一種山荊子葉醇提取物對糖尿病的作用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種山荊子葉醇提取物的提取制備方法及其調(diào)節(jié)糖尿病血脂血糖方面的應(yīng)用，其特征是稱取陰干后的山荊子葉，粉碎，按料液質(zhì)量比1:25-1:30加入30-99%的乙醇，在40℃，40Hz、250W的條件下超聲提取30-90min，提取1-5次，過濾合并提取液，減壓濃縮至浸膏狀，冷凍干燥得山荊子葉醇提取物。本發(fā)明進(jìn)一步公開山荊子葉醇提取物其中富含多酚類物質(zhì)，對糖尿病引起的肝臟腎臟等器官損傷具有顯著的改善和保護(hù)作用，并對糖尿病的血糖有降低作用，對糖尿病小鼠的血脂具有調(diào)節(jié)作用，在預(yù)防、治療和輔助治療糖尿病中具有顯著的效果。
【專利說明】一種山荊子葉醇提取物對糖尿病的作用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種山荊子葉醇提物的對糖尿病的預(yù)防和治療作用。屬于藥物【技術(shù)領(lǐng)域】。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]山荊子[JfeJrW1S bacca ta ( Linn.)Borkh.],另I」名山丁子、林荊子、山定子等,是薔薇科(Rosaceae)蘋果屬(Malus)多年生木本植物,在我國其主要分布于東北、華北及西南等地，朝鮮及俄羅斯西伯利亞也有分布[I]?，F(xiàn)在的研究主要集中在其緑化觀賞及抗旱等作用方面[2-3]，對于其化學(xué)成分的研究少有報(bào)道。山荊子花和葉的揮發(fā)油成分主要為萜類、酯類和烯烴類化合物，主要成分是法呢烯[4]。而多酚和黃酮類化合物是山荊子的主要活性物質(zhì)，其中根皮苷是其藥理活性成分之一 [5，6]，它是ー種廣泛分布于蘋果、蘋果樹皮和葉以及多穗柯甜茶嫩葉中的多酚類化合物，具有抗氧化[7]、調(diào)節(jié)血糖[8]、清除自由基[9，10]等多種藥理活性。山荊子葉醇提物能夠抑制脂肪酸合酶的能力，具有一定的減肥效果[11]。然而，對于山荊子葉醇提取物對糖尿病小鼠的降血糖、降血脂作用并沒有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。鑒于此，本發(fā)明采用HPLC法測定山荊子葉中根根皮素、槲皮素及蘆丁的含量，研究了山荊子葉醇提取物對小鼠血糖、血脂的作用，這為開發(fā)新型的抗糖尿病天然藥物做了一定的理論基礎(chǔ)。
[0004]糖尿病是ー種常見的內(nèi)分泌代謝紊亂的疾病，其發(fā)病與脂代謝異常有關(guān)[12]，因此改善糖尿病中的糖脂代謝紊亂是治療糖尿病及其并發(fā)癥的重要的手段。本研究中糖尿病模型組小鼠血糖、血脂比空白組明顯升高，說明了糖脂代謝的紊亂存在。糖尿病導(dǎo)致的脂代謝紊亂以血清甘油三酯(TG)含量增高最為明顯，血清總膽固醇(TC)次之[13]。糖尿病患者血清中高密度膽固醇(HDL-C)水平降低會導(dǎo)致HDL顆粒攝取膽固醇的能力降低，致使膽固醇大量堆積。這可能是導(dǎo)致糖尿病患者動`脈粥樣化病因的重要因素之一 [14]。有研究報(bào)道[15，16]，根皮苷、槲皮素和蘆丁具有降低糖尿病小鼠血糖和血脂的功效。
[0005]免疫力下降是糖尿病的顯著特征。胸腺是T細(xì)胞分化和發(fā)育的場所，是機(jī)體重要的中樞免疫器官，而脾臟是體內(nèi)最大的淋巴器官，也是具有免疫活性的T、B細(xì)胞移居和接受抗原刺激后產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場所，因此胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)在一定程度上是衡量免疫功能的重要指標(biāo)之ー [17]。糖尿病慢性并發(fā)癥不僅包括胸腺、脾臟、腎臟，肝臟也是長期高血糖累及的靶器官之一 [18]。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明提供了一種山荊子葉醇提取物的提取制備方法，適用于エ業(yè)化生產(chǎn)。
[0007]本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，其中以多酚類為主要活性物質(zhì)。
[0008]本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，該山荊子醇提取物顯著降低糖尿病小鼠空腹血糖并改善其ロ服糖耐量水平。[0009]本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，該山荊子醇提取物能降低糖尿病血脂高的癥狀，改善糖尿病導(dǎo)致的脂代謝紊亂的情況。
[0010]本發(fā)明進(jìn)一步公開了山荊子葉醇提取物在預(yù)防、治療和輔助治療糖尿病中的應(yīng)用，尤其是控制血糖和血脂方面具有顯著的效果。
[0011]本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，山荊子葉醇提物高、低劑量均能明顯降低糖尿病小鼠血清中TG、TC水平，在一定的程度上升高HDL-C水平，使其TG、TC基本維持在正常水平。動物體內(nèi)糖代謝和脂代謝之間有著密切聯(lián)系，高糖血癥為原發(fā)性改變，高脂血癥為繼發(fā)性改變。本發(fā)明實(shí)驗(yàn)中，山荊子葉醇提物高劑量能夠顯著改善糖尿病小鼠空腹血糖和ロ服糖耐量水平。山荊子葉醇提物具有調(diào)節(jié)糖尿病小鼠的血脂、血糖，可能是因?yàn)槠鋬?nèi)含根皮苷、槲皮素和蘆丁等成分。
[0012]本研究中，低劑量的山荊子葉醇提物雖不能顯著性的降低糖尿病小鼠的血糖，但卻可以很好地減少小鼠臟器受到的損傷。高劑量的山荊子葉醇提物不僅能降低糖尿病小鼠血糖，也可以修復(fù)小鼠損傷的臟器，增強(qiáng)小鼠的免疫力。因此，山荊子葉醇提物對糖尿病的血糖、血脂、以及臟器的改善具有顯著效果。
[0013]本發(fā)明提供的山荊子葉醇提取物的制備方法，具體技術(shù)方案如下:
稱取陰干后的山荊子葉，粉碎，按料液質(zhì)量比1:25-1:30加入30-99%的こ醇，在40°C，40Hz、250W的條件下超聲提取30-90min，提取1_5次，過濾合并提取液，減壓濃縮至浸膏狀，冷凍干燥得山荊子葉醇提取物。
[0014]本發(fā)明山荊子葉醇提取物的對糖尿病的作用，其特征在于是以根皮苷等總多酚為主要有效成分制成的。本發(fā)明中，我們測定了山荊子こ醇提取物對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血脂、血糖的影響及保護(hù)作用。結(jié)果表明，山荊子こ醇提取物可以改善糖尿病小鼠的“三多ー少”癥狀，降低糖尿病小鼠的血糖、血脂，修復(fù)小鼠損傷臟器。山荊子醇提取物的這種活性可能歸結(jié)于其內(nèi)的多酚類化合物。
[0015]本發(fā)明的積極效果在于:以山荊子葉為原料，采用常規(guī)提取方法，簡便易得，本發(fā)明提供的山荊子葉醇提取物對糖尿病臟器損傷具有保護(hù)作用，具有降血糖降血脂的作用，可應(yīng)用于糖尿病患者提高免疫カ以及保健治療中。
[0016]為進(jìn)ー步說明本發(fā)明的山荊子葉提取物對糖尿病的作用，下面提供山荊子葉醇提取物中相關(guān)物質(zhì)的含量測定及糖尿病小鼠血糖血脂藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[0017]實(shí)驗(yàn)例I HPLC法測定山荊子葉中根皮苷、根皮素、槲皮素及蘆丁含量 I實(shí)驗(yàn)儀器及材料
對照品及樣品溶液的配制精密稱取根皮苷、根皮素、槲皮素和蘆丁對照品，甲醇配制成質(zhì)量濃度依次為0.1，0.025,0.14，0.51 mg ? mじ1的混合對照品溶液，過0.22 Um濾膜，備用。山荊子葉樣品溶液為山荊子葉為原料采用實(shí)施例2中方法加工而成。將合并后的提取液定容至100 mL,過0.45 um的濾膜，得樣品溶液。
[0018]2色譜條件
色譜柱:Hypersi 10DS2 (250 mmX4.6 mm, 5 Mm);柱溫:35°C ;流動相:甲醇 _0.2% 磷酸水(0-40 min,甲醇 10%-50% ；40-50 min,甲醇 50%)，流速:1.0 mL.min-l ;檢測波長:285nm;進(jìn)樣量:20 ML。在該色譜條件下蘆丁，根皮苷，槲皮素和根皮素均能被洗脫并達(dá)到基線分離。[0019]3 結(jié)果
山荊子多酚的色譜圖，分別是圖1 (A和B)，含量結(jié)果見表1。
[0020]圖1.標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖(A)及樣品色譜圖(B)其中色譜峰分別代表
1.蘆丁(Rutin) ；2.根皮苷(Phlorizin) ；3.槲皮素(Quercetin) ；4.根皮素(Phloretin)
表1樣品測定結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明提供了一種山荊子葉醇提取物的提取制備方法，適用于エ業(yè)化生產(chǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，其中以根皮苷、根皮素、槲皮素、蘆丁等多酚類為主要活性物質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，該山荊子醇提取物顯著降低糖尿病小鼠空腹血糖并改善其ロ服糖耐量水平。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，本發(fā)明提供的一種山荊子葉醇提取物，該山荊子醇提取物能降低糖尿病血脂高的癥狀，改善糖尿病導(dǎo)致的脂代謝紊亂的情況。
5.根據(jù)權(quán)利要求1，本發(fā)明進(jìn)一步公開了山荊子葉醇提取物在預(yù)防、治療和輔助治療糖尿病中的應(yīng)用，尤其是控制·血糖和血脂方面具有顯著的效果。
【文檔編號】A61P3/06GK103585309SQ201310462314
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年10月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月8日
【發(fā)明者】鄭毅男, 丁傳波, 陳麗榮, 高飛飛 申請人:大連杰信生物科技有限公司