(jìn)癥，成骨不全，遺傳性低 纖維蛋白原血癥，ACT缺乏癥，尿崩癥（DI)，后葉激素運(yùn)載蛋白性DI，腎性DI，夏-馬-圖三 氏綜合征，佩-梅二氏病，神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病，帕金森氏病，肌萎縮性側(cè)索 硬化，進(jìn)行性核上性麻痹，皮克氏病，若干聚谷氨酰胺神經(jīng)障礙，例如亨廷頓氏病，I型脊髓 小腦性共濟(jì)失調(diào)，脊髓與延髓肌肉萎縮，齒狀核紅核蒼白球丘腦下部核萎縮，和肌強(qiáng)直性營 養(yǎng)不良，以及海綿狀腦病，例如遺傳性克-雅二氏病（由朊病毒蛋白加工缺陷引起），法布里 氏病，斯-施二氏綜合征，COPD，干眼病或斯耶格倫氏病。
15. 用于體外或體內(nèi)測定生物樣品中CFTR或其片段活性的試劑盒，該試劑盒包括： (i) 包含根據(jù)權(quán)利要求1的化合物的組合物；和 (ii) 關(guān)于下列內(nèi)容的說明書： a) 使該組合物與該生物樣品接觸；和 b) 測定所述CFTR或其片段的活性。
16.權(quán)利要求15的試劑盒，該試劑盒進(jìn)一步包括關(guān)于下列內(nèi)容的說明書： a) 使額外的組合物接觸所述生物樣品； b) 在有所述額外化合物存在下測定所述CFTR或其片段的活性，和 c) 比較在有額外化合物存在下所述CFTR的活性與在有權(quán)利要求1的化合物存在下所 述CFTR的活性。
【文檔編號】A61P11/00GK104447716SQ201410752029
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2008年5月9日 優(yōu)先權(quán)日:2007年5月9日
【發(fā)明者】S·哈迪達(dá)魯阿, P·D·J·格魯滕休斯, 周競蘭, B·貝爾, M·米勒, J·麥卡特內(nèi) 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司