專利名稱：尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說(shuō)，是尿液中可溶性Corin與慢性腎病的關(guān)系，在疾病診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)中的作用
背景技術(shù)：
慢性腎病指各種原因?qū)е履I臟結(jié)構(gòu)和功能改變的一類疾病，是一類嚴(yán)重影響人類健康的疾病，是發(fā)生腎功能衰竭、心血管疾病及死亡的重要原因。根據(jù)2002年美國(guó)腎臟病學(xué)會(huì)制定的腎臟病/透析臨床實(shí)踐指南定義，慢性腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)有兩條，即腎臟損傷持續(xù)3個(gè)月或以上，有或無(wú)腎小球?yàn)V過(guò)率異常；腎小球?yàn)V過(guò)率< 60 mL/ (min. I. 73m2)持續(xù)3個(gè)月或以上，有或無(wú)腎臟損傷證據(jù)。符合上述標(biāo)準(zhǔn)之一即可診斷為慢性腎病。慢性腎病可根據(jù)腎小球?yàn)V過(guò)率分為5期，1-5期慢性腎病患者的腎小球?yàn)V過(guò)率分別為> 90，60-90，30-60，15-30 和〈15 mL/min/1. 73 m2。Corin是一種我們新發(fā)現(xiàn)的跨膜絲氨酸蛋白酶，它主要表達(dá)于心臟，是心鈉肽前體轉(zhuǎn)化酶。Corin在腎臟的水鈉調(diào)節(jié)、機(jī)體的血壓和心臟功能中起重要作用。我們前期研究發(fā)現(xiàn)Corin可被蛋白酶從細(xì)胞表面裂解脫落，心肌細(xì)胞培養(yǎng)上清及人血漿中可檢測(cè)到可溶性Corin0除心臟外，Corin也表達(dá)于其它組織，如腎臟、骨骼組織、妊娠子宮等。在腎臟中，Corin主要表達(dá)于腎小管的近曲小管、髓袢及集合管。Polzin等研究發(fā)現(xiàn)，腎病模型大鼠腎臟中Corin表達(dá)顯著降低，提示Corin在腎臟的水鈉代謝中起作用，Corin缺乏導(dǎo)致水鈉潴
&3甶O表達(dá)于心臟的Corin能從細(xì)胞表面脫落，可在血漿中檢測(cè)到可溶性Corin，同理，表達(dá)于腎臟的Corin也應(yīng)該可以從細(xì)胞表面脫落，為此，我們用ELISA方法檢測(cè)了正常人及慢性腎病患者尿液匯中的可溶性Corin，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，尿液中可檢測(cè)到可溶性Corin，而且慢性腎病患者尿液中的Corin水平顯著低于正常人；我們還發(fā)現(xiàn)慢性腎病患者尿液中可溶性Corin水平與慢性腎病的嚴(yán)重程度相關(guān)，Corin水平隨腎功能的減退而降低。我們的研究提示，尿液中可溶性Corin水平反應(yīng)腎臟的功能狀態(tài)，可作為慢性腎病的分子標(biāo)志物用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)目前尿液中可檢測(cè)到可溶性Corin，其水平與慢性腎病腎功能分級(jí)相關(guān)，本發(fā)明公開了尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用，可用于慢性腎病的診斷指標(biāo)及進(jìn)展評(píng)判。尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用，所述Corin作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。
所述Corin是ー種跨膜絲氨酸蛋白酶，其核苷酸序列為SEQ ID NO: 1，其氨基酸序列分別為SEQ ID NO:2。所述Corin是ー種跨膜絲氨酸蛋白酶，它主要表達(dá)于心臟，是心鈉肽前體轉(zhuǎn)化酶。所述Corin在腎臟的水鈉調(diào)節(jié)、機(jī)體的血壓和心臟功能中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)所述Corin可被蛋白酶從細(xì)胞表面裂解脫落，心肌細(xì)胞培養(yǎng)上清及人血漿中可檢測(cè)到可溶性所述 Corin0與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)
通過(guò)實(shí)驗(yàn)，收集正常人和慢性腎病患者的尿液標(biāo)本，ELISA方法檢測(cè)可溶性Corin。ELISA檢測(cè)結(jié)果提示慢性腎病患者尿液中Corin顯著降低，并且Corin水平與慢性腎病的分級(jí)相關(guān)，隨腎功能的損害程度的加重而減少。提示尿液中可溶性Corin的水平作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)判。上述說(shuō)明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，并可依照說(shuō)明書的內(nèi)容予以實(shí)施，以下以本發(fā)明的較佳實(shí)施例并配合附圖詳細(xì)說(shuō)明如后。
此處所說(shuō)明的附圖用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)ー步理解，構(gòu)成本申請(qǐng)的一部分，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說(shuō)明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的不當(dāng)限定。在附圖中
圖I為Corin蛋白結(jié)構(gòu)模式 圖2為正常人尿液中Corin水平；
圖3為男性正常人及慢性腎病患者尿液中Corin水平；
圖4為女性正常人及慢性腎病患者尿液中Corin水平；
圖5為男性正常人及慢性腎病患者(1-5級(jí))尿液中Corin水平；
圖6為女性正常人及慢性腎病患者(1-5級(jí))尿液中Corin水平。
具體實(shí)施例方式下面將參考附圖并結(jié)合實(shí)施例，來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用，所述Corin作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。參見圖I所示，所述Corin是ー種跨膜絲氨酸蛋白酶，它主要表達(dá)于心臟，是心鈉肽前體轉(zhuǎn)化酶。所述Corin在腎臟的水鈉調(diào)節(jié)、機(jī)體的血壓和心臟功能中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)所述Corin可被蛋白酶從細(xì)胞表面裂解脫落，心肌細(xì)胞培養(yǎng)上清及人血漿中可檢測(cè)到所述Corin。參見圖2所示，為正常人尿液中所述Corin水平，205例正常人尿液樣本，其中男性 101人，女性104人。ELISA結(jié)果顯示，尿液中可檢測(cè)到所述Corin，且存在性別差異，男性為 227 土 107 pg/mL,女性為 161 土 108 pg/mL (p= O. 00003)。參見圖3、圖4所示,為正常人及慢性腎病患者尿液中所述Corin水平低于正常對(duì)照，214例慢性腎病患者尿液中的所述Corin水平，p〈0. 001，檢測(cè)提示，男性慢性腎病患者尿液中的所述Corin水平顯著低于正常対照。參見圖5、圖6所示,為正常人及慢性腎病患者(1-5級(jí))尿液中所述Corin水平，檢測(cè)提示，慢性腎病患者按照慢性腎病分級(jí)的不同進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)尿液中所述Corin水平隨疾病嚴(yán)重程度而遞減，5級(jí)患者的所述Corin水平最低。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精 神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用，其特征在于所述Corin作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。
全文摘要
本發(fā)明公開了尿液中可溶性Corin在慢性腎病診斷中的應(yīng)用，Corin作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。收集正常人和慢性腎病患者的尿液標(biāo)本，ELISA方法檢測(cè)可溶性Corin。ELISA檢測(cè)結(jié)果提示慢性腎病患者尿液中Corin顯著降低，并且Corin水平與慢性腎病的分級(jí)相關(guān)，隨腎功能的損害程度的加重而減少。提示尿液中可溶性Corin的水平作為慢性腎病的分子標(biāo)志物，用于慢性腎病的診斷及預(yù)后評(píng)判。
文檔編號(hào)G01N33/68GK102636652SQ201210113990
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月18日
發(fā)明者吳慶宇, 方朝東, 沈蕾, 董寧征 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)