一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，是由以下重量份的原料藥制成的：250～500份地錦草，50～250份白鮮皮，50～250份丁香，25～175份紫花地丁，25～175份綿馬貫眾，25～175份馬齒莧，5～50份冰片。本發(fā)明還提供了其檢測方法，包括：利用薄層色譜法對地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮的定性鑒別，以及用HPLC法對地錦草的含量進(jìn)行測定。本發(fā)明的噴霧劑對皰疹前期疼和后遺疼具有獨(dú)特的療效，該制劑有清熱解毒、祛風(fēng)止癢、通絡(luò)止痛之功效，具有較強(qiáng)的抗病毒以及廣譜抗菌作用，可用于治療帶狀皰疹、唇皰疹、水痘以及腳氣、陰道炎等多種皮膚、粘膜腔道病癥。
【專利說明】一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，及其檢測方法，屬于中藥【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]部隊指戰(zhàn)員在艱苦駐地、野外訓(xùn)練或戰(zhàn)時惡劣環(huán)境條件下，易受到皰疹病毒、蚊蟲、黃蜂、毒蜂等病源的侵襲，由此引起多種皮膚病癥或粘膜腔道病癥，特別是溫度、濕度增加或者地處高原時患病率顯著增高，有的甚至嚴(yán)重影響了官兵的身體健康。目前，國內(nèi)外皮膚病癥或粘膜腔道病癥的治療，僅限于一般治療，針對其病源，采用抗菌或抗病毒藥物，外用或內(nèi)用藥物治療。治療皮膚病癥或粘膜腔道的常用外用藥物有防腐消毒劑、抗菌劑、抗真菌劑、抗病毒劑、抗寄生蟲劑、止癢劑、干燥吸附劑等；常用內(nèi)用藥物則有磺胺類、青霉素及半合成青霉素類、頭孢類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類等抗菌藥物以及病毒唑、無環(huán)鳥苷、干擾素類、阿昔洛韋等抗病毒藥物。這些藥物制劑雖然對治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥有不同程度的療效，但是還存在很多問題，比如療效不佳、療程過長、患者依從性不好、使用不方便，或者副作用明顯等。尤其在治療帶狀皰疹、唇皰疹等方面，常用的抗病毒藥物對皰疫的前期疼和后遺疼療效不佳。目前我國用于治療皮膚病癥或粘膜腔道的純中藥噴霧劑品種少，效果差。本研究不僅可以解決廣大官兵的疾患，而且有助于傳統(tǒng)中藥的進(jìn)一步開發(fā)和利用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧齊?，及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法，所述皮膚病癥或粘膜腔道病癥包括帶狀皰疹、唇皰疹、水痘、腳氣、陰道炎等。
[0004]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:`[0005]一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，是由以下重量份的原料藥制成的:250~500份地錦草，50~250份白鮮皮，50~250份丁香，25~175份紫花地丁，25~175份綿馬貫眾，25~175份馬齒莧，5~50份冰片。
[0006]優(yōu)選的，是由以下重量份的原料藥制成的:375份地錦草，150份白鮮皮，150份丁香，100份紫花地丁，100份綿馬貫眾，100份馬齒莧，25份冰片。
[0007]進(jìn)一步地，還包括以下輔料:月桂氮卓酮和丙二醇(以便于制成噴霧劑)。
[0008]所述皮膚病癥或粘膜腔道病癥包括帶狀皰疹、唇皰疹、水痘、腳氣、陰道炎等。
[0009]所述治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑的制備方法，為:將各原料藥粉碎，除冰片待用外，其余混勻，用70%乙醇(體積百分?jǐn)?shù))回流提取3次，每次的加醇量分別為藥材重量的10倍、8倍、8倍，回流時間分別為1.5小時、1.0小時、1.0小時；合并回流液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.05~1.10，冷卻至室溫，加入冰片、濾液重量2%的月桂氮卓酮和濾液重量7%的丙二醇，攪拌溶解，過濾，即得治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，為棕褐色液體，氣香，味苦，澀，涼；分裝在噴霧容器中，封口。
[0010]治療時，噴在患處即可。
[0011]本發(fā)明的治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，各原料藥中，地錦草起清熱解毒，涼血止血，利濕退黃之效，為君藥；配以白鮮皮之祛風(fēng)解毒，丁香之溫中降逆，共為臣藥；紫花地丁、綿馬貫眾、馬齒莧三藥均有清熱解毒之效，以為輔翼，合為佐藥；冰片清熱止痛，是為使藥。諸藥相合，共奏清熱解毒、祛風(fēng)止癢、通絡(luò)止痛之功。
[0012]本發(fā)明的噴霧劑為 申請人:研究開發(fā)的一種純中藥制劑，是在多年臨床實(shí)踐經(jīng)驗基礎(chǔ)上經(jīng)過科學(xué)組方，采用先進(jìn)的制備工藝而制成的一種新型外用抗病毒制劑，對皰疹前期疼和后遺疼具有獨(dú)特的療效。該制劑有清熱解毒、祛風(fēng)止癢、通絡(luò)止痛之功效，具有較強(qiáng)的抗病毒以及廣譜抗菌作用，可用于治療帶狀皰疹、唇皰疹、水痘以及腳氣、陰道炎等多種皮膚、粘膜腔道病癥。該制劑主要具備以下特點(diǎn):
[0013]1、采用局部噴涂用藥，直接作用于病灶部位，見效快，刺激性小，使用方便，制作成本低，可廣泛推廣，大量使用。
[0014]2、該制劑處方由地錦草、白鮮皮、丁香、紫花地丁、綿馬貫眾、馬齒莧、冰片等組成。方中地錦草為君藥，現(xiàn)代科學(xué)研究證實(shí)，地錦草具有抗病毒、抗菌、抗炎、抗氧化、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)、保肝、止血等多種作用，含有黃酮、三萜、香豆素、留醇、鞣質(zhì)及酚酸類等化學(xué)成分，其中黃酮類化合物為主要有效成分。
[0015]所述治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑的檢測方法，包括:利用薄層色譜法對地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮的定性鑒別，以及用HPLC法對地錦草的含量進(jìn)行測定。
[0016]所述地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮的定性鑒別，方法如下:
[0017](I)地錦草的薄層色譜鑒別`:取本品內(nèi)容物(指待檢測的噴霧劑，下同)10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取地錦草對照藥材lg，加80%甲醇(體積百分?jǐn)?shù))30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(體積比5:4.5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))，在105°C加熱2~5分鐘，置紫外光燈(254nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；若無該熒光斑點(diǎn),說明本品內(nèi)容物中不含地錦草；
[0018](2)丁香的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物20ml,置圓底燒瓶中，加水100ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶為止，加正己烷2ml，連接回流冷凝管，加熱至微沸，并保持I小時，放冷，取正己烷液作為供試品溶液；另取丁香對照藥材Ig,同法制成對照藥材溶液；另取丁香酚對照品,加乙醚制成每Iml含20μ g的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60~90°C)-乙酸乙酯(體積比9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；若無該斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含丁香；
[0019](3)紫花地丁的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取紫花地丁對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加熱水10ml，攪拌使溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(體積比5:3:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；若無該熒光主斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含紫花地丁；
[0020](4)白鮮皮的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取白鮮皮對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-環(huán)己烷-乙酸乙酯(體積比3:3:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；若無該斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含白鮮皮。
[0021]所述地錦草的含量測定方法，照高效液相色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄VI D試驗，步驟如下:
[0022]①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))(體積比為45:55)為流動相；柱溫為30°C;體積流量為1.0ml檢測波長為360nm ;理論塔板數(shù)按蘆丁峰計算應(yīng)不低于4000 ;若低于4000，說明待檢測噴霧劑中地錦草的含量不足，該噴霧劑不合格，不能夠起到治療作用；
[0023]②對照品溶液的制備:分別取蘆丁和槲皮素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml分別含蘆丁 30 μ g、槲皮素25 μ g的混合溶液，作為對照品溶液；
`[0024]③供試品溶液的制備:取本品內(nèi)容物20ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0025]④測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定；本品每Iml含黃酮以蘆丁(C38H42N2O5)和槲皮素(C37H4tlN2O6)的總量計，不得少于若少于40 μ g，說明待檢測噴霧劑中地錦草的含量不足，該噴霧劑不合格，不能夠起到治療作用。
[0026]上述的檢測方法中未對綿馬貫眾、馬齒莧、冰片進(jìn)行檢測，其理由在于:上述檢測方法中已對處方中的4味藥(地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮)進(jìn)行定性鑒別，對君藥地錦草進(jìn)行含量測定；而綿馬貫眾、馬齒莧為佐藥，冰片為使藥，且處方量較小，故不再進(jìn)行檢測。上述符合國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑注冊申報資料項目及要求》中“中藥制劑一般I / 3以上藥味有鑒別，君藥一般應(yīng)有含量測定”的規(guī)定。
[0027]本發(fā)明的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法，是根據(jù)國家藥典委員會頒布的《〈中國藥典〉中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》制定的，對制劑中的地錦草、丁香、紫花地丁、白鮮皮進(jìn)行薄層色譜鑒別，對制劑中的來源于地錦草的總黃酮進(jìn)行含量測定，建立的方法操作簡便，專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于地錦噴霧劑的質(zhì)量控制。
【專利附圖】
【附圖說明】[0028]圖1:地錦草的薄層色譜鑒別，其中，從左至右數(shù)，第I條帶為地錦草對照藥材溶液，第2~4帶是供試品溶液，第5條帶是陰性對照溶液。
[0029]圖2:丁香的薄層色譜鑒別，其中，從左至右數(shù)，第I條帶為丁香酚對照品溶液，第2條帶為丁香對照藥材溶液，第3~5條帶為供試品溶液，第6條帶為陰性對照溶液。
[0030]圖3:紫花地丁的薄層色譜鑒別，其中，從左至右數(shù)，第I條帶為紫花地丁對照藥材溶液，第2~4條帶為供試品溶液，第5條帶為陰性對照溶液。
[0031]圖4:白鮮皮的薄層色譜鑒別，其中，從左至右數(shù)，第I條帶為白鮮皮對照藥材溶液，第2~4條帶為供試品溶液，第5條帶為陰性對照溶液。
【具體實(shí)施方式】
[0032]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0033]實(shí)施例1:制備治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，并進(jìn)行質(zhì)量檢測
[0034]原料藥配方為:地錦草375g，白鮮皮150g，丁香150g，紫花地丁 100g，綿馬貫眾100g，馬齒莧100g，冰片25g。
[0035]制備方法為:以上七味原料藥，均粉碎成細(xì)粉(能全部通過80目篩，并含能通過100目篩不少于95%的粉末)，除冰片待用外，其余混勻，用70%乙醇回流提取3次，加醇量分別為藥材量的10倍、8倍、8倍，回流時間分別為1.5小時、1.0小時、1.0小時；合并回流液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.05~1.10，冷卻至室溫，加入冰片細(xì)粉、濾液重量2%的月桂氮卓酮和濾液重量7% 的丙二醇，攪拌使溶解，過濾，濾液分裝在噴霧容器中，封口，即得。
[0036]取上述制備的噴霧劑(共3批，批號分別為:20120926、20121106、20121225)，進(jìn)行檢測:
[0037](I)地錦草的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液。另取地錦草對照藥材lg，加80%甲醇30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4.5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，在105°C加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；薄層色譜圖見圖1 ;
[0038](2) 丁香的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物20ml,置圓底燒瓶中，加水100ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶為止，加正己烷2ml，連接回流冷凝管，加熱至微沸，并保持小時，放冷，取正己烷液作為供試品溶液。另取丁香對照藥材Ig,同法制成對照藥材溶液。另取丁香酚對照品,加乙醚制成每Iml含20μ g的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60~90°C)_乙酸乙酯(9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；薄層色譜圖見圖2 ；
[0039](3)紫花地丁的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液。另取紫花地丁對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加熱水10ml，攪拌使溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:3:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；薄層色譜圖見圖3 ；
[0040](4)白鮮皮的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液。另取白鮮皮對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-環(huán)己烷-乙酸乙酯(3:3:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；薄層色譜圖見圖4。
[0041 ] (5 )地錦噴霧劑中黃酮類成分的含量測定，照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VID)試驗:
[0042]①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液(體積配比為45:55)為流動相；柱溫為30°C ;體積流量為1.0ml.mirT1，檢測波長為360nm。理論塔板數(shù)按蘆丁峰計算應(yīng)不低于4000 ；
[0043]②對照品溶液的制備:分別取蘆丁和槲皮素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml分別蘆丁 30 μ g、槲皮素25 μ g的混合溶液，作為對照品溶液；
[0044]③供試品溶液的制備:取本品內(nèi)容物20ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0045]④測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，本品每Iml含黃酮以蘆丁(C38H42N2O5)和槲皮素(C37H4tlN2O6)的總量計，不得少于40 μ g。
[0046]3個批號的地錦噴霧劑中黃酮類成分的測定結(jié)果見表1，結(jié)果均符合規(guī)定。
[0047]表1樣品含量測定結(jié)果(n=3)
[0048]
【權(quán)利要求】
1.一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，其特征在于:是由以下重量份的原料藥制成的:250~500份地錦草，50~250份白鮮皮，50~250份丁香，25~175份紫花地丁，25~175份綿馬貫眾，25~175份馬齒莧，5~50份冰片。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，其特征在于:是由以下重量份的原料藥制成的:375份地錦草，150份白鮮皮，150份丁香，100份紫花地丁，100份綿馬貫眾，100份馬齒覓，25份冰片。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，其特征在于:進(jìn)一步地，還包括以下輔料:月桂氮卓酮和丙二醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑，其特征在于:所述皮膚病癥或粘膜腔道病癥包括帶狀皰疹、唇皰疹、水痘、腳氣、陰道炎。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項所述的一種治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑的制備方法，其特征在于:將各原料藥粉碎，除冰片待用外，其余混勻，用70%乙醇回流提取3次，每次的加醇量分別為藥材重量的10倍、8倍、8倍，回流時間分別為1.5小時、1.0小時、1.0小時；合并回流液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.05~1.10，冷卻至室溫，加入冰片、濾液重量2%的月桂氮卓酮和濾液重量7%的丙二醇，攪拌溶解，過濾，即得治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑。
6.權(quán)利要求1所述的治療皮膚病癥或粘膜腔道病癥的中藥噴霧劑的檢測方法，其特征在于:包括:利用薄層色譜法對地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮的定性鑒別，以及用HPLC法對地錦草的含量進(jìn)行測定； 所述地錦草、丁香、紫花地丁和白鮮皮的定性鑒別，方法如下: (1)地錦草的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物IOml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取地錦草對照藥材lg，加80%甲醇30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取上述溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(體積比5:4.5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，在105°C加熱2~5分鐘，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；若無該熒光斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含地錦草； (2)丁香的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物20ml，加水100ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶為止，加正己烷2ml，連接回流冷凝管，加熱至微沸，并保持I小時，放冷，取正己烷液作為供試品溶液；另取丁香對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；另取丁香酚對照品，加乙醚制成每Iml含20μ g的溶液，作為對照品溶液；吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-乙酸乙酯(體積比9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；若無該斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含丁香； (3)紫花地丁的薄層 色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取紫花地丁對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加熱水10ml，攪拌使溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取上述溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(體積比5:3:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；若無該熒光主斑點(diǎn),說明本品內(nèi)容物中不含紫花地丁； (4)白鮮皮的薄層色譜鑒別:取本品內(nèi)容物10ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml溶解，作為供試品溶液；另取白鮮皮對照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-環(huán)己烷-乙酸乙酯(體積比3:3:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；若無該斑點(diǎn)，說明本品內(nèi)容物中不含白鮮皮； 所述地錦草的含量測定方法，步驟如下: ①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液(體積比為45:55)為流動相；柱溫為30°C ;體積流量為1.0ml 檢測波長為360nm ;理論塔板數(shù)按蘆丁峰計算應(yīng)不低于4000 ;若低于4000，說明待檢測噴霧劑中地錦草的含量不足，該噴霧劑不能夠起到治療作用； ②對照品溶液的制備:分別取蘆丁和槲皮素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml分別含蘆丁 30 μ g、槲皮素25 μ g的混合溶液，作為對照品溶液； ③供試品溶液的制備:取本品內(nèi)容物20ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； ④測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定；本品每 Iml含黃酮以蘆丁和槲皮素的總量計，不得少于40 μ g ;若少于40 μ g，說明待檢測噴霧劑中地錦草的含量不足，該噴霧劑不能夠起到治療作用。
【文檔編號】A61K31/045GK103816300SQ201410027875
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年1月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月21日
【發(fā)明者】孫旭, 趙慶華, 鞏偉, 李興東, 趙豫, 王瑜真, 張振興, 王莉 申請人:中國人民解放軍濟(jì)南軍區(qū)聯(lián)勤部藥品儀器檢驗所