高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料及其制備方法。所述的絲膠基敷料由球狀絲膠蛋白、絲膠交聯(lián)劑M1、烯烴類單體M2、烯烴類單體交聯(lián)劑M3、引發(fā)劑M4和催化劑M5聚合而成，利用絲膠獨具的吸濕性、生物相容性、抗菌性、抗氧化性以及促進(jìn)細(xì)胞粘附與增殖的作用，以絲膠和烯烴類單體為基質(zhì)，通過靜電紡絲、雙網(wǎng)絡(luò)互穿和干燥成膜法制備成纖維、膜和塊狀的敷料，克服傳統(tǒng)敷料細(xì)菌通透、傷口易脫水和粘連的缺點，避免單獨使用絲膠帶來的力學(xué)強(qiáng)度和抑菌效率低的不足。本發(fā)明的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料具有優(yōu)異的抗菌性，可促進(jìn)細(xì)胞增殖從而加快傷口愈合，并可應(yīng)用于不同類型的創(chuàng)傷表面，以及各類組織修復(fù)、潰瘍、瘙癢和褥瘡等。
【專利說明】高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本文涉及醫(yī)用創(chuàng)傷敷料及其制備【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]醫(yī)用敷料作為傷口處的覆蓋物，在傷口愈合過程中，可以替代受損的皮膚起到暫時性的屏障作用，避免或控制傷口的感染，提供了有利于創(chuàng)面愈合的環(huán)境。使用適宜的局部抗菌敷料可以充分降低傷口的感染，同時全面促進(jìn)傷口痊愈。
[0003]在傳統(tǒng)上使用最多的敷料就是紗布。紗布多由棉花、軟麻布和亞麻布加工而成，屬于惰性敷料，對創(chuàng)面的愈合無明顯促進(jìn)作用。這種敷料雖然具有吸收性好、保護(hù)創(chuàng)面、制作簡單、價格便宜、可重復(fù)使用等優(yōu)點，但其缺點也很突出，比如:①無法保持創(chuàng)面濕潤，創(chuàng)面愈合延遲；②敷料纖維易脫落，造成異物反應(yīng)，影響愈合；③創(chuàng)面肉芽組織易長入敷料的網(wǎng)眼中，換藥時可引起疼痛敷料被浸透時，病原體易通過換藥時，易損傷新生的組織；⑥換藥工作量大。
[0004]我國社會老齡化趨勢將增加慢性傷口形成的機(jī)會，對高性能的新型敷料需求將不斷增長。目前，各種具有負(fù)載抗菌性能的新型敷料被研制出來。中國專利CN200710037471.X公開了一種含有水溶性聚合物和甲殼素衍生物的水凝膠敷料，通過輻照、循環(huán)冷凍融化等工序進(jìn)行制備，所得凝膠具有抗菌、消炎、止血和促進(jìn)傷口愈合等功能，但其制備過程復(fù)雜，且殼聚糖不能溶解在中性溶液中，導(dǎo)致混合不均。中國專利CN 101125934A公開了一種含銀離子抗菌膜醫(yī)用敷料，眾所周知銀離子具有光譜的抗菌活性、抗藥性，但其存在促使創(chuàng)面色素沉積、銀中毒等副作用。中國專利CN103301504A公開了一種Y -聚谷氨酸/絲膠水凝膠敷料，采用輻射交聯(lián)，無需添加交聯(lián)劑，條件溫和，避免了交聯(lián)劑產(chǎn)生的細(xì)胞毒性。但是，輻射交聯(lián)易發(fā)生副反應(yīng)，而不被控制。
[0005]綜上，傳統(tǒng)敷料和上述新型敷料均存在著各種方面的不足，或制備過程復(fù)雜，或生物相容性差，或存在副作用，或在促進(jìn)細(xì)胞生長創(chuàng)口愈合方面存在不足。
[0006]絲膠(Silk Sericin, SS)是一種球狀蛋白，約占蠶絲總重量的20?30%，由18種氨基酸組成，在這些氨基酸中，極性側(cè)鏈氨基酸占74.61 %，因此絲膠具有良好的水溶性和吸水性。同時研究也證明了絲膠具有良好的吸濕性、生物相容性、抗菌性、抗氧化性以及促進(jìn)細(xì)胞粘附與增殖的作用等，是制造生物醫(yī)學(xué)材料的理想原料。Jassim等[Iraqi J.Comm.Med.，2010，23 (2):130-133]用2%的絲膠涂覆棉織物，不僅織物的拉伸強(qiáng)度增加5倍，而且對微生物的抑菌環(huán)達(dá) 9 ?12mm。Takai 等[Coating the surface of rayon &cotton fiberwith sericin, B1spher science dept, Hiroshima University, Japan, 2006]通過將絲膠涂覆到棉纖維上制備了親水性纖維，具有良好的吸濕性，并沒有引起皮疹。其可用水凝膠，無紡布，膜等不同形式的醫(yī)用敷料中，提高敷料的作用功效。但醫(yī)用絲膠敷料的報道仍然很少。Pushpa 等[J.Environ.Res.Develop.,2013,8(2):243-253]人從蠶絲工業(yè)廢水中提取的納米絲膠展示了優(yōu)異的抗菌活性。陳忠敏等[絲綢，2012,49(11):1-5]采用MTT法細(xì)胞毒性檢測對比了各組絲膠樣本對L-929小鼠成纖維細(xì)胞的相對增殖率(RGR，% )，觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，評價細(xì)胞毒性。同時進(jìn)行了體外抑菌定量試驗，結(jié)果表明絲膠是具有顯著的抑菌作用的生物相容性材料。
[0007]然而絲膠蛋白作為一種淡黃色粉末，壓制成型后力學(xué)性能不足，松散度高；若單獨使用，則利用效率極低；若與其它基質(zhì)進(jìn)行共混或涂覆，則絲膠分子極易逃逸，導(dǎo)致抗菌性能下降。因此有必要對絲膠蛋白進(jìn)行交聯(lián)，提高力學(xué)強(qiáng)度和抗菌性，同時增加使用效率。鑒于此，本發(fā)明通過對絲膠進(jìn)行改性，同時制成纖維、薄膜、塊狀等形式的敷料，并應(yīng)用于不同類型的創(chuàng)傷表面，有效降低傷口感染，促進(jìn)傷口愈合。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]本發(fā)明目的旨在通過與交聯(lián)劑的交聯(lián)，兩種網(wǎng)絡(luò)的互穿克服絲膠蛋白單獨使用力學(xué)強(qiáng)度差、共混或涂覆引起的抗菌性能下降等問題，提供高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料及其制備方法，滿足如慢性創(chuàng)面對敷料的多種物理和生理需求。
[0009]為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，提供以下方案:
[0010]本發(fā)明的抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料包括:球狀絲膠蛋白、絲膠交聯(lián)劑Ml、烯烴類單體M2、烯烴類單體交聯(lián)劑M3、引發(fā)劑M4和催化劑M5。
[0011]所述的絲膠，分子量為40?200KDa，黃色粉末，其中含絲氨酸為32.3%、天門冬氨酸為14.5%、甘氨酸為13.9%，其它為39.3%。
[0012]所述的絲膠交聯(lián)劑Ml是普魯蘭多糖、戊二醛、京尼平、殼聚糖、海藻酸鈉、甲殼素、聚乙二醇二縮水甘油醚、聚氨酯和聚乙二醇中的一種或任意兩種組成的混合物。
[0013]所述的烯烴類單體M2為丙烯酰胺、雙乙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、N-異丙基丙烯酰胺、N-羥甲基丙烯酰胺、2-( 二甲氨基)乙基-甲基丙烯酰胺、丙烯酸、甲基丙烯酸、2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸、丙烯酸叔丁酯、甲基丙烯酸-2-羥基乙酯、N-乙烯基吡咯烷酮、丙烯酸鈉、多縮乙二醇單甲基丙烯酸酯中的任意一種，以及其混合物。
[0014]所述的烯烴類單體交聯(lián)劑M3包括化學(xué)交聯(lián)劑和物理交聯(lián)劑，是硅酸鎂鋰、蒙脫土、鋰皂石、蒙皂石、N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺、哌嗪丙烯酰胺、二縮水甘油基乙醚、丙烯酸羥乙酯、二(甲基)丙烯酸乙二醇酯、雙甲基丙烯酰氧苯基丙烷、二甲基脲中的一種或任意兩種組成的混合物。
[0015]所述的引發(fā)劑M4為偶氮二異丁腈(AIBN)、過氧化二苯甲酰(BPO)、過硫酸銨(APS)或過硫酸鉀(KPS)中的任意一種。
[0016]所述的催化劑M5為N，N, N’ N’ -四甲基乙二胺、四甲基丙二胺和亞硫酸鈉中的任意一種。
[0017]本發(fā)明的抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法具體如下:
[0018](I)纖維狀絲膠基敷料的制備
[0019]I)絲膠溶液的配制:首先將絲膠溶于去離子水中，配置成質(zhì)量濃度為1_4?〖％的絲膠溶液，然后加入體積分?jǐn)?shù)為去離子水0.5?1.5倍的無水乙醇,攪拌10?30min后加入M2，再次攪拌10?30min直至形成略呈淡黃色的絲膠溶液；
[0020]2)紡絲原液的配制:將I)中的絲膠溶液通氮氣，5?20min后依次加入M4和M5，攪拌20?40min后移入35?45°C的水浴鍋中反應(yīng)6?16h，得到均勻的紡絲原液；
[0021]3)纖維狀絲膠基敷料的制備:將2)中的紡絲原液注入到紡絲管中，調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為15?25kV，絲距為8?16cm，微量注射泵紡絲液的喂入量為0.001?0.003mm/s,在基質(zhì)上制備出直徑為0.01?0.2mm的纖維狀絲膠基敷料；
[0022]4)抑菌性能檢測:將制得的纖維狀絲膠基敷料置于75%乙醇中，滅菌20?60min,然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD63tl進(jìn)行比較；
[0023](2)塊狀絲膠基凝膠敷料的制備
[0024]1)A液的制備:首先將絲膠在20?25°C下溶于去離子水中，攪拌15?30min后加入M2，控制絲膠:M2:去離子水質(zhì)量百分比為絲膠:2-10%，M2:8_30%，去離子水:60-90%，形成略呈淡黃色的反應(yīng)預(yù)聚液；
[0025]B液的制備:將交聯(lián)劑Ml和M3依次溶解于去離子水中，攪拌0.5?1.5h ;
[0026]2)將B液加入到A液中，冰水浴下攪拌10_20min，使其降溫至I?4°C，在氮氣保護(hù)和磁力攪拌下加入M4，攪拌10?30min后，注射M5，將溶液緩慢倒入厚度為0.5_2mm的玻璃器皿中，密封后進(jìn)行原位自由基聚合反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度在25?30°C，30?50h后停止反應(yīng)，然后進(jìn)行純化處理，得到所述的塊狀絲膠基凝膠敷料；
[0027]3)將制得的塊狀絲膠基凝膠敷料置于75%乙醇中，滅菌20?60min，用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD63tl進(jìn)行比較；
[0028](3)膜狀絲膠基敷料的制備
[0029]I)首先制得塊狀絲膠基敷料，然后置于網(wǎng)上自然干燥成膜；
[0030]2)將網(wǎng)上自然干燥的膜置于在37°C的去離子水中，脫膜10?30min，然后將脫下的膜浸泡于去離子水中I?3d，每間隔4?8h更換去離子水，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和各種雜質(zhì)，得到所述的膜狀絲膠基敷料；
[0031]3)將制得的膜狀絲膠基敷置于75%乙醇中，滅菌20?60min，然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD63tl進(jìn)行比較。
[0032]所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，M2、M4和M5的質(zhì)量百分比為:M2:98-99.98%, M4:0.01-1%, M5:0.01_1 %，所述的塊狀絲膠基敷料的制備中，Ml、M3和去離子水的質(zhì)量百分比為:M1:1-15%, M3:0.1-1%，去離子水:84-98.9%。
[0033]所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，絲膠先加入去離子水中是為避免絲膠在乙醇溶液中的團(tuán)聚和不溶。
[0034]所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，基質(zhì)是無紡布、鋁箔、錫箔、玻纖布、編織布、棉布中的任意一種。
[0035]所述的膜狀絲膠基敷料的制備中的網(wǎng)是鋼絲網(wǎng)、鐵絲網(wǎng)、鋁網(wǎng)、無紡布網(wǎng)、竹網(wǎng)、尼龍網(wǎng)、紗布中的任意一種。
[0036]所述的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備中，引發(fā)劑M4、催化劑M5和去離子水的質(zhì)量百分比為 M4:0.01-1%, M5:0.01-1%，去離子水:98-99.98%。
[0037]所述的塊狀絲膠基凝膠敷料的制備中的純化處理是用24號打孔器將反應(yīng)后的產(chǎn)物打孔切片，浸泡于去離子水中I?7d，每間隔4?8h更換去離子水，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和各種雜質(zhì)。
[0038]所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料具有愈合快、換藥不痛、縮短護(hù)士工作時間、抑菌、性價比高、無疼痛和換藥次數(shù)少的優(yōu)點，可用于組織修復(fù)、潰瘍、瘙癢、褥瘡、慢性傷口。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0039]圖1為塊狀絲膠基敷料對大腸桿菌的抑菌粘附后的表面對比圖:a為空白對敷料表面，b為塊狀敷料抑菌后的表面。
【具體實施方式】
[0040]下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。對實施例中得到的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料，采用Mi等Adv.Funct.Mater.，2011，21:4028-4034文獻(xiàn)公開方法進(jìn)行纖維、膜和塊狀絲膠基敷料對細(xì)菌生長的抑制作用。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，其他的任何未違背本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
[0041]實施例1
[0042]I)絲膠溶液的配制:首先將絲膠溶于去離子水中，配置成質(zhì)量濃度為2?〖％的絲膠溶液，然后加入體積分?jǐn)?shù)為去離子水I倍的無水乙醇，攪拌20min后加入甲基丙烯酸-2-羥基乙酯，再次攪拌20min直至形成略呈淡黃色的絲膠溶液；
[0043]2)紡絲原液的配制:將I)中的絲膠溶液通氮氣，1min后依次加入過硫酸鉀和亞硫酸鈉，攪拌30min后移入40°C的水浴鍋中反應(yīng)10h，得到均勻的紡絲原液；
[0044]3)纖維狀絲膠基敷料的制備:將2)中的紡絲原液注入到紡絲管中，調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為20kV，絲距為12cm，微量注射泵紡絲液的喂入量為0.002mm/s，在無紡布上制備出直徑為0.1mm的纖維狀絲膠/聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯敷料；
[0045]4)抑菌性能檢測:將制得的纖維狀絲膠/聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯敷料置于75%乙醇中，滅菌40min，然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD630為0.102，空白對照OD630為1.160。
[0046]實施例2
[0047]1)A液的制備:首先將絲膠在22°C下溶于去離子水中，攪拌20min后加入N-羥甲基丙烯酰胺，控制絲膠:N-羥甲基丙烯酰胺:去離子水質(zhì)量百分比為絲膠:5%，N-羥甲基丙烯酰胺:20%，去離子水:75%，形成略呈淡黃色的反應(yīng)預(yù)聚液；
[0048]B液的制備:將交聯(lián)劑普魯蘭多糖和蒙皂石依次溶解于去離子水中，攪拌Ih ；
[0049]2)將B液加入到A液中，冰水浴下攪拌15min，使其降溫至2°C，在氮氣保護(hù)和磁力攪拌下加入過硫酸銨，攪拌20min后，注射四甲基丙二胺，將溶液緩慢倒入厚度為2_的玻璃器皿中，密封后進(jìn)行原位自由基聚合反應(yīng),控制反應(yīng)溫度在28°C , 48h后停止反應(yīng),然后進(jìn)行純化處理，得到所述的絲膠/普魯蘭多糖/聚N-羥甲基丙烯酰胺塊狀凝膠敷料；
[0050]3)將制得的絲膠/普魯蘭多糖/聚N-羥甲基丙烯酰胺塊狀凝膠敷料置于75%乙醇中，滅菌40min，用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD630為0.894，空白對照OD630為1.023。
[0051]實施例3
[0052]I)首先制得絲膠/普魯蘭多糖/聚N-羥甲基丙烯酰胺塊狀凝膠敷料，然后置于銅網(wǎng)上自然干燥成膜；
[0053]2)將網(wǎng)上自然干燥的膜置于在37°C的去離子水中，脫膜30min，然后將脫下的膜浸泡于去離子水中2d，每間隔6h更換去離子水，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和各種雜質(zhì)，得到所述的絲膠/普魯蘭多糖/聚N-羥甲基丙烯酰胺膜狀敷料；
[0054]3)將制得的絲膠/普魯蘭多糖/聚N-羥甲基丙烯酰胺膜狀敷料置于75%乙醇中，滅菌40min，然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD630為0.092，空白對照OD630為1.207。
[0055]實施例4
[0056]1)A液的制備:首先將絲膠在22°C下溶于去離子水中，攪拌20min后加入N-異丙基丙烯酰胺，控制絲膠:N-異丙基丙烯酰胺:去離子水質(zhì)量百分比為絲膠:4%，N-異丙基丙烯酰胺:16%，去離子水:80%，形成略呈淡黃色的反應(yīng)預(yù)聚液；
[0057]B液的制備:將交聯(lián)劑京尼平和硅酸鎂鋰依次溶解于去離子水中，攪拌Ih ；
[0058]2)將B液加入到A液中，冰水浴下攪拌15min，使其降溫至2°C，在氮氣保護(hù)和磁力攪拌下加入過硫酸鉀，攪拌20min后，注射N，N，N’ N’ -四甲基乙二胺，將溶液緩慢倒入厚度為2mm的玻璃器皿中，密封后進(jìn)行原位自由基聚合反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度在28°C，48h后停止反應(yīng)，然后進(jìn)行純化處理，得到所述的絲膠/京尼平/聚N-異丙基丙烯酰胺/硅酸鎂鋰塊狀凝膠敷料；
[0059]3)將制得的絲膠/京尼平/聚N-異丙基丙烯酰胺/硅酸鎂鋰塊狀凝膠敷料置于75%乙醇中，滅菌40min，用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD630為0.086，空白對照OD630為1.127。
【權(quán)利要求】
1.高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料，其特征在于由球狀絲膠蛋白、絲膠交聯(lián)劑Ml、烯烴類單體M2、烯烴類單體交聯(lián)劑M3、引發(fā)劑M4和催化劑M5聚合而成，其中所述的絲膠，分子量為40?200KDa，黃色粉末，其中含絲氨酸為32.3%、天門冬氨酸為14.5%、甘氨酸為13.9%，其它為39.3%，所述的絲膠交聯(lián)劑Ml是普魯蘭多糖、戊二醛、京尼平、殼聚糖、海藻酸鈉、甲殼素、聚乙二醇二縮水甘油醚、聚氨酯和聚乙二醇中的一種或任意兩種組成的混合物，所述的烯烴類單體M2為丙烯酰胺、雙乙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、N-異丙基丙烯酰胺、N-羥甲基丙烯酰胺、2-( 二甲氨基)乙基-甲基丙烯酰胺、丙烯酸、甲基丙烯酸、2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸、丙烯酸叔丁酯、甲基丙烯酸-2-羥基乙酯、N-乙烯基吡咯烷酮、丙烯酸鈉、多縮乙二醇單甲基丙烯酸酯中的任意一種，以及其混合物，所述的烯烴類單體交聯(lián)劑M3包括化學(xué)交聯(lián)劑和物理交聯(lián)劑，是硅酸鎂鋰、蒙脫土、鋰皂石、蒙皂石、N，N’ -亞甲基雙丙烯酰胺、哌嗪丙烯酰胺、二縮水甘油基乙醚、丙烯酸羥乙酯、二(甲基)丙烯酸乙二醇酯、雙甲基丙烯酰氧苯基丙烷、二甲基脲中的一種或任意兩種組成的混合物，所述的引發(fā)劑M4為偶氮二異丁腈(AIBN)、過氧化二苯甲酰(BPO)、過硫酸銨(APS)或過硫酸鉀(KPS)中的任意一種，所述的催化劑M5為N，N，N’N’_四甲基乙二胺、四甲基丙二胺和亞硫酸鈉中的任意一種。
2.高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，包括下列步驟: (1)纖維狀絲膠基敷料的制備 1)絲膠溶液的配制:首先將絲膠溶于去離子水中，配置成質(zhì)量濃度為l_4wt%的絲膠溶液，然后加入體積分?jǐn)?shù)為去離子水0.5?1.5倍的無水乙醇,攪拌10?30min后加入M2,再次攪拌10?30min直至形成略呈淡黃色的絲膠溶液； 2)紡絲原液的配制:將I)中的絲膠溶液通氮氣，5?20min后依次加入M4和M5，攪拌20?40min后移入35?45°C的水浴鍋中反應(yīng)6?16h，得到均勻的紡絲原液； 3)纖維狀絲膠基敷料的制備:將2)中的紡絲原液注入到紡絲管中，調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為15?25kV，絲距為8?16cm，微量注射泵紡絲液的喂入量為0.001?0.003mm/s,在基質(zhì)上制備出直徑為0.01?0.2mm的纖維狀絲膠基敷料； 4)抑菌性能檢測:將制得的纖維狀絲膠基敷料置于75%乙醇中，滅菌20?60min，然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值0D630進(jìn)行比較； (2)塊狀絲膠基凝膠敷料的制備 1)A液的制備:首先將絲膠在20?25°C下溶于去離子水中，攪拌15?30min后加入M2，控制絲膠:M2:去離子水質(zhì)量百分比為絲膠:2-10%，M2:8_30%，去離子水:60-90%，形成略呈淡黃色的反應(yīng)預(yù)聚液； B液的制備:將交聯(lián)劑Ml和M3依次溶解于去離子水中，攪拌0.5?1.5h ; 2)將B液加入到A液中，冰水浴下攪拌10-20min，使其降溫至I?4°C，在氮氣保護(hù)和磁力攪拌下加入M4，攪拌10?30min后，注射M5，將溶液緩慢倒入厚度為0.5_2mm的玻璃器皿中，密封后進(jìn)行原位自由基聚合反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度在25?30°C，30?50h后停止反應(yīng)，然后進(jìn)行純化處理，得到所述的塊狀絲膠基凝膠敷料； 3)將制得的塊狀絲膠基凝膠敷料置于75%乙醇中，滅菌20?60min，用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD63tl進(jìn)行比較； (3)膜狀絲膠基敷料的制備 1)首先制得塊狀絲膠基敷料，然后置于網(wǎng)上自然干燥成膜； 2)將網(wǎng)上自然干燥的膜置于在37°C的去離子水中，脫膜10?30min，然后將脫下的膜浸泡于去離子水中I?3d，每間隔4?8h更換去離子水，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和各種雜質(zhì)，得到所述的膜狀絲膠基敷料； 3)將制得的膜狀絲膠基敷置于75%乙醇中，滅菌20?60min，然后用無菌的磷酸緩沖液沖洗3遍，然后用37°C的PBS恒溫浸泡12h后移至24孔板中，細(xì)菌生長的抑制作用通過MK3酶標(biāo)儀(Thermo，USA)檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌的光密度值OD63tl進(jìn)行比較。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，M2、M4和M5的質(zhì)量百分比為:M2:98-99.98%, M4:0.01-1%, M5:0.01_1 %，所述的塊狀絲膠基敷料的制備中，Ml、M3和去離子水的質(zhì)量百分比為:M1:1-15%, M3:0.1-1%，去離子水:84-98.9%。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，絲膠先加入去離子水中是為避免絲膠在乙醇溶液中的團(tuán)聚和不溶。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的纖維狀絲膠基敷料的制備中，基質(zhì)是無紡布、鋁箔、錫箔、玻纖布、編織布、棉布中的任意一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的膜狀絲膠基敷料的制備中的網(wǎng)是鋼絲網(wǎng)、鐵絲網(wǎng)、鋁網(wǎng)、無紡布網(wǎng)、竹網(wǎng)、尼龍網(wǎng)、紗布中的任意一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備中，引發(fā)劑M4、催化劑M5和去離子水的質(zhì)量百分比為 M4:0.01-1%, M5:0.01-1%，去離子水:98-99.98%。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的塊狀絲膠基凝膠敷料的制備中的純化處理是用24號打孔器將反應(yīng)后的產(chǎn)物打孔切片，浸泡于去離子水中I?7d，每間隔4?8h更換去離子水，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑和各種雜質(zhì)。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料的制備方法，其特征在于所述的高抑菌快愈合的纖維、膜和塊狀絲膠基敷料具有愈合快、換藥不痛、縮短護(hù)士工作時間、抑菌、性價比高、無疼痛和換藥次數(shù)少的優(yōu)點，可用于組織修復(fù)、潰瘍、瘙癢、褥瘡、慢性傷口。
【文檔編號】A61L15/20GK104368033SQ201410577212
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月23日
【發(fā)明者】張青松, 薛蕊, 陳冰潔, 高文軍, 鄭林寶, 劉亞龍, 興麗娟, 陳莉 申請人:天津工業(yè)大學(xué)