干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)siRNA及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)siRNA及其應(yīng)用，stealth?siRNA-69，stealth?siRNA-294，stealth?siRNA-319是以EV712A蛋白酶基因?yàn)榘行蛄谢瘜W(xué)合成的三個(gè)siRNA，其可以與EV71病毒2A蛋白酶基因區(qū)域有效的互補(bǔ)結(jié)合，將病毒核酸降解，從而達(dá)到抑制病毒復(fù)制擴(kuò)增的目的。以siRNA為基礎(chǔ)的RNAi因其基因沉默的高度特異性和高效性，為病毒感染類(lèi)疾病的臨床治療開(kāi)辟了新的途徑。
【專(zhuān)利說(shuō)明】干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)s iRNA及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】[0001]本發(fā)明涉及的是干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)siRNA及其應(yīng)用，包括stealth siRNA_69stealth siRNA_294stealth siRNA-319。
【背景技術(shù)】
[0002]EV71病毒屬于微小RNA病毒科腸道病毒A組,病毒基因組為單股正鏈RNA,大小約7500bp，病毒衣殼為二十面體立體對(duì)稱(chēng)球形結(jié)構(gòu)，直徑約為24-30nm，無(wú)包膜和突出。EV71感染主要引起手足口病，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱，手、足、口腔黏膜等部位出現(xiàn)皰疹，重癥病例在發(fā)病1-5天后出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫和循環(huán)障礙等癥狀，甚至死亡。1957年，加拿大首次報(bào)告手足口病，之后在歐洲、美洲和亞洲多個(gè)地區(qū)相繼發(fā)生大流行。在我國(guó)，手足口病早有流行。1981年，上海首次報(bào)告了手足口病，2008年3月，安徽省阜陽(yáng)市發(fā)生了較大規(guī)模的疫情，感染人數(shù)達(dá)176000人，并有23例死亡，隨即在全國(guó)其他地區(qū)也出現(xiàn)了手足口病的疫情，引起了社會(huì)的恐慌。目前，尚無(wú)有效抵抗EV71的抗病毒藥物，所以，尋找一種潛在有效的抗病毒方法是十分必要的。
[0003]RNA干擾是一種分子生物學(xué)上由雙鏈RNA誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象，其機(jī)制是通過(guò)阻礙特定基因的翻譯或轉(zhuǎn)錄來(lái)抑制基因表達(dá)。當(dāng)細(xì)胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的雙鏈RNA時(shí)，該mRNA發(fā)生降解而導(dǎo)致基因表達(dá)沉默。研究中導(dǎo)入的雙鏈RNA分子為具有基因沉默功能的大小約21-25核苷酸的雙鏈小RNA分子(稱(chēng)為siRNA)，由RNAaseIII家族中對(duì)雙鏈RNA具有特異性的酶Dicer加工而成。
[0004]近些年已經(jīng)報(bào)道過(guò)以EV71基因的其他區(qū)域比如vpl，vp2，5’UTR，3’UTR，2C, 3Cproand3Dpol為靶序列化學(xué)合成siRNR治療病毒的文章，但還沒(méi)有以2A蛋白酶基因作為抑制病毒復(fù)制的靶標(biāo)，所以本發(fā)明的目的是探討以EV712A蛋白酶基因?yàn)榘行蛄谢瘜W(xué)合成的三個(gè)siRNA是否具有潛在的抗病毒作用。
[0005]因此，現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷，需要改進(jìn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足提供干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)siRNA及其應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0008]干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)siRNA，包括如下表所示的三個(gè)siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
[0009]
【權(quán)利要求】
1.干擾EV71病毒2A蛋白酶基因的三個(gè)SiRNA，其特征在于，包括如下表所示的三個(gè)siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
2.權(quán)利要求1所述的三個(gè)siRNA的應(yīng)用，其與EV71病毒2A蛋白酶基因區(qū)域有效的互補(bǔ)結(jié)合，將病毒核酸降解，從而達(dá)到抑制病毒復(fù)制擴(kuò)增的目的。
【文檔編號(hào)】A61K48/00GK103642808SQ201310646161
【公開(kāi)日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2013年12月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月6日
【發(fā)明者】陳建國(guó), 劉海冰, 王勝軍, 孔枕枕, 趙培培 申請(qǐng)人:陳建國(guó), 劉海冰