一種雙黃連提取物的提取方法

一種雙黃連提取物的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種雙黃連提取物的提取方法，以金銀花、黃芩、連翹為原料，通過水提醇沉法及大孔樹脂精制，得到雙黃連提取物。本發(fā)明得到的雙黃連提取物可制成各種劑型，優(yōu)選口服液和注射液。采用本發(fā)明的提取方法，有效提高雙黃連提取物的純度，降低總固體量，提高有效成分含量。
【專利說明】一種雙黃連提取物的提取方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種雙黃連提取物的提取方法，具體涉及金銀花、連翹、黃芩提取物的提取方法。
【背景技術】
[0002]雙黃連是由金銀花(又名雙花)、黃芩和連翹三味藥組成的，取這三種中藥名的第一個字，故叫做雙黃連。金銀花，性寒味甘、氣味芒香、既可清風溫之熱，又可解血中之毒，適用于溫病發(fā)熱、斑疹、咽痛。黃芩味苦性寒，瀉心中之余火，清腸中濕熱，適用于心火旺盛，腸胃濕熱、濕熱瘟毒。連翹性涼味苦，清心瀉火，去上焦各種熱癥，適用于溫病初起、頭痛、發(fā)熱、煩渴，以及熱毒郁結引起的癰瘡腫痛、丹毒、斑疹等。根據(jù)現(xiàn)代藥理研究和動物實驗證實，這三種中藥都有抗菌作用，對金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌、痢疾桿菌等有一定的抑制作用。三藥合用制成雙黃連，可以清熱解毒、輕宣透邪，用于治療風濕邪在肺衛(wèi)或風熱閉肺引起的發(fā)熱、微惡風寒或不惡寒、咳嗽氣促、咯痰色黃、咽紅腫痛等癥，以及上呼吸道感染、急性支氣管炎、急性扁桃腺炎、輕型肺炎等。
[0003]雙黃連有多種劑型，包括:口服液、片劑、膠囊劑、注射劑、糖漿劑、顆粒劑、合劑、滴丸劑、栓劑、氣霧劑、滴眼液等等。如今雙黃連已成為家喻戶曉的百姓常用藥，所以提高產品的質量及安全性，減少不良反應已經成為首要問題。也因此，必須提高藥品的純度，減少雜質，以保證百姓的用藥安全。
[0004]目前，雙黃連提取的方法大多數(shù)采用金銀花、連翹合提，水提醇沉；黃芩單提，水提醇沉的方法；也有采用金銀花、連翹、黃芩分別水提醇沉法。
[0005]CN101040915A公開了一種雙黃連注射液的制備方法，其先分別對黃芩、金銀花和連翹進行提取，然后再進行注射液的制備。CN1546095A公開了一種用于生產濃縮型雙黃連口服液的制備方法，主要采用的是現(xiàn)代分離、精制技術，采用酸沉、醇沉、利用不同PH調節(jié)、萃取、高速離心等方法，且對藥料的深度加工，使藥料的有效成分能夠得到充分利用，藥物濃度增大、有效成分含量提高；縮短生產周期，降低生產成本。CN101933967A公開了一種金銀花提取物的制備方法，運用超高壓提取和大孔吸附樹脂分離技術提取純化金銀花的活性成分；CN101085043A公開了一種連翹提取物的制備方法，先將連翹加水煎煮提取，醇沉法初步純化，最后采用水飽和正丁醇萃取法進一步精制。
[0006]上述雙黃連的提取方法得到的提取物大都純度不高，雜質多。因而提供一種純度高、雜質少的雙黃連提取物的制備方法，具有重要意義。

【發(fā)明內容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種雙黃連提取物的提取方法。
[0008]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
[0009]一種雙黃連提取物的提取方法，以金銀花、黃芩、連翹為原料，通過水提醇沉法及大孔樹脂精制，得到雙黃連提取物。[0010]其中，金銀花、連翹采用水提醇沉法和大孔樹脂精制法提??；黃芪采用水提醇沉法提??；
[0011 ] 上述提取方法具體包括如下步驟:
[0012]一、金銀花的提取物的精制
[0013]I)取金銀花適量，先加入6~10倍體積量純化水，70~80°C溫浸60~120分鐘，過濾，濾液備用，濾渣再加入4~8倍體積量純化水，70~80V溫浸60~120分鐘，過濾，合并兩次濾液，濃縮濾液至相對密度1.18~1.22 (800C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75~80%，攪拌均勻后，靜置14~18小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味,再將濾液濃縮至相對密度1.16~1.20 (800C ±5°C測)，得到濃縮膏I ;
[0014]2)向上述濃縮膏I中加入3~5倍體積量純化水，攪拌，靜置14~20小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.18~1.22 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量80~85%，邊加邊攪拌，靜置14~18小時，取上清液，用40%Na0H溶液測調pH值8.5~9.0，靜置25~30小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.16~1.20 (800C ±5°C測)，得到濃縮膏2 ；
[0015]3)向上述濃縮膏2中加入3~5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌30~60分鐘，靜置I~2小時，過濾，將濾液以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將2~4倍體積量的20~25%乙醇以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，合并兩次洗脫液，回收洗脫液中的乙醇至洗脫液無醇味，濃縮洗脫液至相對密度1.12~1.14 (80°C測)，即得精制的金銀花提取物。
[0016]二、連翹的提取物的制備
[0017]I)取連翹適量，加入6~10倍體積量純化水，浸泡30分鐘后，煮沸1.5~2小時,過濾’濾液備用，濾渣再加入4~6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4~6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，合并三次濾液，濃縮濾液至相對密度1.18~1.22 (800C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75~80%，邊加邊攪拌，靜置14~20小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.16~1.20 (800C ±5°C測)，得到濃縮膏3 ；
[0018]2)向上述濃縮膏3中加入3~5倍體積量純化水，攪拌，靜置14~20小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.18~1.22 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量達到75~85%，邊加邊攪拌，靜置14~20小時，取上清液，用20%氫氧化鈉溶液測調PH值8.5~9.0，靜置25~35小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.15~1.20 (800C ±5°C測)，得到濃縮膏4 ；
[0019]3)向上述濃縮膏4中加入3~5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置30~60分鐘,過濾,將濾液以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將3~4倍體積量的10~15%乙醇以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液棄去，再用3~4倍體積量的70~75%乙醇過大孔樹脂柱洗脫，洗脫流速為1.0~1.5BV/h,與第一次洗脫液合并，回收合并洗脫液中乙醇并濃縮至1.16~1.20 (80°C測)，即得精制的連翹提取物。
[0020]三、黃芩的提取物的制備
[0021]I)取黃芩適量，加入6~10倍體積量純化水，浸泡30~60分鐘，煎煮2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4~8倍體積量純化水，煎煮1.5~2.5小時，過濾，合并濾液；用濃鹽酸調合并濾液pH值至1.5~2.5，并在75°C條件下保溫1.5~2.5小時，靜置14~18小時，過濾，濾渣再加入4~6倍體積量純化水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至6.5~
7.0，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液；
[0022]2)向上述濾渣溶解液中加入其體積0.5%的藥用炭吸附15~20分鐘，最后加入濾渣溶解液等體積的90~95%的乙醇溶液，攪拌均勻，靜置12~24小時，過濾，濾液用濃鹽酸調節(jié)PH值至2.0，緩慢攪拌至完全均勻，靜置12~24小時，抽濾，濾渣用乙醇洗滌后，干燥得黃芩提取物。
[0023]作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，上述雙黃連提取物的提取方法包括如下步驟:
[0024]1、金銀花的提取物的精制
[0025]取金銀花濃縮膏，加入4倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置I小時，過濾，濾液攪拌均勻，將過濾后藥液加入大孔樹脂柱，以1.0~1.5BV/h流速過柱吸附,再加入3倍體積量的20%乙醇以1.0~1.5BV/h流速洗脫，合并洗脫液?；厥找掖疾饪s至1.12~1.14 (80°C測)，即得精制的金銀花提取物。
[0026]2、連翹的提取物的精制
[0027]取連翹濃縮膏，加入4倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置30分鐘，濾過，濾液以1.0BV/h流速上大孔樹脂柱，然后用三倍柱體積10%乙醇洗脫，洗脫流速為1.0BV/h，洗脫液棄去,再用三倍柱體積70%乙醇洗脫，洗脫流速為1.0BV/h，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至
1.16~1.20 (80°C測)，即得精制的連翹提取物。
[0028]金銀花提取物制 備過程中所述的大孔樹脂為:ADS-F8、ADS-17、HPD-750、HPD-100、HPD-450 或 DM-130。
[0029]連翹提取物制備過程中所述的大孔樹脂為:ADS-F8、ADS-17, HPD-750, D-10UHPD-100、HPD-450 或DA-201。
[0030]本發(fā)明得到的雙黃連提取物制成雙黃連口服劑型、注射劑型或外用劑型。
[0031]所述口服劑型為口服液、片劑、膠囊劑、糖漿劑、顆粒劑、合劑、滴丸，優(yōu)選為口服液。
[0032]所述注射劑型為注射液、凍干粉針、滴注液，優(yōu)選為注射液。
[0033]本發(fā)明將經過大孔樹脂精制得到的金銀花提取物和連翹提取物按比例加入黃芩提取物黃芩苷中，配制成雙黃連的各種劑型，優(yōu)選口服液和注射液。
[0034]本發(fā)明通過對雙黃連各成分的初提工藝進行調整，并結合大孔樹脂進行精制，從多個方面對雙黃連提取工藝進行優(yōu)化，在保證有效成分及各項質量指標合格的前提下，大幅減少總固體，有效去除了無機雜質、非極性大分子無效雜質等的量，提高了制劑的品質及安全性。
【具體實施方式】
[0035]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0036]實施例1雙黃連提取物的制備方法
[0037]一、金銀花提取物的制備
[0038]I)取金銀花適量，先加入8倍體積量純化水，80°C溫浸60分鐘，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，80°C溫浸60分鐘，過濾，合并兩次濾液，濃縮濾液至相對密度1.20 (80°C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75%，攪拌均勻后，靜置14小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.18 (80 0C ±5°C測)，得到濃縮膏I;
[0039]2)向上述濃縮膏I中加入4倍體積量純化水，攪拌，靜置14小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.20 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量85%，邊加邊攪拌，靜置14小時，取上清液，用40%Na0H溶液測調pH值8.5，靜置25小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.18 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏2 ；
[0040]3)向上述濃縮膏2中加入4倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置I小時，過濾，將濾液以1.0BV/h流速過HPD-450大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將3倍量(V/V)的20%乙醇以1.0BV/h流速過HPD-450大孔樹脂柱洗脫，合并兩次洗脫液，回收洗脫液中的乙醇至洗脫液無醇味，濃縮洗脫液至相對密度1.12(80°C測)，即得精制的金銀花提取物。
[0041]二、連翹提取物的制備
[0042]I)取連翹適量，加入8倍體積量純化水，浸泡30分鐘后，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，合并三次濾液，濃縮濾液至相對密度1.20 (800C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75%，邊加邊攪拌，靜置14小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.18 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏3 ；
[0043]2)向上述濃縮膏3中加入4倍體積量純化水，攪拌，靜置14小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.20 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量達到85%，邊加邊攪拌，靜置14小時，取上清液，用20%氫氧化鈉溶液測調PH值8.5，靜置30小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.20 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏4 ；
[0044]3)向上述濃縮膏4中加入4倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置30分鐘，過濾，將濾液以1.0BV/h流速過D-101大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將3倍量(V/V)的10%乙醇以1.0BV/h流速過D-101大孔樹脂柱洗脫，洗脫液棄去，再用3倍量V/V)的70%乙醇過D-101大孔樹脂柱洗脫，洗脫流速為1.0BV/h，與第一次洗脫液合并，回收合并洗脫液中乙醇并濃縮至1.20 (80°C測)，即得精制的連翹提取物。
[0045]三、黃芩提取物的制備
[0046]I)取黃芩適量，加入8倍體積量純化水，浸泡30分鐘，煎煮2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，煎煮2小時，過濾，合并濾液；用濃鹽酸調合并濾液pH值至2.0，并在75°C條件下保溫2小時，靜置14小時，過濾，濾渣再加入5倍體積量純化水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至7.0，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液；
[0047]2)向上述濾渣溶解液中加入其體積0.5%的藥用炭吸附15分鐘，最后加入濾渣溶解液等體積的95%的乙醇溶液，攪拌均勻，靜置12小時，過濾，濾液用濃鹽酸調節(jié)pH值至
2.0，緩慢攪拌至完全均勻，靜置12小時，抽濾，濾渣用乙醇洗滌后，干燥得黃芩提取物。
[0048]實施例2雙黃連提取物的制備方法
[0049]一、金銀花提取物的制備
[0050]1)取金銀花適量，先加入6倍體積量純化水，70°C溫浸60分鐘，過濾，濾液備用，濾渣再加入4倍體積量純化水，70°C溫浸60分鐘，過濾，合并兩次濾液，濃縮濾液至相對密度1.18 (80°C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75%，攪拌均勻后，靜置14小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.18 (80 0C ±5°C測)，得到濃縮膏I;
[0051]2)向上述濃縮膏I中加入3倍體積量純化水，攪拌，靜置14小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.18 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量80%，邊加邊攪拌，靜置14小時，取上清液，用40%Na0H溶液測調pH值8.5，靜置25小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.18 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏2 ；
[0052]3)向上述濃縮膏2中加入3倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置I小時，過濾，將濾液以1.0BV/h流速過DM-130大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將2倍量(V/V)的20%乙醇以1.0BV/h流速過DM-130大孔樹脂柱洗脫，合并兩次洗脫液，回收洗脫液中的乙醇至洗脫液無醇味，濃縮洗脫液至相對密度1.12(80°C測)，即得精制的金銀花提取物。
[0053]二、連翹提取物的制備
[0054]I)取連翹適量，加入6倍體積量純化水，浸泡30分鐘后，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，合并三次濾液，濃縮濾液至相對密度1.18 (800C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量75%，邊加邊攪拌，靜置14小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.18 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏3 ；
[0055]2)向上述濃縮膏3中加入3倍體積量純化水，攪拌，靜置14小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.18 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量達到85%，邊加邊攪拌，靜置14小時，取上清液，用20%氫氧化鈉溶液測調PH值8.5，靜置25小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.15 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏4 ；
[0056]3)向上述濃縮膏4中加入3倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置30分鐘，過濾，將濾液以1.0BV/h流速過HPD-100大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將3倍量(V/V)的10%乙醇以1.0BV/h流速過HPD-100大孔樹脂柱洗脫，洗脫液棄去，再用3倍量V/V)的70%乙醇過HPD-100大孔樹脂柱洗脫，洗脫流速為1.0BV/h,與第一次洗脫液合并，回收合并洗脫液中乙醇并濃縮至1.16 (80°C測)，即得精制的連翹提取物。
[0057]三、黃芩提取物的制備
[0058]I)取黃芩適量，加入6倍體積量純化水，浸泡30分鐘，煎煮2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4倍體積量純化水，煎煮1.5小時，過濾，合并濾液；用濃鹽酸調合并濾液pH值至2.0，并在75°C條件下保溫1.5小時，靜置16小時，過濾，濾渣再加入4倍體積量純化水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至6.5，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液；
[0059]2)向上述濾渣溶解液中加入其體積0.5%的藥用炭吸附20分鐘，最后加入濾渣溶解液等體積的90%的乙醇溶液，攪拌均勻，靜置12小時，過濾，濾液用濃鹽酸調節(jié)pH值至
2.0，緩慢攪拌至完全均勻，靜置12小時，抽濾，濾渣用乙醇洗滌后，干燥得黃芩提取物。
[0060]實施例3雙黃連提取物的制備方法
[0061]一、金銀花提取物的制備
[0062]I)取金銀花適量，先加入10倍體積量純化水，80°C溫浸120分鐘，過濾，濾液備用，濾渣再加入8倍體積量純化水，80°C溫浸120分鐘，過濾，合并兩次濾液，濃縮濾液至相對密度1.22(80°C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量80%，攪拌均勻后，靜置18小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.20 (800C ±5°C測)，得到濃縮骨I ;
[0063]2)向上述濃縮膏I中加入5倍體積量純化水，攪拌，靜置20小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.22 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量85%，邊加邊攪拌，靜置18小時，取上清液，用40%Na0H溶液測調pH值9.0，靜置30小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.20 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏2 ；
[0064]3)向上述濃縮膏2中加入5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌60分鐘，靜置2小時，過濾，將濾液以1.5BV/h流速過ADS-F8大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將4倍量(V/V)的25%乙醇以1.5BV/h流速過ADS-F8大孔樹脂柱洗脫，合并兩次洗脫液，回收洗脫液中的乙醇至洗脫液無醇味，濃縮洗脫液至相對密度1.14(80°C測)，即得精制的金銀花提取物。
[0065]二、連翹提取物的制備
[0066]I)取連翹適量，加入10倍體積量純化水，浸泡30分鐘后，煮沸2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入6倍體積量純化水，煮沸1.5小時，過濾，合并三次濾液，濃縮濾液至相對密度1.22 (800C ±5°C測)，冷至室溫，加入乙醇至含醇量80%，邊加邊攪拌，靜置20小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再將濾液濃縮至相對密度1.20 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏3 ；
[0067]2)向上述濃縮膏3中加入5倍體積量純化水，攪拌，靜置20小時，過濾，濾液濃縮至相對密度1.22 (800C ±5°C測)，濾液中再加入乙醇至含醇量達到85%，邊加邊攪拌，靜置20小時，取上清液，用20%氫氧化鈉溶液測調PH值9.0，靜置35小時，過濾，回收濾液中的乙醇至濾液無醇味，再濃縮濾液至相對密度1.20 (80°C ±5°C測)，得到濃縮膏4 ；
[0068]3)向上述濃縮膏4中加入5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置60分鐘，過濾，將濾液以1.5BV/h流速過DA-201大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將4倍量(V/V)的15%乙醇以1.5BV/h流速過DA-201大孔樹脂柱洗脫，洗脫液棄去，再用4倍量V/V)的75%乙醇過DA-201大孔樹脂柱洗脫，洗脫流速為1.5BV/h,與第一次洗脫液合并，回收合并洗脫液中乙醇并濃縮至1.20 (80°C測)，即得精制的連翹提取物。
[0069]三、黃芩提取物的制備
[0070]I)取黃芩適量，加入10倍體積量純化水，浸泡60分鐘，煎煮2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入8倍體積量純化水，煎煮2.5小時，過濾，合并濾液；用濃鹽酸調合并濾液pH值至2.5，并在75°C條件下保溫2.5小時，靜置18小時，過濾，濾渣再加入6倍體積量純化水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至7.0，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液；
[0071]2)向上述濾渣溶解液中加入其體積0.5%的藥用炭吸附20分鐘，最后加入濾渣溶解液等體積的95%的乙醇溶液，攪拌均勻，靜置24小時，過濾，濾液用濃鹽酸調節(jié)pH值至
2.0，緩慢攪拌至完全均勻，靜置24小時，抽濾，濾渣用乙醇洗滌后，干燥得黃芩提取物。
[0072]實施例4雙黃連口服液的制備
[0073]I)金銀花提取物的制備:制備方法同實施例1
[0074]2)連翹提取物的制備:制備方法同實施例1
[0075]3)黃芩提取物的制備:制備方法同實施例1[0076]4)雙黃連口服液的制備:取金銀花提取物3.4kg、連翹提取物3.4kg，黃芩提取物
5.6kg，加注射用水稀釋至30L，混合均勻，絹布過濾，微孔濾膜過濾，再加注射用水稀釋至40L，加入香精0.1ml，調pH值至7.0,定容至50L，攪拌均勻，靜置12h，精濾，灌裝，115°C滅菌40分鐘，即得。
[0077]實施例5雙黃連注射液的制備
[0078]I)金銀花提取物的制備:制備方法同實施例1
[0079]2)連翹提取物的制備:制備方法同實施例1
[0080]3)黃芩提取物的制備:制備方法同實施例1
[0081]4)雙黃連注射液的制備:分別取金銀花提取物、連翹提取物和黃芩提取物按生藥比1:2:1，將金銀花、連翹提取物加注射用水稀釋，混勻后加入黃芩提取物攪拌，溶解得雙黃連濃配液；絹布過濾，微孔濾膜過濾，加注射用水稀釋至全量的90%，加入處方量的藥用炭，煮沸15~30分鐘并冷卻至70°C以下，調pH值6.8~7.5，定容至全量，攪拌均勻，進行粗濾，粗濾后的藥液冷卻至10~40°C，精濾，灌裝，115~118°C滅菌30分鐘，即得。
[0082]對比例I雙黃連提取物的制備
[0083]取實施例1中同批次的金銀花、連翹及黃芩按CN101040915A “一種雙黃連注射液的制備方法”中實施例1項下方法制備雙黃連提取物:
[0084]一、金銀花濃浸膏的制備:
[0085]I)稱取金銀花,第 一遍加10倍量水,于80°C保溫浸泡I小時,第二遍加入10倍量水，于80°C保溫浸泡40分鐘，分次過濾，收取濾液濃縮至相對密度1.20±0.02 (80±5°C測)，待溫度降至40°C以下，加入90%乙醇至含醇量75%，靜置12小時，過濾，濾液回收乙醇至無乙醇味，并濃縮至相對密度1.18 (80±5°C測)，得到濃縮膏I ;
[0086]2)待冷至40°C以下，向上述濃縮膏I中加入膏重4倍量的純化水，輕輕攪拌，靜置12小時，取上清液過濾，濾液濃縮至相對密度1.20±0.02(80±5°C測)；待冷至40°C以下，邊攪拌邊加入95%乙醇，使含醇量達到85%，靜置12小時，虹吸上清液用20%氫氧化鈉調pH值8.5，靜置24小時，取上清液過濾，濾液回收乙醇至無醇味，并濃縮至相對密度1.15~1.20 (800C ±5°C測)，得濃縮膏2，即金銀花濃浸膏。
[0087]二、連翹濃浸膏的制備:
[0088]I)稱取連翹，第一遍加入8倍量水，浸泡30分鐘，加熱煮沸1.5小時，過濾；第二、第三次各6倍量水，煮沸1.0小時，合并藥液濃縮至相對密度1.18~1.22(80±5°C測)，待溫度降至40°C以下，加入90%乙醇至含醇量75%，沉淀12小時，過濾，濾液回收乙醇至無乙醇味，得到濃縮膏3;
[0089]2)待冷至40°C以下，向上述濃縮膏3中加入膏重4倍量的純化水，攪拌，靜置12小時，取上清液過濾，濾液濃縮至相對密度1.18~1.22(80±5°C測)；待冷至40°C以下，邊攪拌邊加95%乙醇，使含醇量達到85%，靜置12小時，虹吸上清液用20%氫氧化鈉調pH值9.0，靜置24小時，取上清液過濾，濾液回收乙醇至無醇味，并濃縮至相對密度1.15~
1.20 (80±50Cil )，得到濃縮膏4，即連翹濃浸膏。
[0090]三、黃芩苷的制備:
[0091]I)取黃芩片，加入8倍量水，煎煮2小時，過濾，加入6倍量水，煎煮I小時，合并濾液，濃縮至生藥量5倍，靜置I小時后濾取上清液用2mol/L鹽酸調pH值至1.0，80°C保溫I小時，靜置12小時，濾過，沉淀加8倍量水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至7.5，再加等量乙醇，攪拌使溶解，過濾，濾液用2mol/L鹽酸調pH值至1.0，60°C保溫30分鐘，靜置12小時，濾過，沉淀用乙醇洗至pH值為7.5，回收乙醇，離心得沉淀物；取沉淀物加入2倍量(以黃芩苷干品重量計)400C以下的注射用水，浸潤4小時，再加入4倍量(以黃芩苷干品重量計)40°C以下的注射用水，攪拌2分鐘后緩緩加入10%氫氧化鈉溶液，調pH值至6.5，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液；
[0092]2)向上述濾渣溶解液中加入加入0.5%的藥用炭，煮沸30分鐘，待冷卻至60°C后，加入藥液體積0.5倍量的90%乙醇，趁熱過濾，濾液用10%HC1調pH值至1.5，60±5°C保溫30分鐘，靜置4小時，棄去上清液，沉淀物用95%的乙醇洗滌至pH>4.0，抽干，干燥得黃芩苷。
[0093]對比例2雙黃連提取物的制備
[0094]取實施例1中同批次的金銀花、連翹及黃芩按CN1546095A “用于生產濃縮型雙黃連口服液的制備方法”中實施例1項下方法制備雙黃連提取物:
[0095]1、取黃芩，加入10倍量水煎煮2小時，濾過，藥渣再加6倍量水煎煮二次，各I小時，濾過，合并三次濾液，濾液濃縮并在80°C時加入鹽酸溶液適量調節(jié)pH值至2.0，保溫I小時，放置過夜，將下部沉淀加8倍量水攪勻，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH至7.0，再加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用濃鹽酸調節(jié)PH至2.0，在60°C保溫30分鐘后放置過夜，濾過，沉淀用乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇得黃芩粗提取物；再用6倍量水混懸，調節(jié)pH至
7.0，攪拌至溶解，并加入黃芩粗提取物量3%活性炭，攪拌，在80°C以上保溫30分鐘，過濾，濾液加入稀鹽酸，PH調節(jié)至7，在攪拌下加入等量95%乙醇，抽濾，用鹽酸調至2.8，60°C保溫30分鐘，放置過夜，經抽干得到精制黃芩苷提取物。
[0096]2、取金銀花、連翹，按1:2的比例投料，加入生藥總量12倍量水溫浸半小時后，加熱至沸騰保持1.5小時。過濾得濾液，藥渣再加8倍量水微沸保持1.5小時，得濾液，棄去藥渣；合并兩次濾液，蒸發(fā)濃縮至相對密度為1.21 (在80°C條件下測)，放冷，在攪拌下緩緩加入乙醇，使含醇量達70%，置冷藏室內靜置24小時，慮取上清液，殘渣加乙醇適量，攪勻，靜置24小時，濾過，合并乙醇液，回收乙醇至無醇味后放出，得金銀花、連翹粗提取物(提取物A);再用一定量的正丁醇分4次進行萃取，濾清萃取液，減壓回收正丁醇，得精制金銀花、連翹提取物(提取物B)。
[0097]對比例3雙黃連提取物的制備
[0098]1、取實施例1中同批次的金銀花按CN101933967A “一種金銀花提取物的制備方法”中實施例1項下方法制備金銀花提取物:1)超高壓提取:取金銀花藥材，破碎成長約3mm的小段，放入超高壓提取罐，加入7倍量75%乙醇；加壓到200MPa，保壓15min后，立即泄壓，過濾，將濾液濃縮至原體積的30%后,冷藏過夜；將冷藏液用離心機以轉速5000r/min離心分離20min ；2)純化:將離心后得到的上清液減壓回收乙醇至流浸膏狀(提取物A)，然后加入生藥等量的水溶解，上大孔吸附樹脂柱(型號:D-101)，依次用5倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用8倍樹脂柱體積的20%乙醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物(提取物B)。
[0099]2、取實施例1中同批次的連翹按CN101085043A “一種連翹提取物的制備方法”中實施例1項下方法制備連翹提取物:稱取連翹，加入10倍量純化水煎煮1.5小時，濾過，得藥液，藥渣再加8倍量水煎煮50min，濾過，得藥液，棄藥渣，合并兩次煎液，濃縮至相對密度
1.15 (600C )，放涼，攪拌下緩緩加入乙醇，使含醇量達70%，冷藏(5°C ) 24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮至相對密度1.05 (60°C)，放涼，冷藏(5°C)48小時，得提取物A ;取出提取物A，濾過，用生藥2倍量的水飽和正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，減壓回收正丁醇，稠膏加水溶解，冷藏(5°C ) 48小時，取出，濾過，濾液濃縮至稠膏，60°C減壓干燥，粉碎，得連翹提取物(提取物B )。
[0100]3、按對比例I中的黃芩制備方法制備黃芩提取物。
[0101]實驗例I金銀花、連翹、黃芩提取物各項指標測定結果
[0102]將實施例1-3、對比例1-3所得各提取物進行指標測定，結果見表1。
[0103]表1金銀花、連翹、黃芩提取物各項指標測定結果
[0104]
【權利要求】
1.一種雙黃連提取物的提取方法，其特征在于，以金銀花、黃芩、連翹為原料，通過水提醇沉法及大孔樹脂精制，得到雙黃連提取物。
2.根據(jù)權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述金銀花的提取物的精制步驟: 向水提醇沉法得到的濃縮膏中加入3~5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，加水完成后繼續(xù)攪拌30~60分鐘，靜置I~2小時，過濾，將濾液以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將2~4倍體積量的20~25%乙醇以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，合并兩次洗脫液，回收洗脫液中的乙醇至洗脫液無醇味，濃縮洗脫液至80°C測相對密度1.12~1.14，即得精制的金銀花提取物。
3.根據(jù)權利要求2所述的提取方法，其特征在于，在金銀花的提取物的精制過程中，所述大孔樹脂為 ADS-F8、ADS-17、HPD-750、HPD-100, HPD-450 或 DM-130 中的一種。
4.根據(jù)權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述連翹的提取物的精制步驟: 向水提醇沉法得到的濃縮膏中加入3~5倍體積量的純化水，邊加邊攪拌，靜置30~60分鐘，過濾，將濾液以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液備用，再將3~4倍量體積的10~15%乙醇以1.0~1.5BV/h流速過大孔樹脂柱洗脫，洗脫液棄去，再用3~4倍量體積的70~75%乙醇過大孔樹脂柱洗脫，洗脫流速為1.0~1.5BV/h,與第一次洗脫液合并，回收合并洗脫液中乙醇并濃縮至80°C測相對密度1.16~1.20，即得精制的連翹提取物。
5.根據(jù)權利要求4所述的提取方法，其特征在于，在連翹的提取物的精制過程中，所述大孔樹脂為 ADS-F8、ADS-17、HPD-750、D-101、HPD-100、HPD-450 或 DA-201 中的一種。
6.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述黃芩的提取物的制備步驟: 1)取黃芩適量，加入6~10倍體積量純化水，浸泡30~60分鐘，煎煮2小時，過濾，濾液備用，濾渣再加入4~8倍體積量純化水，煎煮1.5~2.5小時，過濾，合并濾液；用濃鹽酸調合并濾液PH值至1.5~2.5，并在75°C條件下保溫1.5~2.5小時，靜置14~18小時，過濾，濾渣再加入4~6倍體積量純化水，用40%氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至6.5~7.0，攪拌使濾渣溶解，得到濾渣溶解液； 2)向上述濾渣溶解液中加入其體積0.5%的藥用炭吸附15~20分鐘，最后加入濾渣溶解液等體積的90~95%的乙醇溶液，攪拌均勻，靜置12~24小時，過濾，濾液用濃鹽酸調節(jié)pH值至2.0，緩慢攪拌至完全均勻，靜置12~24小時，抽濾，濾渣用乙醇洗滌后，干燥得黃芩提取物。
7.—種權利要求1-6任一所述提取方法得到的雙黃連提取物。
8.—種權利要求7所述雙黃連提取物制得的雙黃連口服劑型，其特征在于，所述口服劑型為口服液、片劑、膠囊劑、糖漿劑、顆粒劑、合劑或滴丸。
9.一種權利要求7所述雙黃連提取物制得的雙黃連注射劑型，其特征在于，所述注射劑型為注射液、凍干粉針或滴注液。
【文檔編號】A61K36/634GK103463201SQ201310358911
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年8月16日 優(yōu)先權日:2013年8月16日
【發(fā)明者】方同華, 許照芹, 曾向東, 劉玉成, 席桂才, 董佳濤 申請人:黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司