胰島素樣生長因子-Ⅰ緩釋片及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種胰島素樣生長因子-Ⅰ緩釋片。該緩釋片由胰島素樣生長因子-Ⅰ、酪蛋白、腺苷、大豆粕、卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白組成,是先從大豆粕中提取大豆肽,再將胰島素樣生長因子-Ⅰ與酪蛋白等原輔料制成脂質(zhì)體,將兩者與其他原料混勻制備而得。本發(fā)明具有組方科學(xué),可有效提高機體免疫,且質(zhì)量穩(wěn)定,具有良好緩釋效果、生物利用度高等優(yōu)點。
【專利說明】胰島素樣生長因子-1緩釋片及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及保健品領(lǐng)域,具體涉及胰島素樣生長因子-1緩釋片。
【背景技術(shù)】
[0002]胰島素樣生長因子-1 (IGF-1 )是一種活性蛋白多肽物質(zhì),其具有:1.降血糖;
2.降血脂;3.舒張血管;4.促進骨的合成代謝保持其正常結(jié)構(gòu)功能;5.促生長;6.促細胞分化;7.創(chuàng)傷修復(fù)等功效。然而單獨口服IGF-1卻很難被吸收,只有約10%不被消化液分解而被整體吸收,但與酪蛋白同時服用則完整吸收率可達46%。酪蛋白可促進人體對于IGF-1的吸收。
[0003]大豆肽是大豆蛋白質(zhì)經(jīng)酸解或酶解而得的由不同氨基酸組成的肽鏈的混合物,以小分子肽為主,還含有少量游離氨基酸、糖類、大分子肽、無機鹽等成分。大豆肽具有易溶于水、無蛋白變性、加熱不凝固、酸性不沉淀、流動性好、乳化性低、無豆腥味等理化性質(zhì)。大豆肽具有易消化吸收性、促進機體免疫調(diào)節(jié)、氨基酸組成合理、低過敏性和低抗原性、抗氧化作用、促進蛋白質(zhì)合成、促進礦物質(zhì)吸收等優(yōu)點。作為一種新型的功能活性因子,大豆多肽在營養(yǎng)療效食品、功能食品、保健食品、嬰兒食品、發(fā)酵食品和強化運動飲料中有廣泛的應(yīng)用價值。
[0004]腺苷指由腺嘌呤的N-9與D-核糖的C-1通過P糖苷鍵連接而成的化合物,為白色結(jié)晶性粉末,腺苷是一種遍布人體細胞的內(nèi)源性核苷,可直接進入心肌經(jīng)磷酸化生成腺苷酸,參與心肌能量代謝,同時還參與擴張冠脈血管,增加血流量。腺苷對心血管系統(tǒng)和肌體的許多其它系統(tǒng)及組織均有生理作用。腺苷是用于合成三磷酸腺苷、腺嘌呤、腺苷酸、阿糖腺苷的重要中間體。
[0005]隨著人們生活水平提高,對健康的重視程度與日俱增,市面保健品雖品種繁多,但質(zhì)量和效果參差不齊,研制一種成分配伍科學(xué),可有效提高機體免疫,且質(zhì)量穩(wěn)定,具有良好緩釋效果、生物利用度高的保健品具有廣闊市場前景。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足,目的是提供一種配方科學(xué),具有良好生物利用度,可提高機體免疫的胰島素樣生長因子-1緩釋片。
[0007]本發(fā)明的另一個目的是提供一種工藝嚴謹,適合工業(yè)化推廣的胰島素樣生長因子-1緩釋片的制備方法。
[0008]實現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案是:
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 20-26份、酪蛋白14-17份、腺苷8-12份、大豆蛋白42-54份、卵磷脂24-32份、膽固醇6-10份、膠原蛋白3-6份;
具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量5-7倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度55_65°C,調(diào)節(jié)pH值至8.0-8.5,于每克大豆蛋白中加入0.005-0.008g堿性蛋白酶水解30_60min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.004-0.007g木瓜蛋白酶、0.006-0.009g菠蘿蛋白酶、0.008-0.012g中性蛋白酶水解60-90min,調(diào)節(jié)PH值至2.3-2.8,于每克大豆蛋白中依次加A 0.005-0.008g 黑曲霉蛋白酶、0.003-0.005g 胃蛋白酶水解 3.5-5.5h,在 300-500r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量8-14倍量的體積分數(shù)為80-95%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于10-14份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,50-60°C水浴超聲5-10min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入32-38份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用;
將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0009]本發(fā)明也可根據(jù)實際生產(chǎn)需求,制成膠囊、口服液等其他劑型。
[0010]其中,胰島素樣生長因子-1購于北京端木圣達生物技術(shù)有限責(zé)任公司;酪蛋白購于甘肅華安生物科技集團;腺苷購于陜西森弗高科實業(yè)有限公司;大豆蛋白購于山東大豆蛋白有限公司;堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、中性蛋白酶購于南寧龐博生物工程有限公司;黑曲霉蛋白酶購于棗莊市杰諾生物酶有限公司;胃蛋白酶購于上海源聚生物科技有限公司。
[0011]本發(fā)明主要有效成分為胰島素樣生長因子(IGF-1 )、酪蛋白、大豆肽、腺苷,其中酪蛋白可提高人體對IGF-1的吸收;大豆肽為大豆蛋白經(jīng)復(fù)合酶分階段水解制得,復(fù)合酶法制備工藝可以克服單酶法水解存在的水解度不高、多肽得率低等缺點,其可增加蛋白質(zhì)催化位點,有效地將大豆蛋白分解成分子量低的小分子大豆肽,但多酶復(fù)合水解工藝條件中需要考慮的因素也比單酶水解要復(fù)雜,除水解時間、pH、溫度等常規(guī)因素外,還要考慮酶的配比和加入酶的方式等因素;將胰島素樣生長因子(IGF-1 )、酪蛋白、大豆肽三者制成脂質(zhì)體,一方面可使產(chǎn)品在體內(nèi)緩慢釋放,延長作用時間,另一方面可掩蓋原料的不良口感和氣味,增加產(chǎn)品適口性。本發(fā)明的組方科學(xué),各組分的功效經(jīng)合理的工藝加工制備可達到協(xié)同作用,從而達到長時間、有效提高機體免疫力的保健作用。
具體實施例
[0012]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步的說明,以助于理解本發(fā)明的內(nèi)容。
[0013]實施例1:
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 23份、酪蛋白15份、腺苷11份、大豆蛋白49份、卵磷脂28份、膽固醇8份、膠原蛋白4份; 具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量6倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度60°C,調(diào)節(jié)pH值至8.3,于每克大豆蛋白中加入0.007g堿性蛋白酶水解40min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.006g木瓜蛋白酶、0.007g菠蘿蛋白酶、0.0lOg中性蛋白酶水解75min,調(diào)節(jié)PH值至2.5,于每克大豆蛋白中依次加入0.007g黑曲霉蛋白酶、0.004g胃蛋白酶水解
4.5h,在420r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量12倍量的體積分數(shù)為85%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于12份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,55°C水浴超聲8min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入35份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用;
將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0014]實施例2
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 20份、酪蛋白14份、腺苷8份、大豆蛋白42份、卵磷脂24份、膽固醇6份、膠原蛋白3份;
具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量5倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度55°C,調(diào)節(jié)pH值至8.0,于每克大豆蛋白中加入0.005g堿性蛋白酶水解30min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.004g木瓜蛋白酶、0.006g菠蘿蛋白酶、0.008g中性蛋白酶水解60min,調(diào)節(jié)PH值至2.3,于每克大豆蛋白中依次加入0.005g黑曲霉蛋白酶、0.003g胃蛋白酶水解
3.5h,在300r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量8倍量的體積分數(shù)為80%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于10份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,50°C水浴超聲5min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入32份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用; 將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0015]實施例3
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 26份、酪蛋白17份、腺苷12份、大豆蛋白54份、卵磷脂32份、膽固醇10份、膠原蛋白6份;
具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量7倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度65°C,調(diào)節(jié)pH值至8.5,于每克大豆蛋白中加入0.008g堿性蛋白酶水解60min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.007g木瓜蛋白酶、0.009g菠蘿蛋白酶、0.012g中性蛋白酶水解90min,調(diào)節(jié)PH值至2.8,于每克大豆蛋白中依次加入0.008g黑曲霉蛋白酶、0.005g胃蛋白酶水解
5.5h,在500r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量14倍量的體積分數(shù)為95%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于14份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,60°C水浴超聲lOmin,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入38份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用;
將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0016]實施例4
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 18份、酪蛋白12份、腺苷6份、大豆蛋白50份、卵磷脂20份、膽固醇5份、膠原蛋白4份;
具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量4倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力
0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度50°C,調(diào)節(jié)pH值至8.0,于每克大豆蛋白中加入0.004g堿性蛋白酶水解30min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.003g木瓜蛋白酶、0.005g菠蘿蛋白酶、0.007g中性蛋白酶水解50min,調(diào)節(jié)PH值至2.1,于每克大豆蛋白中依次加入0.004g黑曲霉蛋白酶、0.002g胃蛋白酶水解3h,在200r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量7倍量的體積分數(shù)為70%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于8份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,40°C水浴超聲4min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入28份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用;
將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0017]實施例5
胰島素樣生長因子-1緩釋片,由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 28份、酪蛋白18份、腺苷13份、大豆蛋白55份、卵磷脂34份、膽固醇13份、膠原蛋白7份;
具體制備方法如下:
大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量8倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力
0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度75°C,調(diào)節(jié)pH值至8.5,于每克大豆蛋白中加入0.009g堿性蛋白酶水解60min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.008g木瓜蛋白酶、0.0lOg菠蘿蛋白酶、0.013g中性蛋白酶水解90min,調(diào)節(jié)PH值至2.9,于每克大豆蛋白中依次加入0.009g黑曲霉蛋白酶、0.006g胃蛋白酶水解6h,在600r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用;
磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用;
胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量15倍量的無水乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于10-14份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,70°C水浴超聲15min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入40份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用;
將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
[0018]試驗例
試驗動物:選取體重18-22 g的健康小鼠,雌雄兼有,小鼠基礎(chǔ)日糧配方:玉米45 %、低溫豆柏20 %、麩皮10 %、進口魚粉11 %、碎米7.5 %、酵母膏3 %、磷酸氫鈣I %、石粉I %、食鹽0.5 %、復(fù)合多維多礦I %。試驗分組:取小鼠180只,隨機分成三批,每批隨機分成6組,每組10只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,實施例1-5組試驗鼠的基礎(chǔ)日糧中分別添加實施例1-5制備的產(chǎn)品,且添加量為日糧質(zhì)量的2 %。
[0019]1、小鼠免疫器官指數(shù)測定
試驗方法:第一批小鼠正常飼養(yǎng)30d。30d后為試驗小鼠稱重,稱重后頸椎脫曰法處死,分離脾臟、胸腺,濾紙吸干水分后分別稱重,計算免疫器官指數(shù)。
[0020]免疫器官指數(shù)=免疫器官質(zhì)量(mg)/體重(g),結(jié)果見表1:
表I小鼠免疫器官指數(shù)
【權(quán)利要求】
1.胰島素樣生長因子-1緩釋片,其特征在于:由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 20-26份、酪蛋白14-17份、腺苷8-12份、大豆蛋白42-54份、卵磷脂24-32份、膽固醇6-10份、膠原蛋白3-6份。
2.如權(quán)利要求1所述的胰島素樣生長因子-1緩釋片,其特征在于:具體制備方法如下: 大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量5-7倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度55_65°C,調(diào)節(jié)pH值至8.0-8.5,于每克大豆蛋白中加入0.005-0.008g堿性蛋白酶水解30_60min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.004-0.007g木瓜蛋白酶、0.006-0.009g菠蘿蛋白酶、0.008-0.012g中性蛋白酶水解60-90min,調(diào)節(jié)PH值至2.3-2.8,于每克大豆蛋白中依次加A 0.005-0.008g 黑曲霉蛋白酶、0.003-0.005g 胃蛋白酶水解 3.5-5.5h,在 300-500r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20min后取上清液,上清 液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用; 磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用; 胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量8-14倍量的體積分數(shù)為80-95%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于10-14份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,50-60°C水浴超聲5-10min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入32-38份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用; 將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
3.如權(quán)利要求1所述的胰島素樣生長因子-1緩釋片,其特征在于:由下述重量配比的原料制成的藥劑:胰島素樣生長因子-1 23份、酪蛋白15份、腺苷11份、大豆蛋白49份、卵磷脂28份、膽固醇8份、膠原蛋白4份。
4.如權(quán)利要求3所述的胰島素樣生長因子-1緩釋片,其特征在于:具體制備方法如下: 大豆肽的制備:取大豆蛋白于大豆蛋白質(zhì)量6倍的水中混勻,放入殺菌鍋中在壓力0.08Mpa下預(yù)處理15min,待其冷卻后,倒入酶解反應(yīng)釜,控制溫度60°C,調(diào)節(jié)pH值至8.3,于每克大豆蛋白中加入0.007g堿性蛋白酶水解40min,調(diào)節(jié)PH值至7.0,于每克大豆蛋白中依次加入0.006g木瓜蛋白酶、0.007g菠蘿蛋白酶、0.01Og中性蛋白酶水解75min,調(diào)節(jié)PH值至2.5,于每克大豆蛋白中依次加入0.007g黑曲霉蛋白酶、0.004g胃蛋白酶水解4.5h,在420r/min攪拌速度下,90°C水浴滅酶30 min,水解液于離心沉淀機中以2000 r/min轉(zhuǎn)速離心20 min后取上清液,上清液經(jīng)噴霧干燥得大豆肽備用; 磷酸鹽緩沖溶液:稱取氯化鈉Sg、氯化鉀0.2g、磷酸氫二鈉3.63g、磷酸二氫鉀0.24g,溶于900ml蒸餾水中,調(diào)PH值至7.4,加水定容至1L,即得磷酸鹽緩沖溶液備用; 胰島素樣生長因子-酪蛋白脂質(zhì)體的制備:將卵磷脂、膽固醇、膠原蛋白混合均勻,溶于三者總質(zhì)量12倍量的體積分數(shù)為85%的乙醇溶液中,另取胰島素樣生長因子-1、酪蛋白、大豆肽溶于12份磷酸鹽緩沖溶液中;將兩溶液充分混合后,55°C水浴超聲8min,形成穩(wěn)定的W/0型乳液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中25°C減壓除去溶劑,旋轉(zhuǎn)形成膠態(tài)后,加入35份磷酸鹽緩沖溶液,常溫下旋轉(zhuǎn)水合,即得到乳白色的脂質(zhì)體混懸液,將脂質(zhì)體混懸液于_60°C快速冷凍12h,在真空冷凍干燥機內(nèi)-50 °C干燥24h,即得胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì)體備用; 將胰島素樣生長因子-酪蛋白-大豆肽脂質(zhì) 體和腺苷混勻后,壓片成型即得。
【文檔編號】A61K9/22GK103478707SQ201310371772
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年8月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月23日
【發(fā)明者】樓秀余 申請人:樓秀余