亞甲藍(lán)的一種抗急性腦缺血損傷用途

亞甲藍(lán)的一種抗急性腦缺血損傷用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及亞甲藍(lán)(methylene?blue，MB)的一種抗急性腦缺血新用途。亞甲藍(lán)能夠明顯減小由永久性大腦中動(dòng)脈閉塞(middle?cerebral?artery?occlusion，MCAO)引起的腦缺血梗死灶，緩解神經(jīng)功能的損傷。本發(fā)明的 申請(qǐng)人:采用線(xiàn)栓法將大鼠大腦中動(dòng)脈永久性閉塞，即刻及腦缺血后不同時(shí)間點(diǎn)多次腹腔注射亞甲藍(lán)后，觀察大鼠永久性腦缺血梗死的程度及行為學(xué)的改變。研究發(fā)現(xiàn)亞甲藍(lán)能夠明顯減小由腦缺血造成的梗死體積，提高大鼠在腦缺血后的行為能力。通過(guò)本發(fā)明的方法，在腦缺血后多次給予合適劑量的臨床用藥亞甲藍(lán)，就能夠顯著減輕大鼠永久性腦缺血后的損傷程度，改善大鼠腦缺血后的行為能力。亞甲藍(lán)的此種用途，有望為臨床提供一種腦卒中后的急救治療措施，減輕患者因?yàn)殄e(cuò)過(guò)黃金治療期帶來(lái)的永久性神經(jīng)功能損傷。
【專(zhuān)利說(shuō)明】亞甲藍(lán)的一種抗急性腦缺血損傷用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及亞甲藍(lán)的一種抗急性腦缺血損傷用途。大鼠經(jīng)大腦中動(dòng)脈閉塞缺血后，立即腹腔注射亞甲藍(lán)，并在缺血后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)給藥，能夠明顯減小大鼠永久性腦缺血后梗死灶的體積，提高大鼠的行為能力。
【背景技術(shù)】
[0002]缺血性腦卒中占腦卒中病人總數(shù)的70%-80%，它是導(dǎo)致成人殘疾的首因。治療缺血性腦卒中的藥物多達(dá)幾十種之多，但目前的用藥多以溶栓為主，有些藥物副作用還很大，即便如此，由于時(shí)間窗的問(wèn)題(得病后6小時(shí)以?xún)?nèi)，3小時(shí)以?xún)?nèi)為黃金治療期)，在我國(guó)僅有1.6%的患者能夠得到及時(shí)的溶栓治療，即使在美國(guó)也只有5%的病人能得到及時(shí)溶栓治療。因此，能緩解急性期的腦缺血損傷和減輕隨后的永久性腦梗死的救治藥物凸顯尤為重要。
[0003]亞甲藍(lán)(化學(xué)式C16H18C1N3S)又稱(chēng)亞甲基藍(lán)、次甲基藍(lán)、次甲藍(lán)、美藍(lán)、品藍(lán)、甲烯藍(lán)、瑞士藍(lán)。亞甲藍(lán)屬于芳香雜環(huán)化合物，1876年由Heinrich Caro合成，自1890s起用于實(shí)驗(yàn)室和臨床。亞甲藍(lán)在臨床上的應(yīng)用包括以下幾個(gè)方面:1.低濃度時(shí)，亞甲藍(lán)能使高鐵血紅蛋白還原為氧合血紅蛋白，故亞甲監(jiān)可治療聞鐵血紅蛋白血癥。2.聞濃度時(shí)，亞甲監(jiān)能將氧合血紅蛋白的鐵氧化為三價(jià)鐵，而形成高鐵血紅蛋白，利用此作用可治療氰化物中毒。
3.亞甲藍(lán)能使膀胱結(jié)石 溶解，故可用于尿路結(jié)石，對(duì)草酸鈣結(jié)石療效較好。4.亞甲藍(lán)與神經(jīng)組織有較強(qiáng)的親和力，可作用于神經(jīng)末梢，治療神經(jīng)性皮炎。5.其他治療:亞甲藍(lán)還可以治療感染性休克、閉塞性脈管炎、血管瘤等。此外，有研究報(bào)道亞甲藍(lán)在大鼠腦缺血再灌損傷中具有保護(hù)作用，提示可能用于腦缺血溶栓治療后的保護(hù)作用。但是目前能夠及時(shí)得到溶栓治療的患者只占缺血性腦卒中患者的2%左右，亞甲藍(lán)對(duì)另外98%錯(cuò)過(guò)黃金治療期而帶來(lái)的永久性神經(jīng)功能損傷的患者是否能起到保護(hù)作用尚未見(jiàn)研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明公開(kāi)了亞甲藍(lán)的一種抗急性腦缺血損傷用途。大鼠經(jīng)大腦中動(dòng)脈閉塞后即刻腹腔注射亞甲藍(lán)((本發(fā)明中應(yīng)用的亞甲藍(lán)由Amresco公司生產(chǎn)，優(yōu)選的用藥劑量是Img/kg, 5mg/kg, 10mg/kg,更優(yōu)選的是5mg/kg),并在缺血后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)繼續(xù)給藥,能夠明顯減小大鼠永久性腦缺血造成的梗死體積，改善大鼠的行為能力。通過(guò)本發(fā)明的方法，采用在適宜時(shí)間注射合適劑量的亞甲藍(lán)，就能夠提高大鼠等動(dòng)物對(duì)抗急性腦缺血損傷的能力，為臨床治療缺血性腦卒中提供了有力的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。若能得以推廣到人體應(yīng)用，將有較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
[0005]本發(fā)明的 申請(qǐng)人:采用線(xiàn)栓法對(duì)成年大鼠進(jìn)行大腦中動(dòng)脈閉塞造成局灶性腦缺血，栓塞后即刻經(jīng)腹腔注射不同劑量的亞甲藍(lán)，并在缺血后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)給予上述劑量的亞甲藍(lán)注射，在缺血24小時(shí)后觀察大鼠的行為能力和腦梗死程度，評(píng)價(jià)亞甲藍(lán)對(duì)急性腦缺血損傷的保護(hù)作用?！揪唧w實(shí)施方式】
[0006]材料:
[0007]I)戊巴比妥鈉，德國(guó)進(jìn)口，北京試劑公司分裝。
[0008]2)1%戊巴比妥鈉注射液:取Ig戊巴比妥鈉粉末，溶于10ml生理鹽水中，充分混勻，制成I %戊巴比妥鈉注射液100ml，用于動(dòng)物麻醉，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.5ml/100g
用量使用。
[0009]3)亞甲藍(lán)(methylene blue, MB)分子式C16H18C1N3S是雜環(huán)芳香族染料，屬于噻嗪類(lèi)染料家族，無(wú)臭深藍(lán)色晶體，溶于水和氯仿，但不溶于酒精，避光保存，Amresco公司生產(chǎn)，效期安全。其水溶液呈藍(lán)色，現(xiàn)用現(xiàn)配。
[0010]4) 10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:稱(chēng)取90mg亞甲藍(lán)粉末，溶于30ml生理鹽水中，充分混勻，制成3mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液30ml，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得10mg/kg的實(shí)際用量。
[0011]5) 5mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:取上述配制的10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液1ml,溶于1ml生理鹽水中，充分混勻，制成1.5mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液20ml,以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得5mg/kg的實(shí)際用量。
[0012]6) lmg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:取上述配制的10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液2ml,溶于18ml生理鹽水中，充分混勻，制成0.3mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液20ml，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得lmg/kg的實(shí)際用量。
[0013]7)氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-Triphenyltetrazolium chloride, TTC),分子式C19H15C1N4,白色至淺黃色結(jié)晶粉末，用作分析試劑和色譜分析試劑，sigma公司進(jìn)口，避光保存。
[0014]8)1% TTC溶液:取0.1gTTC粉末，溶于1ml純水中，充分混勻，制成1% TTC溶液10ml，用于腦片的染色，用時(shí)避光，37°C。
[0015]9)成年雄性SD大鼠，體重280_320g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)在室溫22-25°C，12h晝夜循環(huán)交替，自由飲食。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)流程均符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)的規(guī)定。
[0016]10)大腦中動(dòng)脈閉塞性缺血模型的制備:選用體重范圍在280~350g的雄性SD大鼠，于術(shù)前12h禁食，自由飲水，以I %戊巴比妥鈉(0.5ml/100g)腹腔注射實(shí)施麻醉后，將大鼠固定于操作臺(tái)上，腹面朝上，從頸部正中剪開(kāi)皮膚，剝離暴露出頸總動(dòng)脈(CCA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)，和頸外動(dòng)脈(ECA)。經(jīng)ECA將線(xiàn)栓插入至大腦中動(dòng)脈，系緊結(jié)扎線(xiàn)，即刻給予腹腔注射亞甲藍(lán)，消毒并縫合皮膚。
[0017]效果驗(yàn)證:
[0018]應(yīng)用神經(jīng)功能評(píng)分和腦梗死體積測(cè)定作為亞甲藍(lán)治療效果驗(yàn)證的方法，具體實(shí)施如下:
[0019]I)神經(jīng)功能評(píng)分
[0020]手術(shù)后24h實(shí)施神經(jīng)功能評(píng)分，采取三種評(píng)分方法:Longa評(píng)分法、爬格實(shí)驗(yàn)、肢體放置測(cè)驗(yàn)對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞性缺血后的大鼠神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。分值越大，神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重。采用單因素方差分析，用P值判斷統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。[0021]2)腦梗死的測(cè)定
[0022]以大腦視交叉為中心，做冠狀切片6片，每片2mm，腦切片置于I % TTC溶液中避光室溫孵育20min，然后用4%多聚甲醛室溫固定2h，置換清水后，平鋪掃描儀上掃描入電腦。用image J軟件計(jì)算梗塞百分比。采用單因素方差分析，用P值判斷統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
[0023]結(jié)果發(fā)現(xiàn):應(yīng)用本發(fā)明公開(kāi)的濃度的亞甲藍(lán)溶液在大鼠行MCAO手術(shù)后即刻、5h、1h給予腹腔注射后，能顯著降低大鼠的腦梗死體積，改善神經(jīng)功能，提高大鼠的行為能力。
[0024]實(shí)施實(shí)例一:
[0025]亞甲藍(lán)(lmg/kg, 5mg/kg, 10mg/kg)腹腔注射對(duì)MCAO大鼠急性腦缺血損傷的保護(hù)作用
[0026]1、材料:
[0027]I)戍巴比妥鈉(PelltobarbitalumNatricum):德國(guó)進(jìn)口，北京試劑公司分裝,批號(hào)020402，有效期2015年3月。
[0028]2)1%戊巴比妥鈉注射液制備:以德國(guó)Merck公司生產(chǎn)的戊巴比妥鈉為基礎(chǔ)，取Ig戊巴比妥鈉粉末，溶于10ml生理鹽水中，充分混勻，制成I %戊巴比妥鈉注射液100ml，用于動(dòng)物麻醉，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.5ml/100g用量使用。 [0029]3)0.9%生理鹽水:石家莊四藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H13023200，有效期至2015年I月29日。
[0030]4)亞甲藍(lán)(methylene blue, MB)分子式C16H18C1N3S是雜環(huán)芳香族染料，屬于噻嗪類(lèi)染料家族，無(wú)臭深藍(lán)色晶體，溶于水和氯仿，但不溶于酒精，避光保存，Amresco公司生產(chǎn)，有效期至2015年I月。
[0031]5) 10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:以Amresco公司生產(chǎn)的亞甲藍(lán)為基礎(chǔ)，稱(chēng)取90mg亞甲藍(lán)粉末，溶于30ml生理鹽水中，充分混勻，制成3mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液30ml，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得10mg/kg的實(shí)際用量。
[0032]6) 5mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:取上述配制的10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液10ml，溶于1ml生理鹽水中，充分混勻，制成1.5mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液20ml，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得5mg/kg的實(shí)際用量。
[0033]7) lmg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液:取上述配制的10mg/kg亞甲藍(lán)腹腔注射液2ml,溶于18ml生理鹽水中，充分混勻，制成0.3mg/ml亞甲藍(lán)腹腔注射液20ml，以大鼠體重為依據(jù)，按照0.33ml/100g用量使用，即得lmg/kg的實(shí)際用量。
[0034]8)氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-Triphenyltetrazolium chloride, TTC),分子式C19H15C1N4,白色至淺黃色結(jié)晶粉末，用作分析試劑和色譜分析試劑，sigma公司生產(chǎn)，避光保存，有效期至2015年8月。
[0035]9)1% TTC溶液:以sigma公司生產(chǎn)的TTC為基礎(chǔ)，取0.1gTTC粉末，溶于1ml純水中，充分混勻，制成1% TTC溶液10ml，用于腦片的染色，用時(shí)避光，37°C。
[0036]10)成年雄性SD大鼠，體重280_320g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)在室溫22-25°C，12h晝夜循環(huán)交替，自由飲食。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)流程均符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)的規(guī)定。
[0037]11)大腦中動(dòng)脈閉塞性缺血模型的制備:
[0038]A.動(dòng)物選擇:選用體重范圍在280~350g的雄性SD大鼠，于術(shù)前12h禁食，自由飲水。
[0039]B.手術(shù)操作:以1%戊巴比妥鈉(0.5ml/100g)腹腔注射實(shí)施麻醉后，將大鼠固定于操作臺(tái)上，腹面朝上，從頸部正中剪開(kāi)皮膚，剝離暴露出頸總動(dòng)脈(CCA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)，和頸外動(dòng)脈(ECA)。經(jīng)ECA將線(xiàn)栓插入至大腦中動(dòng)脈，系緊結(jié)扎線(xiàn)消毒并縫合皮膚。
[0040]C.給藥方式與劑量:于模型制作后即刻、5h、10h三次給予腹腔注射亞甲藍(lán)溶液(lmg/kg,5mg/kg,10mg/kg)。
[0041]D.模型成功入選標(biāo)準(zhǔn):大鼠麻醉蘇醒后按Zea Longa(0-4分)5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行神經(jīng)功能缺失程度評(píng)分。
[0042]a) O分:無(wú)神經(jīng)功能缺失癥狀，活動(dòng)正常者；
[0043]b) I分:不能伸展對(duì)側(cè)前爪者；
[0044]c)2分:爬行時(shí)出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈者；
[0045]d) 3分:行走時(shí)身體向偏癱側(cè)傾倒者；
[0046]e)4分:不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失者。
[0047]E.模型排除標(biāo)準(zhǔn)
[0048]a)依據(jù)Zea Longa5分制評(píng)分法,神經(jīng)功能缺失體征評(píng)分低于I分者； [0049]b)開(kāi)顱發(fā)現(xiàn)并發(fā)蛛網(wǎng)膜下腔出血者；
[0050]c)腦組織切片HE染色無(wú)缺血病理改變者；
[0051 ] d) TTC染色未見(jiàn)缺血灶者；
[0052]e)缺血24h內(nèi)死亡者。
[0053]2、方法:
[0054](I)大腦中動(dòng)脈閉塞性缺血模型的制備:體重280~320g的雄性SD大鼠，稱(chēng)重，I %戊巴比妥鈉溶液腹腔注射麻醉(0.5ml/100g)，仰臥位固定在鼠手術(shù)板上，充分暴露頸部。頸前正中切口，分離筋膜，暴露右側(cè)頸動(dòng)脈，向近心端游離頸總動(dòng)脈(CCA)約0.2cm，向遠(yuǎn)心端游離頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)和頸外動(dòng)脈(ECA)。在ECA上穿兩條結(jié)扎線(xiàn)，一根在分叉處打松結(jié)，一根盡量靠近遠(yuǎn)心端結(jié)扎，ICA上夾動(dòng)脈夾，在已分離的CCA近心段夾動(dòng)脈夾。提起ECA上遠(yuǎn)心端結(jié)扎線(xiàn)，電凝器熔斷ECA，于ECA靠近遠(yuǎn)心端處(約距離動(dòng)脈分叉3mm處)剪一小口，將尼龍線(xiàn)栓從剪好的小口置入ECA，向前推進(jìn)經(jīng)CCA到ICA動(dòng)脈夾處扎緊ECA上原來(lái)松結(jié)的結(jié)扎線(xiàn)，放開(kāi)ICA上的動(dòng)脈夾，繼續(xù)向前推進(jìn)線(xiàn)栓，至標(biāo)記處(1.8-2.0cm)，此時(shí)大鼠呼吸可有短暫加速，提示模型成功。再次扎緊ECA上的結(jié)扎線(xiàn)，剪斷線(xiàn)栓，放開(kāi)CCA上動(dòng)脈夾，即刻腹腔注射給予亞甲藍(lán)(Methylene blue, MB)治療(A組:1 mg/kg, B組:5mg/kg, C組:10mg/kg)，對(duì)照組(N組)給予相同量的生理鹽水。確認(rèn)大鼠無(wú)活動(dòng)出血后，消毒皮膚、縫合切口。將大鼠放置于干凈通風(fēng)的鼠籠內(nèi)單籠飼養(yǎng)，維持籠內(nèi)溫度25°C左右。觀察大鼠一般情況至麻醉蘇醒。期間于手術(shù)后5h、1h兩次腹腔注射追加給藥，劑量同前。
[0055](2)神經(jīng)功能缺損檢測(cè):手術(shù)后24h實(shí)施神經(jīng)功能評(píng)分，采取三種評(píng)分方法:Longa評(píng)分法、爬格實(shí)驗(yàn)、肢體放置測(cè)驗(yàn)對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞性缺血大鼠神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
[0056]Zea Longa (0-4分)5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行神經(jīng)功能缺失程度評(píng)分。O分:無(wú)神經(jīng)功能缺失癥狀，活動(dòng)正常者；1分:不能伸展對(duì)側(cè)前爪者；2分:爬行時(shí)出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈者；3分:行走時(shí)身體向偏癱側(cè)傾倒者:4分:不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失者。
[0057]肢體放置測(cè)驗(yàn):肢體放置于三種獨(dú)立刺激(視覺(jué)、觸覺(jué)、本體感覺(jué))以評(píng)測(cè)運(yùn)動(dòng)感覺(jué)完整性。具體實(shí)驗(yàn)有:前肢放置實(shí)驗(yàn)，包括(I)視覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)，即前方刺激:實(shí)驗(yàn)者將動(dòng)物握于手中，使其前爪懸空，自桌面上方1cm處向桌面緩慢斜線(xiàn)靠近(此時(shí)桌子位于大鼠前方)，大鼠正常反應(yīng)為前肢即刻抓向桌面，損傷大鼠則表現(xiàn)為肢體反應(yīng)延遲。O分-動(dòng)物肢體放置反應(yīng)正常；1分-反應(yīng)延遲但不超過(guò)2s ;2分-反應(yīng)延遲且超過(guò)2s。側(cè)方刺激,此時(shí)桌子位于動(dòng)物側(cè)方，其余實(shí)驗(yàn)方法及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同前方刺激。(2)觸覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)，將動(dòng)物置于桶狀凹陷實(shí)驗(yàn)器內(nèi)，使其前爪懸空，此時(shí)大鼠應(yīng)該既看不見(jiàn)，也不能用胡須觸及桌面，用其前爪背側(cè)輕觸桌面，刺激深度僅達(dá)皮膚和毛發(fā)，動(dòng)物反應(yīng)及評(píng)分同視覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)，觸覺(jué)刺激同樣分前方及側(cè)方刺激。(3)本體覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)，操作及評(píng)分同觸覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)，僅刺激深度不同，本體覺(jué)亞實(shí)驗(yàn)給予前爪較大壓力，刺激深達(dá)肌肉及關(guān)節(jié)，該亞實(shí)驗(yàn)只有前方刺激。動(dòng)物前肢放置實(shí)驗(yàn)總分范圍為O~10分,功能損傷越重,得分越高。
[0058]爬格實(shí)驗(yàn):主要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的視覺(jué)、觸覺(jué)以及前肢對(duì)感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)的整合能力。整個(gè)空格的面積為1cmX 110cm，由許多正方形小網(wǎng)格組成(面積9cm2)，小網(wǎng)格網(wǎng)絲的直徑為1.0mm，放置在離地面Im的高度。大鼠自由從空格的一端爬向另一端，行進(jìn)中腦缺血對(duì)側(cè)前肢掉入網(wǎng)格一次，記為失誤一分，失誤是由腦組織缺血損傷導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)功能失調(diào)。
[0059](3)腦梗死體積檢測(cè):神經(jīng)功能評(píng)分結(jié)束后，大鼠行頸椎脫白處死，快速分離出腦組織，腹面向上，放入腦模，以大腦視交叉為中心，做冠狀切片6片(視交叉前面取兩片，視交叉后面四片)，每片2mm，腦切片置于1% TTC溶液中避光室溫孵育20min，然后用4%多聚甲醛室溫固定2h，置換清水后，平鋪掃描儀上掃描入電腦。用image J軟件計(jì)算梗塞百分t匕，公式如下:
[0060]矯正腦梗死體積) = [LT-(RT-RI)]/LTX 100% (LT:左側(cè)大腦半球體積，RT:右側(cè)大腦半球體積，R1:梗死部分體積)。 [0061](4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):以神經(jīng)功能評(píng)分和腦梗死率的測(cè)定作為定量考察指標(biāo)，分析亞甲藍(lán)組與對(duì)照組大鼠的差別。采用單因素方差分析，用P值判斷統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
[0062]3、結(jié)果:
[0063]神經(jīng)功能評(píng)分
[0064]亞甲藍(lán)的三個(gè)劑量組(A，B, C)與對(duì)照組(N)相比，神經(jīng)功能總評(píng)分分?jǐn)?shù)均顯示下降，表明經(jīng)不同劑量亞甲藍(lán)治療后，大鼠的神經(jīng)功能得到不同程度的改善(如下表所示)。
[0065]表.亞甲藍(lán)對(duì)永久性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響
[0066]
【權(quán)利要求】
1.亞甲藍(lán)在制備增強(qiáng)人或動(dòng)物對(duì)抗急性腦缺血損傷的藥物和保健品方面的應(yīng)用。
2.亞甲藍(lán)作為添加劑或輔料在制備增強(qiáng)人或動(dòng)物對(duì)抗急性腦缺血損傷的食品和保健品方面的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的應(yīng)用，其中所說(shuō)的急性腦缺血損傷為由腦動(dòng)脈粥樣硬化造成的栓塞，或由纖維素、血小板、白細(xì)胞、膽固醇結(jié)晶所組成的微栓子形成的微栓塞，或由血液粘度和凝固性的血液成分改變以及由心臟病引起的血流動(dòng)力學(xué)改變?cè)斐傻哪X供血不足，在一定時(shí)間(腦缺血3天)內(nèi)得不到溶栓治療，或錯(cuò)過(guò)黃金治療期對(duì)腦組織造成的損傷。該損傷既包括神經(jīng)功能的改變，也包括腦組織的病變。
4.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的應(yīng)用，其中所說(shuō)對(duì)抗急性腦缺血損傷為對(duì)抗急性腦缺血后引起的永久性缺血(非缺血再灌注)損傷的能力。包括神經(jīng)功能的改善，以及腦組織病變的減 緩。
【文檔編號(hào)】A61P9/10GK104027338SQ201410252319
【公開(kāi)日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月6日
【發(fā)明者】吳麗穎, 范明, 朱玲玲, 邸瑤, 趙彤, 何云凌, 丁學(xué)鋒, 吳奎武, 黃欣, 趙永岐, 劉淑紅 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所