一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，由利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇組成，其中利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。其制備方法采用復(fù)乳法制備，離心得緩釋微球后凍干既得。本發(fā)明的制劑穩(wěn)定性良好，載藥量大，包封率高，加速試驗(yàn)條件不發(fā)生降解、聚集，且體內(nèi)安全性良好。
【專利說明】一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物制劑，尤其涉及一種多肽類藥物利拉魯肽的注射用緩釋微球 制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 利拉魯肽，英文通用名為liraglutide，是一種人工合成的人胰高血糖素樣肽-1 類似物，由31個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，其氨基酸序列為：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser -Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(N-ε-(Ν-α -Palmitoyl-L-y-glu tamyl))-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-〇H 〇
[0003] 目前市場(chǎng)上可以獲得的利拉魯肽制劑為注射劑，給藥途徑為皮下注射。由于多肽 藥物進(jìn)入體內(nèi)易被降解，血漿半衰期較短，因此需要每日給藥三次，由此導(dǎo)致患者順應(yīng)性較 低，容易忘記給藥，不利于患者自行給藥。
[0004] 多肽藥物的緩釋制劑通常采用化學(xué)修飾方法或采用緩釋制劑技術(shù)。其中對(duì)多肽藥 物進(jìn)行PEG修飾或融合蛋白修飾對(duì)延長(zhǎng)多肽藥物的體內(nèi)半衰期較為有效，但所制備的緩釋 制劑價(jià)格昂貴，導(dǎo)致患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)過重。
[0005] 緩釋制劑技術(shù)在多肽藥物中的應(yīng)用目前僅有及少數(shù)案例獲得成功。其中一種人胰 高血糖素樣肽-1類似物艾塞那肽（Exenatide)的緩釋制劑（商品名BYDURE0N)已在國(guó)外 被批準(zhǔn)上市。其緩釋制劑采用聚乙丙交酯和蔗糖作為輔料，具有顯著的緩釋效果，能夠有效 降低用藥頻率。但近年研宄證實(shí)，BYDURE0N與艾塞那肽的普通注射劑相比能夠顯著增加甲 狀腺C細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)，因此存在顯著的不良作用。該藥目前已被美國(guó)食品藥品管理局在說 明書中標(biāo)識(shí)黑框警告。
[0006] 關(guān)于利拉魯肽的緩釋制劑目前尚無該類產(chǎn)品上市。國(guó)內(nèi)公開的專利文獻(xiàn) CN102429876A(
【公開日】2012年5月2日）公開了一種利拉魯肽的緩釋微球制劑，由利拉魯 肽和生物可降解材料組成，其中生物可降解材料選自聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸嵌段共聚 物，乙交酯-丙交酯共聚物，聚乙醇酸、聚己內(nèi)酯、聚乳酸-羥基乙酸-聚己內(nèi)酯共聚物或 PLCG-聚己內(nèi)酯，或其中任意兩種或兩種以上的混合物。該緩釋微球制劑的體外累計(jì)釋放實(shí) 驗(yàn)顯示其緩釋可達(dá)28-30天。但該文獻(xiàn)說明書附圖部分給出的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示， 該緩釋微球給藥后第1、7、14、28天采血樣測(cè)定血糖濃度，結(jié)果采樣日均表現(xiàn)出顯著的血糖 峰谷現(xiàn)象，說明其體內(nèi)藥物釋放存在不穩(wěn)定的突釋現(xiàn)象，從而導(dǎo)致了血糖忽高忽低的問題， 以上問題在體外累計(jì)釋放實(shí)驗(yàn)中未能被發(fā)現(xiàn)，且上述制劑的體內(nèi)安全性尚未得到證實(shí)。對(duì) 于緩釋效果達(dá)到28-30天的緩釋制劑而言，隨有利于降低給藥頻率，但由于載藥量過大， 一旦出現(xiàn)藥物突釋即會(huì)導(dǎo)致血糖的急劇降低誘發(fā)低血糖昏迷等問題，因此，目前治療糖尿 病的多肽藥物的緩釋劑型或者經(jīng)化學(xué)修飾的緩釋多肽，通常設(shè)計(jì)為每日或每周給藥一次， 每月給藥一次的降血糖藥物，相對(duì)于其突釋風(fēng)險(xiǎn)而言，其緩釋效果的收益已不再重要，因此 此類緩釋制劑尚見被批準(zhǔn)上市。
[0007] 本發(fā)明人對(duì)利拉魯肽的緩釋微球制劑進(jìn)行了研宄，發(fā)現(xiàn)使用現(xiàn)有技術(shù)中的方法和 常規(guī)方法制備的利拉魯肽緩釋制劑存在不穩(wěn)定，突釋、包封率和載藥量不理想等諸多缺點(diǎn)， 而目前藥物緩釋微球制劑的研宄中，雖然根據(jù)藥物的理化性質(zhì)解決微球的載藥量和包封率 等技術(shù)問題已有一定的經(jīng)驗(yàn)可供遵循，但對(duì)提高微球的穩(wěn)定性以及有效避免藥物突釋問 題，尚缺乏可供普遍遵循的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)教導(dǎo)。尤其是對(duì)于人胰高血糖素樣肽-1類似物多肽 乙交酯-丙交酯共聚物緩釋微球制劑引發(fā)的甲狀腺C細(xì)胞癌風(fēng)險(xiǎn)，尚未見降低其發(fā)病率的 有效手段。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008] 針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于提供一種利拉魯肽的緩釋制劑，具體的說 是一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑。
[0009] 本發(fā)明的另一方面還提供了一種利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法。
[0010] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0011] 一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，其配方中包括利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚 乙烯醇，其中，利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。
[0012] 所述聚乙丙交酯中乙交酯、丙交酯的摩爾比例為30:70。
[0013] 本發(fā)明還提供本發(fā)明利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑的制備方法，包括以下步 驟：
[0014] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調(diào)整溶液濃度為6mg/ml，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0015] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲燒，調(diào)整溶液濃度為90mg/ml，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為 8. 0 ?8. 3 ;
[0016] 3)將內(nèi)水相與油相混合，冰浴條件下15000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時(shí)得初乳；
[0017] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為8. 0?8. 3 ;
[0018] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘得復(fù) 乳；
[0019] 6)將步驟5)所得復(fù)乳6000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0020] 所述步驟1)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào)節(jié)劑為碳酸氫鈉溶液；
[0021] 所述步驟2)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉溶液；
[0022] 所述步驟4)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào)節(jié)劑為磷酸二氫鈉緩沖溶液。
[0023] 本發(fā)明人對(duì)利拉魯肽的緩釋制劑進(jìn)行了大量研宄。在研宄過程中，本發(fā)明人驚奇 的發(fā)現(xiàn)，采用利用緩釋微球技術(shù)結(jié)合特殊材料的使用可獲得利拉魯肽的穩(wěn)定性良好、載藥 量大、包封率高的緩釋微球制劑，且采用本發(fā)明組方和制備工藝，能夠有效提高利拉魯肽緩 釋微球的穩(wěn)定性，避免藥物體內(nèi)突釋，且體外致突變實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的緩釋微球制劑無誘 癌風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明所采用的制備方法簡(jiǎn)單，工藝條件易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，并易于 得到質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，批間差異小，便于質(zhì)量控制。
【專利附圖】
【附圖說明】：
[0024] 附圖I :本發(fā)明實(shí)施例1制備的利拉魯肽緩釋微球制劑的藥時(shí)曲線，橫坐標(biāo)給藥后 時(shí)間-小時(shí)，縱坐標(biāo)血藥濃度-ng/ml，采血時(shí)間點(diǎn)為給藥后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0025] 附圖2 :本發(fā)明實(shí)施例2制備的利拉魯肽緩釋微球制劑的藥時(shí)曲線，橫坐標(biāo)給藥后 時(shí)間-小時(shí)，縱坐標(biāo)血藥濃度-ng/ml，采血時(shí)間點(diǎn)為給藥后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0026] 附圖3本發(fā)明實(shí)施例3制備的三種利拉魯肽緩釋微球制劑對(duì)比制劑的藥時(shí)曲線， 橫坐標(biāo)給藥后時(shí)間-小時(shí)，縱坐標(biāo)血藥濃度-ng/ml，采血時(shí)間點(diǎn)為給藥后第0、12、24、48、 72、96、120、144、168、192、216、240h。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的解釋。應(yīng)當(dāng)理解的是，以下實(shí)施例僅用于解 釋本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0028] 實(shí)施例1利拉魯肽注射用緩釋微球的制備
[0029] 配方
[0030] 利拉魯肽 IOmg
[0031] 聚乙丙交酯 150mg
[0032] 聚乙稀醇 300mg
[0033] 制備方法
[0034] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調(diào)整溶液濃度為6mg/ml，用碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié) pH 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0035] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，調(diào)整溶液濃度為90mg/ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)p 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0036] 3)將內(nèi)水相與油相混合，冰浴條件下15000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時(shí)得初乳；
[0037] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用磷酸二氫鈉緩沖溶液調(diào)節(jié)pH為8. 0?8. 3 ;
[0038] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘得復(fù) 乳；
[0039] 6)將步驟5)所得復(fù)乳6000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，
[0040] 凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0041] 實(shí)施例2利拉魯肽注射用緩釋微球的制備
[0042] 配方
[0043] 利拉魯肽 IOmg
[0044] 聚乙丙交酯 150mg
[0045] 聚乙稀醇 300mg
[0046] 制備方法
[0047] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調(diào)整溶液濃度為6mg/ml，用磷酸二氫鈉緩沖溶 液調(diào)節(jié)pH為8. 0?8. 3 ;
[0048] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，調(diào)整溶液濃度為90mg/ml，用碳酸氫鈉溶液溶液 調(diào)節(jié)pH為8.0?8.3 ;
[0049] 3)將內(nèi)水相與油相混合，冰浴條件下15000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時(shí)得初乳；
[0050] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用磷酸二氫鈉緩沖溶液調(diào)節(jié)pH為8. 0?8. 3 ;
[0051] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘得復(fù) 乳；
[0052] 6)將步驟5)所得復(fù)乳6000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0053] 實(shí)施例3利拉魯肽注射用緩釋微球的處方對(duì)比
[0054] 以利拉魯肽組方，制備成不同的緩釋制劑，測(cè)定包封率和載藥量等技術(shù)指標(biāo)，為對(duì) 比效果，設(shè)對(duì)比制劑三種，分別如下：
[0055] A :利拉魯肽，乙交酯、丙交酯摩爾比為50:50的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:0. 5:20,采用實(shí)施例1的制備方法制備。
[0056] B :利拉魯肽，乙交醋、丙交醋摩爾比為10:90的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:10:70,采用實(shí)施例2的制備方法制備。
[0057] C:利拉魯肽，乙交酯、丙交酯摩爾比為40:60的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:30:10,采用實(shí)施例1的制備方法制備。
[0058] 實(shí)施例1和實(shí)施例2的制劑分別用D、E代表。包埋率（％)按照如下公式計(jì)算包 埋率（％)=(微球載藥量/頭要比）X100%，其中投藥比（％)=[處方中藥物量八處 方中藥物量+處方中輔料量）]X100%。載藥量（％)按照如下公式計(jì)算：載藥量（％)= (微球中藥物含量/微球重量）X100%。
[0059]
【權(quán)利要求】
1. 一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，其特征在于，由利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙 烯醇組成，其中利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。乙交酯丙交酯。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑，其特征在于，所述聚乙丙交 酯中乙交酯、丙交酯的摩爾比例為30:70。
3. 權(quán)利要求1或2所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法，其特征在于，包括 以下步驟： 1) 將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調(diào)整溶液濃度為6mg/ml，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為 8. 0 ?8. 3 ; 2) 將聚乙丙交酯溶于二氯甲燒，調(diào)整溶液濃度為90mg/ml，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為 8. 0 ?8. 3 ; 3) 將內(nèi)水相與油相混合，冰浴條件下15000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24小時(shí) 得初乳； 4) 將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為8. 0?8. 3 ; 5) 將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘得復(fù)乳； 6) 將步驟5)所得復(fù)乳6000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖洗，凍 干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法，其特征在于，所 述步驟1)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào)節(jié)劑為碳酸氫鈉溶液；所述步驟2)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào) 節(jié)劑為氫氧化鈉溶液；所述步驟4)中調(diào)節(jié)pH值采用的調(diào)節(jié)劑為磷酸二氫鈉緩沖溶液。
【文檔編號(hào)】A61K47/34GK104434817SQ201410475284
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月17日
【發(fā)明者】蘇慶, 冷國(guó)慶, 厲保秋, 張琪, 蘇宏健, 趙麗, 劉懷萍 申請(qǐng)人:黑龍江泰華源生物技術(shù)有限責(zé)任公司