两个人的电影免费视频_国产精品久久久久久久久成人_97视频在线观看播放_久久这里只有精品777_亚洲熟女少妇二三区_4438x8成人网亚洲av_内谢国产内射夫妻免费视频_人妻精品久久久久中国字幕

針對(duì)β-NGF的適體及其在治療β-NGF介導(dǎo)的疾病和失調(diào)中的用途

文檔序號(hào):1313972閱讀:275來源:國(guó)知局
針對(duì)β-NGF的適體及其在治療β-NGF介導(dǎo)的疾病和失調(diào)中的用途
【專利摘要】本公開大體上涉及核酸的領(lǐng)域,更具體而言涉及能夠結(jié)合β-NGF的適體;包含這種β-NGF適體的藥物組合物;和制造并使用所述適體的方法。
【專利說明】針對(duì)β -NGF的適體及其在治療β -NGF介導(dǎo)的疾病和失調(diào)中的用途
[0001]本申請(qǐng)為申請(qǐng)日為2011年04月12日、申請(qǐng)?zhí)枮?01180018781.1、發(fā)明名稱為“針對(duì)β -NGF的適體及其在治療β -NGF介導(dǎo)的疾病和失調(diào)中的用途”的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
[0002]相關(guān)申請(qǐng)
[0003]本申請(qǐng)要求美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)61/323145(2010年4月12日提交)的權(quán)益,其通過引用全部并入本文。
[0004]于2011年4月I日創(chuàng)建的題為“Sequence_listing_ST25.txt”126千字節(jié)大小的序列表通過引用全部并入本文。
發(fā)明領(lǐng)域
[0005]本公開大體涉及核酸和更具體地涉及適體的領(lǐng)域,所述適體能夠結(jié)合神經(jīng)生長(zhǎng)因子,更具體而言神經(jīng)生長(zhǎng)因子的β亞基(“β-NGF”),并用作針對(duì)預(yù)防、治療或改善搔癢癥、搔癢性病癥和/或其他β-NGF已牽連其中的疾病或病癥的治療。本公開還涉及用于施用能夠結(jié)合β -NGF的適體的材料和方法。

【背景技術(shù)】
[0006]以下描述提供與本公開有關(guān)的信息概述,并且不是承認(rèn)本文引用的任何所提供的信息或出版物對(duì)本公開是現(xiàn)有技術(shù)。
[0007]嚴(yán)重的瘙癢每天負(fù)面地影響數(shù)以百萬計(jì)人的生活質(zhì)量。嚴(yán)重的瘙癢可能與多種健康狀態(tài)有聯(lián)系,包括瘙癢性皮膚病,例如疥瘡、濕疹、干皮癥、牛皮癬、蕁麻疹,以及系統(tǒng)性病癥,包括慢性肝臟或腎臟疾病和淋巴瘤。類似地,疼痛是常見的現(xiàn)象,其為看醫(yī)生的主要原因之一。疼痛可能與多種類型的損害或病癥有聯(lián)系,并且治療急性疼痛失敗可能導(dǎo)致慢性疼痛的問題以及免疫和代謝失調(diào)。除降低患有瘙癢癥和/或疼痛的個(gè)體的生活質(zhì)量,在特別是與搔癢性皮膚病以及慢性疼痛失調(diào)有關(guān)的醫(yī)療預(yù)算上也有顯著的影響。目前處理或治療搔癢和/或疼痛的努力被廣泛地認(rèn)為是不能勝任的。
[0008]神經(jīng)生理學(xué)研究已確認(rèn)癢途徑與疼痛途徑相比的區(qū)別。癢的感覺是由專門的C神經(jīng)元感知和傳遞,其區(qū)別于加工疼痛感覺的傷害性感受器(Schmelz, Neurosc1.B1behav.Rev.do1: 10.1016/j.neub1rev.2008.12.004,2009)。專門的 C 神經(jīng)元然后傳遞所述癢刺激至一類特化的背角神經(jīng)元并投身至丘腦(Stander and Schmelz, Eur.J.PainlO: 473,2006)。相信在周圍神經(jīng)末梢上沒有特異的癢受體而癢感C神經(jīng)元的特異性是基于其與癢途徑在脊髓的連接。在腦活動(dòng)模式中觀察到癢與疼痛的差異,例如缺少可檢測(cè)的來自癢感覺的丘腦和頂葉體感皮層的活動(dòng)(Yosipovitch等人,Lancet361:690.2003)。
[0009]一般將疼痛分類為急性的或慢性的。急性疼痛通常是組織損傷的反應(yīng),其特征是短暫并隨著最初損傷痊愈而解決。慢性疼痛是持續(xù)的并可能與創(chuàng)傷性事件沒有明顯的聯(lián)系。在疼痛的機(jī)械起源的基礎(chǔ)上可以進(jìn)一步將疼痛分類并包括傷害性的和非傷害性的。傷害性疼痛是由通過特異性刺激(損傷、炎癥、化學(xué)制品等)所激活的特異性的受體(傷害性受體)所介導(dǎo)的。傷害性疼痛可以進(jìn)一步劃分類為軀體的或內(nèi)臟的。軀體疼痛發(fā)生在組織中,例如皮膚、肌肉、關(guān)節(jié)、骨骼或韌帶。軀體疼痛是一般尖銳的和局部的。目前的治療包括使用的阿片類和非留體類抗炎癥藥物(NSAIDS)。內(nèi)臟疼痛發(fā)生在內(nèi)部器官中。它經(jīng)常地是定位不明的疼痛并且通常使用阿片類治療。
[0010]非傷害性疼痛可以進(jìn)一步分解成神經(jīng)性的或交感神經(jīng)性的。神經(jīng)性疼痛可能在周圍或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中出現(xiàn)。神經(jīng)性疼痛可能與退行性病癥、炎癥或感染性疾病有聯(lián)系。這類型的疼痛導(dǎo)致過敏感(痛覺過敏)并經(jīng)常被描述為刺痛或灼痛。治療可選方案包括N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)拮抗劑、抗心律不齊藥、抗驚厥藥或抗抑郁藥。神經(jīng)性疼痛經(jīng)常對(duì)常規(guī)的止痛藥是耐受的。交感神經(jīng)疼痛出現(xiàn)在交感神經(jīng)系統(tǒng)以及周圍和中樞神經(jīng)系統(tǒng)并且通常與某種類型的損傷有聯(lián)系。損傷的位置可能表現(xiàn)出增長(zhǎng)的過敏感和異常的溫度。治療通常涉及包括交感神經(jīng)阻斷、血管舒張、抗驚厥藥、抗心律不齊藥和抗抑郁藥的多藥物方案。
[0011]不推薦用阿片類止痛藥的常規(guī)和長(zhǎng)期的治療,因?yàn)榭紤]到潛在的成癮性、副作用、耐受性和對(duì)阿片類的依賴性。阿片類的副作用包括惡心、嘔吐、便秘、呼吸抑制等。對(duì)許多目前以幫助進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶弁纯刂频闹委?,存在缺乏效力、?yán)重的副作用和給藥方法不力。這些問題支持需要更好的疼痛控制療法。
[0012]雖然癢和疼痛是明顯地有區(qū)別的感覺,但在癢和疼痛之間有重要的相互作用。眾所周知可以通過刮擦引起的疼痛的感覺減少癢。然而,通過作用以降低疼痛的感覺的止痛藥(如阿片類)實(shí)際上可以增強(qiáng)癢的感覺。因此,一些針對(duì)疼痛的治療可以加劇癢的癥狀,這進(jìn)一步支持對(duì)更好的有治療癢和疼痛的潛力的治療的需要。
[0013]神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)性細(xì)胞因子或神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族中的一員。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子通過控制細(xì)胞的存活、分化和凋亡在周圍和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和維持中發(fā)揮關(guān)鍵作用。除了這些神經(jīng)系統(tǒng)的功能,NGF也已顯示出增加組胺的釋放、肥大細(xì)胞的產(chǎn)生和B淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。NGF也已顯示出調(diào)節(jié)某些脂質(zhì)介質(zhì)的嗜堿性生產(chǎn)。嗜中性粒細(xì)胞的凋亡也可以被NGF所抑制。所有這些因素暗示NGF在免疫系統(tǒng)中以及神經(jīng)系統(tǒng)中的作用。
[0014]NGFβ鏈(β-NGF)單獨(dú)地負(fù)責(zé)NGF的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激活性。在細(xì)胞中,β-NGF以二聚體存在并與神經(jīng)元和非神經(jīng)元細(xì)胞中的兩類細(xì)胞表面受體結(jié)合。該蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)基于三個(gè)胱氨酸二硫化物和兩個(gè)反向平行的β_鏈。人、小鼠和大鼠該蛋白的氨基酸的同源性是大約90%。像所有的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,β -NGF以ηΜ的親和力來結(jié)合ρ75細(xì)胞受體。β -NGF也以ηΜ的親和力來結(jié)合一種酪氨酸激酶受體(Trk),具體來說結(jié)合TrkA。與p75受體的反應(yīng)可以誘導(dǎo)細(xì)胞死亡而與TrkA結(jié)合促進(jìn)細(xì)胞存活。β β -NGF結(jié)合TrkA導(dǎo)致該受體和細(xì)胞內(nèi)部的蛋白質(zhì)的磷酸化。β-NGF通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞被內(nèi)化。在廣泛的非神經(jīng)組織中發(fā)現(xiàn)Trk受體。
[0015]從皮膚中的角質(zhì)形成細(xì)胞所釋放的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)是主要遞質(zhì)之一,所述遞質(zhì)通過(也包括其他)促進(jìn)神經(jīng)纖維發(fā)芽來增加皮膚的神經(jīng)密度并影響形態(tài)(Schmelz, Neurosc1.B1behav.Rev.do1:10.1016/j.neub1rev.2008.12.004, 2009)。已發(fā)現(xiàn)有慢性瘙癢的患者表現(xiàn)出增加的皮內(nèi)神經(jīng)纖維密度。另外,已發(fā)現(xiàn)NGF通過(在其他事項(xiàng)中)觸發(fā)NGF受體酪氨酸激酶TrkA來增加周圍神經(jīng)元的靈敏度(Stander andSchmelz, Eur.J.PainlO:473, 2006)。
[0016]可能由瘙癢和疼痛引起癥狀的異位性病癥中所測(cè)量的高濃度的NGF中表現(xiàn)出NGF在在介導(dǎo)瘙癢以及疼痛中的重要性。有異位性皮炎的患者具有極大地提高的NGF的血清水平,其與所述病癥的嚴(yán)重性正相關(guān)。有接觸性皮炎的患者具有更高的局部NGF濃度而有結(jié)節(jié)性癢疫的患者也表現(xiàn)出更高的NGF水平和TrkA活動(dòng)水平(Schmelz, Neurosc1.B1behav.Rev.do1: 10.1016/ j.neub1rev.2008.12.004, 2009)。
[0017]通過腹腔內(nèi)注射系統(tǒng)性施用抗NGF抗體在針對(duì)異位性皮炎的小鼠模型的癥狀上的效果已有研究,并且結(jié)果“暗示抗NGF抗體阻斷NGF對(duì)周圍神經(jīng)系統(tǒng)上的作用并抑制表皮神經(jīng)支配、皮炎和抓撓行為”(Takano等人,J.Pharmacol Sci99:211:284,2005)。然而,該研究發(fā)現(xiàn)抗-NGF抗體沒有改變血清NGF水平,沒有減少所測(cè)試的皮膚區(qū)域中的NGF濃度,并且沒有完全地抑制抓撓行為。因此,仍然存在更完全地減少或消除與異位性皮炎有關(guān)聯(lián)的瘙癢的需要。
[0018]不斷增長(zhǎng)的證據(jù)表明NGF作為某些疼痛狀態(tài)的遞質(zhì)起作用。已顯示抗NGF抗體可以產(chǎn)生持續(xù)的熱和化學(xué)止痛效果,以及阻斷由角叉菜膠(carrageenan)誘導(dǎo)的炎癥所發(fā)展的痛覺過敏(McMahon等人,Nat.Med.1:774, 1995)。針對(duì)阻斷NGF生物活性的小分子NGF受體拮抗劑的研究已表明在神經(jīng)性和炎癥性疼痛上的止痛效果(Owolabi等人,J.Pharmacol.Exp.Ther.289:1271, 1999)。在Owolabi等人的研究中,小分子NGF活性抑制劑的止痛效果可能小于嗎啡的效果,其取決于施用的途徑。由于阿片類(例如嗎啡)具有很多不需要的副作用,仍然有需要提供在由NGF介導(dǎo)的多種疼痛狀態(tài)中的止痛,其允許在有效施用中的靈活性。
[0019]概述
[0020]本公開提供與神經(jīng)生長(zhǎng)因子的β亞基結(jié)合的多種適體(在本文中單獨(dú)地稱為“ β -NGF適體”)和使用這種β -NGF適體來治療β -NGF介導(dǎo)的疾病和失調(diào)(包括疼痛和瘙癢和搔癢性病癥的治療)的方法。包括藥物組合物或制劑,其包含β-NGF適體或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
[0021]可以任何適合的藥學(xué)上可接受的劑量形式制備本公開的組合物。本文所描述的制劑和劑量,旨在在治療各種病癥(例如疼痛和瘙癢和搔癢病癥)中最大化臨床的效力,而同時(shí)減少或最小化不良副作用。
[0022]本公開還提供用于預(yù)防、治療或改善由β-NGF所介導(dǎo)的疾病或病癥的方法,所述方法包括給脊椎動(dòng)物,具體地哺乳動(dòng)物,更具體地人類施用β -NGF適體或所述β -NGF適體的藥物組合物。具體而言,本公開提供用于治療、預(yù)防或改善疼痛和瘙癢和搔癢性病癥的方法。在某些方面,所述β-NGF介導(dǎo)的疾病或病癥是這樣的疾病或病癥,其中在疾病某個(gè)階段,β-NGF活性可能直接或間接地導(dǎo)致瘙癢。在一些實(shí)施方案中,所要治療、防止或改善的疾病或病癥是皮炎或濕疹。在其它實(shí)施方案中,所要治療、防止或改善的疾病或病癥是異位性皮炎。
[0023]在一個(gè)實(shí)施方案中,通過施用β -NGF適體使所述適體暴露至β -NGF并能夠結(jié)合β-NGF(不論用于被治療的患者的遞送所述適體的方式)可以實(shí)現(xiàn)治療效果(例如治療、預(yù)防或改善疼痛和瘙癢和搔癢性病癥)。在一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方案中,通過施用所述β-NGF適體使其暴露于β-NGF并結(jié)合β-NGF,從而阻止或減少β-NGF與一或多種其不同細(xì)胞受體的結(jié)合可以實(shí)現(xiàn)治療效果。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述細(xì)胞受體是P75。在另一實(shí)施方案中,所述細(xì)胞受體是Trk受體。在又一實(shí)施方案中,所述細(xì)胞受體是TrkA。在又一實(shí)施方案中,所述β-NGF適體阻止或減少所述β-NGF受體和其它內(nèi)部的細(xì)胞蛋白質(zhì)的磷酸化水平。
[0024]所提供的方法包括與一或多種次級(jí)活性劑聯(lián)合施用β-NGF適體。這種施用可以是連續(xù)的或以組合組合物。
[0025]在另一方面,本公開提供體外診斷方法,其包括將β -NGF適體與疑似包含β -NGF的樣品接觸。在另一方面,本公開提供體內(nèi)診斷方法,其包括提供適當(dāng)?shù)貥?biāo)記的β-NGF適體,注射所述適體至疑似具有β -NGF介導(dǎo)的疾病或病癥的個(gè)體中,并出于診斷或評(píng)估所述個(gè)體的健康狀況的目的而檢測(cè)所述標(biāo)記的適體。將會(huì)按照所要使用的成像方式選擇所使用的標(biāo)記。
[0026]附圖簡(jiǎn)述
[0027]圖1展示針對(duì)適體2426-66( ) (SEQ ID NO:1)與隨機(jī)文庫(kù)(〇)相比的結(jié)合曲線。
[0028]圖2A和2B表示對(duì)適體2426-66 (SEQ ID NO:1)使用454測(cè)序鑒定的適體共有序列。
[0029]圖3展示針對(duì)β -NGF適體的二聚化策略#1。
[0030]圖4展示針對(duì)β -NGF適體的二聚化策略#2。
[0031]圖5圖形化地展示多種適體抑制人β -NGF誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞分化的能力,在實(shí)施例4中所描述的神經(jīng)突生長(zhǎng)測(cè)定中測(cè)試。
[0032]圖6圖形化地展示β -NGF介導(dǎo)的神經(jīng)突生長(zhǎng)的抑制,其作為適體2426_66 ( )(SEQ ID NO:1)與其截短變體2426-66-50(〇)(SEQ ID NO:2)的適體濃度的函數(shù),如實(shí)施例4所描述測(cè)量。
[0033]圖7圖形化地展示通過適體2426-66 (SEQ ID NO:1)和截短變體2426_66_50 (SEQID NO: 2)和 2426-66-53 (SEQ ID NO:43)的對(duì)人 β-NGF、小鼠 β-NGF 和大鼠 β-NGF 介導(dǎo)的神經(jīng)突生長(zhǎng)的抑制。所有三種適體與對(duì)人β -NGF幾乎一樣有效地抑制了小鼠β -NGF,并以更小的程度抑制了大鼠β-NGF。
[0034]圖8圖形化地展示使用適體2426-66 (SEQ ID NO:1)和截短變體2426_66_50 (SEQID NO: 2)和 2426-66-3 (SEQ ID NO: 5)的 TrkA 磷酸化測(cè)定的結(jié)果。
[0035]圖9圖形化地展示使用小鼠和大鼠(rate) β -NGF針對(duì)適體2426-66-50 (SEQ IDNO: 2)的TrkA磷酸化測(cè)定。
[0036]圖10表示用于制備本文所描述的適體的C-5嘧啶修飾。
[0037]圖11圖形化地展示在用適體2426-66-50 (SEQ ID NO: 2) (.)治療的患病小鼠中四個(gè)星期內(nèi)抓撓頻率的減少,但在未處理小鼠()或用親水性軟膏(HO)處理的小鼠(▲)中沒有減少,如實(shí)施例5中所描述的。在適體治療與未治療(*)之間或適體治療與HO治療(#)之間觀察到統(tǒng)計(jì)上顯著的差異(?〈0.05),其由〖檢驗(yàn)確定。
[0038]圖12圖形化地展示在用適體2426-66-50 (SEQ ID NO: 2) (.)治療的患病小鼠中四個(gè)星期內(nèi)臨床皮膚病癥的減少,但在未處理小鼠()或用親水性軟膏(HO)處理的小鼠(A)中沒有減少,如實(shí)施例5中所描述的。在適體治療與未治療(*)之間或適體治療與HO治療(#)之間觀察到統(tǒng)計(jì)上顯著的差異(ρ〈0.05),其由t檢驗(yàn)確定。
[0039]發(fā)明詳述
[0040]現(xiàn)在將會(huì)詳細(xì)描述本發(fā)明的代表性實(shí)施方案。雖然會(huì)結(jié)合所列舉的實(shí)施方案來描述本發(fā)明,但會(huì)理解本發(fā)明并非旨在限于這些實(shí)施方案。相反地,本發(fā)明旨在涵蓋如權(quán)利要求所限定的可以包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)的所有替代物、修改和等同物。
[0041]本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)承認(rèn)許多類似或等同于本文所描述的方法和材料,其可以在本發(fā)明的實(shí)施中使用并且在本發(fā)明的領(lǐng)域內(nèi)。本發(fā)明不以任何方式限于所描述的方法和材料。
[0042]除非另有定義,本文中所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有由本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。雖然在本發(fā)明的實(shí)施或測(cè)試中可以使用類似或等同于本文中所描述的任何方法、設(shè)備和材料,現(xiàn)在描述優(yōu)選的方法、設(shè)備和材料。
[0043]本公開中引用的所有出版物、出版的專利文獻(xiàn)和專利申請(qǐng)是本公開所屬的領(lǐng)域的技術(shù)水平的指示。本文所引用的所有出版物、出版的專利文獻(xiàn)和專利申請(qǐng)以相同程度來通過引用并入本文,正如每個(gè)單個(gè)出版物、公開的專利文件或?qū)@暾?qǐng)被具體地和單個(gè)地以通過引用并入。
[0044]如在本公開(包括附加權(quán)利要求)中所使用的,單數(shù)形式“一(a)”、“一(an)”和“所述(the) ”包括復(fù)數(shù)引用,除非所述內(nèi)容明確另有指定,并與“至少一”和“一或多”可交換地使用。因此,對(duì)“一個(gè)適體”的引用包括適體的混合物等。
[0045]如本文中所用的,術(shù)語“大約”代表數(shù)字?jǐn)?shù)值的不顯著的修改或改變,以致所述數(shù)字?jǐn)?shù)值相關(guān)的項(xiàng)的基本功能是不變的。
[0046]當(dāng)在本文中使用術(shù)語“每個(gè)”來指復(fù)數(shù)的項(xiàng)時(shí),旨在指所述項(xiàng)的至少兩個(gè)。不需要要求組成復(fù)數(shù)的所有項(xiàng)滿足關(guān)聯(lián)的額外限制。
[0047]如本文中所用的,術(shù)語“包含(comprises) ”、“包含(comprising) ”、“包括(includes) ”、“包括(including) ”、“含有(contains) ”,“含有(containing) ” 及其任何變體旨在涵蓋非獨(dú)占性的包含物,例如包含、包括或含有一種元素或一列表的元素的過程、方法、加工產(chǎn)品或物質(zhì)的組合物不僅包括那些元素還可能包括沒有明確地列出的或該過程、方法、加工產(chǎn)品或物質(zhì)的組合物的固有的其它元素。
[0048]如本文中所用的,術(shù)語“核苷酸”是指核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸,或其修飾的形式及其類似物。核苷酸包括種類,其包括嘌呤(例如,腺嘌呤、次黃嘌呤、鳥嘌呤和它們的衍生物和類似物)以及嘧啶(例如,胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶和它們的衍生物和類似物)。
[0049]如本文中所用的,互換地使用“核酸”、“寡核苷酸”和“多核苷酸”來指核苷酸的聚合物,并包括DNA、RNA、DNA/RNA雜交體和這些種類的核酸、寡核苷酸和多核苷酸的修飾,其中包括在所述核苷酸單位的任何位置上附加各種實(shí)體或部分。術(shù)語“多核苷酸”、“寡核苷酸”和“核酸”包括雙或單鏈分子以及三螺旋分子。核酸、寡核苷酸和多核苷酸是比術(shù)語適體更寬的術(shù)語,因此術(shù)語核酸、寡核苷酸和多核苷酸包括是適體的核苷酸的聚合物但術(shù)語核酸、寡核苷酸和多核苷酸不限于適體。
[0050]如本文中所用的,當(dāng)指寡核苷酸時(shí)使用術(shù)語“修飾”、“修飾的”、“修飾”意為所述寡核苷酸的四種組成核苷酸堿基(即A、G、T/U和C)的至少一種是天然存在的核苷酸的類似物或酯。在一些實(shí)施方案中,所述修飾的核苷酸賦予寡核苷酸核酸酶抗性。具有在C-5位的取代的嘧啶是修飾的核苷酸的實(shí)例。修飾可以包括主鏈修飾、甲基化、罕有的堿基配對(duì)的組合,例如異堿基異胞苷和異胍等。修飾也可以包括3’和5’的修飾,如加帽。其他修飾可以包括用類似物取代一或多種天然存在的核苷酸,核苷酸間的修飾,例如具有不帶電荷的鍵(例如甲基膦酸鹽、磷酸三酯、磷酸胺鹽(phosphoamidates)、氨基甲酸鹽等)的核苷酸間修飾和具有帶電荷的鍵(例如硫代磷酸鹽、二硫代磷酸鹽等)的核苷酸間修飾,有嵌入劑(例如吖啶、補(bǔ)骨脂素(psoralen)等)的核苷酸間修飾,含有螯合劑(例如金屬、放射性金屬、硼、氧化性金屬等)的核苷酸間修飾,含有烷化劑的核苷酸間修飾和有修飾的鍵(例如阿爾法異頭核酸等)的核苷酸間修飾。另外,通常存在于核苷酸的糖上的任何羥基可以由膦酸基或磷酸基來取代;由標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基團(tuán)來保護(hù);或被活化來制備額外的與其它核苷酸或固體支持物的連接。可以用胺、大約I至大約20個(gè)碳原子的有機(jī)加帽基團(tuán)部分、在一個(gè)實(shí)施方案中的大約10至大約80kDa的聚乙二醇(PEG)聚合物、在另一實(shí)施方案中的大約20至大約60kDa的PEG聚合物、或者其它的親水性或疏水性的生物的或合成的聚合物來磷酸化或取代所述5’和3’末端的OH基。在一個(gè)實(shí)施方案中,修飾是嘧啶的C-5位的修飾。通過直接在C-5位的酰胺鍵或其他類型的鍵可以產(chǎn)生這些修飾。
[0051]多核苷酸還可以含有本領(lǐng)域通常所知的核糖或脫氧核糖的類似形式,包括2’ -O-甲基_、2’ -O-烯丙基、2’ -氟-或2’ -疊氮基-核糖,碳環(huán)糖類似物,α -異頭糖,差向異構(gòu)糖如阿拉伯糖、木糖或來蘇糖,批喃糖,呋喃糖,景天庚醒糖,無環(huán)類似物和脫堿基核苷類似物如甲基核糖苷。如上所述,通過可選的連接基團(tuán)可以替代一或多個(gè)磷酸二酯鍵。這些可選的連接基團(tuán)包括其中磷酸被P(O)S( “硫代”)、P(S) S( “二硫代”)、(O)NR2 ( “酰胺”)、P (O) R, P (O) (O) 0R’、CO或CH2 ( “formacetal ”)替換的實(shí)施方案,其中每個(gè)R或R’獨(dú)立地是H或任選地含有醚(-0 -)鍵、芳基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基或芳烷基的取代的或未取代的烷基(1-20C)。并非所有的多核苷酸中的鍵都需要是相同的。糖、嘌呤和嘧啶的類似物形式的取代在設(shè)計(jì)終產(chǎn)物中可以是有利的,例如像多酰胺主鏈的可選主鏈結(jié)構(gòu)也可以是有利的。
[0052]如本文中所用的,術(shù)語“C-5修飾的嘧啶”是指有C-5位上的修飾的嘧啶,所述修飾包括但不限于圖10中所示的那些部分。c-5修飾的嘧啶的實(shí)例包括美國(guó)專利號(hào)5719273和5945527以及美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)61/264545 (2009年11月25日提交,題為“核酸酶抗性寡核苷酸”)中所描述的那些。C-5修飾的實(shí)例包括C-5位上的脫氧尿嘧啶由取代基所取代,所述取代基獨(dú)立地選自:苯甲基甲酰胺(或者苯甲基氨基羰基)(Bn)、萘基甲基甲酰胺(或者萘基甲基氨基羰基)(NAP)、色氨基甲酰胺(或者色氨基羰基)(Trp)和異丁基甲酰胺(或者異丁基氨基羰基)(IBU),如緊接著下面所示。
[0053]

【權(quán)利要求】
1.藥物組合物,其包含結(jié)合β-NGF的適體或其藥學(xué)上可接受的鹽或其片段以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑,所述適體包含選自SEQ.1D.NO: 1,2,9-44和149的序列。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物,其中所述適體抑制β-NGF的功能。
3.權(quán)利要求1的藥物組合物,其中所述適體能夠調(diào)節(jié)β-NGF與其一或多種細(xì)胞受體的
4.權(quán)利要求3的藥物組合物,其中所述細(xì)胞受體選自p75或TrkA。
5.權(quán)利要求4的藥物組合物,其中所述適體包含與SEQID N0:l、2、9-44和149中的任一具有至少大約90%相同性、至少大約91%相同性、至少大約92%相同性、至少大約93%相同性、至少大約94%相同性或至少大約95%相同性的序列。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的藥物組合物,所述組合物還包含稀釋劑、抗微生物劑、結(jié)合劑、填充劑、潤(rùn)濕劑、懸浮劑、軟化劑和乳化劑。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的藥物組合物,其中所述藥物組合物是選自霜?jiǎng)?、洗劑、軟膏、凝膠、浸潰敷料、氣霧劑、含藥粉末、含藥粘合劑和泡沫的局部制劑。
8.權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)的適體在生產(chǎn)藥物中的用途。
9.權(quán)利要求8的用途,其中所述藥物是包含適體的用于治療、預(yù)防或改善由β-NGF介導(dǎo)的疾病的 藥劑。
10.權(quán)利要求9的用途,其中所述β-NGF介導(dǎo)的疾病或病癥是這樣的疾病或病癥,其中在疾病進(jìn)程中的某個(gè)階段,β -NGF活性可能直接或間接地導(dǎo)致瘙癢。
11.權(quán)利要求9或10的用途,其中所述疾病或病癥是皮炎或濕疹。
12.權(quán)利要求11的用途,其中所述皮炎是異位性皮炎。
【文檔編號(hào)】A61P17/04GK104069512SQ201410340470
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2011年4月12日 優(yōu)先權(quán)日:2010年4月12日
【發(fā)明者】D·J·施奈德, 久美奈明彥, S·沃, D·雷尼考, 長(zhǎng)嚢晃, 小野俊秀 申請(qǐng)人:私募蛋白質(zhì)體公司, 大冢制藥株式會(huì)社
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 大型黄色视频在线免费观看| 真人做人爱边吃奶动态| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲av成人av| 他把我摸到了高潮在线观看| 少妇丰满av| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 99热6这里只有精品| 日本一二三区视频观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲乱码一区二区免费版| 日韩免费av在线播放| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲av片天天在线观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 午夜成年电影在线免费观看| 久久这里只有精品19| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 在线观看午夜福利视频| 久久久久久久午夜电影| 国产精品,欧美在线| 国产高清激情床上av| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产乱人视频| 老汉色∧v一级毛片| 成年版毛片免费区| 精品福利观看| 亚洲最大成人中文| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 99热精品在线国产| 一级毛片女人18水好多| 最近最新中文字幕大全电影3| 精品午夜福利视频在线观看一区| 女警被强在线播放| 国产真实乱freesex| 男人的好看免费观看在线视频| 成人特级av手机在线观看| 美女黄网站色视频| 久久精品国产清高在天天线| 少妇人妻一区二区三区视频| 男人舔女人的私密视频| 亚洲电影在线观看av| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 九九在线视频观看精品| 少妇熟女aⅴ在线视频| 中文资源天堂在线| 9191精品国产免费久久| 一级毛片精品| 怎么达到女性高潮| 精品久久久久久久久久免费视频| 久久人妻av系列| 午夜影院日韩av| 久久久久久人人人人人| 久久香蕉精品热| h日本视频在线播放| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久人妻av系列| 美女 人体艺术 gogo| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 搡老熟女国产l中国老女人| 色尼玛亚洲综合影院| 久久精品国产综合久久久| 欧美中文日本在线观看视频| 久久久久性生活片| 日本黄色片子视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美3d第一页| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 色综合欧美亚洲国产小说| 日本黄色片子视频| 少妇的丰满在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| www国产在线视频色| 性欧美人与动物交配| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲成人久久爱视频| 熟女人妻精品中文字幕| 在线免费观看不下载黄p国产 | 免费人成视频x8x8入口观看| 九色国产91popny在线| 女人被狂操c到高潮| 久久久久性生活片| 欧美成人免费av一区二区三区| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲精品456在线播放app | 两人在一起打扑克的视频| 最近最新免费中文字幕在线| 日本 欧美在线| 欧美黑人巨大hd| 免费观看的影片在线观看| 青草久久国产| 日本一二三区视频观看| 在线观看午夜福利视频| 性色avwww在线观看| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 人人妻人人看人人澡| 亚洲在线自拍视频| 久久人妻av系列| 99热精品在线国产| 中文字幕av在线有码专区| 色综合婷婷激情| 久久久久久久久中文| 免费一级毛片在线播放高清视频| 老司机福利观看| 成人18禁在线播放| 午夜成年电影在线免费观看| 久久久成人免费电影| 午夜福利18| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品人妻1区二区| 男人舔奶头视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 精品久久久久久,| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产乱人视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 日韩欧美国产一区二区入口| 精品电影一区二区在线| 精品国产亚洲在线| 动漫黄色视频在线观看| 两个人的视频大全免费| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 久99久视频精品免费| 国产亚洲欧美98| 国产v大片淫在线免费观看| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美国产日韩亚洲一区| 色视频www国产| www.精华液| 久久热在线av| 国产伦精品一区二区三区四那| 欧美日韩精品网址| 手机成人av网站| 亚洲色图av天堂| 日韩精品中文字幕看吧| 国语自产精品视频在线第100页| 黑人操中国人逼视频| 美女免费视频网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 他把我摸到了高潮在线观看| 岛国视频午夜一区免费看| 九九热线精品视视频播放| 我要搜黄色片| 男女之事视频高清在线观看| 成人无遮挡网站| 后天国语完整版免费观看| 夜夜夜夜夜久久久久| 日韩欧美在线二视频| 看片在线看免费视频| 国产亚洲精品av在线| 一个人看视频在线观看www免费 | 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产免费男女视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 在线国产一区二区在线| 国产激情久久老熟女| www.熟女人妻精品国产| 男女那种视频在线观看| 国产99白浆流出| 免费无遮挡裸体视频| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲专区中文字幕在线| 嫩草影视91久久| 国产不卡一卡二| 国产欧美日韩精品亚洲av| 久久精品综合一区二区三区| 极品教师在线免费播放| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲五月婷婷丁香| 成人永久免费在线观看视频| 麻豆av在线久日| tocl精华| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 日本在线视频免费播放| 中文字幕久久专区| 757午夜福利合集在线观看| 在线播放国产精品三级| 国产 一区 欧美 日韩| 日韩欧美在线乱码| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲专区国产一区二区| 一进一出抽搐gif免费好疼| www日本黄色视频网| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 中文字幕熟女人妻在线| 最近最新免费中文字幕在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲在线观看片| 伦理电影免费视频| 99久久精品一区二区三区| 亚洲无线观看免费| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲电影在线观看av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 久久久水蜜桃国产精品网| 91av网站免费观看| 国产精华一区二区三区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| www.精华液| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| av中文乱码字幕在线| 亚洲18禁久久av| 精品一区二区三区视频在线 | 啪啪无遮挡十八禁网站| 久99久视频精品免费| 欧美中文综合在线视频| 欧美最黄视频在线播放免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 精品人妻1区二区| 婷婷精品国产亚洲av| 12—13女人毛片做爰片一| 日韩欧美精品v在线| 亚洲国产中文字幕在线视频| 特大巨黑吊av在线直播| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产成+人综合+亚洲专区| 1000部很黄的大片| 一a级毛片在线观看| 深夜精品福利| 国产精品av久久久久免费| 桃红色精品国产亚洲av| 国产97色在线日韩免费| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美zozozo另类| 男女视频在线观看网站免费| 黄色片一级片一级黄色片| 婷婷丁香在线五月| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品99久久久久久久久| av天堂中文字幕网| 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久这里只有精品中国| 99国产综合亚洲精品| 成人无遮挡网站| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 91老司机精品| 一个人看视频在线观看www免费 | 国产亚洲精品综合一区在线观看| 在线观看66精品国产| 久久久久亚洲av毛片大全| 美女黄网站色视频| 18禁美女被吸乳视频| 久久久国产成人免费| 一本精品99久久精品77| 特级一级黄色大片| av在线蜜桃| 免费av毛片视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 午夜精品在线福利| 久久伊人香网站| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产成人系列免费观看| 免费av毛片视频| 日本a在线网址| 一进一出抽搐动态| 国产人伦9x9x在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产精品久久电影中文字幕| 9191精品国产免费久久| 免费在线观看影片大全网站| 1024香蕉在线观看| a级毛片a级免费在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 在线观看免费午夜福利视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲精品在线观看二区| 日韩av在线大香蕉| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久伊人香网站| 成人国产综合亚洲| 色综合欧美亚洲国产小说| 在线观看舔阴道视频| 久久久久久九九精品二区国产| 岛国视频午夜一区免费看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产亚洲精品av在线| ponron亚洲| 国产一区二区激情短视频| 麻豆成人午夜福利视频| 国产人伦9x9x在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产激情偷乱视频一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 变态另类丝袜制服| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产激情偷乱视频一区二区| 一区二区三区高清视频在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 一本久久中文字幕| 国产综合懂色| 欧美三级亚洲精品| 国产精品免费一区二区三区在线| 午夜福利在线观看吧| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 成年版毛片免费区| 国产伦精品一区二区三区视频9 | www日本在线高清视频| 久久精品人妻少妇| 一二三四社区在线视频社区8| tocl精华| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产91精品成人一区二区三区| a级毛片在线看网站| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲成av人片在线播放无| 三级国产精品欧美在线观看 | 999久久久国产精品视频| 亚洲av免费在线观看| 一本一本综合久久| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美黑人巨大hd| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产av在哪里看| 国产不卡一卡二| 国产黄色小视频在线观看| 美女高潮的动态| 国产精品乱码一区二三区的特点| 中文资源天堂在线| 国产三级中文精品| 久久中文字幕人妻熟女| 国产97色在线日韩免费| 亚洲无线观看免费| 最好的美女福利视频网| 精品免费久久久久久久清纯| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美日韩福利视频一区二区| 色综合婷婷激情| 日本 av在线| 久久久久久久久久黄片| 国产精品av久久久久免费| 三级毛片av免费| 国产伦精品一区二区三区四那| 午夜福利高清视频| 久久久久久国产a免费观看| 两性夫妻黄色片| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产高潮美女av| 视频区欧美日本亚洲| 很黄的视频免费| 9191精品国产免费久久| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 一夜夜www| 欧美丝袜亚洲另类 | 99久久综合精品五月天人人| 麻豆成人av在线观看| 1024香蕉在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 一级毛片高清免费大全| 国产三级在线视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美成人免费av一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av| 久久精品综合一区二区三区| 久久性视频一级片| 亚洲av成人精品一区久久| av在线蜜桃| 久久精品综合一区二区三区| 首页视频小说图片口味搜索| 不卡av一区二区三区| 婷婷六月久久综合丁香| a在线观看视频网站| 日韩大尺度精品在线看网址| 神马国产精品三级电影在线观看| 观看美女的网站| www.熟女人妻精品国产| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日日夜夜操网爽| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 丰满人妻一区二区三区视频av | 人人妻人人澡欧美一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 日韩国内少妇激情av| 男女下面进入的视频免费午夜| 在线观看午夜福利视频| 一本精品99久久精品77| 国产精品久久久久久精品电影| 色综合站精品国产| 热99re8久久精品国产| 国产精品亚洲美女久久久| 男女下面进入的视频免费午夜| 十八禁人妻一区二区| 一级毛片女人18水好多| 午夜影院日韩av| 嫩草影院入口| 国产探花在线观看一区二区| 午夜免费成人在线视频| 亚洲av熟女| 一级毛片女人18水好多| 亚洲国产精品999在线| a级毛片在线看网站| 久久久精品大字幕| 国产成人系列免费观看| 国产麻豆成人av免费视频| 一本综合久久免费| 久久精品国产清高在天天线| 在线观看免费午夜福利视频| 精品福利观看| 国产一区二区激情短视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产一区二区三区视频了| 欧美日韩乱码在线| 色尼玛亚洲综合影院| 精品电影一区二区在线| 性色av乱码一区二区三区2| 精品久久久久久久久久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 极品教师在线免费播放| 日本三级黄在线观看| 久久久久久人人人人人| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲黑人精品在线| 99热精品在线国产| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产高潮美女av| 淫秽高清视频在线观看| 成人三级做爰电影| 女同久久另类99精品国产91| 国产高清视频在线观看网站| 最新在线观看一区二区三区| 网址你懂的国产日韩在线| 国产欧美日韩一区二区三| 国产真实乱freesex| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 午夜激情欧美在线| 麻豆成人av在线观看| 亚洲国产欧美人成| www国产在线视频色| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 热99re8久久精品国产| 婷婷精品国产亚洲av| 国产三级黄色录像| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久亚洲真实| 啦啦啦韩国在线观看视频| www日本黄色视频网| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 我要搜黄色片| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 91av网站免费观看| 久久久久久久久免费视频了| 国产野战对白在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲无线观看免费| 亚洲激情在线av| 国产日本99.免费观看| 亚洲精品在线美女| 欧美激情在线99| 看黄色毛片网站| 久久久久久久久久黄片| 特大巨黑吊av在线直播| 999久久久国产精品视频| 毛片女人毛片| 老司机在亚洲福利影院| 嫩草影院精品99| 中文字幕久久专区| 精华霜和精华液先用哪个| 91久久精品国产一区二区成人 | 香蕉国产在线看| 国产午夜精品论理片| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久久国产精品麻豆| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产精品,欧美在线| 国产成人aa在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品久久久久久精品电影| 精品欧美国产一区二区三| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| av黄色大香蕉| 91av网一区二区| 久久这里只有精品19| 国产乱人伦免费视频| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产69精品久久久久777片 | cao死你这个sao货| 中文字幕av在线有码专区| 99热只有精品国产| svipshipincom国产片| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产成人aa在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 夜夜爽天天搞| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久精品综合一区二区三区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 久久中文看片网| 伦理电影免费视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 又爽又黄无遮挡网站| 99国产极品粉嫩在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 岛国在线观看网站| 黄色视频,在线免费观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产私拍福利视频在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 人人妻人人澡欧美一区二区| 1024手机看黄色片| 国产一区二区三区视频了| 欧美黑人巨大hd| 欧美日韩精品网址| 一夜夜www| 久久精品国产综合久久久| 久久香蕉国产精品| 天堂网av新在线| 国产主播在线观看一区二区| 两人在一起打扑克的视频| 日韩欧美 国产精品| 欧美色视频一区免费| 欧美精品啪啪一区二区三区| a级毛片a级免费在线| 看片在线看免费视频| 天堂动漫精品| 观看免费一级毛片| 久久亚洲精品不卡| www国产在线视频色| www.自偷自拍.com| 国产成人aa在线观看| 三级国产精品欧美在线观看 | 看黄色毛片网站| 国产午夜精品久久久久久| 级片在线观看| 丰满的人妻完整版| 校园春色视频在线观看| 成人三级黄色视频| 国产成人欧美在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 熟女人妻精品中文字幕| 999久久久精品免费观看国产| 俺也久久电影网| 一级黄色大片毛片| 国产一区在线观看成人免费| 欧美日韩综合久久久久久 | 成人三级黄色视频| 国产亚洲欧美98| 午夜免费成人在线视频| 国产日本99.免费观看| 熟女电影av网| 国产精品久久视频播放| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 真人一进一出gif抽搐免费| 日本黄色视频三级网站网址| 男人的好看免费观看在线视频| 国产成+人综合+亚洲专区| av在线天堂中文字幕| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 叶爱在线成人免费视频播放| 一级毛片高清免费大全| 淫秽高清视频在线观看| 中文字幕高清在线视频| 亚洲国产欧美人成| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲九九香蕉| 无限看片的www在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 十八禁网站免费在线| 看免费av毛片| 国产三级黄色录像| 一级毛片精品| 久久热在线av| 手机成人av网站| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精品国产高清国产av| 欧美在线一区亚洲| 久久国产精品影院| 禁无遮挡网站| 日本黄大片高清| 亚洲人成电影免费在线| 嫩草影视91久久| 欧美黄色淫秽网站| 欧美在线黄色| 伦理电影免费视频| 免费av毛片视频|