專利名稱：治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療豬病用的中草藥制劑，具體涉及一種治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
豬藍(lán)耳病即豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的豬的一種高度接觸性傳染病，不同年齡、品種和性別的豬均能感染，但以妊娠母豬和I月齡以內(nèi)的仔豬最易感染。該病以母豬流產(chǎn)、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔豬呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征。因發(fā)病時(shí)部分病豬的特征表現(xiàn)是耳部發(fā)紫，故該病又稱為“豬藍(lán)耳病”。近年來普遍流行的高致病性豬藍(lán)耳病，是由PRRSV變異株引起的一種急性高致死性傳染病，仔豬發(fā)病率可達(dá)100%、死亡率可達(dá)50 %以上，母豬流產(chǎn)率可達(dá)30 %以上，育肥豬也可發(fā)病及死亡；PRRSV感染后，首先在局部的易感巨噬細(xì)胞中復(fù)制，然后迅速向全身淋巴組織和肺擴(kuò)散，有時(shí)也向其他組織擴(kuò)散。病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖，使巨噬細(xì)胞破裂，溶解崩潰造成巨噬細(xì)胞數(shù)量減少，肺泡壁增厚，淋巴組織呈衰竭狀態(tài)，肺泡巨噬細(xì)胞對(duì)其他細(xì)菌和病毒疫苗的免疫力降低，易繼發(fā)感染豬瘟病毒(CSFV)、多殺性巴氏桿菌(PM)、鏈球菌(SS)、豬副嗜血桿菌(HP)、放線桿菌(AS)、支原體(MHR)、圓環(huán)病毒(PCV-2)等，這是本病與其他疾病混合或繼發(fā)感染的根本原因。同時(shí)因?yàn)槎局甑淖儺悓?dǎo)致免疫細(xì)胞識(shí)別能力降低，而逃避抗體的中和及細(xì)胞毒性T細(xì)胞的殺傷作用。因此，有效的防治豬藍(lán)耳病的治則是:清熱解毒，抗菌消炎，激活免疫系統(tǒng)，恢復(fù)巨噬細(xì)胞功能，抑制病毒繁殖，促進(jìn)巨噬細(xì)胞攝取、處理和傳遞抗原，調(diào)節(jié)和增強(qiáng)T/B細(xì)胞的反應(yīng)能力、增加T/B細(xì)胞的數(shù)量及促進(jìn)其發(fā)育成熟，使豬在接種疫苗后能獲得高水平的免疫應(yīng)答反應(yīng)。目前，化學(xué)藥物增強(qiáng)機(jī)體免疫力都不同程度地存在著毒副作用、藥物殘留和階段性用藥達(dá)不到理想效果的弊端。中草藥屬于天然、綠色藥物，對(duì)動(dòng)物及人類安全、無毒副作用，并且能從根本上調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。目前中草藥制劑的研究有了較大發(fā)展，治療豬病的 獸用中草藥種類也較多，但能夠有效治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液尚未見有報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述問題，提供一種能夠有效治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液。本發(fā)明的目的還在于提供該中草藥注射液的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液，它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4_6份。本發(fā)明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液優(yōu)選的原料藥重量配比是:金銀花2份，連翹4份，黃芩2份，紫錐菊7份，黃芪5份。本發(fā)明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液的制備方法包括以下步驟:
(I)按重量配比分別稱取金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪中草藥飲片，并分別粉碎成中草藥粗粉；
(2)取黃芩、黃芪中草藥粗粉，按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的7倍加注射水浸泡1-1.5h，加熱煎煮25-35min，再加入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉煎煮25-35 min，傾出第一次煮液，再按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的5倍加注射水煎煮兩次，每次煎煮25-35min，得到第二次煮液和第三次煮液；
(3)合并步驟(2)得到的三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮
液；
(4)將步驟(3)得到的濃縮煮液加入3倍重量的濃度為95%的乙醇，邊加入邊攪拌，靜置24h，除去沉淀并回收乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液；
(5)滴加稀氫氧化·鈉使步驟(4)得到的濃縮藥液的pH達(dá)到7.0，按所述濃縮藥液重量的0.15%加入活性炭，煮沸25-30min，放置12h，再按所述濃縮藥液重量的1%各加入苯甲醇和吐溫-80，攪勻，G-3號(hào)垂熔玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補(bǔ)足至每毫升注射水含生藥2g，灌裝，滅菌，即得本發(fā)明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液。本發(fā)明組方中各組份藥理功效是:
1.金銀花功效:金銀花為忍冬科忍冬屬植物忍冬及同屬植物干燥花蕾或初開的花。性甘、寒，氣芳香。歸肺，胃，心，大腸經(jīng)。金銀花含綠原酸，異綠原酸，白果醇，β_谷甾醇，豆甾醇，β_谷留醇-D-葡萄糖甙，豆留醇-D-葡萄糖甙。還含揮發(fā)油，其成分有芳樟醇，左旋-順三甲基-2-乙烯基-5-羥基-四氫吡喃，棕櫚酸乙酯，1，1-聯(lián)二環(huán)已烷，亞油酸甲酯，3-甲基-2- (2-戊烯基)-2_環(huán)戊烯-1-酮，亞麻酸乙酯，順-3-已烯-1-醇，α-松油醇，丁香油酚及香荊芥酚等數(shù)十種。所含成分氯原酸等有機(jī)酸及黃酮類物質(zhì)，是其主要的抗菌有效成分。金銀花水煎劑對(duì)流感病毒、孤兒病毒、皰疹病毒均有抑制作用，能抑制病毒的復(fù)制，延緩病毒所致細(xì)胞病變的發(fā)生，并有一定的抗炎解熱、抗內(nèi)毒素作用。此外，尚能促進(jìn)白細(xì)胞吞噬能力，提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱之功效。主治溫病熱入氣分或營血，身發(fā)斑疹，熱毒癰腫瘡毒。2.連翹功效:連翹又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等。味苦，微寒。歸肺、心、小腸經(jīng)。含有連翹酚，連翹甙、連翹甙元，齊墩果酸、白樺脂酸、熊果酸、松脂素、馬苔樹脂醇甙，尚含有多種烴類、醛酮類、醇酯醚類揮發(fā)性成分如α-菔烯、莰烯、β-菔烯等，樟腦、香葉醛，龍腦、α-萜品醇、黃樟醚、芳樟醇、松油烯醇-4、去甲拉帕醇以及香豆素、蘆丁等。連翹對(duì)多種革蘭陽性及陰性細(xì)菌均有抑制作用。其濃縮煎劑在體外可抑制傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌、白喉?xiàng)U菌及霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌等。體外實(shí)驗(yàn)表明連翹對(duì)亞洲甲型流感病毒、鼻病毒-17型有抑制作用，連翹子揮發(fā)油在體外對(duì)金黃色葡萄球菌也有明顯的抗菌作用，還有明顯抑制金黃色葡萄球菌血漿凝固酶對(duì)血漿的凝固作用。有清熱解毒，消腫散結(jié)之功效。用于癰疽，瘰疬，風(fēng)熱感冒，溫病初起，溫?zé)崛霠I，高熱煩渴。主治熱病初起，風(fēng)熱感冒，發(fā)熱等。3.黃芩功效:黃芩別名山茶根、黃芩茶、土金茶根等。為唇形科植物黃芩，以根入藥。味苦，寒。歸肺、膽、脾、大腸、小腸經(jīng)。黃岑根含黃酮類化合物:黃岑素，黃岑新素，黃芩甙，漢黃芩素，漢黃芩甙，木蝴蝶素Α，7-甲氧基黃芩素，二氫木蝴蝶素，白楊素，另外還含β-谷留醇，菜油留醇及豆留醇等有效成分。對(duì)痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、溶血性璉球菌等有抑制作用。有清熱燥濕，涼血安胎，解毒之功效。主治溫?zé)岵 ⑸虾粑栏腥?、肺熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾等癥。4.紫錐菊功效:紫錐菊含有多糖、黃酮、咖啡酸的衍生物、精油、多炔、烷基胺和生物堿。紫錐菊有免疫刺激作用，減少發(fā)炎，而且?guī)椭鷻C(jī)體對(duì)抗細(xì)菌和病毒。有關(guān)試驗(yàn)表明用紫錐菊飼喂動(dòng)物，可提高嗜中性粒細(xì)胞的吞噬能力及外周淋巴細(xì)胞的數(shù)量，有效刺激動(dòng)物機(jī)體的免疫活性；將紫錐菊根制成飼料添加劑喂雞，可明顯增加實(shí)驗(yàn)組體重和降低球蟲的感染率。5.黃芪功效:黃芪別稱棉芪，黃耆，獨(dú)椹，蜀脂，百本。味甘，微溫。歸肺，脾，肝，腎經(jīng)。含皂甙、黃酮、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、降壓、抗衰老、抗缺氧、抗輻射、抗應(yīng)激、耐低溫和耐高溫作用。動(dòng)物試驗(yàn)證明，能夠增加網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，促進(jìn)抗體形成，提高E-玫瑰花環(huán)率，促進(jìn)T細(xì)胞的分化與成熟，增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素；對(duì)細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)的雞外周血B淋巴細(xì)胞體外增殖也有明顯的促進(jìn)作用；有加強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力的作用，可對(duì)抗組織胺、氯仿造成的毛細(xì)血管滲透性增加的現(xiàn)象。黃芪在體外對(duì)痢疾桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等有較強(qiáng)的抗菌作用，對(duì)動(dòng)物流感病毒、腺病毒等所致的細(xì)胞病變有抑制作用。有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效。用于治療氣虛乏力，中氣下陷，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴等癥。本發(fā)明組方依據(jù):本組方以扶正祛邪，增強(qiáng)豬抗病、防病能力，提高免疫力為原則。方中金銀花、連翹為清熱、解毒主藥，黃芩為清熱、解毒、抗菌、消炎輔藥，紫錐菊具有免疫刺激作用，減少發(fā)炎，而且可幫助機(jī)體對(duì)抗細(xì)菌和病毒；黃芪有補(bǔ)中益氣，生津養(yǎng)血，扶正祛邪，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。方中諸藥相和，共奏清熱解毒，抗菌消炎，提高機(jī)體免疫力和抗病能力的功效。為增強(qiáng)治療效果，制成注射液。本發(fā)明中草藥注射液適用于由豬藍(lán)耳病病毒及其因豬藍(lán)耳病病毒感染引起的各種細(xì)菌的繼發(fā)感染、藥物使用不當(dāng)?shù)仍蛞鸬拿庖咭种?。本發(fā)明中草藥注射液具有清熱解毒、抗菌消炎功效，能增強(qiáng)豬抗病、防病能力，提高免疫力，作為治療豬藍(lán)耳病的中草藥制劑，具有良好的效果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例:
1、分別稱取原料藥(中草藥飲片):金銀花100g，連翹200 g，黃芩100 g，紫錐菊350g，黃苗 250 g ；
2、將上述原料藥分別粉碎成中草藥粗粉；
3、將黃芩、黃芪兩味中草藥粗粉混合，加水7000mL浸泡I h，文火煎煮30 min，再放入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉，文火煎煮30 min，得到第一次煮液，然后再每次加水5000mL煎煮二次，每次煎煮30 min，得到第二次煮液和第三次煮液；
4、合并上述三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮液，然后加入濃度為95%的乙醇1500 mL，邊加入邊攪拌，靜置24h，去沉淀取上清液，蒸去乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液；
5、滴加稀氫氧化鈉使上述濃縮藥液的pH達(dá)到7.0， 加該濃縮藥液重量0.15%的活性炭煮沸30min，放置12h，過濾，按該濃縮藥液重量各加入1%的苯甲醇和吐溫_80，攪勻，G-3號(hào)垂榕玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補(bǔ)足500mL，灌裝每瓶10mL，100°C >30 min滅菌，即得本發(fā)明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液。利用本發(fā)明進(jìn)行的一些試驗(yàn)情況如下:
1、本發(fā)明中草藥注射液對(duì)PRRSV的抑制作用
中藥有效成分抗病毒作用的機(jī)理，一般認(rèn)為主要有2條途徑，一是直接殺滅病毒，二是抑制病毒的繁殖。本實(shí)驗(yàn)按抑制病毒的繁殖途徑設(shè)計(jì)了 I組試驗(yàn)，即先接種病毒后加本發(fā)明中草藥注射液以觀察中草藥樣品能否對(duì)細(xì)胞內(nèi)的PRRSV起抑制作用，即抑制其生物合成及成熟釋放。本發(fā)明中草藥注射液對(duì)PRRSV的抑制作用測(cè)定實(shí)驗(yàn)是這樣實(shí)現(xiàn)的:將100TCID50 PRRSV接種至長成單層猴胚胎腎上皮細(xì)胞(Marc-145)的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，
0.1 11117孔，371:吸附1.5 h，棄去PRRSV液，用磷酸鹽緩沖液PBS液洗2次，加入倍比稀釋的單味中藥和本發(fā)明中草藥注射液，0.1 mL/孔，每個(gè)稀釋度重復(fù)4孔，另設(shè)細(xì)胞對(duì)照和PRRSV對(duì)照，5% C02培養(yǎng)箱37 °C培養(yǎng)，結(jié)果見表I。試驗(yàn)結(jié)果表明，金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪水提物對(duì)PRRSV在Marc-145細(xì)胞上的增殖具有明顯的抑制作用，5種單味中藥提取物分別在 0.25 mg/mL、0.25 mg/mL、0.25 mg/mL、0.125 mg/mL 濃度時(shí)仍具有顯著的抑制 CPE 作用，其中紫錐菊水提物對(duì)PRRSV引起的細(xì)胞病變CPE最小抑制濃度最低，為0.0625 mg/mL ；本發(fā)明中草藥注射液對(duì)PRRSV引起的CPE最小抑制濃度也最低，為0.0625 mg/mL。表I本發(fā)明中草藥注射液對(duì)PRRSV在Marc-145細(xì)胞上增殖的抑制作用
權(quán)利要求
1.一種治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液，其特征在于它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4-6份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液，其特征在于它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花2份，連翹4份，黃芩2份，紫錐菊7份，黃芪5份。
3.一種治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液的制備方法，其特征在于它包括以下步驟: (1)按重量配比分別稱取金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪中草藥飲片，并分別粉碎成中草藥粗粉； (2)取黃芩、黃芪中草藥粗粉，按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的7倍加注射水浸泡1-1.5h，加熱煎煮25-35min，再加入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉煎煮25-35 min，傾出第一次煮液，再按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的5倍加注射水煎煮兩次，每次煎煮25-35min，得到第二次煮液和第三次煮液； (3)合并步驟(2)得到的三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮液； (4)將步驟(3)得到的濃縮煮液加入3倍重量的濃度為95%的乙醇，邊加入邊攪拌，靜置24h，除去沉淀并回收乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液； (5)滴加稀氫氧化鈉使步驟(4)得到的濃縮藥液的pH達(dá)到7.0，按所述濃縮藥液重量的0.15%加入活性炭，煮沸25-30min，放置12h，再按所述濃縮藥液重量的1%各加入苯甲醇和吐溫-80，攪勻，G-3號(hào)垂熔玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補(bǔ)足至每毫升注射水含生藥2g，灌裝，滅菌，即得本發(fā) 明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液及其制備方法，該中草藥注射液由下述重量配比的原料藥制成金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4-6份。上述原料經(jīng)過粉碎，配料，三次水煮浸提，合并三次濾液，濃縮后醇沉，調(diào)pH，活性炭脫色，吐溫-80助溶，按定量加入防腐劑，攪勻，過濾，灌裝，滅菌，制成本發(fā)明治療豬藍(lán)耳病的中草藥注射液。本發(fā)明中草藥注射液對(duì)治療豬藍(lán)耳病有很好的效果。
文檔編號(hào)A61P31/14GK103142702SQ20131009168
公開日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者史秋梅, 高桂生, 楊彩然, 沈萍, 張艷英, 高光平 申請(qǐng)人:河北科技師范學(xué)院