包含至少一種透明質(zhì)酸及至少一種蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的在水性介質(zhì)中的組合物的制作方法

包含至少一種透明質(zhì)酸及至少一種蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的在水性介質(zhì)中的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含至少一種任選交聯(lián)的透明質(zhì)酸或其一種鹽，以及至少一種蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的組合物；還涉及生產(chǎn)所述組合物的方法，以及所述組合物在配制粘彈性補充組合物、在配制填充皺紋的組合物或在配制化妝品組合物中的用途。
【專利說明】包含至少一種透明質(zhì)酸及至少一種蔗糖八硫酸酯水溶性鹽 的在水性介質(zhì)中的組合物

【背景技術(shù)】
[0001] 透明質(zhì)酸在美容領(lǐng)域中已被使用超過15年，其中其已被證明是無害且有效的。目 前，基于源自生物發(fā)酵的交聯(lián)透明質(zhì)酸的凝膠是美容填充凝膠市場中或作為填充劑最廣泛 使用的產(chǎn)品。的確，在美容領(lǐng)域中，非再吸收性植入物使用得越來越少并且基于其他多糖的 凝膠已被摒棄，因為副作用或因為其動物源性，導(dǎo)致病毒污染的風(fēng)險。
[0002]源自生物發(fā)酵的透明質(zhì)酸在例如填充皺紋（comblement de rides)、粘彈性補充 (viscosuppl6mentation)、眼科治療或尿失禁治療等領(lǐng)域中的使用全部得到更加地認可與 青睞，這是因為其天然存在于人體中，特別是天然存在于真皮、滑液和角膜中，使得由于副 作用導(dǎo)致的風(fēng)險降至最低。
[0003] 盡管如此，歸因于透明質(zhì)酸天然存在于人體中的事實，存在能分解透明質(zhì)酸的內(nèi) 源性酶，例如透明質(zhì)酸酶。這種分解作用闡述于Locono等，J. Ped. Surg. , 1988年，第4期， 第33卷，第564-567頁中，其涉及傷口愈合。透明質(zhì)酸酶是一種通過催化透明質(zhì)酸水解以 得到透明質(zhì)酸的低聚糖而分解透明質(zhì)酸的酶。這種分解具有降低透明質(zhì)酸粘性的效果。這 種粘性降低無可挽回地導(dǎo)致在填充皺紋或粘彈性補充領(lǐng)域的期望效果隨時間降低，導(dǎo)致縮 短了每次注射間隔的時間以恢復(fù)其效果，容易導(dǎo)致患者的不適或疼痛。
[0004] 解決該問題的第一種解決方案可以是用其他多糖替代透明質(zhì)酸，所述多糖對透明 質(zhì)酸酶較不敏感且天然存在于人體中。
[0005] 在胞外基質(zhì)（ECM)的組分多糖中，硫酸軟骨素、硫酸皮膚素及硫酸角質(zhì)素可為有 利的。
[0006] 這是因為它們與透明質(zhì)酸一起部分造成皮膚的保濕與柔順，并且它們天然存在于 真皮中使得能夠預(yù)見其對于作為填充皺紋的產(chǎn)品、對于補水或?qū)τ谡硰椥匝a充的優(yōu)異的耐 受性和有效性。
[0007] 令人遺憾的是，硫酸軟骨素是動物源性的，迄今為止，通過生物發(fā)酵途徑合成硫酸 軟骨素的任何嘗試均不可生產(chǎn)出適應(yīng)于工業(yè)開發(fā)的量。這同樣適用于硫酸皮膚素及硫酸角 質(zhì)素，其僅可在工業(yè)上作為動物來源產(chǎn)品而獲得。
[0008] 目標在于減少通過透明質(zhì)酸酶對透明質(zhì)酸分解的另一種解決方案是提供包含與 透明質(zhì)酸組合的具備透明質(zhì)酸酶抑制性能的化合物的組合物。
[0009] 在文獻中已知硫酸酯基團的抗氧化及抗自由基性質(zhì)，以及高保濕能力和抗透明質(zhì) 酸酶活性。
[0010] 關(guān)于硫酸酯基團的抗氧化及抗自由基性質(zhì)，它們保護糖胺聚糖（GAG)免受活性氧 物質(zhì)的解聚，如 Moseley R 等在 Biochim. Biophys. Acta.，（1995)，1244 (2-3)，第 245-52 頁 中所述的。
[0011] 關(guān)于硫酸酯基團的高保濕能力，例如R. Servaty等在International Journal of Biological Macromolecules，（2001)，28,第121-127頁中證明：相比于透明質(zhì)酸，硫酸軟 骨素所具有更強的水分子吸收能力是由于存在硫酸軟骨素所具有的硫酸酯基團所導(dǎo)致。
[0012] 關(guān)于硫酸酯基團的抗透明質(zhì)酸酶活性，已知硫酸化多糖、更特別是全部0-硫酸化 糖胺聚糖具有高的抗透明質(zhì)酸酶活性，這例如從T.Toida等，Archives of Biochemistry and Biophysics，1999年，第370 (2)期，第176-182頁中可知。該出版物中所述的全部0-硫 酸化糖胺聚糖為硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸肝素及硫酸化透明質(zhì)酸。所獲得的結(jié)果顯 示：所有的全部〇-硫酸化糖胺聚糖都以劑量依賴性的方式抑制透明質(zhì)酸酶，并且在已測試 的全部0-硫酸化糖胺聚糖中，全部0-硫酸化透明質(zhì)酸是最佳的透明質(zhì)酸酶抑制劑。全部 0-硫酸化透明質(zhì)酸的缺點是其不能交聯(lián)。
[0013] 盡管如此，在美容領(lǐng)域中，超過80%的組合物基于交聯(lián)透明質(zhì)酸；因此，不可能開 發(fā)基于非交聯(lián)透明質(zhì)酸的填充劑產(chǎn)品。
[0014] 可以設(shè)想將少量的動物源性硫酸化多糖并入基于透明質(zhì)酸的組合物中；例如， Hermida名下的專利申請W0 03/041724描述了基于透明質(zhì)酸鈉及硫酸軟骨素的混合物的 無菌注射組合物意在用于關(guān)節(jié)內(nèi)用途。
[0015] 同樣，在Marcum名下的專利申請W0 2004/034980中，描述了基于透明質(zhì)酸、硫酸 軟骨素及N-乙酰葡糖胺的注射組合物，其用于通過關(guān)節(jié)內(nèi)注射進行軟骨再生。
[0016] 這種組合物的缺點仍然是硫酸軟骨素的動物源性。
[0017] 關(guān)于人工合成的硫酸化多糖，硫酸葡聚糖抑制透明質(zhì)酸組合物中透明質(zhì)酸酶的試 驗也已例如描述于 K. Zimmermann 的 J. Cancer Res. Clin. Oncol.，1983 年，第 105 期，第 189-190頁中。根據(jù)納爾遜（Nelson)法測定了如下組合物中透明質(zhì)酸的水解，所述組合物 包含透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸酶及不同濃度的分子量為17. 7kDa的硫酸葡聚糖。硫酸葡聚糖被 描述為透明質(zhì)酸酶的強力抑制劑，并且如果分子量為17. 7kDa的硫酸葡聚糖的活性劑量遠 低于毒性劑量，則毒性隨分子量增大而升高，并且僅一些高分子量的分子才顯著升高毒性， 正如Walton, Br.在J. Pharmacol. ,1954年，第9期，第1-14頁中所證實的。另外，硫酸葡 聚糖還被描述為可用于體內(nèi)和體外試驗的抗凝劑，正如例如在US2715091中所述，并且這 些抗凝性質(zhì)與作為可植入組合物的組分的用途本來就不兼容。
[0018] 在植物源性的硫酸化多糖中，角叉菜聚糖是已知的，但已知這些多糖會引起炎癥 反應(yīng)，以致用于測試抗炎性的模型都基于這些多糖的性質(zhì)。
[0019] 另外，D印uy名下的W003/000191公開了用于治療關(guān)節(jié)炎的包含透明質(zhì)酸及透明 質(zhì)酸酶抑制劑（例如硫酸化多糖）的組合物，所述硫酸化多糖例如硫酸葡聚糖、硫酸木糖或 硫酸乙酰肝素，這些多糖組分的一部分包覆在脂質(zhì)體中以確保其擴散受控，但在特別意在 交聯(lián)的組合物中使用脂質(zhì)體令人難以想象。
[0020] 因此，可用作透明質(zhì)酸添加劑（以降低透明質(zhì)酸酶活性）的大多數(shù)多糖是動物源 性的或者顯示潛在毒性，這兩個條件都與所設(shè)想的用途不相容。
[0021] 從理論角度而言，可設(shè)想以硫酸根離子的形式引入硫酸鹽溶液；盡管如此，它們在 所注入組織中的擴散會太快，事實上甚至是立即擴散，因此，對于填充皺紋或粘彈性補充領(lǐng) 域中組合物的抗透明質(zhì)酸酶的性質(zhì)而言是無效的。因此，優(yōu)選選擇通過硫酸酯基團官能化 的化合物。
[0022] 另一種潛在的解決方案是使用屬于硫酸化單糖和硫酸化寡糖類別的硫酸化化合 物。
[0023] 該類別的硫酸化單糖或寡糖（由1至10個單糖單元形成）令人關(guān)注，因為它們會 容易地通過合成制得，還因為它們的糖類結(jié)構(gòu)仍然與胞外基質(zhì)的組分糖胺聚糖的糖類結(jié)構(gòu) 近似，它們可以很好地被代謝，同時產(chǎn)生無毒的分解產(chǎn)物。
[0024] 例如，對透明質(zhì)酸酶有活性的低聚半乳糖已被描述于已發(fā)表的如下著作中： S. Salmen等，Planta Medica，71，No. 8,2005年，第727-732頁，特別是毛蕊花糖、車前糖及 新霉素，其表現(xiàn)出的抗透明質(zhì)酸酶活性比芹黃素（一種已知的透明質(zhì)酸酶抑制劑）高100 倍至500倍。
[0025] 源自透明質(zhì)酸的全部0-硫酸化低聚糖的抗透明質(zhì)酸酶性質(zhì)也被描述在現(xiàn)有技術(shù) 中，例如A. Suzuki等，Glycobiology，2001年，第11 (1)期，第57-64頁。已證實源自透明質(zhì) 酸的〇-硫酸化低聚糖對透明質(zhì)酸酶的抑制作用與其硫酸酯基團官能度及所述低聚糖大小 之間的相關(guān)性。更特別注意到：這些〇-硫酸化低聚糖的抑制活性與所述低聚糖大小有關(guān)。
[0026] 還有硫酸化單糖（例如硫酸化葡糖胺，例如葡糖胺-3-硫酸）已被描述為軟骨分 解的抑制劑（J.I. Fenton 等，Osteoarthritis and Cartilage，2000 年，第 8 卷，第 6 期，第 444-451 頁）。
[0027] 這些低聚糖中，還包括由2個單糖單元（葡萄糖和果糖）縮合形成的低聚糖。
[0028] Marion Laboratories名下的專利EP0230023中已描述硫酸化鹿糖（與其他硫酸 化低聚糖類似）被用作局部施用的傷口愈合促進劑，以溶液或膠原基質(zhì)或基于聚乙烯醇給 藥。
[0029] 在Bar-Shalom名下的W0 89/05646和EP 0640346中，描述了包含蔗糖八硫酸酯 的鹽的組合物，更具體的例子為蔗糖八硫酸酯的鋁鹽，其是意在用于局部施用或注射到組 織（包括關(guān)節(jié)）中的不溶性鹽。蔗糖八硫酸酯的鹽更特別的是利用它們的愈合性質(zhì)。在愈 合應(yīng)用的上下文中，透明質(zhì)酸也能用作促進愈合的活化劑。
[0030] Dumex-Alpharma名下的W0 98/22114公開了包含由多糖（例如殼聚糖或透明質(zhì) 酸）及硫酸化低聚糖（例如蔗糖八硫酸酯或其鹽）形成的化合物的組合物。本文的這些組 合物再次意在促進包含膠原的組織（例如皮膚、骨骼及粘膜）的傷口愈合。利用各種不同 技術(shù)證明了復(fù)合物的形成，例如NMR光譜、紅外光譜、X射線衍射、熱力學(xué)分析及規(guī)定條件下 的溶解度測試。
[0031] 意在植入或注射的組合物的生產(chǎn)意味著在其生產(chǎn)過程中對其進行滅菌，以遵守對 這種組合物的最低衛(wèi)生要求。在這種組合物的生產(chǎn)過程中最廣泛使用的滅菌方法是蒸汽滅 菌（或稱高壓滅菌），這類滅菌方法會導(dǎo)致組成組合物的產(chǎn)品的分解。因此，在高壓滅菌期 間保留并保持流變學(xué)特性、pH度量及生物相容性是必要的。這同樣適用于通過細針頭的可 注射要求（這些組合物的主要使用方式）。
[0032] 通過讓人非常驚喜并意外的測試已證實：利用蔗糖八硫酸酯（S0S)的水溶性 鹽配制的透明質(zhì)酸凝膠，在所有可能的候選對象中，是唯一可能獲得在蒸汽滅菌（另稱 為高壓滅菌）期間穩(wěn)定的組合物的凝膠，并且相比于不含蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的含透 明質(zhì)酸凝膠，所述凝膠由于其對透明質(zhì)酸酶導(dǎo)致的分解的抗性，還表現(xiàn)出升高的持久性 (r6manence)〇
[0033] 蔗糖八硫酸酯水溶性鹽在每個蔗糖分子上都有8個硫酸酯基團；因此，在利用蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽配制的凝膠中，每mg S0S中硫酸酯基團的加入量高。本公司 申請人:還 已證實：讓人驚喜的是，向基于透明質(zhì)酸的凝膠中加入蔗糖八硫酸酯水溶性鹽不會導(dǎo)致滅 菌過程中凝膠粘性或彈性的降低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0034] 本發(fā)明中，本公司 申請人:旨在通過加入蔗糖八硫酸酯水溶性鹽來解決由透明質(zhì)酸 酶導(dǎo)致的含透明質(zhì)酸組合物分解的問題，同時保持這些組合物用于填充皺紋、粘彈性補充、 化妝品制劑或藥物制劑領(lǐng)域的能力，這是由于其在生產(chǎn)過程中的蒸汽滅菌階段流變學(xué)特性 的穩(wěn)定性。
[0035] 本發(fā)明使得能夠解決所有上述問題，另外，使得能夠獲得根據(jù)本發(fā)明的組合物，所 述組合物在高壓滅菌期間保持其流變性特性，并且相比于現(xiàn)有技術(shù)的組合物具有更高的持 久性（更長的半衰期）。
[0036] 本發(fā)明涉及包含至少一種交聯(lián)或非交聯(lián)的透明質(zhì)酸或其一種鹽，以及至少一種蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的滅菌組合物；還涉及生產(chǎn)所述組合物的方法，以及所述組合物在配 制粘彈性補充組合物或在配制作為填充皺紋的組合物、在配制化妝品組合物或在配制藥物 組合物中的用途。
[0037] 根據(jù)本發(fā)明的組合物具備透明質(zhì)酸酶抗性，其特征在于蒸汽滅菌之后保持的至少 與僅包含至少一種交聯(lián)或非交聯(lián)的透明質(zhì)酸或其一種鹽的組合物的流變性特性類似的流 變性特性。本發(fā)明還涉及包含根據(jù)本發(fā)明的組合物以及至少一種化妝品可接受的賦形劑的 化妝品制劑。
[0038] 出人意料的是，本發(fā)明使得能夠獲得抗透明質(zhì)酸酶并且滿足關(guān)于意在前述領(lǐng)域的 組合物高壓滅菌的穩(wěn)定性要求的組合物。
[0039] 本發(fā)明涉及一種在水性介質(zhì)中的組合物，其包含至少一種透明質(zhì)酸以及至少一種 蔗糖八硫酸酯水溶性鹽，其特征在于所述組合物是物理混合物，并且透明質(zhì)酸的含量[HA] 與蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]大于或等于0. 1。
[0040] "透明質(zhì)酸"被理解為交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸（單獨或作為混合物），任選地通 過取代進行化學(xué)改性（單獨或作為混合物），任選地為其一種鹽的形式（單獨或作為混合 物）。
[0041] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含至少一種非交聯(lián)透明質(zhì)酸或其一種 鹽（單獨或作為混合物）。
[0042] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含至少一種交聯(lián)透明質(zhì)酸或其一種鹽 (單獨或作為混合物）。
[0043] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含至少一種共交聯(lián)透明質(zhì)酸或其一種 鹽（單獨或作為混合物）。
[0044] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含至少一種交聯(lián)或非交聯(lián)的、通過取 代進行化學(xué)改性的透明質(zhì)酸或其一種鹽（單獨或作為混合物）。
[0045] 在一個實施方案中，所述透明質(zhì)酸為鈉鹽或鉀鹽形式。
[0046] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于蔗糖八硫酸酯水溶性鹽選自 堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽、銨鹽及氨基酸鹽。
[0047] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于蔗糖八硫酸酯水溶性鹽選自 堿金屬鹽和堿土金屬鹽。
[0048] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于蔗糖八硫酸酯水溶性鹽為蔗 糖八硫酸酯的鈉鹽或蔗糖八硫酸酯的鉀鹽。
[0049] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于蔗糖八硫酸酯水溶性鹽為蔗 糖八硫酸酯的鈉鹽。
[0050] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于蔗糖八硫酸酯水溶性鹽為蔗 糖八硫酸酯的鉀鹽。
[0051] 鹿糖八硫酸酯的鉀鹽的最大溶解度為40mg/g ;因此，假定本發(fā)明組合物中HA的最 小可接受濃度為4mg/g以獲得用于本發(fā)明用途的適當(dāng)一致性，本發(fā)明組合物的最小[HA]/ [S0S]比率為0.1。由于蔗糖八硫酸酯的鈉鹽的溶解度大于其鉀鹽的溶解度，因此在確定 [HA]/[S0S]比率的最小值時已考慮蔗糖八硫酸酯的鉀鹽的溶解度極限。
[0052] "水性介質(zhì)"被理解為水溶液形式的組合物，任選地存在可溶鹽或緩沖液，任選地 為凝膠或水凝膠形式。
[0053] "物理混合物"被理解為一種混合物，其中該混合物的組分的所有物理化學(xué)性質(zhì)都 得以保留，也就是說，這些性質(zhì)與混合物組分在分開時的物理化學(xué)性質(zhì)是嚴格相同的，能夠 通過各種分析方法表征所述物理化學(xué)性質(zhì)的完整性。本公司 申請人:已選擇核磁共振（NMR) 光譜用于表征所述物理混合物。根據(jù)本發(fā)明的混合物的NMR光譜是一維質(zhì)子 1H光譜。例 如，包含蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的物理混合物的NMR光譜的特征在于：單獨處于溶液中的 蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的質(zhì)子的化學(xué)位移值，與根據(jù)本發(fā)明的物理混合物中蔗糖八硫酸酯 水溶性鹽的質(zhì)子的化學(xué)位移值相等，這證明：蔗糖八硫酸酯水溶性鹽與透明質(zhì)酸之間沒有 相互作用或不反應(yīng)。
[0054] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：當(dāng)利用質(zhì)子1HNMR光譜進行 分析時，蔗糖八硫酸酯的鹽的端基質(zhì)子的化學(xué)位移值（S =5. 7ppm)，與單獨處于溶液中的 蔗糖八硫酸酯的鹽的端基質(zhì)子的化學(xué)位移值相等。
[0055] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為0. 1至5000。
[0056] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為0. 1至2500。
[0057] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為1至1000。
[0058] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為10至500。
[0059] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為0. 1至100。
[0060] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]為0. 5至50。
[0061] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[S0S]按重量計的比率[HA]/[S0S]等于20。
[0062] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：蔗糖八硫酸酯水溶性鹽相 對于組合物的含量為〇? 〇lmg/g至40mg/g。
[0063] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：蔗糖八硫酸酯水溶性鹽相 對于組合物的含量為〇? lmg/g至10mg/g。
[0064] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：蔗糖八硫酸酯水溶性鹽相 對于組合物的含量為〇? lmg/g至lmg/g。
[0065] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸相對于組合物的 含量為2mg/g至50mg/g。
[0066] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸相對于組合物的 含量為4mg/g至40mg/g。
[0067] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸相對于組合物的 含量為 l〇mg/g 至 30mg/g。
[0068] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其包含至少一種非交聯(lián)透 明質(zhì)酸。
[0069] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其包含至少一種交聯(lián)透明 質(zhì)酸。
[0070] 本發(fā)明中，交聯(lián)度X定義為等于如下比率：
[0071] X =引入反應(yīng)介質(zhì)的奪聯(lián)劑的靡爾數(shù)
[0072] 引入反應(yīng)介質(zhì)的二糖單元的摩爾數(shù)
[0073] 在一個實施方案中，交聯(lián)透明質(zhì)酸顯示0. 001至0. 5的交聯(lián)度X。
[0074] 在一個實施方案中，交聯(lián)透明質(zhì)酸顯示0. 01至0. 25的交聯(lián)度X。
[0075] 在一個實施方案中，交聯(lián)透明質(zhì)酸顯示0. 1至0. 2的交聯(lián)度X。
[0076] 在一個實施方案中，透明質(zhì)酸是共交聯(lián)的，如Fermentech名下的申請W0 2000/0046253 或 Corn6al 名下的 W0 2004/092222 乃至 Anteis 名下的 FR 2 865 737 中所 述。
[0077] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其包含Innomed Ltd名下 的申請W0 2005/061611中所述的交聯(lián)和非交聯(lián)的透明質(zhì)酸的混合物。
[0078] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其包含交聯(lián)的透明質(zhì)酸的 混合物。
[0079] 在一個實施方案中，所述交聯(lián)的透明質(zhì)酸的混合物為單相混合物，例如本公司申 請人名下的專利申請W0 2009/071697中所述。
[0080] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其包含由賦予親脂性或保 濕性的基團取代的至少一種透明質(zhì)酸，例如本公司 申請人:名下的申請W0 2013/079889中 所述的取代的透明質(zhì)酸。
[0081] 在一個實施方案中，所述組合物額外地包含另一種多糖。
[0082] 在一個實施方案中，所述另一種多糖選自纖維素、褐藻酸或其一種鹽。
[0083] Mw或"分子量"是指聚合物的重量平均分子量（以道爾頓為單位）。
[0084] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的分子量Mw為 0.OlMDa 至 5MDa。
[0085] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：透明質(zhì)酸的分子量Mw為 0? lMDa 至 3. 5MDa。
[0086] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其額外地包含至少一種活 性成分。
[0087] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述活性成分選自抗氧化 齊IJ、局部麻醉劑或維生素（單獨或組合使用）。
[0088] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述抗氧化劑選自多元醇。 [0089] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述抗氧化劑選自甘露醇 和山梨醇（單獨或組合使用）。
[0090] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述抗氧化劑選自甘露醇。
[0091] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述抗氧化劑選自山梨醇。
[0092] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述抗氧化劑為甘露醇和 山梨醇的組合。
[0093] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述局部麻醉劑選自利多 卡因、普魯卡因、甲哌卡因、柔匹華卡因、布比卡因及其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0094] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：所述局部麻醉劑為鹽酸利 多卡因。
[0095] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：相對于所述組合物總重量， 所述活性成分的含量按重量計為〇. oiwt%至10wt%。
[0096] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：相對于所述組合物總重量， 所述活性成分的含量按重量計為〇. lwt%至5wt%。
[0097] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征在于：其在蒸汽滅菌下是穩(wěn)定的。
[0098] 在一個實施方案中，本發(fā)明是粘彈性補充組合物，其特征在于其包含至少一種根 據(jù)本發(fā)明的組合物。
[0099] 在一個實施方案中，本發(fā)明是用于治療干眼病或眼珠干澀的組合物，其特征在于 其包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的組合物。
[0100] 根據(jù)實施方案，所述組合物實施方案用作人工淚液、淚液凝膠或潤滑劑。
[0101] 在一個實施方案中，本發(fā)明是化妝品制劑，其特征在于其包含根據(jù)本發(fā)明的組合 物以及至少一種化妝品可接受的賦形劑。
[0102] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑的特征在于：其包含相對于所述化 妝品制劑總重量按重量計為〇. oiwt%至10wt%的根據(jù)本發(fā)明的組合物。
[0103] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑的特征在于：所述至少一種化妝品 可接受的賦形劑選自常規(guī)化妝品輔料。
[0104] "常規(guī)化妝品輔料"被理解為特別地選自如下的賦形劑：脂肪物質(zhì)、有機溶劑、離子 或非離子增稠劑、軟化劑、抗氧化劑、乳濁劑、穩(wěn)定劑、軟化劑、硅氧烷、a -羥基酸、消泡劑、 保濕劑、香料、防腐劑、表面活性劑、填料、螯合劑、聚合物、推進劑、堿化或酸化劑、著色劑或 化妝品中常用的任何其他組分。
[0105] 根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑可額外地包含其他活性劑，特別是保濕劑、濕潤劑、舒緩 劑（apaisants)、抗炎劑或傷口愈合劑（cicatrisants)。
[0106] 根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑可依照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的技術(shù)制備，特別是那些意 在制備水包油（0/W)或油包水（W/0)型乳劑的技術(shù)。
[0107] 這種化妝品制劑特別地可以簡單或復(fù)合乳液（o/w、w/o、o/w/o或W/0/W)的形式提 供，例如乳膏、乳、凝膠、膠狀乳液，也可以粉劑、固體棒劑的形式提供，還能任選地包裝到氣 溶膠中并以摩絲或噴霧的形式提供。
[0108] 在一個實施方案中，所述化妝品制劑根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的技術(shù)進行消毒， 特別是Y射線輻照。
[0109] 本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑，其特征在于：其可以洗劑、乳膏、油劑、棒 齊IJ、洗發(fā)劑或任何其他適當(dāng)?shù)男问竭M行局部施用。
[0110] 根據(jù)本發(fā)明的化妝品制劑、皮膚科用制劑或藥物制劑能用作保護人類表皮的組合 物免受外部因素的侵擾，并且因此能阻止表皮的早衰。
[0111] 本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的組合物的生產(chǎn)方法。
[0112] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其包括至少如下步驟：
[0113] -至少一種透明質(zhì)酸的纖維的水合步驟，以獲得水凝膠，
[0114] -將前述步驟所獲得的水凝膠與蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的溶液混合的步驟，
[0115] -均質(zhì)化步驟，以及
[0116] -蒸汽滅菌步驟。
[0117] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述水合步驟在室溫下實施。
[0118] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述均質(zhì)化步驟在室溫下實 施。
[0119] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述蒸汽滅菌步驟在m°c 至134°C的溫度下實施，該步驟持續(xù)調(diào)整到所述溫度的時段。
[0120] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其額外地包括至少一個包裝 步驟，其中將均質(zhì)化混合物包裝入注射器中。
[0121] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其額外地包括至少一個包裝 步驟，其中將均質(zhì)化混合物包裝入單劑量瓶中。
[0122] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其額外地包括至少一個交聯(lián) 步驟。
[0123] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述交聯(lián)步驟是在所述水合 步驟與所述混合步驟之間進行的。
[0124] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其包括按照W0 2013/079889 中所述方法來混合兩種預(yù)先交聯(lián)的透明質(zhì)酸的步驟。
[0125] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述交聯(lián)步驟是借助于至少 一種交聯(lián)劑來實施的。
[0126] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述交聯(lián)劑是雙官能或多官 能的。
[0127] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述雙官能交聯(lián)劑或多官能 交聯(lián)劑選自：乙二醇二縮水甘油醚、丁二醇二縮水甘油醚（BDDE)、聚甘油聚縮水甘油醚、聚 乙二醇二縮水甘油醚、聚丙二醇二縮水甘油醚、雙或多環(huán)氧化合物（例如1，2, 3,4-雙環(huán)氧 丁烷或1，2, 7,8-雙環(huán)氧辛烷）、二烷基砜、二乙烯基砜、甲醛、環(huán)氧氯丙烷，或可選戊二醛或 碳化二亞胺，例如1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基）-碳二亞胺鹽酸鹽（EDC)。
[0128] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：所述雙官能交聯(lián)劑為丁二醇 二縮水甘油醚（BDDE)或1，2, 7,8-雙環(huán)氧辛烷。
[0129] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的生產(chǎn)方法的特征在于，所述交聯(lián)步驟是根據(jù)本 領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)實施的。
[0130] 在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于：其在所述交聯(lián)步驟之后，包括 至少一個純化和洗滌步驟，其根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)實施。
[0131] 本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的組合物在配制粘彈性補充組合物中的用途。
[0132] 本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的組合物在配制作為填充皺紋的組合物中的用途。
[0133] 目標應(yīng)用更特別地是那些常見于用于或潛在可用于如下疾病或治療的可注射粘 彈性補充產(chǎn)品的應(yīng)用：
[0134] _面部美容注射：用于填充皺紋、皮膚缺陷或體積缺陷（顴骨、下巴、唇）；
[0135] _體內(nèi)豐盈注射：乳房及臀部增大、G點增大、陰道成形術(shù)、陰道陰唇的重建或陰莖 增大；
[0136] _治療骨關(guān)節(jié)炎，注射到關(guān)節(jié)中以替代或補充不足的滑液；
[0137] -在治療括約肌機能不全導(dǎo)致的尿失禁中的尿道周圍注射；
[0138] -特別用于防止腹膜粘連的手術(shù)后注射；
[0139] _通過激光鞏膜切開的遠視外科手術(shù)之后的注射；
[0140] -向玻璃體腔中的注射。
[0141] 更特別地，在美容手術(shù)中，根據(jù)其粘彈性補充及持久性，根據(jù)本發(fā)明方法獲得的水 凝膠可用于：
[0142] _用于填充微細、中度、深度皺紋，并可用細針頭（例如27號）注射；
[0143] -利用通過直徑更大（例如22號至26號）且長度更長（例如30mm至40mm)的針 頭的注射，作為豐盈產(chǎn)品；這種情況下，其粘合性將使得能夠確保其保持在注射位置。
[0144] 根據(jù)本發(fā)明的組合物還在關(guān)節(jié)外科中具有重要應(yīng)用，以及在口腔外科具有例如用 于填充牙周袋的重要用途。
[0145] 這些實施的例子絕非限制性的，根據(jù)本發(fā)明的組合物更廣泛地用于：
[0146] -填充體積；
[0147] -在某些組織間產(chǎn)生空隙，由此發(fā)揮它們的最佳機能；
[0148] -代替不足的生理流體。
[0149] 本發(fā)明還涉及包含根據(jù)本發(fā)明的組合物的套裝，其包裝于注射器中并在包裝后進 行滅菌。
[0150] 本發(fā)明還涉及包含根據(jù)本發(fā)明的組合物的套裝，其包裝于單劑量瓶中并在包裝后 進行滅菌。
[0151] 根據(jù)本發(fā)明的組合物在化妝品或醫(yī)藥領(lǐng)域中也是有用的。
[0152] 更特別地，在化妝品領(lǐng)域中，根據(jù)本發(fā)明的組合物將用作化妝品組合物中的保濕 活性成分。
[0153] 在醫(yī)藥領(lǐng)域中，根據(jù)本發(fā)明的組合物將用作使患有干眼病的眼睛保濕的組合物， 即作為人工淚液。
[0154] 在這些化妝品和/或醫(yī)藥應(yīng)用中，本發(fā)明組合物可額外地包含任何化妝品和/或 藥學(xué)上可接受的組分。
[0155] 根據(jù)本發(fā)明的組合物的特征、它們的制備方法及其性質(zhì)在以下的實施例中進行詳 述。
[0156] 實施例1
[0157] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸和蔗糖八硫酸酯鉀的組合物。
[0158] 在容器中稱取可注射等級的透明質(zhì)酸鈉（NaHA)纖維（lg ;分子量：約2. 7MDa)。加 入磷酸鹽緩沖水溶液（32. 3g)，在室溫及900mmHg的大氣壓下，用刮鏟將全部物質(zhì)均質(zhì)化約 1小時。
[0159] 由此所得的非交聯(lián)NaHA水凝膠的NaHA濃度為約30mg/g。
[0160] 將蔗糖八硫酸酯鉀（KSOS) (60mg，即4. 7X 10_5m〇l)溶于磷酸鹽緩沖溶液（19. 94g) 中，以獲得濃度為3mg/g的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液。
[0161] 通過加入上述制備得到的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液，將前述步驟所獲得的NaHA 水凝膠進行稀釋。隨后將由此得到的組合物均質(zhì)化。
[0162] 由此得到了包含濃度為20mg/g的非交聯(lián)NaHA及濃度為lmg/g的KS0S的組合物； 因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0163] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0164] 表7中所述的凝膠是通過調(diào)整使用量根據(jù)與上述相同的方法制備的。
[0165] 實施例2
[0166] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含交聯(lián)透明質(zhì)酸和蔗糖八硫酸酯鉀的組合物。
[0167] 根據(jù)Vivacy名下的W0 2009/071697 (實施例1，第1部分）中描述的交聯(lián)方法， 以透明質(zhì)酸鈉（NaHA)纖維（lg ;分子量：約2. 7MDa)及丁二醇二縮水甘油醚（BDDE) (54mg) 為原料，制備得到包含交聯(lián)透明質(zhì)酸的組合物。由此所得的組合物的交聯(lián)NaHA濃度為約 3〇mg/g，交聯(lián)度X為約0? 12。
[0168] 按照實施例1制備濃度為3mg/g的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液。
[0169] 在上述制備得到的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液中稀釋前述步驟中所獲得的交聯(lián) NaHA水凝膠。隨后將由此得到的組合物均質(zhì)化。
[0170] 由此得到了包含濃度為20mg/g的交聯(lián)NaHA及濃度為lmg/g的蔗糖八硫酸酯鉀的 組合物；因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0171] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0172] 表8中所述的凝膠是通過調(diào)整使用量根據(jù)與上述相同的方法制備的。
[0173] 實施例3
[0174] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸、蔗糖八硫酸酯鉀及甘露醇的示 例性組合物。
[0175] 根據(jù)實施例1的方法，以30mg/g濃度的透明質(zhì)酸水凝膠及10mg/g濃度的蔗糖八 硫酸酯鉀的水溶液為原料，制備包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸和蔗糖八硫酸酯鉀的組合物。
[0176] 根據(jù)Anteis名下的W0 2009/024670中描述的方法，向上述獲得的組合物中進行 添加86mg/g濃度的甘露醇溶液。
[0177] 由此得到的組合物包含濃度為20mg/g的非交聯(lián)NaHA、濃度為20mg/g的甘露醇及 濃度為lmg/g的蔗糖八硫酸酯鉀；因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0178] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0179] 實施例4
[0180] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含交聯(lián)透明質(zhì)酸、蔗糖八硫酸酯鉀及甘露醇的示例 性組合物。
[0181] 根據(jù)實施例2的方法，以30mg/g濃度的NaHA水凝膠及10mg/g濃度的鹿糖八硫酸 酯鉀為原料，制備包含交聯(lián)NaHA的組合物。
[0182] 根據(jù)Anteis名下的W0 2009/024670中描述的方法，向上述獲得的組合物中進行 添加86mg/g濃度的甘露醇溶液。
[0183] 由此得到的組合物包含濃度為20mg/g的交聯(lián)透明質(zhì)酸、濃度為20mg/g的甘露醇 及濃度為lmg/g的蔗糖八硫酸酯鉀；因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0184] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0185] 實施例5
[0186] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸、蔗糖八硫酸酯鉀及利多卡因的 示例性組合物。
[0187] 根據(jù)實施例1的方法，以30mg/g濃度的透明質(zhì)酸水凝膠及10mg/g濃度的蔗糖八 硫酸酯鉀溶液為原料，制備包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸和蔗糖八硫酸酯鉀的組合物。
[0188] 根據(jù)Anteis名下的W0 2009/024670中描述的方法，或者根據(jù)Vivacy名下的申請 US 61/791 977或FR 13/52971中描述的方法，向上述獲得的組合物中進行添加13mg/g濃 度的利多卡因溶液。
[0189] 由此得到的組合物包含濃度為20mg/g的非交聯(lián)透明質(zhì)酸、濃度為3mg/g的利多卡 因及濃度為lmg/g的蔗糖八硫酸酯鉀；因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0190] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0191] 實施例6
[0192] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含交聯(lián)透明質(zhì)酸、蔗糖八硫酸酯鉀及利多卡因的示 例性組合物。
[0193] 根據(jù)實施例2的方法，以30mg/g濃度的NaHA水凝膠及10mg/g濃度的鹿糖八硫酸 酯鉀為原料，制備包含交聯(lián)NaHA的組合物。
[0194] 根據(jù)Anteis名下的W0 2009/024670中描述的方法，或者根據(jù)Vivacy名下的申請 US 61/791 977或FR 13/52971中描述的方法，向上述獲得的組合物中進行添加13mg/g濃 度的利多卡因溶液。
[0195] 由此得到的組合物包含濃度為20mg/g的交聯(lián)透明質(zhì)酸、濃度為3mg/g的利多卡因 及濃度為lmg/g的蔗糖八硫酸酯鉀；因此以重量計的[HA]/[S0S]比率為20。
[0196] 將上述得到的組合物包裝到注射器中，將其經(jīng)蒸汽滅菌消毒（T = 121°C，10分 鐘）。
[0197] 實施例1至6中制得的組合物可用于粘彈性補充或用作填充流體。
[0198] 實施例7
[0199] 本實施例說明根據(jù)本發(fā)明的包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸和蔗糖八硫酸酯鉀的組合物用 于治療干眼病。
[0200] 在容器中稱取可注射等級的透明質(zhì)酸鈉（NaHA)纖維（lg;分子量：約lMDa)。加入 磷酸鹽緩沖水溶液（165. 7g)，在室溫及900mmHg的大氣壓下，用刮鏟將全部物質(zhì)均質(zhì)化約1 小時。
[0201] 由此所得的非交聯(lián)NaHA水凝膠的NaHA濃度為約6mg/g。
[0202] 將蔗糖八硫酸酯鉀（KSOS) (600mg，即4. 7 X l(T4m〇l)溶于磷酸鹽緩沖溶液 (19. 94g)中，以獲得濃度為30mg/g的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液。
[0203] 通過加入上述制備得到的蔗糖八硫酸酯鉀的水溶液，將前述步驟所獲得的NaHA 水凝膠進行稀釋。隨后將由此得到的組合物均質(zhì)化。
[0204] 由此得到包含濃度為4mg/g的非交聯(lián)NaHA及濃度為10mg/g的KS0S的組合物；因 此以重量計的[HA]/[S0S]比率為0.4。
[0205] 將上述得到的組合物包裝到單劑量瓶中，將其滅菌。
[0206] 實施例8
[0207] 本實施例說明化妝品制劑。
[0208] 鯨臘硬脂醇 5% 酯（二辛基酸（6therdicaprylique)，肉豆蔻酸肉豆寇酯） 10% 實施例1中獲得的非交聯(lián)透明質(zhì)酸及蔗糖八硫酸酯鉀的組合物1% 甘油 5% 乙醇 5%
[0209] 生育酚 0.2% 香料 0.1% 水 補加至100%
[0210] 實施例9
[0211] 本實施例說明滅菌化妝品制劑。
[0212] 根據(jù)實施例1獲得的非交聯(lián)透明質(zhì)酸及蔗糖八硫酸酯鉀鹽的組合物，其中
[0213]
[HA|/|S()S丨比率為4 1% 卡波姆 0.5% 黃原膠 2.5% 杵檬酸 0.1% 2苯基乙醇 0.5% 甘油 1.2% 水 補加至100°/0
[0214] 以劑量為5_25kGy (優(yōu)選7_15kGy)的Y射線輻照對上述化妝品制劑進行滅菌。
[0215] 實施例10
[0216] 關(guān)于蒸汽滅菌的穩(wěn)定性
[0217] 對于根據(jù)本發(fā)明的包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸的組合物，經(jīng)蒸汽滅菌步驟之后該滅菌組 合物的粘度n，利用TA Instruments的AR 2000EX型流變儀在受控的約束條件及25°C下 進行表征。所述粘度值在約束為0.02s4下記錄。
[0218] 對于包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸的組合物，粘度損失的百分比為：蒸汽滅菌后參考組合 物的粘度與包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸和硫酸化低聚多糖或硫酸化單糖的組合物在經(jīng)蒸汽滅菌 后的粘度的差值，相對于蒸汽滅菌后參考組合物粘度值的百分比。
[0219] 對于根據(jù)本發(fā)明的包含交聯(lián)透明質(zhì)酸的組合物，經(jīng)高壓滅菌步驟之后滅菌組合物 的彈性分量G'，利用TA Instruments的AR 2000Ex型流變儀在振蕩條件及25°C下進行表 征。所述彈性分量值在1Hz頻率下記錄。
[0220] 對于上述包含交聯(lián)透明質(zhì)酸的組合物，彈性分量G'損失的百分比為：蒸汽滅菌后 參考組合物的彈性分量G'與包含交聯(lián)透明質(zhì)酸和硫酸化低聚多糖或硫酸化單糖的組合物 在經(jīng)蒸汽滅菌后的彈性分量G'的差值，相對于蒸汽滅菌后參考組合物的彈性分量G'值的 百分比。
[0221] 對于所有這些測試，配制一種參考組合物，將硫酸化低聚多糖或硫酸化單糖的水 溶液用相同量的磷酸緩沖水溶液代替。
[0222] a)關(guān)于包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸及硫酸化低聚多糖或硫酸化單糖的組合物經(jīng)蒸汽滅 菌的穩(wěn)定性。
[0223] 根據(jù)實施例1所述的方法制備了 9種包含非交聯(lián)透明質(zhì)酸及硫酸化低聚多糖或硫 酸化單糖（在組合物中的濃度為lmg/g)的組合物。
[0224] 還配制了參考組合物，將硫酸化低聚多糖或硫酸化單糖的水溶液用相同量的磷酸 緩沖水溶液代替。
[0225]測定了根據(jù)實施例1方法制得的組合物相對于參考組合物的經(jīng)蒸汽滅菌步驟后 的粘度損失百分比，所得結(jié)果列于下表1中：
[0226]

【權(quán)利要求】
1. 一種在水性介質(zhì)中的滅菌組合物，所述滅菌組合物包含至少一種透明質(zhì)酸及至少 一種蔗糖八硫酸酯水溶性鹽，其特征在于：所述組合物是物理混合物，并且透明質(zhì)酸的含量 [HA]與蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[SOS]按重量計的比率[HA]/[SOS]大于或等于0. 1。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于：當(dāng)對所述組合物進行質(zhì)子1H NMR光譜 分析時，所述蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的端基質(zhì)子的化學(xué)位移值，與單獨處于溶液中的所述 蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的端基質(zhì)子的化學(xué)位移值相等。
3. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：透明質(zhì)酸的含量[HA]與蔗 糖八硫酸酯水溶性鹽的含量[SOS]按重量計的比率[HA]/[SOS]為0. 1至5000。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述透明質(zhì)酸的分子量Mw 為 0? OlMDa 至 5MDa。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：透明質(zhì)酸相對于組合物的 含量為2mg/g至50mg/g。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：透明質(zhì)酸相對于組合物的 含量為4mg/g至40mg/g。
7. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述組合物包含至少一種 非交聯(lián)透明質(zhì)酸。
8. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述組合物額外地包含至 少一種交聯(lián)透明質(zhì)酸。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其特征在于：所述交聯(lián)透明質(zhì)酸顯示0. 001至0. 5的 交聯(lián)度X。
10. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述組合物包含被賦予 親脂性或保濕性的基團取代的至少一種透明質(zhì)酸。
11. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述組合物額外地包含 另一種多糖。
12. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述蔗糖八硫酸酯水溶 性鹽選自堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽、銨鹽及氨基酸鹽。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的組合物，其特征在于：所述蔗糖八硫酸酯水溶性鹽選自所 述堿金屬鹽和所述堿土金屬鹽。
14. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物，其特征在于：所述蔗糖八硫酸酯水溶性鹽為蔗糖 八硫酸酯的鈉鹽或蔗糖八硫酸酯的鉀鹽。
15. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述蔗糖八硫酸酯水溶 性鹽相對于組合物的含量為0. 〇lmg/g至40mg/g。
16. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其特征在于：所述組合物額外地包含 至少一種活性成分。
17. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的組合物，其特征在于：所述活性成分選自抗氧化劑、局部麻 醉劑或維生素，所述抗氧化劑、局部麻醉劑或維生素單獨或組合使用。
18. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于：所述抗氧化劑選自多元醇。
19. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于：所述局部麻醉劑選自利多卡因、普魯 卡因、甲哌卡因、柔匹華卡因、布比卡因及其藥學(xué)上可接受的鹽。
20. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的組合物，其特征在于：相對于所述組合物總重量，所述活性 成分的含量按重量計為〇. 01 %至10%。
21. 根據(jù)權(quán)利要求1至19中任一項所述的組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述方法包 括至少如下步驟： ?至少一種透明質(zhì)酸纖維的水合步驟，以獲得水凝膠， ?將前述步驟中所獲得的所述水凝膠與蔗糖八硫酸酯水溶性鹽的溶液混合的步驟， ?均質(zhì)化步驟，以及 ?蒸汽滅菌步驟。
22. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述方法額外地包括至 少一個交聯(lián)步驟。
23. 根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項所述的組合物用在配制粘彈性補充組合物中的用 途。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項所述的組合物在配制作為填充皺紋的組合物中的用 途。
25. 根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項所述的組合物在配制治療干眼病的組合物中的用 途。
26. -種化妝品制劑，其特征在于，所述化妝品制劑包含根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項 所述的組合物以及至少一種化妝品可接受的賦形劑。
27. 根據(jù)權(quán)利要求26所述的化妝品制劑，其特征在于，所述化妝品制劑包含相對于所 述化妝品制劑總重量為按重量計〇. 01 %至10%的根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項所述的組 合物。
28. -種包含根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項所述的組合物的套裝，所述組合物包裝于 滅菌注射器中或包裝于滅菌單劑量瓶中。
【文檔編號】A61P19/02GK104394934SQ201380031227
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2013年6月13日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月13日
【發(fā)明者】埃斯特爾·皮龍, 熱雷米·邦貝唐 申請人:實驗室維維西公司