一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳椇子總黃酮的方法
【專利摘要】本發(fā)明具體涉及一種利用表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳椇子總黃酮的方法。它包括如下步驟：（1）將枳椇子粉碎后，用石油醚進(jìn)行索氏提取除去脂肪，得到完全除脂的枳椇子粉碎物；（2）將枳椇子粉碎物、蒸餾水和表面活性劑混勻后得到混合溶液；（3）將混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為200~600W，超聲波功率為100~500W，提取時(shí)間為5~20min；（4）提取結(jié)束后取濾液、醇沉淀后棄醇上清，濃縮并干燥，得到枳椇子總黃酮提取物。采用本發(fā)明所述方法提取枳椇子總黃酮，大大縮短了提取時(shí)間，提高了提取效率，降低了成本，且耗能少；同時(shí)以溶有少量表面活性劑的蒸餾水溶液作為提取液，不存在有毒有機(jī)溶劑殘留的問題。
【專利說明】一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種天然活性物質(zhì)的提取方法，具體涉及一種利用表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]積犋子是鼠李科植物積棋(MoveniadulcisThunb)的干燥種子。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為，積棋子具有止渴除煩，清濕熱，解酒毒的功能。用于煩熱止渴，二便不利，酒精中毒等癥。其中枳犋子的主要活性成分為黃酮類(包括山奈酚、洋芹素、楊梅黃素、槲皮素、雙氫楊梅黃素)和蒽醌類化合物大黃素等。目前提取枳犋子黃酮的方法主要有冷浸、滲漉、索氏提取法、熱回流法等傳統(tǒng)固-液浸提法。但這些方法不可避免的存在能耗高，耗時(shí)長，產(chǎn)率較低且有機(jī)溶劑殘留等缺點(diǎn)?，F(xiàn)代病理學(xué)研究表明，過量的自由基及其誘導(dǎo)的氧化反應(yīng)與很多疾病有關(guān)，如動(dòng)脈粥樣硬化、衰老、癌癥等。而目前的人工合成抗氧化劑BHT、BHA、TBHA多存在一定的毒性。隨著綠色環(huán)保的概念逐漸深入人心，對(duì)天然抗氧化成分的需求日益增長。枳犋子中的黃酮做為天然抗氧化劑具有良好的抗氧化活性，在食品、化妝品、藥品中具有廣泛的應(yīng)用潛質(zhì)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的發(fā)明目的是提供一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，通過以溶有表面活性劑的水溶液為提取液，結(jié)合微波提取法和超聲波提取法提取枳犋子總黃酮，所述方法可以大大提高提取效率，降低提取成本，且不存在有毒有機(jī)溶劑殘留的問題。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:
一種表面活性劑協(xié)助微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，它包括如下步驟:
(1)將枳犋子粉碎后真空干燥，然后以石油醚為溶劑，采用索氏提取法除去枳犋子中的脂肪，得到完全除脂的枳犋子粉碎物；
(2)將枳犋子粉碎物和蒸餾水按質(zhì)量比1:11-1:33充分混合后得到料液；
(3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑，混勻后得到混合溶液，所述表面活性劑的質(zhì)量為所述蒸餾水質(zhì)量的0.2%~2% ；
(4)將步驟(3)的混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為20(T600W，超聲波功率為10(T500W，提取時(shí)間為5~20min ；
(5)微波-超聲波提取結(jié)束，過濾后取其濾液；
(6)向?yàn)V液中加入乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄去醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
[0005]上述方案中，所述表面活性劑為吐溫20、吐溫40或吐溫60 ;優(yōu)選吐溫20。上述方案中，所述微波功率為300W，超聲波功率為400W，提取時(shí)間為lOmin。[0006]上述方案中，所述乙醇的體積濃度為40%~80% ;優(yōu)選60%。
[0007]本發(fā)明的原理是:表面活性劑具有親水親油雙重性質(zhì)，可以降低枳犋子細(xì)胞膜和水溶液間的界面張力，使有效成分可以輕易溶出，因此以溶有合適劑量的表面活性劑的水取代有機(jī)溶劑作為提取介質(zhì)，對(duì)有效成分有“增溶”的作用；另外，微波是通過使極性分子發(fā)生共振摩擦從而產(chǎn)生熱效應(yīng)，同時(shí)微波又有穿透性，可以使溶劑和物料內(nèi)部同時(shí)加熱，這樣不僅利用了熱效應(yīng)，同時(shí)由于細(xì)胞內(nèi)部在加熱，產(chǎn)生了壓力，細(xì)胞更容易發(fā)生破裂，有效成分可以自由溶出；超聲波則是利用“空穴作用”局部產(chǎn)生瞬間的高壓，使細(xì)胞產(chǎn)生孔洞甚至破裂，也可以使有效成分進(jìn)一步流出；所以將三者結(jié)合同時(shí)作用于枳犋子提取工藝可以大大的提聞提取效率，降低成本。
[0008]本發(fā)明的有益效果:
(O采用本發(fā)明所述方法提取枳犋子總黃酮，提取時(shí)間由傳統(tǒng)的2tT4h縮短為5~20min，大大縮短了提取時(shí)間，提高了提取效率，且成本低、耗能少；
(2)以溶有少量表面活性劑的蒸餾水溶液作為提取液，取代了傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑，因表面活性劑廣泛的應(yīng)用于食品、保健品、化妝品中，無毒無害，因此以本發(fā)明方法提取的枳犋子總黃酮在應(yīng)用于以上領(lǐng)域時(shí)不存在有毒溶劑殘留的問題。
[0009](3)采用本發(fā)明方法提取得到的枳犋子總黃酮，由于避免了長時(shí)間的熱效應(yīng)，減少了黃酮發(fā)生水解、 熱分解、被氧化的程度，其體外抗氧化活性明顯優(yōu)于采用傳統(tǒng)方法提取得到的總黃酮。
[0010](4)本發(fā)明所述方法操作簡單，所需設(shè)備簡單，溶劑易得易儲(chǔ)存，有潛在的應(yīng)用前
旦
-5^ O
【具體實(shí)施方式】
[0011]為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實(shí)施例。
[0012]實(shí)施例1
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，包括如下步驟:(I)準(zhǔn)確稱取5g枳犋子粉碎物，真空干燥后進(jìn)行石油醚索氏提取至完全除脂，得到完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g ；(2)將完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g、50g蒸餾水和0.4g表面活性劑吐溫20混合均勻后得到混合溶液；(3)將所述混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為300W，超聲波功率為400W，提取時(shí)間為IOmin ； (4)提取完畢后對(duì)混合溶液過濾后取濾液；
(5)向?yàn)V液中加入60vt% (體積濃度)乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
[0013]采用NaNO2-Al (NO3)3-NaOH法測定上述提取得到的枳犋子總黃酮的含量，結(jié)果顯示:總黃酮含量為2.21wt%。
[0014]采用鄰二氮菲法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法對(duì)上述提取得到的枳犋子總黃酮進(jìn)行體外抗氧化性能測試，結(jié)果顯示:當(dāng)總黃酮濃度為0.4mg.ml_1時(shí)，其清除率.0H為79.1%，02_為83.2%，DPPH.為96.7% ;與對(duì)比例對(duì)比可知，本實(shí)施例所述方法提取得到的總黃酮，其體外抗氧化性明顯優(yōu)于采用傳統(tǒng)熱回流法提取得到的黃酮。
[0015]實(shí)施例2一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，包括如下步驟:(I)準(zhǔn)確稱取5g枳犋子粉碎物，真空干燥后進(jìn)行石油醚索氏提取至完全除脂，得到完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g ；(2)將完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g、100g蒸餾水和0.2g表面活性劑吐溫40混合均勻后得到混合溶液；(3)將所述混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為200W，超聲波功率為100W，提取時(shí)間為5min ； (4)提取完畢后對(duì)混合溶液過濾后取濾液；(5)向?yàn)V液中加入80vt%乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
[0016]采用NaNO2-Al (NO3)3-NaOH法測定上述提取得到的枳犋子總黃酮的含量，結(jié)果顯示:總黃酮含量為1.31wt%。
[0017]采用鄰二氮菲法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法對(duì)上述提取得到的枳犋子總黃酮進(jìn)行體外抗氧化性能測試，結(jié)果顯示:當(dāng)總黃酮濃度為0.4mg.πιL-1時(shí)，其清除率.0H為73.3%, (V為79.9%, DPPH ?為92.1%。與對(duì)比例對(duì)比可知，本實(shí)施例所述方法提取得到的總黃酮，其體外抗氧化性明顯優(yōu)于采用傳統(tǒng)熱回流法提取得到的黃酮。
[0018]實(shí)施例3
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，包括如下步驟:
(I)準(zhǔn)確稱取5g枳犋子粉碎物，真空干燥后進(jìn)行石油醚索氏提取至完全除脂，得到完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g ; (2)將完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g、150g蒸餾水和3g表面活性劑吐溫60混合均勻后得到混合溶液；(3)將所述混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為600W，超聲波功率為500W，提取時(shí)間為20min ； (4)提取完畢后對(duì)混合溶液過濾后取濾液；(5)向?yàn)V液中加入40vt%乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
[0019]采用NaNO2-Al (NO3)3-NaOH法測定上述提取得到的枳犋子總黃酮的含量，結(jié)果顯示:總黃酮含量為1.98wt%。
[0020]采用鄰二氮菲法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法對(duì)上述提取得到的枳犋子總黃酮進(jìn)行體外抗氧化性能測試，結(jié)果顯示:當(dāng)濃度為0.4mg.πιM1時(shí)，其清除率.0H為76.3.1%，(V為80.0%, DPPH.為95.2%。與對(duì)比例對(duì)比可知，本實(shí)施例方法提取得到的總黃酮，其體外抗氧化性明顯優(yōu)于采用傳統(tǒng)熱回流法提取得到的黃酮。
[0021]對(duì)比例
采用傳統(tǒng)熱回流法提取枳犋子總黃酮的方法，包括如下步驟:
(I)準(zhǔn)確稱取5g枳犋子粉碎物，真空干燥后進(jìn)行石油醚索氏提取至完全除脂，得到完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g ; (2)將完全除脂的枳犋子粉碎物4.59g、50mL70vt%乙醇溶液混合均勻后得到混合溶液；(3)將所述混合溶液加熱至微沸，加熱容器上連接冷凝裝置保持乙醇持續(xù)回流，提取時(shí)間為120min ;(4)提取完畢后對(duì)混合溶液過濾后取濾液；(5)向?yàn)V液中加入60vt%乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
[0022]將上述提取得到的總黃酮采用鄰二氮菲法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法進(jìn)行體外抗氧化性能測試，結(jié)果為:當(dāng)總黃酮濃度為0.4mg.ml—1時(shí)，其清除率.0H為60.7%，02_為70.2%, DPPH.為73.9%。對(duì)比可知，利用本發(fā)明所述方法提取得到的總黃酮，其體外抗氧化性明顯優(yōu)于采用傳統(tǒng)熱回流法提取得到的總黃酮。
[0023]顯然，上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明所作的實(shí)例，而并非對(duì)實(shí)施方式的限制。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無需也無法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而因此所引申的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明創(chuàng)造的保護(hù)范圍 之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種表面活性劑輔助微波-超聲波提取枳犋子總黃酮的方法，其特征在于:它包括如下步驟: (1)將枳犋子粉碎后真空干燥，然后以石油醚為溶劑，采用索氏提取法除去枳犋子中的脂肪，得到完全除脂的枳犋子粉碎物； (2)將枳犋子粉碎物和蒸餾水按質(zhì)量比1:1廣I:33充分混合后得到料液； (3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑，混勻后得到混合溶液，所述表面活性劑的質(zhì)量為所述蒸餾水質(zhì)量的0.2%~2% ； (4)將步驟(3)的混合溶液進(jìn)行微波-超聲波提取，微波功率為20(T600W，超聲波功率為10(T500W，提取時(shí)間為5~20min ； (5)微波-超聲波提取結(jié)束，過濾后取其濾液； (6)向?yàn)V液中加入乙醇進(jìn)行醇沉，靜置后棄去醇上清液，再濃縮并干燥后，得到枳犋子總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述表面活性劑為吐溫20、吐溫40或吐溫60。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述表面活性劑為吐溫20。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述微波功率為300W，超聲波功率為400W，提取時(shí)間為lOmin。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特`征在于，所述乙醇的體積濃度為40%~80%。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述方法，其特征在于，所述乙醇的體積濃度為60%。
【文檔編號(hào)】A61K131/00GK103751317SQ201410057346
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2014年2月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月20日
【發(fā)明者】呂萌, 黎莉 申請(qǐng)人:武漢工程大學(xué)