核-殼微球的制作方法【專利摘要】本說(shuō)明書(shū)描述了一種包含多個(gè)微粒的物質(zhì)。該微粒包括包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍ぃ渲械诙酆衔锝到獾帽鹊谝痪酆衔锫?。本說(shuō)明書(shū)還描述了用于制備該微粒的方法以及該微粒的用途。【專利說(shuō)明】核—?dú)の⑶蝾I(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及核-殼微球、其制備方法及其用途。本申請(qǐng)要求第61/495，328號(hào)美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，該申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容通過(guò)交叉引用并入本文中。[0002]在許多應(yīng)用中，需要向介質(zhì)受控的釋放物質(zhì)。過(guò)去一直通過(guò)將物質(zhì)包封在顆粒中并且顆粒經(jīng)過(guò)一段時(shí)間釋放該物質(zhì)的方式滿足這種需要。精確控制向介質(zhì)中釋放物質(zhì)的速率一直是一種挑戰(zhàn)。更進(jìn)一步的挑戰(zhàn)是引入釋放物質(zhì)的延遲時(shí)段。例如，當(dāng)需要一段時(shí)間使含有物質(zhì)的顆粒到達(dá)期望的目的地從而在最有效的位置釋放該物質(zhì)時(shí)，這樣的延遲時(shí)段是所期望的。對(duì)于在患者治療方案的不同時(shí)間點(diǎn)上順序遞送多種活性物質(zhì)中的每一種，或者對(duì)于多種不同激素的循環(huán)遞送，這樣的延遲時(shí)段也是所期望的。[0003]本發(fā)明設(shè)計(jì)為至少部分地滿足以上所述需要。發(fā)明概述[0004]本發(fā)明的各個(gè)方面闡述如下。[0005]包含多個(gè)微粒的物質(zhì)，所述微粒包括包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?，所述第二聚合物降解得比第一聚合物慢。在殼?nèi)的第一聚合物可以以連續(xù)通道的形式穿過(guò)所述殼。[0006]段落[0005]中的物質(zhì)，其中第二聚合物生物降解得比第一聚合物慢。[0007]段落[0005]或[0006]中的物質(zhì)，其中第二聚合物為半晶質(zhì)的。[0008]段落[0005]至[0007]中的任一段中的物質(zhì)，其中第二聚合物的分子量為大約IOOkDa0[0009]段落[0005]至[0007]中的任一段中的物質(zhì)，其中第二聚合物的分子量為超過(guò)IOOkDa0[0010]段落[0009]中的物質(zhì)，其中第二聚合物的分子量為超過(guò)大約160kDa。[0011]段落[0005]至[0010]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物的分子量為大約I到大約60kDa，例如大約7到大約24kDa。[0012]段落[0005]至[0010]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物的分子量為大于約75kDa0[0013]段落[0005]至[0012]中的任一段中的物質(zhì)，其中微粒中第二聚合物與第一聚合物的重量比在大約1:1.25到大約2:1的范圍內(nèi)。[0014]段落[0005]至[0012]中的任一段中的物質(zhì)，其中微粒中第二聚合物與第一聚合物的重量比在大約1:1到大約1:1.25的范圍內(nèi)。[0015]段落[0005]至[0014]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物的降解不產(chǎn)生有毒產(chǎn)物。[0016]段落[0005]至[0015]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。[0017]段落[0005]至[0016]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物在殼中以少于大約25wt%的量存在。[0018]段落[0005]至[0017]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物和第二聚合物至少部分不互溶，任選地基本上不互溶。[0019]段落[0018]中的物質(zhì)，其中第一聚合物形成多個(gè)穿過(guò)殼的連續(xù)通道或途徑(或者為多個(gè)穿過(guò)殼的連續(xù)通道或途徑的形式)。[0020]段落[0005]至[0019]中的任一段中的物質(zhì)，其中核包含可釋放材料。[0021]段落[0020]中的物質(zhì)，其中可釋放材料為顆粒狀的。[0022]段落[0020]或[0021]中的物質(zhì)，其中可釋放材料吸附在核中的納米顆粒上或吸附在其中、或既吸附在其上又吸附在其中。[0023]段落[0022]中的物質(zhì)，其中納米顆粒為無(wú)機(jī)納米顆粒。[0024]段落[0023]中的物質(zhì)，其中納米顆粒包括磷灰石。[0025]段落[0021]至[0024]中的任一段中的物質(zhì)，其中第一聚合物和第二聚合物基本上不互溶并且第一聚合物形成多個(gè)穿過(guò)殼的連續(xù)通道并且其中納米顆粒(如果存在)或可釋放材料的顆粒(如果存在)小于該通道的直徑。[0026]段落[0020]至[0025]中的任一段中的物質(zhì)，其中可釋放材料為治療性物質(zhì)。[0027]段落[0026]中的物質(zhì)，其中治療性物質(zhì)為藥物。[0028]段落[0020]至[0027]中的任一段中的物質(zhì)，其中可釋放材料選自蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、酶、DNA、DNA片段、RNA、RNA片段、多糖、激素、生長(zhǎng)因子、非以上任一種的藥物和它們的任何兩種或更多種的混合物。[0029]段落[0020]至[0028]中的任一段中的物質(zhì)，其中可釋放材料為親水性的。[0030]段落[0029]中的物質(zhì)，其中可釋放材料可以分散在水中或溶解在水中。[0031]段落[0020]至[0028]中的任一段中的物質(zhì)，其中可釋放材料為疏水性的。[0032]段落[0031]中的物質(zhì)，其中可釋放材料基本不溶于水。[0033]段落[0005]至[0032]中的任一段中的物質(zhì)，其中微粒分散在載體中。[0034]段落[0033]中的物質(zhì)，其中載體為水凝膠、膜或支架。[0035]段落[0005]至[0033]中的任一段中的物質(zhì)，其中微粒至少部分粘結(jié)在一起形成固體物質(zhì)。[0036]用于制備包含多個(gè)微粒的物質(zhì)的方法，任選地用于制備段落[0005]至[0035]中的任一段中的物質(zhì)，所述方法包括:將包含在第一溶劑中的第一聚合物的第一溶液與包含在第二溶劑中的第二聚合物的第二溶液合并，從而形成混合的聚合物溶液，所述第二聚合物降解得比第一聚合物慢并且第一聚合物和第二聚合物至少部分不互溶、任選地基本不互溶，并且所述第一溶劑和第二溶劑可相互混溶；在水性介質(zhì)中乳化該混合的聚合物溶液以形成乳液，所述水性介質(zhì)與第一溶劑和第二溶劑至少部分不互溶；將乳液老化一段足夠長(zhǎng)的時(shí)間以允許在乳液液滴中第一聚合物和第二聚合物至少部分分離，以形成包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?；以及除去第一溶劑和第二溶劑以形成作為水性懸浮液的該物質(zhì)，其中每個(gè)微粒包括包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?。[0037]段落[0036]中的方法，其中第一溶劑和第二溶劑相同。[0038]段落[0036]或[0037]中的方法，其中水性介質(zhì)至少部分地被第一溶劑和/或第二溶劑飽和。[0039]段落[0036]至[0038]中的任一段中的方法，其中水性介質(zhì)包含乳化劑。[0040]段落[0039]中的方法，其中乳化劑為甲基纖維素。[0041]段落[0036]至[0040]中的任一段中的方法，其中第一溶液包含可釋放材料，借此微粒的核包含所述可釋放材料。[0042]段落[0041]中的方法，其中可釋放材料為顆粒狀的。[0043]段落[0041]或[0042]中的方法，其中可釋放材料吸附在納米顆粒上或吸附在其中，或既吸附在納米顆粒上又吸附在其中。[0044]段落[0041]至[0043]中的任一段中的方法，包括通過(guò)將前驅(qū)體溶液與可釋放材料合并來(lái)制備第一溶液的步驟，所述前驅(qū)體溶液包含在第一溶劑中的第一聚合物。[0045]段落[0041]至[0044]中的任一段中的方法，其中可釋放材料與第一聚合物的重量比為小于1:1。[0046]段落[0036]至[0045]中的任一段中的方法，其中第二聚合物為半晶質(zhì)的。[0047]段落[0036]至[0046]中的任一段中的方法，其中第二聚合物的分子量為大約IOOkDa0[0048]段落[0036]至[0046]中的任一段中的方法，其中第二聚合物的分子量為超過(guò)IOOkDa0[0049]段落[0048]中的方法，其中第二聚合物的分子量為超過(guò)大約160kDa。[0050]段落[0036]至[0049]中的任一段中的方法，其中第一聚合物的分子量小于大約40kDa,任選地小于大約35kDa,任選地大約IkDa到大約40kDa,任選地大約3kDa到大約24kDa，任選地大約7kDa到大約24kDa。[0051]段落[0036]至[0049]中的任一段中的方法，其中第一聚合物的分子量為大于約75kDa0[0052]段落[0036]至[0051]中的任一段中的方法，其中在混合的聚合物溶液中第二聚合物與第一聚合物的重量比使得所述方法形成微粒，所述微粒包括包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?。[0053]所述方法中，在混合的聚合物溶液中第二聚合物與第一聚合物的重量比在大約1:1.25到大約2:1的范圍內(nèi)。[0054]段落[0053]中的方法，其中在混合的聚合物溶液中第二聚合物與第一聚合物的重量比在大約1:1到大約1:1.25的范圍內(nèi)。[0055]段落[0036]至[0054]中的任一段中的方法，包括以下步驟:選擇第一聚合物的分子量、第二聚合物的分子量以及第一聚合物與第二聚合物的比例中的至少一種，使得可釋放材料(如果存在于微粒的核中)可以以所需的速率或在所需的延遲時(shí)段里從微粒中釋放。[0056]段落[0036]至[0055]中的任一段中的方法，其中第一聚合物的降解不產(chǎn)生有毒產(chǎn)物。[0057]段落[0036]至[0056]中的任一段中的方法，其中第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。[0058]段落[0036]至[0057]中的任一段中的方法，其中在連續(xù)攪拌下實(shí)施老化步驟。[0059]段落[0036]至[0058]中的任一段中的方法，其中溶劑萃取步驟與老化步驟至少部分地同時(shí)實(shí)施，借此老化和溶劑萃取步驟有足夠的時(shí)間以允許在乳液液滴中第一聚合物與第二聚合物至少部分地分離，以便形成包含第一聚合物的核和包圍在該核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍ぁ0060]段落[0036]至[0059]中的任一段中的方法，其中第一溶劑和第二溶劑與水性液體部分混溶，并且除去溶劑的步驟包括用水性液體稀釋作為水性懸浮液的顆粒狀物質(zhì)，所述水性液體中既不含有第一溶劑也不含有第二溶劑。[0061]段落[0036]至[0060]中的任一段中的方法，包括從水液中分離顆粒狀物質(zhì)。[0062]段落[0061]中的方法，包括在模具中以足夠的溫度加熱分離出的顆粒狀物質(zhì)足夠的時(shí)間，使得微粒粘結(jié)在一起以便由顆粒狀物質(zhì)形成小球。[0063]段落[0062]中的方法，其中足夠的溫度為第二聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度。[0064]段落[0062]或[0063]中的方法，其中第一溶液包含可釋放材料并且該足夠的溫度低于所述可釋放材料在該足夠的時(shí)間內(nèi)降解的溫度。[0065]用于向液體遞送材料的方法，包括在能降解第一聚合物的降解劑的存在下將段落[0005]的物質(zhì)暴露于所述液體，所述物質(zhì)為其中微粒的核包含所述材料的物質(zhì)。[0066]段落[0065]中的方法，其中液體為降解劑或包含降解劑。[0067]段落[0065]或[0066]中的方法，其用于非治療、非診斷的目的。[0068]段落[0065]或[0066]中的方法，其中所述材料為治療性物質(zhì)并且所述液體為體液，因此該方法用于將治療性物質(zhì)遞送給患者。[0069]段落[0068]中的方法，其中患者為非人類。[0070]段落[0065]至[0069]中的任一段中的方法，其中所述物質(zhì)的微粒粘結(jié)在一起。[0071]根據(jù)段落[0020]的物質(zhì)在治療患者(任選非人類的患者)中的疾病狀態(tài)的用途，其中可釋放材料被指明用于治療所述疾病狀態(tài)。[0072]根據(jù)段落[0071]的用途，其中所述疾病狀態(tài)為疼痛并且可釋放材料為止痛劑。[0073]根據(jù)段落[0071]的物質(zhì)的用途，其中所述疾病狀態(tài)為青光眼，其中可釋放材料被指明用于治療青光眼。[0074]根據(jù)段落[0073]的用途,其中可釋放材料為酒石酸溴莫尼定(brimoridine)。[0075]根據(jù)段落[0071]的用途，其中可釋放材料為抗纖維化劑。[0076]根據(jù)段落[0075]的用途，其中抗纖維化劑為氟尿嘧啶。[0077]包含至少兩種不同物質(zhì)的組合物質(zhì)，每種所述物質(zhì)為根據(jù)段落[0005]到[0033]中的任一段中的物質(zhì)，其中:每種物質(zhì)的微粒的核包含可釋放材料，并且不同物質(zhì)的微粒的殼為使得它們?cè)谙嗤臈l件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解，因此在不同物質(zhì)的微粒中的可釋放材料可以被順序釋放。[0078]所述的組合物質(zhì)，其中至少兩種不同物質(zhì)的可釋放材料相同。[0079]段落[0077]中的組合物質(zhì)，其中每種不同物質(zhì)的可釋放材料與每種其他的不同物質(zhì)的可釋放材料不同。[0080]段落[0077]至[0079]的任一段中的組合物質(zhì)，其中不同物質(zhì)的微粒的殼具有不同的厚度，使得它們?cè)谙嗤瑮l件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解。[0081]段落[0077]至[0080]的任一段中的組合物質(zhì)，其中不同物質(zhì)的微粒的第二聚合物的分子量不相同，使得不同物質(zhì)的殼在相同條件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解。[0082]段落[0077]至[0081]的任一段中的組合物質(zhì)，其中每種不同物質(zhì)的微粒的第一聚合物相同，并且每種不同物質(zhì)的微粒的第二聚合物相同。[0083]段落[0082]中的組合物質(zhì)，其中第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。[0084]本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案闡述如下。[0085]包含多個(gè)微粒的物質(zhì)，所述微粒包括包含聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和聚(L-乳酸)(PLLA)的殼，其中所述核包含可釋放材料。在該殼內(nèi)的PLGA可以以通道的形式穿過(guò)所述殼。[0086]包含多個(gè)微粒的物質(zhì)，所述微粒包括包含聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和聚(L-乳酸)(PLLA)的殼，其中所述核包含可釋放材料，所述可釋放材料為顆粒狀的或吸附在該核中的無(wú)機(jī)納米顆粒上、或吸附在其中、或既吸附在其上又吸附在其中。在該殼內(nèi)的PLGA可以以通道的形式穿過(guò)所述殼。[0087]包含至少兩種不同物質(zhì)的組合物質(zhì)，每種所述物質(zhì)包含多個(gè)微粒，所述微粒包括包含聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的核和包圍在所述核周?chē)野琍LGA和聚(L-乳酸)(PLLA)的殼，其中該核包含可釋放材料，其中不同物質(zhì)的微粒的殼為使得它們?cè)谙嗤臈l件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解，因此在該不同物質(zhì)的微粒中的可釋放材料可以被順序釋放。[0088]用于制備包含多個(gè)微粒的物質(zhì)的方法，所述方法包括:將包含在DCM(二氯甲烷)或其它適合的溶劑如DMF(二甲基甲酰胺)、DMS0(二甲亞砜)、甲醇或其中任意一種或更多種與DCM的混合物中的聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的第一溶液，與包含在DCM或其它適合的溶劑如DMF、`DMS0、甲醇或其中任意一種或更多種與DCM的混合物中的聚(L-乳酸)(PLLA)的第二溶液合并，以形成混合的聚合物溶液；將所述混合的聚合物溶液在水性介質(zhì)中乳化以形成乳液，所述水性介質(zhì)與第一溶劑和第二溶劑至少部分不互溶；將該乳液老化足夠的時(shí)間以允許在乳液液滴中的PLGA和PLLA至少部分地分離，以便形成包含PLGA的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和PLLA的殼；以及除去DCM以形成作為水性懸浮液的該物質(zhì)，其中每個(gè)微粒包括包含PLGA的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和PLLA的殼。[0089]用于制備包含多個(gè)微粒的物質(zhì)的方法，所述方法包括:將包含在DCM(二氯甲烷)中的聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)和可釋放材料的第一溶液與包含在DCM中的聚(L-乳酸)(PLLA)的第二溶液合并以形成混合的聚合物溶液，所述可釋放材料為顆粒狀的或吸附在無(wú)機(jī)納米顆粒上、或吸附在其中、或既吸附在其上又吸附在其中；將所述混合的聚合物溶液在水性介質(zhì)中乳化以形成乳液，所述水性介質(zhì)與第一溶劑和第二溶劑至少部分不互溶；將該乳液老化足夠的時(shí)間以允許在乳液液滴中的PLGA和PLLA至少部分地分離，以便形成包含PLGA的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和PLLA的殼；以及除去DCM以形成作為水性懸浮液的該物質(zhì)，其中每個(gè)微粒包括包含PLGA的核和包圍在所述核周?chē)⑶野琍LGA和PLLA的殼，所述核包含可釋放材料，所述可釋放材料為顆粒狀的或吸附在該核中的無(wú)機(jī)納米顆粒上、或吸附在其中、或即吸附在其上又吸附在其中?！緦＠綀D】【附圖說(shuō)明】[0090]圖1為說(shuō)明藥物釋放的假定機(jī)理的圖。[0091]圖2示出了使用核-殼PLLA-PLGA微球的酒石酸溴莫尼定(brimoridine,BT)藥物釋放曲線圖，其中PLLA:PLGA的重量比為1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為7kDa(左)和24kDa(右)。圖例中指明了負(fù)載在250mg的微球中的BT的量。7kDa的PLGA導(dǎo)致藥物釋放前的滯后時(shí)間為4天，而24kDa的PLGA導(dǎo)致藥物釋放前的滯后時(shí)間為25天。在圖2中，左圖中曲線的順序從下到上為30mg、60mg、90mg和120mg,右圖中曲線的順序從下到上為5mg、15mg、30mg和60mg。[0092]圖3為說(shuō)明允許吸附和遞送蛋白質(zhì)的負(fù)載在富含PLGA的核相內(nèi)的額外的無(wú)機(jī)磷灰石納米顆粒的圖。[0093]圖4為說(shuō)明聯(lián)合遞送藥物和蛋白質(zhì)的圖。[0094]圖5示出了通過(guò)將具有不同滯后時(shí)間的核-殼微球結(jié)合的藥物和/或蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期釋放(a)和脈動(dòng)釋放(b)的圖。[0095]圖6為通過(guò)壓緊獲得的微粒的小球的照片。[0096]圖7為示出在水相中引入飽和的藥物溶液以允許改善負(fù)載在微球上的藥物負(fù)載的圖。[0097]圖8為不出使用核-殼PLLA-PLGA微球的丁哌卡因(bupivacaine)體外釋放的圖，其中以PLLA=PLGA的重量比1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為7kDa(?)和24kDa(實(shí)心)合成PLLA-PLGA微球。[0098]圖9示出了將緊湊的微球插入左膝關(guān)節(jié)(a)和右膝關(guān)節(jié)(b)的空隙中的照片。[0099]圖10示出了隨著丁哌卡因的體內(nèi)釋放滑液(實(shí)心)和血漿(.)中的丁哌卡因的水平對(duì)時(shí)間的函數(shù)。陰影區(qū)域指明了緩解膝關(guān)節(jié)疼痛所需的藥物治療窗口。虛線表示血漿(4000ng/ml)中容許的藥物毒性限度。[0100]圖11示出了第28天的膝關(guān)節(jié)的組織切片的照片。[0101]圖12示出了用核-殼PLLA-PLGA微球獲得的BT釋放的滯后時(shí)間和釋放速率的圖，其中以PLLA=PLGA的重量比1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為7kDa(a)和24kDa(b)合成PLLA-PLGA微球。圖例中指明了負(fù)載在250mg的微球中的BT的量。在(a)中，獲得了4天的滯后時(shí)間，接著在隨后的8天里0.56mg/天的線性釋放。在(b)中，獲得了25天的滯后時(shí)間，接著在隨后的18天里0.76mg/天的線性釋放。在圖12a中，曲線從下到上的順序?yàn)?0、60、90和120mg并且在圖12b中，曲線從下到上的順序?yàn)?、15、30和60mg。[0102]圖13示出了用核-殼PLLA-PLGA微球獲得的BT釋放的滯后時(shí)間和釋放速率，其中以PLLA=PLGA的重量比1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為3.4kDa合成PLLA-PLGA微球。圖例中指明了負(fù)載在250mg的微球中的BT的量。當(dāng)使用3.4kDaPLGA時(shí)觀察不到滯后時(shí)間，并且在第一個(gè)8小時(shí)內(nèi)獲得0.13mg/h的線性釋放速率。在第一天中大部分BT都被釋放了，隨后釋放速率下降到0.12mg/天?；诘谝惶旌筢尫诺腂T的量(2.8mg)，計(jì)算得出發(fā)生在第一個(gè)21小時(shí)內(nèi)的初始線性釋放。在圖13a中，曲線從下到上的順序?yàn)?0、60、90和120mg并且在圖13b中，曲線從下到上的順序?yàn)?0、60和90mg，其中120mg與90mg的曲線幾乎重合。[0103]圖14為示出了在兔子眼睛中的包封的微球的照片。核-殼PLLA-PLGA微球以PLLA=PLGA的重量比1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為24kDa所合成。這些微球負(fù)載有BT并且包封在明膠-HPA水凝膠載體中，并將其插入誘導(dǎo)患有青光眼病的兔子的眼睛里。[0104]圖15為示出了在植入BT-負(fù)載的核-殼PLLA-PLGA微球30天后在誘導(dǎo)患有青光眼病的兔子中IOP(眼內(nèi)壓)水平下降的圖，其中以PLLA:PLGA的重量比1:1，PLLA為IOOkDa,并且PLGA為24kDa合成PLLA-PLGA微球。眼內(nèi)壓持續(xù)下降直到第50天，之后緩慢上升直到在第84天回到初始的青光眼IOP水平。微球被設(shè)計(jì)為體外滯后時(shí)間為25天，隨后18天線性釋放BT(參見(jiàn)圖12b中的釋放曲線)。正常兔子的IOP作為參照(?)。[0105]圖16為第一聚合物溶解后本發(fā)明的顆粒的顯微圖像。實(shí)施方案的描述[0106]本發(fā)明涉及用于可調(diào)控的延遲釋放例如藥物、蛋白質(zhì)和活性成分的核-殼聚合物/聚合物-無(wú)機(jī)微球。本技術(shù)提供了用于制備可以以延遲特性釋放物質(zhì)如藥物、蛋白質(zhì)和/或活性成分的微球的方法。以本技術(shù)方式，可以在物質(zhì)以恒定速率釋放之前指定一段滯后時(shí)間。因此，可以通過(guò)將具有不同滯后時(shí)間的各批微球結(jié)合實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期持續(xù)地釋放，使得當(dāng)藥物、蛋白質(zhì)或活性成分已經(jīng)完全(或部分地)從特定批次的微球中釋放時(shí)，將有另一批次的微球準(zhǔn)備開(kāi)始釋放這種或另一種藥物、蛋白質(zhì)或活性成分。[0107]可以將這些微球加入載體如水凝膠、膜或支架中，以便將其植入所需的釋放位置。當(dāng)所有的藥物、蛋白質(zhì)或活性成分均已釋放后，可以將這個(gè)載體替換。[0108]眾所周知，通常不同聚合物之間不能完全混溶(參見(jiàn)例如Kim,J.H.等人，Macromolecules2006,39，1297-1299，第1297頁(yè))。因此，聚合物的混合物通常會(huì)發(fā)生相分離。在本實(shí)例中，將兩種不同的聚合物在溶液中的乳液液滴中合并。初始相分離提供了兩個(gè)同心的相，內(nèi)部(其變成核)富含第一聚合物而外部(其變成殼)富含第二聚合物。隨著進(jìn)一步發(fā)生相分離，被認(rèn)為外部相形成第二聚合物的基質(zhì)，該基質(zhì)具有在第二聚合物基質(zhì)中或貫穿第二聚合物基質(zhì)的第一聚合物的途徑或通道。一旦從液滴中收回或至少部分地收回溶劑，這些相就會(huì)固化，以便形成最終顆粒并且“凍住”最終結(jié)構(gòu)。[0109]如果將可釋放材料，例如活性化合物如藥物，提供給(例如負(fù)載到或合并入)第一聚合物，那么可以形成可釋放材料位于顆粒的核中的層狀顆粒。然后考慮通過(guò)將該顆粒放置在能降解所述第一聚合物的環(huán)境中而降解第一聚合物，以打開(kāi)貫穿該殼的途徑，通過(guò)該途徑可釋放材料可以被釋放。[0110]在本文中，術(shù)語(yǔ)“降解”和相關(guān)術(shù)語(yǔ)應(yīng)采取其最廣泛的意義。因此，這個(gè)術(shù)語(yǔ)可以指一個(gè)過(guò)程，通過(guò)該過(guò)程使得第一方法具有流動(dòng)性或者轉(zhuǎn)變成具有流動(dòng)性的種類。這可以包括解聚或部分解聚、溶解、化學(xué)分解或某種其它方法。降解涉及使用顆粒或打算使用顆粒的環(huán)境，通常由該環(huán)境引發(fā)。因此如果顆粒將要釋放可釋放材料到工業(yè)液體中，那么第一聚合物可以被該液體或被其中的組分降解。例如，如果可釋放材料將要被釋放至酸性環(huán)境中，那么第一聚合物可以在酸性環(huán)境中降解。例如，如果可釋放材料是堿，那么這可能是有用的，以便該顆粒可以用于阻止過(guò)度酸化。在另一個(gè)例子中，如果可釋放材料將要被釋放至生物液體(例如體內(nèi))中，那么第一聚合物可以為可生物降解的。在又一個(gè)例子中，第一聚合物可以為可光降解的，并且對(duì)顆粒的懸浮液進(jìn)行輻照可以促進(jìn)可釋放材料的釋放。輻照可以在專門(mén)適合第一聚合物的降解的波長(zhǎng)下進(jìn)行。因此，在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明提供用于向環(huán)境釋放可釋放材料的包含多個(gè)微粒的物質(zhì)，所述微粒包括包含分散在第一聚合物中的可釋放材料的核和包圍在該核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?，所述第一聚合物在所述環(huán)境中為可降解的并且在所述環(huán)境中第二聚合物降解得比第一聚合物慢，并且第一聚合物在該殼中形成貫穿第二聚合物的連續(xù)通道。[0111]在本發(fā)明的微粒中，第一聚合物可以形成多個(gè)穿過(guò)殼的連續(xù)通道或途徑(或可以為多個(gè)穿過(guò)殼的連續(xù)通道或途徑的形式)。第一聚合物可以設(shè)置在殼內(nèi)，使得一旦將其去除(例如通過(guò)降解)便會(huì)暴露出多個(gè)貫穿殼的通道或途徑。(第一聚合物的或者通過(guò)將其去除而暴露的)通道或途徑在該殼的外表面和該殼的內(nèi)表面之間可以為由互相連接的通道或途徑形成的網(wǎng)狀物的形式，或者可以形成獨(dú)立的通道或途徑。通過(guò)去除第一聚合物而暴露出的通道或途徑可以為使得它們?cè)试S在該殼的外表面和該殼的內(nèi)表面之間的液體通路。因此，該殼可以為第一聚合物和第二聚合物的相互貫穿的網(wǎng)狀物的形式。[0112]鑒于本發(fā)明設(shè)想了對(duì)患者釋放治療或診斷的物質(zhì)的一種應(yīng)用，也設(shè)想了其它非治療和/或非診斷的用途，例如在衣物清洗過(guò)程中釋放增白劑、在工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中釋放催化劑/酶等。甚至在使用診斷或治療應(yīng)用的情況下，患者可以是非人類患者，例如哺乳動(dòng)物、脊椎動(dòng)物、鳥(niǎo)、魚(yú)、家畜(例如牛、馬、狗、貓、羊、豬等)或一些其它類型的非人類患者。在一些應(yīng)用中，患者為人類患者。在顆粒用于體內(nèi)的情況下，優(yōu)選地第一聚合物或第二聚合物或它們?nèi)我坏娜魏紊锝到猱a(chǎn)物都沒(méi)有毒性或不對(duì)使用該顆?；蚴┯盟鼈兊挠袡C(jī)體有害。本發(fā)明可以在體外應(yīng)用。它也可以在體內(nèi)應(yīng)用。[0113]如上所述，第一聚合物應(yīng)該比第二聚合物更容易被降解。在一些例子中，第一聚合物為可降解的并且第二聚合物為不可降解的或僅能非常緩慢的降解。在具體實(shí)施方案中，第一聚合物為可生物降解的并且第二聚合物為不可以生物降解的或僅能非常緩慢的生物降解。另外，第一聚合物和第二聚合物優(yōu)選為互相不完全互溶。如上所示，這個(gè)需求很容易滿足，因?yàn)橥耆ト艿木酆衔飳?duì)不常見(jiàn)。各個(gè)聚合物可以獨(dú)立地為均聚物或共聚物。在一個(gè)為共聚物的情況下，聚合物主鏈可以包含至少兩種不同的共聚單體。在一些實(shí)施方案中，第一聚合物為共聚物并且第二聚合物為均聚物。第二聚合物的單體可以是第一聚合物的共聚單體。在這類情況下，第一聚合物的又一個(gè)(或另一個(gè))共聚單體可以為共聚物引入增加的降解性。這可能由于其本身為可降解的(例如可生物降解的、可光降解的等)或具有連接至另一個(gè)共聚單體的可降解的連接。[0114]在顆粒形成的溫度(或在15、20、25或30°C)下，第一聚合物在第二聚合物中的混溶性可以小于以重量或體積計(jì)大約10%，或小于5、4、3、2、1、0.5、0.2或0.1%，或可以為以重量或體積計(jì)大約0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9或10%。在顆粒形成的溫度下第二聚合物在第一聚合物中的混溶性可以小于以重量或體積計(jì)大約10%，或小于大約5、4、3、2、1、0.5、0.2或0.1%，或可以為以重量或體積計(jì)大約0.1>0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9或10%。[0115]在顆粒形成的溫度下第一聚合物與第二聚合物可以基本上不互溶。用于本發(fā)明的合適的聚合物(獨(dú)立地第一聚合物和第二聚合物)包括縮聚物，例如聚酯、聚酰胺、聚酰亞胺、聚酸酐等。尤其合適的聚合物包括羥基官能化羧酸的聚合物和共聚物。這些可以獨(dú)立地是C2到C6的羥基官能化羧酸，例如C2、C3、C4、C5或C6的羥基官能化羧酸。它們可以是單羧酸。它們可以是單羥基官能化的。它們可以是伯羥基官能化的，或者可以是仲羥基官能化的，或者可以是叔羥基官能化的。使用無(wú)毒單體的聚合物可能是有用的，以便在降解聚合物時(shí)避免產(chǎn)生有毒產(chǎn)物。合適的第一聚合物為乳酸(D、L或DL)和另一個(gè)羥基酸如乙醇酸的共聚物。第一聚合物可以為無(wú)定形的。它可以為非晶質(zhì)的。這可以促進(jìn)其降解。獨(dú)立地，第二聚合物可以為羥基官能化羧酸如乳酸(D、L或DL)的聚合物。在本發(fā)明中使用的有用的聚合物對(duì)是作為第一聚合物的聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)和作為第二聚合物的聚(L-乳酸)(PLLA)。第二聚合物可以為半晶質(zhì)的或可以為晶質(zhì)的。這可以抑制其降解。第一聚合物和第二聚合物可以獨(dú)立地為線性的。它們可以是非交聯(lián)的。在共聚物的情況下，在共聚物主鏈上可以存在至少兩個(gè)共聚單體。當(dāng)本說(shuō)明書(shū)中提到在聚合物中存在的單體(或相關(guān)說(shuō)法)時(shí)，是指來(lái)自聚合物中存在的單體的單體單元的存在。[0116]如上所述，在本發(fā)明中第一聚合物在其所使用的環(huán)境中為可以降解的是很重要的。在其所暴露的且不希望釋放可釋放材料的其他環(huán)境中，它可以為不可降解的或非常緩慢的降解。例如在中性水或空氣中它可以為不可降解的或非常緩慢的降解。第一聚合物可以為由其分子量決定其降解速率。這使得可以通過(guò)第一聚合物的分子量來(lái)控制可釋放材料從該顆粒中的釋放。第一聚合物的分子量可以為可以獲得所需要的可釋放材料的釋放特性。例如它可以大于大約lkDa，或大于大約2、3、4、5、7、10、15、20、30、50、75或IOOkDa,或它可以小于大約40kDa，或小于大約35、30、25、20、15或IOkDa,或可以在大約I到大約IOOkDa之間，或可以在大約I和60、I和58、I和35、3和35、5和35、10和35,20和35、I和5、1和10、1和5、4和7、5和75、5和50、5和25、5和20、5和15、5和10,10和100,20和100,50和100、10和50,20和50、10和20、7和24、7和15、15和24或75和IOOkDa之間，例如大約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90或100。第二聚合物可以具有高分子量。這可以抑制其在使用中降解。其分子量可以大于大約50kDa，或大于75、100、125、150或200kDa，或在大約50和大約250kDa之間，或在大約50和200,50和1050、100和250或100和200kDa之間，或大約50、60、70、80、90、100、125、150、175、200、225或250kDa。在一些例子中，第二聚合物可以具有較低的分子量，例如低至2kDa。第二聚合物的分子量可以為2至50kDa、或2至20、2至10、10至50、20至50、10至30或15至20kDa，例如大約2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45或50kDa。在一個(gè)實(shí)例中，第一聚合物的分子量為大約4至大約7kDa并且第二聚合物的分子量為大約15到大約20kDa。以上分子量可以為數(shù)均分子量、或者可以為重均分子量、或者可以為粘均分子量。它們可以是與聚苯乙烯等價(jià)的分子量(例如使用已知分子量的聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)量)或它們可以是使用Mark-Houwink-Sakurada方程計(jì)算得到的分子量。第一聚合物和第二聚合物可以獨(dú)立地具有窄或?qū)挼姆肿恿?。它們可以?dú)立地具有小于20或小于15、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1.5、1.4、1.3、1.2或1.1，或大約I至20、I至10、I至5、I至2、I至1.5、I至1.2、2至20、5至20,10至20,15至20、2至10、2至5或5至10，例如大約1,1.1、1.2,1.3,1.4,1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20的多分散性(定義為Mw/Mn)，盡管在一些情況下可以使用多分散性大于20的聚合物。[0117]可以選擇第一聚合物和第二聚合物的分子量，以使核相對(duì)于殼降解得更快，即第一聚合物比第二聚合物降解得更快。在使用的條件下第二聚合物應(yīng)該相對(duì)于第一聚合物降解得更緩慢。因此，如果在核內(nèi)的第一聚合物的分子量非常低并且第一聚合物降解非?？?，那么可以在該殼中使用分子量非常低的第二聚合物。優(yōu)選地殼在使用時(shí)在整個(gè)釋放可釋放材料的時(shí)間和核的降解時(shí)間里保持完整。在一些應(yīng)用中，可以期望在藥物完全釋放之后不久該殼完全降解。在這種情況下，在殼中的第二聚合物應(yīng)選擇具有盡可能低的分子量，以在完成藥物釋放之后盡早降解同時(shí)在藥物釋放期間仍保持完整。[0118]在一個(gè)實(shí)例中，2kDaPLLA用作殼內(nèi)的第二聚合物，與分子量小于7kDa的核內(nèi)的PLGA第一聚合物配對(duì)。發(fā)現(xiàn)分子量為7kDa的PLGA的降解顯著快于分子量為2kDa的PLLA。這導(dǎo)致在使用高分子量的PLLA/PLGA時(shí)，藥物釋放方案為10天左右而不是幾個(gè)月。[0119]第二聚合物的量(即重量)可以大于第一聚合物。第二聚合物與第一聚合物的比例可以在大約I和大約5之間(即大約1:1到大約5:1)，或大約I至4、I至3、I至2、2至3、1至1.5,1.5至2、1至1.25,1.25至2,1.25至1.5,1.5至2或1.5至1.75，例如大約1、1.05、1.1、1.15、1.2、1.25、1.3、1.35、1.4、1.45、1.5、1.6、1.7、1.75、1.8、1.9、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。[0120]顆粒的殼可以包含少于以重量或體積計(jì)大約25%的第一聚合物，或少于大約20、15或10%，或可以包含大約5和大約25%之間的第一聚合物，或在大約10和25、15和25、20和25、5和15或15和20%之間，例如大約5、10、15、20或25%。一旦第一聚合物在使用時(shí)已經(jīng)降解，這個(gè)比例可以接近等于在殼內(nèi)的孔體積的比例。[0121]本發(fā)明的微粒的直徑可以在大約0.5和大約1000微米之間，或在大約0.5和大約500微米之間，或在大約0.5和200,0.5和100,0.5和50,0.5和20,0.5和10,0.5和5、0.5和2、0.5和1、I和500、2和500、5和500、10和500,50和500、100和500,200和500、I和100,1和10,10和100,10和50或50和100微米之間，例如大約0.5、1、1.5、2、2.5、3,3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450或500微米，或甚至更大，例如550、600、650、700、750、800、850、900、950或1000微米。這可以是平均直徑。微?？梢詾榛旧蠁畏稚⒌?，或可以具有一定范圍的顆粒尺寸。顆粒的直徑與核的直徑的比可以為大約1.05至大約5，或大約1.05至3、1.05至2、1.05至1.5、1.1至5、1.5至5、2至5、3至5、1.5至2、1.5至3、1.5至2.5或1.2至2，例如大約1.05,1.1、1.15,1.2,1.25,1.3,1.35,1.4,1.45,1.5,1.6,1.7,1.8,1.9、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。核的直徑可以為大約0.2到大約500微米，或大約0.5到500、I到500、20到500、5到500、10到500、20到500、50到500、100到500、200到500、0.2到200、0.2到100,0.2到50,0.2到20,0.2到10,0.2到5,0.2到2、I到200、10到50、10到100,50到250,10到20或5到10微米，例如大約0.2,0.3,0.4,0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450或500微米。微?？梢詾榍蛐位蚪咏蛐巍Ｋ鼈兛梢詾楸鈭A球形、卵形、多面體或某一其它合適的形狀。它們應(yīng)為固體。[0122]可釋放材料可以以不可溶的形式存在在顆粒的核中，或可以溶解在第一聚合物中。它可以為顆粒狀的。它可以吸附在支撐顆粒上或吸附在其中。支撐顆?？梢詾闊o(wú)機(jī)顆粒。無(wú)機(jī)顆?？梢詾槔琨}顆粒、礦物顆粒、沸石顆?；蚰骋黄渌w粒。磷灰石顆粒是一個(gè)合適的例子。支撐顆粒(或可釋放材料的顆粒)可以為納米顆粒。其直徑可以為大約I到大約20nm、或大約I到10、I到5、I到2、2到20、5到20、10到20、2到10或5到IOnm,例如大約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20nm，或可以比這更大(例如大約30、40、50或IOOnm)或更小。支撐顆?；蚩舍尫挪牧系念w?？梢宰銐蛐∫源┻^(guò)通過(guò)殼中的第一聚合物的降解形成的在微粒的殼中的孔。那些孔的直徑可以為大約10到大約lOOOnm，或大約10到500、10到200、10到100、10到50、20到1000、50到1000、100到1000、200到1000、500到1000、100到500、50到200、10到20、20到50或20到30nm,例如大約10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900或lOOOnm。在一些例子中，它們可以比這些更大，例如大約I至大約50微米或大約I到20、I到10、I到5、5到50、10到50、20到50、5到20、10到20或20到30微米，例如大約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45或50微米?？梢酝ㄟ^(guò)控制支撐顆粒的大小或可釋放材料的顆粒(本文中稱為“可釋放顆?！?的大小控制可釋放材料的釋放速率。因此可釋放顆粒越大，它們穿過(guò)的孔釋放得越慢，該孔為通過(guò)第一聚合物的降解在殼中所形成的。在極端情況下，如果可釋放顆粒大于該孔，那么釋放的機(jī)理僅為通過(guò)降解/溶解第二聚合物，或者通過(guò)溶解可釋放顆?；蛑辽倏舍尫挪牧?，隨后可釋放材料擴(kuò)散出該孔。PLGA降解的酸性產(chǎn)物可以降解磷灰石核并釋放所吸附的材料。[0123]可釋放材料可以為蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、酶、DNA、DNA片段、RNA、RNA片段、多糖、激素、生長(zhǎng)因子、皮質(zhì)類固醇、抗生素、放射性藥物、非以上任意一種的藥物、放射性示蹤劑、顯像劑、染料、藥妝試劑或其任意兩種或更多種的混合物，或可以為某一其它物質(zhì)。[0124]本發(fā)明的核-殼顆?？梢詾楠?dú)立的顆粒的形式，或可以相互粘結(jié)，或部分地相互粘結(jié)。例如可以將它們燒結(jié)以形成顆粒塊。這可以通過(guò)將顆粒加熱到合適的燒結(jié)溫度來(lái)實(shí)現(xiàn)。當(dāng)然這將取決于第二聚合物的性質(zhì)。該溫度可以高于第二聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度。例如，其可以為大約35到55°C，或大約40到50,35到50或40到55°C，例如大約35、40、45、50或55°C。另外地或作為一種選擇可以壓緊顆粒以使它們形成顆粒的固體塊。作為另一種選擇粘性物質(zhì)(例如膠水或聚合物)可以用于粘結(jié)顆粒。膠水或聚合物可以在第一聚合物降解的條件下為可降解的，以使得在使用中顆粒分離從而促進(jìn)可釋放材料的釋放。在另一種選擇中，可以將微粒包埋在一種物質(zhì)(例如凝膠、蠟等)中。在使用的條件下，例如在第一聚合物降解的條件下，該物質(zhì)可以為可降解的、可溶的或?yàn)榭沙サ?。[0125]可以通過(guò)將包`含在第一溶劑中的第一聚合物的第一溶液和包含在第二溶劑中的第二聚合物的第二溶液合并以形成混合的聚合物溶液來(lái)制備本發(fā)明的微粒(因此物質(zhì)包含所述微粒)?；蛘撸谝痪酆衔锖偷诙酆衔锟梢匀芙庠谌軇┲?，任選地包含第一溶劑和第二溶劑的混合溶劑。第一溶劑和第二溶劑可以相同，或者可以混溶并且不同。隨后在介質(zhì)中乳化混合的聚合物溶液，在該介質(zhì)中第一溶劑和第二溶劑最多微混溶(通常為水性介質(zhì))以形成乳液。隨后將乳液老化足夠的時(shí)間以允許第一聚合物和第二聚合物在乳液液滴中至少部分分離以形成包含第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍?。隨后除去乳液液滴中的第一溶劑和第二溶劑，從而形成作為水性懸浮液的微粒。[0126]優(yōu)選地第一溶劑和第二溶劑相同。第一溶劑應(yīng)為第一聚合物的溶劑，并且第二溶劑應(yīng)為第二聚合物的溶劑。通常第一溶劑和第二溶劑為疏水溶劑。它們可以獨(dú)立地是芳族烴溶劑、鹵化溶劑、酯類溶劑、酮類溶劑或一些其它合適的溶劑，或可以是合適溶劑的混合物。合適用作第一溶劑和第二溶劑的溶劑為二氯甲烷(DCM)。其它合適的溶劑包括或其它合適的溶劑例如DMF、DMS0、甲醇或其中任意一種或多種與DCM的混合物。在一個(gè)實(shí)例中，使用最小量的DMF和/或DMSO和/或甲醇，以在將溶解藥物與PLGA-DCM溶液混合之前輔助溶解一些種類的藥物，以促進(jìn)藥物并入PLGA-DCM溶液中。如果固體藥物直接加入至PLGA-DCM，那么在合成過(guò)程中它可以在一些情況下沉淀析出進(jìn)入PLLA相中或進(jìn)入乳化緩沖液中。乳液的連續(xù)相通常為水性的。它可以包含水和一種或多種溶質(zhì)。溶質(zhì)可以為聚合物，例如甲基纖維素。溶質(zhì)可以以重量計(jì)大約0.01到1%，或大約0.01到0.1,0.1到I或0.05到0.5%，例如大約0.01,0.05,0.1,0.5或1%的水平存在。乳液可以通過(guò)表面活性劑得到穩(wěn)定。表面活性劑可以為無(wú)毒的。其可以是可生物降解的。為了避免第一溶劑和第二溶劑在乳液液滴中過(guò)早地耗盡，在連續(xù)相中可以溶解有少量的第一溶劑和/或第二溶劑。連續(xù)相可以為第一溶劑和/或第二溶劑所飽和。它另外地或作為一種選擇可以包含有可釋放材料。它可以為可釋放材料所飽和。[0127]在第一溶劑中的第一聚合物的濃度和在第二溶劑中的第二聚合物的濃度可以獨(dú)立地為大約5到大約50%w/v,或大約5到20、5到10、10到50,20到50或10到20%，例如大約5、10、15、20、25、30、35、40、45或50%.[0128]混合的聚合物溶液乳化所在的介質(zhì)可以為水性的。它可以是水溶液。它可以包含乳化劑。乳化劑可以是高分子乳化劑。它可以為表面活性劑。它可以為單體表面活性劑，或者可以為聚合物表面活性劑。它可以為非離子的，或可以為陽(yáng)離子的，或可以為陰離子的，或可以為兩性離子的。水溶液還可以包含輔助表面活性劑。合適的乳化劑包括甲基纖維素，聚山梨酯/失水山梨醇表面活性劑,例如吐溫(Tvveen?)、司盤(pán)(Span?),聚氧乙烯表面活性劑，例如布里杰(Brij?)，環(huán)氧乙烷以及環(huán)氧丙烷表面活性劑，例如普魯洛尼克(Pluronic?)等。[0129]如文中所討論的，可釋放材料的釋放(如果存在)可以由多種因素控制，所述因素包括第一聚合物的分子量、第一聚合物的化學(xué)性質(zhì)(和由此的降解速率)、可釋放物質(zhì)的顆粒尺寸、或它吸附在其上和/或所吸收的支撐顆粒的顆粒尺寸和在一些情況中第一聚合物與第二聚合物的比例。因此，所述方法可以包括選擇以下一個(gè)或多個(gè)的步驟:第一聚合物的分子量、第一聚合物的化學(xué)性質(zhì)(和由此的降解速率)、可釋放物質(zhì)的顆粒尺寸或它吸附在其上和/或所吸收的支撐顆粒的顆粒尺寸和第一聚合物與第二聚合物的比例，以在預(yù)定應(yīng)用中獲得需要的可釋放材料的釋放特性。釋放`特性可以是釋放延遲或滯后時(shí)間(即將顆粒暴露在第一聚合物降解條件下直到開(kāi)始釋放的時(shí)間)，或者可以是釋放開(kāi)始后的釋放速率。延遲或滯后時(shí)間可以為從大約0.5到大約100天，或從大約0.5到50、0.5到20、0.5到10、0.5到5,0.5到2,0.5到Ul到50,50到50,10到50,20到50、1到10、5到20或10到20天，例如大約0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、15、30、35、40、45或50天，或者在具體的情況下可以比這更多或更少。在一些情況下可以沒(méi)有或有微不足道的延遲或滯后時(shí)間。釋放速率可以為使得可釋放材料在一段時(shí)間內(nèi)釋放，該段時(shí)間為從大約0.5到大約100天，或從大約0.5到50、0.5到20、0.5到10、0.5到5、0.5到2、0.5到1、I到50,50到50、10到50,20到50、I到10、5到20或10到20天，例如大約0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、15、30、35、40、45或50天，或者在具體的情況下可以比這更多或更少。[0130]第一溶液還可以包含可釋放材料并且因此可以通過(guò)將可釋放材料加入至第一溶劑中的第一聚合物的溶液中或通過(guò)將第一聚合物溶解在第一溶劑和可釋放材料(任選地在支撐物上)的混合物中的方式制備。可以以顆粒形式或吸附于顆粒狀支撐物上的形式提供可釋放材料。(可釋放材料的或者可釋放材料在其上和/或其中的支撐物的)顆粒的直徑可以為大約I到大約20nm、或大約I到IOU到5、1到2、2到20、5到20,10到20、2到10或5到10nm，例如大約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20nm，或可以比這更大(例如大約30、40、50或IOOnm)或更小。在以下討論中，假設(shè)存在可釋放材料。然而，應(yīng)該認(rèn)識(shí)到在一些情況下除了第一聚合物以外沒(méi)有可釋放材料。在這種情況下，方法是相同的，除去省略了可釋放材料和它吸附在其上/所吸附的支撐物(如果存在)。[0131]通過(guò)合并第一溶液和第二溶液形成第一聚合物和第二聚合物以及可釋放物質(zhì)同時(shí)存在的溶液，可釋放物質(zhì)通常是盡管不總是在懸浮液中或吸附于顆粒上。隨后在介質(zhì)中乳化該混合的聚合物溶液從而使該混合的聚合物溶液形成乳液分散相(液滴)。該液滴的直徑可以為大約I到大約1000微米，或大約I到500、I到200、I到100、I到50、I到20、I到10、10到1000、100到1000,500到1000、10到100、10到50或50到100微米，例如大約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900或1000微米。該方法可以包括攪拌(例如搖動(dòng)、超聲處理、微粉化等)介質(zhì)和混合的聚合物溶液的混合物以獲得需要的液滴尺寸。[0132]一旦形成乳液，應(yīng)為發(fā)生相分離留有足夠的時(shí)間以形成一個(gè)殼溶液包圍核溶液的結(jié)構(gòu)，該核溶液中含有相對(duì)于第二聚合物來(lái)說(shuō)富集的第一聚合物，該殼溶液中含有相對(duì)于第一聚合物來(lái)說(shuō)富集的第二聚合物。然而該殼溶液應(yīng)該含有一些第一聚合物(通常為相對(duì)于第二聚合物少于大約25%)。[0133]為了固化聚合物以形成顆粒，應(yīng)除去顆粒中第一溶劑和/或第二溶劑。一個(gè)方便地獲得該效果的方法為用混合溶液稀釋該乳液，該混合溶液與不含有第一和/或第二溶劑的連續(xù)相(通常為水性液體)混溶。之后從液滴中分離出溶劑以使第一和第二聚合物固化?？梢钥焖倩蛑饾u地實(shí)施稀釋。因此，可以加入(任選地伴隨攪拌)乳液至稀釋的連續(xù)相，抑或向乳液中加入稀釋的連續(xù)相，通常為伴隨攪拌逐漸加入。可以容易地理解其它除去在液滴中的溶劑的方法，例如通過(guò)將乳液加熱到接近、正好或高于第一溶劑和/或第二溶劑的沸點(diǎn)的溫度，或者將乳液抽部分真空以蒸發(fā)第一溶劑和/或第二溶劑。對(duì)于這些方法，優(yōu)選第一溶劑和/或第二溶劑的沸點(diǎn)低于乳液連續(xù)相的沸點(diǎn)。[0134]人們認(rèn)為由于從液滴的顆粒中除去第一溶劑和/或第二溶劑，核溶液形成顆粒的核，(如果可釋放材料為顆粒狀或吸附于顆粒支撐物上)可釋放材料或支撐顆粒分散于其中。包圍在核周?chē)臍と芤盒纬蓺?。由于從殼溶液中除去了溶劑，在殼中發(fā)生進(jìn)一步地相分離，形成貫穿第二聚合物的殼基質(zhì)的第一聚合物的通道。應(yīng)該理解，無(wú)論如何第一聚合物和第二聚合物可以有少量的相互混溶性，因此在核中的第一聚合物可以包含少量第二聚合物，并且相似地殼中的第二聚合物可以包含少量第一聚合物。[0135]一旦顆粒完全形成，可以通過(guò)任何通常使用的方法(例如過(guò)濾、離心、沉降/浮選、蒸發(fā)等)將其從所得懸浮液中分離。隨后可以將其洗滌以除去殘留的不希望的材料諸如連續(xù)相中的溶質(zhì)、表面活性劑等，并且隨后可以干燥。[0136]本發(fā)明允許通過(guò)將具有不同特性的多批次的顆?；旌闲纬山M合物來(lái)按需設(shè)計(jì)出不同釋放特性。例如，如果同時(shí)釋放兩種單獨(dú)的可釋放材料，可以將它們分別地并入除此以外相同的微粒的核中。隨后可以將這些合并入將同時(shí)釋放兩種可釋放材料的單一組合物中。或者，如果要順序釋放兩種可釋放材料，可以將包含第一可釋放材料(在核中)的第一批次的微粒的殼設(shè)計(jì)為很短或可忽略不計(jì)的延遲并且可以將在核中包含第二可釋放材料的第二批次設(shè)計(jì)為使得該殼具有對(duì)應(yīng)為第一批次的延遲加上第二批次的釋放時(shí)間的延遲。這樣獲得的組合物會(huì)順序釋放兩種可釋放物質(zhì)。在又一種選擇中，單一可釋放物質(zhì)可以并入兩個(gè)批次的微粒中，該兩個(gè)批次的微粒設(shè)計(jì)為使得第二批次的延遲大于第一批次的延遲加上第一批次的釋放時(shí)間。這樣可釋放物質(zhì)將被遞送到兩個(gè)分離的相中，在兩個(gè)相之間存在其間沒(méi)有釋放發(fā)生的間隙。技術(shù)人員會(huì)容易認(rèn)識(shí)到可以通過(guò)合并兩個(gè)或更多個(gè)不同批次的本發(fā)明的微粒任意制備其它釋放特性。如前討論，通過(guò)能夠獨(dú)立地控制可釋放物質(zhì)的釋放速率和釋放發(fā)生前的延遲時(shí)間，提供了這種多功能性。[0137]在一些應(yīng)用中，可以對(duì)患者施用本發(fā)明的微粒。這可以用于治療可釋放材料所指明的用于治療的疾病狀態(tài)，或者可以用于可釋放材料作為顯影劑(例如MRI顯像劑、PET顯像劑等)的身體局部成像。施用可以通過(guò)攝入、吸入、栓劑、注射或通過(guò)其他合適的途徑。微?；虬⒘５奈镔|(zhì)可以用于制備治療疾病狀態(tài)的藥物。本文中可治療的疾病包括疼痛、發(fā)燒、癌癥、細(xì)菌感染等。該技術(shù)可以適用于疏水性的(例如不溶于水的)物質(zhì)的釋放，例如疏水性藥物，盡管也可以使用親水性(例如水溶性)藥物或其它可釋放物質(zhì)。[0138]該技術(shù)可以用于遞送用于包括骨科、視力保健、消費(fèi)品、食品/營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品的多種應(yīng)用的藥物、蛋白質(zhì)和/或其它活性成分。該技術(shù)提供如下獨(dú)一無(wú)二的特性:?在藥物、蛋白質(zhì)和/或活性成分釋放之前的可調(diào)節(jié)的滯后時(shí)間。?可以合并多個(gè)延遲釋放配方，以便以預(yù)先設(shè)定的順序受控的釋放不同藥物、蛋白質(zhì)和/或活性成分。?可以合并多個(gè)延遲釋放配方，以便重復(fù)地以脈動(dòng)方式釋放相同藥物、蛋白質(zhì)和/或活性成分，或用于長(zhǎng)期持續(xù)釋放。`?可以大量生產(chǎn)用于體內(nèi)應(yīng)用或市售品的微球。?通過(guò)(i)在升溫下壓緊或者(ii)包封在諸如水凝膠、膜和支架的載體中，可以易于將微球遞送到和保留在所需的植入位點(diǎn)。實(shí)施例[0139]開(kāi)發(fā)了具有富含聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的核和富含聚(L-乳酸)(PLLA)的殼的核-殼納米復(fù)合微球，該微球作為延遲釋放媒介物用于順序遞送單一或多種藥物。通過(guò)控制PLLA和PLGA的相分離形成核-殼結(jié)構(gòu)。將藥物并入PLGA相(核)。PLGA的降解會(huì)在富含PLLA的殼中產(chǎn)生孔，使得藥物可以通過(guò)擴(kuò)散穿過(guò)富含PLLA的殼得以釋放(圖1)。因此通過(guò)PLGA的降解時(shí)間控制藥物釋放前的滯后時(shí)間，PLGA的降解時(shí)間取決于PLGA的分子量(圖2)。在PLGA相中并入額外的無(wú)機(jī)(磷灰石)納米顆粒將促進(jìn)蛋白質(zhì)的吸附和遞送(圖3)。通過(guò)降解富含PLGA的核，蛋白質(zhì)可以從微球中釋放，富含PLGA的核的降解導(dǎo)致生成酸性產(chǎn)物并溶解磷灰石納米顆粒，以及隨后釋放在磷灰石納米顆粒上預(yù)先吸附的蛋白質(zhì)。通過(guò)在PLGA相中并入吸附了藥物和蛋白質(zhì)的無(wú)機(jī)納米顆粒，可以同時(shí)釋放藥物和蛋白質(zhì)并且最小化總的微球體積(圖4)。通過(guò)合并含有不同分子量的PLGA的微球，可以獲得藥物和/或蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期持續(xù)釋放(圖5a)。還可以脈動(dòng)釋放(圖5b)。為了方便植入，可以將微球壓緊為小球(圖9)?；蛘?，可以將它們并入諸如水凝膠、膜或支架的載體中，并在藥物和/或蛋白質(zhì)完全釋放后替換該載體(圖14)。Al.核-殼微球的制備Al.1.用于藥物遞送的PLLA-PLGA微球[0140]使用水包油包固體乳液溶劑萃取技術(shù)合成PLLA-PLGA核-殼微球。在典型的合成中，制備兩種單獨(dú)的溶液，分別是Iml二氯甲烷(DCM)中含有125mgPLLA的溶液和ImlDCM中含有125mgPLGA的溶液。隨后在PLGA溶液中加入多達(dá)125mg的藥物形成油包固體懸浮液。將該懸浮液和PLLA溶液合并、混合，并且隨后使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器在200ml0.lwt%甲基纖維素的水溶液中將其乳化，以生成水包油包固體乳液。用1.8mlDCM部分飽和在乳化步驟中使用的甲基纖維素溶液以最小化不希望的水對(duì)油液滴中DCM的萃取，并且避免在兩種聚合物能發(fā)生相分離前微球的過(guò)早硬化。在攪拌30min之后，通過(guò)使用蠕動(dòng)泵以l_7ml/min的速率加入另外的不含有DCM的200ml0.lwt%甲基纖維素溶液，開(kāi)始可控的萃取DCM并且使聚合物液滴硬化。再連續(xù)攪拌4h確保DCM完全萃取。過(guò)濾得到硬化的微球，用水洗滌，并且冷凍干燥過(guò)夜。Al.2.用于蛋白質(zhì)遞送的PLLA-PLGA-磷灰石微球[0141]通過(guò)在雙膦酸分子(例如羥乙磷酸:1_羥基亞乙基-1，1-二膦酸)存在下用磷酸氫銨堿沉淀硝酸鈣來(lái)合成羥乙磷酸鹽封端的碳酸磷灰石(eCAP)納米顆粒，以減少顆粒的聚集。在典型的合成中，快速將100ml硝酸鈣溶液(8mM)加入到100ml包含磷酸氫銨(5mM)、碳酸氫銨(5mM)、羥乙磷酸(3mM)和氫氧化銨(pH值為10.4)的堿溶液中，從而得到eCAP納米顆粒。24h后濃縮并通過(guò)超濾水洗該納米顆粒，以去除任何未反應(yīng)的試劑。隨后將8.5mg蛋白質(zhì)加入到20mgeCAP顆粒中，攪拌該懸浮液過(guò)夜以使得蛋白質(zhì)吸附到eCAP納米顆粒上。濃縮并通過(guò)超濾水洗所獲得的懸浮液，以去除任何未結(jié)合的蛋白質(zhì)。然后將該顆粒冷凍干燥過(guò)夜以制得負(fù)載蛋白質(zhì)的eCAP。[0142]隨后制備兩種單獨(dú)的溶液，分別是ImlDCM中含有125mgPLLA的溶液和ImlDCM中含有125mgPLGA的溶液。隨后將30mg負(fù)載蛋白質(zhì)的eCAP加入PLGA溶液中形成油包固體懸浮液。將該懸浮液和PLLA溶液合并、混合，并且隨后使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器在200ml0.lwt%甲基纖維素的水溶液中將其乳化，以生成水包油包固體乳液。用1.8mlDCM部分飽和在乳化步驟中使用的甲基纖維素溶液以最小化不希望的水對(duì)油液滴中DCM的萃取，并且避免在兩種聚合物能發(fā)生相分離前微球的過(guò)早硬化。在攪拌30min之后，通過(guò)使用蠕動(dòng)泵以l_7ml/min的速率加入另外不含有DCM的200ml0.lwt%甲基纖維素溶液，開(kāi)始可控的萃取DCM并且使聚合物液滴硬化。再連續(xù)攪拌4h確保完全萃取DCM。過(guò)濾得到硬化的微球，用水洗滌，并且冷凍干燥過(guò)夜。Al.3.用于遞送組合的藥物和蛋白質(zhì)的微球[0143]依照Al.2部分中描述的方法制備吸附蛋白質(zhì)的eCAP納米顆粒。隨后將吸附蛋白質(zhì)的eCAP納米顆粒和藥物可結(jié)合載入PLGA溶液中形成油包固體懸浮液。隨后將該懸浮液和PLLA溶液合并，并且進(jìn)行如上述Al.2部分中描述的多個(gè)步驟。A2.微球的大規(guī)模生產(chǎn)[0144]使用水包油包固體乳液溶劑萃取技術(shù)合成負(fù)載蛋白質(zhì)的PLLA/PLGA核-殼微球。在典型的合成中，制備兩種單獨(dú)的溶液，分別是100mlDCM中含有12.5gPLLA的溶液和100mlDCM中含有12.5gPLGA的溶液。隨后將多達(dá)IOg的染料、藥物或蛋白質(zhì)加入PLGA溶液中形成油包固體懸浮液。將該懸浮液和PLLA溶液合并、混合，并且隨后使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器在600ml0.lwt%甲基纖維素的水溶液中將其乳化，以生成水包油包固體乳液。用5.4mlDCM部分飽和在乳化步驟中使用的甲基纖維素溶液，以最小化不希望的水對(duì)油液滴中DCM的萃取，并且避免在兩種聚合物能發(fā)生相分離前微球的過(guò)早硬化。在攪拌30min之后，通過(guò)使用蠕動(dòng)泵以l-7ml/min的速率加入另外不含有DCM的600ml0.lwt%甲基纖維素溶液，開(kāi)始可控的萃取DCM并且使聚合物液滴硬化。將混合物進(jìn)一步攪拌24h以確保完全萃取DCM。過(guò)濾得到的硬化微球，用水洗滌，并且冷凍干燥過(guò)夜。A2.1.放大100倍的程序[0145]1.在玻璃瓶中將12.5gPLLA(90kDa)溶解在100mlDCM中，玻璃瓶加蓋以防止揮發(fā)。2.在玻璃瓶中將12.5gPLGA(例如7kDa、24kDa)溶解在100mlDCM中，玻璃瓶加蓋以防止揮發(fā)。3.在PLGA溶液中加入多達(dá)IOg的藥物或蛋白質(zhì)，并且將其混合以形成油包固體懸浮液。4.將PLGA-藥物混合物加入至PLLA溶液，并且混合。5.使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器將上述溶液與600ml用5.4mlDCM飽和了的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%、lg/L磷酸鹽緩沖液(PBS))混合30min從而制得水包油包固體乳液。6.在連續(xù)攪拌的同時(shí)，使用蠕動(dòng)泵加入600ml不含DCM的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%、lg/LPBS)。7.以1500rpm離心4_5min,并且倒出甲基纖維素。8.用水洗滌和旋降(spindown)多次直到水澄清并且不再為紫色?？諝飧稍铽@得的微球。A2.2.放大到千克的程序[0146]1.在容器中將1.25kgPLLA(90kDa)溶解在101DCM中。2.在容器中將1.25kgPLGA(例如7kDa、24kDa)溶解在101DCM中。3.在PLGA溶液中加入多達(dá)Ikg的藥物或蛋白質(zhì)，并且混合以形成油包固體懸浮液。4.將PLGA-藥物混合物加入至PLLA溶液，并且混合。5.使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器將如上溶液與601用540mlDCM飽和了的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%Ug/LPBS)混合30min從而制得水包油包固體乳液。6.在連續(xù)攪拌的同時(shí)，使用蠕動(dòng)泵以lml/min加入另外的601不含DCM的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%Ug/LPBS)。7.以1500rpm離心4_5min,并且倒出甲基纖維素。8.用水洗滌和旋降多次直到水澄清并且不再為紫色?？諝飧稍铽@得的微球。A3.用于將微球遞送并保留在所需的植入位點(diǎn)的方法A3.1.在升溫下壓緊[0147]使微球經(jīng)受PLLA外殼的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(下限為45_50°C)，該微球不會(huì)熔化或損壞，并且可以重新機(jī)械分離。當(dāng)微球負(fù)載有不能耐受45°C以上的溫度的蛋白質(zhì)或藥物時(shí)，這樣行不通。[0148]通過(guò)使用加熱同時(shí)使用或不使用離心，將微球壓緊成圓柱狀或其他形狀的小球。典型地，將微球傾倒或離心加入模具中。隨后將裝滿的模具放入45-50°C的烘箱中24h。將微球保持在PLLA外殼的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度的下限可以使PLLA稍微軟化，從而允許微球相互之間輕微粘連。去掉磨具后，微球保持所需要的模具的形狀，但是通過(guò)施加合適的力或摩擦可以將其重新分離并且不遭破壞。A3.2.用于獲得高度壓緊的微球的程序[0149]1.在微球合成的最終洗滌和旋降步驟中，應(yīng)將微球旋降為分批的所需要的小球的量。例如，如果使用100g干燥的原料制備每個(gè)IOg的小球，離心前將樣品等分加入10個(gè)單獨(dú)的管中。2.將離心管頂部的溶液倒出，僅留下離心管底部的固體。3.直接將該管放入45-50°C的烘箱中24h。4.將獲得的微球高度壓緊，其將需要很大的力氣去分離得到單獨(dú)的微球。A3.3.用于獲得壓緊程度較小的微球的程序[0150]1.在微球合成的最終洗滌和旋降步驟中，應(yīng)將微球旋降為分批的所需要的小球的量。例如，如果使用100g干燥的原料制備每個(gè)IOg的小球，離心前將樣品等分加入10個(gè)單獨(dú)的管中。2.將離心管頂部的溶液倒出，僅留下離心管底部的固體。3.加入少量水，并且渦旋以使微球松散。4.將該管放入45-50°C的烘箱中24h。5.與A3.2部分中的相比，將所獲得的微球程度更小地壓緊，且更容易分離。A3.4.用于獲得微型片狀高度壓緊的微球的程序[0151]使用液壓機(jī)將微球壓緊，并且使微球小球的體積最小化。這有利于微球插入特定的植入部位，尤其是那些具有空間限制的部位(例如眼睛)。[0152]1.冷凍干燥之后，稱重微球以提供所需量的待遞送藥物。2.將微球轉(zhuǎn)移到具有所需尺寸的片劑模具沖床(tablediepunch)上。3.將含有微球的片劑模具沖床放置在液壓機(jī)上。4.使用液壓機(jī)施加合適的壓力以獲得高度壓緊的片劑。5.從模具沖床中取出片劑。A4.用于增加微球藥物負(fù)載容量的方法[0153]通過(guò)增加PLGA核中的藥物負(fù)載量，微球可以獲得更長(zhǎng)的持續(xù)釋放。A4.1.用于通過(guò)再利用藥物飽和的乳化溶液增加負(fù)載的程序[0154]在之前的微球制備步驟中得到的藥物飽和的乳化溶液的再利用允許在乳化液滴內(nèi)部和外部環(huán)境之間建立藥物量的平衡，從而減少了藥物在環(huán)境水溶液中的凈損失。[0155]1.使用機(jī)械渦旋，在玻璃瓶中將125mgPLLA(IOOkDa)溶解在ImlDCM中，玻璃瓶加蓋以防止揮發(fā)。2.使用機(jī)械渦旋，在玻璃瓶中將125mg?11^(71^&、12.91^&、241^&或其它分子量)溶解在ImlDCM中，玻璃瓶加蓋以防止揮發(fā)。3.將多達(dá)120mg藥物加入PLGA溶液中，并且混合形成油包固體懸浮液。4.將PLGA-藥物混合物加入PLLA溶液中，并且混合生成藥物-PLGA-PLLA懸浮液。5.在燒杯中加入200ml再利用的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%、lg/LPBS)，其中包含用于負(fù)載在微球上的相同藥物。用1.8mlDCM部分飽和該溶液。6.使用攪拌速度為250rpm的頂置式攪拌機(jī)，將步驟4中的藥物-PLGA-PLLA懸浮液加入步驟5中的表面活性劑溶液中生成水包油包固體乳液。7.30min后，持續(xù)以250rpm攪拌，使用蠕動(dòng)泵加入另外200ml再利用的甲基纖維素表面活性劑溶液(0.lwt%Ug/LPBS)，其中包含用于負(fù)載在微球上的相同藥物。這也控制了DCM溶劑萃取速率。8.攪拌6h至過(guò)夜從而完全萃取DCM。9.以2500-3000rpm離心5min，并且倒出表面活性劑溶液。硬微球集中在底部。該步驟將適當(dāng)形成的微球與過(guò)量的聚合物分離。10.用PBS洗滌微球3次并且在每次清洗后旋降。該步驟除去未被包封在微球上的過(guò)量藥物。A5.在載體(例如水凝膠、膜和支架)中包封微球[0156]微球懸浮在液體狀態(tài)下的水凝膠中，例如明膠-羥基苯基丙酸(HPA)、明膠-低聚(-)-表兒茶素-3-0-沒(méi)食子酸酯(OEGCG)、透明質(zhì)酸(HA)-酪胺和HA-OEGCG。隨后將它們注入所需要的植入位點(diǎn)，之后水凝膠通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)(例如針對(duì)HA-酪胺的由辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和過(guò)氧化氫催化的酶介導(dǎo)反應(yīng))固化。[0157]制備冷凍干燥或空氣干燥的包封藥物或蛋白質(zhì)的微球。1.制備水凝膠溶液例如明膠-HPA、明膠-OEGCG、HA-酪胺、HA-OEGCG。2.均勻地渦旋微球和水凝膠溶液。3.正好就在注入所需植入位點(diǎn)之前，將水凝膠與用于交聯(lián)的試劑(例如用于HA-酪胺體系的HRP和過(guò)氧化氫)混合。4.用<18g的針將混合溶液注入所需位點(diǎn)。或者，將溶液注入所需尺寸的模具，并且使其在植入前形成固定形狀(例如盤(pán)狀)。通過(guò)將微球懸浮液和聚合物或熟化之前的支架溶液混合，還可以將微球捕獲在多孔聚合物材料或支架中。使用核-殼聚合物微球的藥物遞送B1.將丁哌卡因遞送至山羊膝關(guān)節(jié)大于2周用于緩解外科手術(shù)術(shù)后疼痛[0158]第三方GLP認(rèn)證的公司(AginkoAG)實(shí)施該測(cè)試作為概念驗(yàn)證研究的一部分來(lái)判斷在膝關(guān)節(jié)手術(shù)后通過(guò)將治療水平鎮(zhèn)痛的丁哌卡因遞送至膝關(guān)節(jié)至少2周以緩解術(shù)后疼痛的可行性。[0159]在這項(xiàng)研究中，丁哌卡因負(fù)載在核-殼PLLA-PLGA微球上，該微球使用重量比為1:1的PLLA:PLGA(PLLA為IOOkDa,并且PLGA為24kDa)所合成。基于初期的體外釋放研究，PLLA和PLGA的結(jié)合使得丁哌卡因(30wt%負(fù)載)釋放時(shí)間超過(guò)14天(圖8)。[0160]為了體內(nèi)研究的目的，微球合成方案如下放大了100倍。使用水包油包固體乳液溶劑萃取技術(shù)合成負(fù)載蛋白質(zhì)的PLLA-PLGA核-殼微球。在典型的合成中，制備兩種單獨(dú)的溶液，分別是100mlDCM中含有12.5gPLLA的溶液和100mlDCM中含有12.5gPLGA的溶液。隨后在PLGA溶液中加入多達(dá)IOg丁哌卡因形成油包固體懸浮液。該懸浮液和PLLA溶液合并、混合，并且隨后使用攪拌速度為400rpm的機(jī)械攪拌器在600ml0.lwt%甲基纖維素的水溶液中將其乳化，以生成水包油包固體乳液。用5.4mlDCM部分飽和在乳化步驟中使用的甲基纖維素溶液以最小化不希望的水對(duì)油液滴中DCM的萃取，并且避免在兩種聚合物能發(fā)生相分離前微球的過(guò)早硬化。在攪拌30min之后，使用蠕動(dòng)泵以l-7ml/min的速率加入另外的不含有DCM的600ml0.lwt%甲基纖維素溶液，開(kāi)始可控的萃取DCM并且使聚合物液滴硬化。將混合物進(jìn)一步攪拌24h以確保完全萃取DCM。過(guò)濾所得到的硬化的微球，用水洗滌，并且冷凍干燥過(guò)夜。[0161]為了在移植過(guò)程中方便處理，通過(guò)將微球倒入模具并隨后將模具放入45_50°C的烘箱24h而將微球壓緊成盤(pán)狀。將微球保持在PLLA外殼的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度下限可以使PLLA稍微軟化，從而允許微球相互之間輕微粘連。去掉磨具后，微球保持所需要的模具的形狀，但是通過(guò)施加適度的力或摩擦可以將其重新分離并且不遭破壞。方便地將微球緊密物植入膝關(guān)節(jié)(圖9)。[0162]體內(nèi)研究表明治療水平的丁哌卡因在膝關(guān)節(jié)中保持超過(guò)2星期(圖10)。在這段時(shí)間里，血漿中的丁哌卡因水平很好地低于耐性限度，這證實(shí)局部藥物遞送是安全的。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)膝關(guān)節(jié)的組織切片表明沒(méi)有炎癥(圖11)。也沒(méi)有關(guān)于不良反應(yīng)或喪失活動(dòng)性的報(bào)生口O[0163]在圖11中觀察殘留的空PLLA殼。然而，由于PLLA為FDA批準(zhǔn)的常用于化妝品填料的材料，所以它的存在不會(huì)導(dǎo)致副作用。在實(shí)施人體實(shí)驗(yàn)之前，我們會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步研究以監(jiān)測(cè)動(dòng)物直至PLLA完全降解。由于PLLA和PLGA的相對(duì)降解速率的限制，使用降解更快的PLLA從而使得一旦藥物已經(jīng)完全釋放微球就完全降解并不可行(參見(jiàn)以下B3部分)。B2.將BT遞送至患有青光眼的兔子的眼睛以降低眼內(nèi)壓(IOP)[0164]BT是用于降低青光眼患者的IOP的藥物。它通常以滴眼液的形式每天給予2-3次。然而，在這種給藥方式中，大部分藥物損失于眼淚等中。該研究的目的為，通過(guò)包埋在載體中的微球更加有效并且以受控、持續(xù)的方式遞送BT，該載體被植入眼睛的結(jié)膜下(subconjunctiva)?？梢悦磕陮⑤d體替換2-3次。[0165]在該研究中，將BT負(fù)載到核-殼PLLA-PLGA微球內(nèi)，該微球使用重量比為1:1的PLLA:PLGA(PLLA為IOOkDa,并且PLGA為7kDa和24kDa)合成，從而得到釋放滯后時(shí)間不同的微球(圖12)。當(dāng)使用可獲得的分子量最低的PLGA(3.4kDa、Lactel)時(shí)，發(fā)現(xiàn)BT立即釋放，并且在第一天中大部分藥物都釋放了(圖13)。[0166]用于方便地植入誘導(dǎo)患有青光眼的兔子的眼結(jié)膜下，將一批次的PLGA為24kDa的核-殼PLLA-PLGA微球負(fù)載到明膠-HPV水凝膠載體上(圖14)。在植入后30天到50天IOP顯著下降，并且一直到第74天保持低于初始青光眼水平(圖15)。這說(shuō)明將BT藥物封裝在微球中并在體內(nèi)植入后沒(méi)有功能損失。[0167]通過(guò)合并包含不同分子量的PLGA的核-殼PLLA-PLGA微球，我們可以實(shí)現(xiàn)BT順序釋放，使得一旦之前批次的微球結(jié)束釋放BT每一新批次的微球就開(kāi)始釋放BT。這可以獲得長(zhǎng)期可持續(xù)釋放BT?？梢匀鏏3部分中所述壓緊合并的微球以減少植入體積。如A4部分中所述還可以增加藥物負(fù)載。B3.PLLA和PLGA的分子量和PLLA=PLGA的重量比[0168]在藥物釋放過(guò)程中，為了保持在核-殼PLLA-PLGA微球中的殼屏障，PLLA應(yīng)該降解得比PLGA慢很多。由于殼中富含PLLA，一旦PLGA降解，就會(huì)在殼中形成孔，使得藥物可以通過(guò)擴(kuò)散釋放。降解PLGA和PLLA所需的時(shí)間取決于其分子量。因此，可以將分子量較低的PLGA與分子量較低的PLLA結(jié)合而不會(huì)影響釋放特性，只要PLLA仍然降解得比PLGA慢很多。[0169]盡管在本操作中使用了IOOkDa的PLLA，仍然認(rèn)為可以使用分子量更高的PLLA(大于160kDa)，而不會(huì)影響微球的形成和釋放特性。可以使用分子量高于75kDa的PLGA來(lái)產(chǎn)生更長(zhǎng)的滯后時(shí)間。[0170]通常，改變PLLA=PLGA的重量比可以導(dǎo)致核-殼的轉(zhuǎn)化。例如，當(dāng)PLLA=PLGA的重量比為1:1(本實(shí)驗(yàn)中使用的配方)，獲得具有富含PLGA的核和富含PLLA的殼的微球。如果使用PLLA=PLGA的重量比為1:2或1:3，將發(fā)生相轉(zhuǎn)化而生成具有富含PLLA的核和富含PLGA的殼的微球。用于獲得具有富含PLGA的核和富含PLLA的殼的微球，最佳的PLLA:PLGA的重量比為1:1到1:1.25。[0171]相對(duì)于PLGA增加PLLA(例如PLLA:PLGA=2:1)，仍會(huì)獲得具有富含PLGA的核和富含PLLA的殼的微球。然而，這將會(huì)改變核的直徑與殼的厚度的比例，導(dǎo)致相較于核而言更厚的殼。因此，可行的PLLA=PLGA的重量比的范圍認(rèn)為是2:1到1:1.25。[0172]在一具體的實(shí)施方案中，本技術(shù)涉及用于制備微球的方法，該微球包含聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)和聚(L-乳酸)(PLLA)并且可以伴有延遲的特性釋放諸如藥物、蛋白質(zhì)和/或活性成分的物質(zhì)。該技術(shù)使得在物質(zhì)釋放之前有規(guī)定的滯后時(shí)間，因此通過(guò)合并具有不同滯后時(shí)間的多批次的微球，使得有可能長(zhǎng)期持續(xù)釋放。在當(dāng)一個(gè)具體批次的微球中的物質(zhì)已經(jīng)完全(或部分地)釋放的情況下，另一批次將會(huì)準(zhǔn)備開(kāi)始釋放其中包封的成分。也可以將微球并入諸如水凝膠、膜或支架的載體中，以便將其方便地植入所需的釋放位置。[0173]本發(fā)明的具體實(shí)施方案包括如下重要特征:Fl)具有如下規(guī)格的含有富含聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的核和富含聚(L-乳酸)(PLLA)的殼的核-殼納米復(fù)合微球:a)PLLA=PLGA的重量比在1:25到2:1之間`b)PLLA的分子量大于160kDac)PLGA的分子量在7kDa至24kDa之間或高于75kDaF2)受控釋放的組合物，其包含在諸如水凝膠、膜和支架的載體中的包封的PLLA/PLGA微球F3)抗青光眼藥物的受控遞送的方法，其包括對(duì)個(gè)體給予如F2中所述的受控釋放的組合物的步驟F4)骨科相關(guān)的治療方法，包括體內(nèi)植入PLLA/PLGA微球和/或如F2中所述的受控釋放的組合物的步驟[0174]以體外釋放為例，這表明丁哌卡因(30wt%負(fù)載)釋放大于14天。另外，使用聚合物比例為1:1(使用IOOkDaPLLA)的核-殼PLLA-PLGA微球的酒石酸溴莫尼定(brimoridine,BT)的釋放特性報(bào)告4天滯后時(shí)間(使用7kDaPLGA)以及25天滯后時(shí)間(使用24kDaPLGA)。合適的載體包括諸如明膠-ΗΡΑ、明膠-OEGCG的水凝膠、HA-酪胺和HA-OEGCG。[0175]使用環(huán)氧乙烷對(duì)用于體內(nèi)植入的微球壓緊物(MC)進(jìn)行消毒。術(shù)前山羊禁食12小時(shí)但可以自由飲水(以減少膨脹的危險(xiǎn))。[0176]頸靜脈導(dǎo)管，術(shù)前用藥和麻醉:在頸靜脈中放入永久性導(dǎo)管以便于在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中抽血。使用相同的導(dǎo)管給予術(shù)前用藥和麻醉。使用靜脈注射的0.3mg/kg咪達(dá)唑侖(速眠安(Dormicum),羅氏制藥(RochePharma)，雷納克(Reinach))和0.2mg/kg美沙酮(美沙酮特萊(MethadonStreuli),特萊制藥公司(StreuliPharmaAG),烏茲納赫(Uznach))進(jìn)行術(shù)前用藥。使用靜脈注射的3mg/kg氯胺酮(NarkanlOO;Dr.EGreubAG,Bern)和lmg/kg丙泊酹(丙泊酹1%費(fèi)森尤斯(Propofoll%Fresenius),費(fèi)森尤斯卡比(FreseniusKabi),施坦斯(Stans))的組合誘導(dǎo)麻醉。氣管插管后，用氧氣/空氣中的IMAC七氟醚(2.3%ET)維持麻醉狀態(tài)。通過(guò)平衡麻醉/鎮(zhèn)痛治療方案來(lái)保證術(shù)前鎮(zhèn)痛:美沙酮，氯胺酮。青霉素用于術(shù)前和術(shù)后的抗生素治療。[0177]手術(shù)部位準(zhǔn)備:如外科手術(shù)般地準(zhǔn)備手術(shù)部位(山羊的從跗骨到股骨的中部的左后肢):用獸醫(yī)理發(fā)推子AesculapFavoritaII220Volt(ProvetAG,瑞士)和其更換刀片l/20mm剪去毛發(fā),用聚維酮碘(Betadine?,巴斯夫，瑞士)液體肥阜和酒精對(duì)皮膚進(jìn)行清洗以及消毒。使用真空墊將動(dòng)物以背臥位-仰臥位放置在手術(shù)臺(tái)上，左后腿處于垂直位置且遠(yuǎn)端固定；脛骨滑車(chē)直立于股骨髁之上。手術(shù)部位蓋有無(wú)菌單。粘性U型簾粘合在切口周?chē)坏诙承院熡糜谏w在山羊的其余部位上。[0178]手術(shù)方法:用手術(shù)刀刀片內(nèi)側(cè)在髕旁的內(nèi)側(cè)皮膚上切開(kāi)一個(gè)七到九厘米長(zhǎng)的切口，從大收肌的插入點(diǎn)縱向到股骨內(nèi)側(cè)髁和/或髕韌帶的邊界，直至插入腓骨的第三肌肉的腱。該方法涉及所有解剖層(逐層地)。首先從皮膚，然后到腱膜，隨后到股肌內(nèi)側(cè)的股肌內(nèi)側(cè)斜肌部分，其覆蓋在膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)關(guān)節(jié)的第二層中的內(nèi)側(cè)-股骨韌帶的上方，之后關(guān)節(jié)囊的髕骨韌帶纖維，最終到達(dá)關(guān)節(jié)層。用剪刀近關(guān)節(jié)地拉長(zhǎng)髕骨肌腱的內(nèi)側(cè)以避免腿彎微動(dòng)脈的側(cè)枝局部更遠(yuǎn)。用0.9%NaCl使關(guān)節(jié)保持濕潤(rùn)。為了得到不可接受的病理(骨關(guān)節(jié)病，滑膜炎，異物)的證據(jù)對(duì)關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)液進(jìn)行檢測(cè)。[0179]測(cè)試物的植入:引入微球壓緊物(MC)之前，通過(guò)燒灼止血。在六只羊的膝關(guān)節(jié)內(nèi)植入標(biāo)準(zhǔn)劑量的負(fù)載有藥物的微球并且作為對(duì)照在另外六只動(dòng)物的膝關(guān)節(jié)內(nèi)植入空載微球。在髕骨間隙植入MC。用0.9%的氯化鈉溶液連續(xù)沖洗打開(kāi)的關(guān)節(jié)和軟組織表面。髕骨內(nèi)脂肪墊從股骨內(nèi)側(cè)髁縮回并拉直膝蓋，以縮短髕骨，從而避免軟組織對(duì)新備的傷口的無(wú)意接觸。[0180]傷口縫合:髕骨下脂肪墊從股骨內(nèi)側(cè)髁縮回并拉直膝蓋，以縮短髕骨，從而避免新植入MC與軟組織的無(wú)意接觸。通過(guò)全方位的移動(dòng)使腿循環(huán)。用ViCryl2-0縫合韌帶和皮下組織及關(guān)節(jié)囊，用普迪絲(PDS2-0)縫合亞皮膚層。用MonoCryl2-0縫合皮膚。最后，用Op-Site?噴霧汽化縫合線并且施加軟繃帶。[0181]術(shù)后護(hù)理:術(shù)后立即斷開(kāi)麻醉器與動(dòng)物的連接并且在完全重建吞咽反射后拔管。將動(dòng)物放回畜欄，在那里它只能保持站立的姿勢(shì)。在程序的最后，當(dāng)羊完全恢復(fù)后，通過(guò)肌肉注射鹽酸丁丙諾菲(Temgesic?、10yg/kg)給藥。每天兩次給藥抗生素(盤(pán)尼西林、IlocillinPS)五天。在余下的生存期中，山羊被關(guān)在一個(gè)農(nóng)場(chǎng)的環(huán)境中不限制其運(yùn)動(dòng)，直到尸體解剖。有資質(zhì)的獸醫(yī)針對(duì)任何嚴(yán)重畸形和過(guò)度不適體征為動(dòng)物做了常規(guī)檢查。術(shù)后14天和尸體解剖之前進(jìn)行了步態(tài)分析。[0182]本技術(shù)不限于遞送親水性/水溶性物質(zhì)，因?yàn)樗梢允沟梅撬苄?即不是親水性的)或最低限度可溶的藥物和活性成分被封裝并成功地遞送。例如，已遞送了諸如氯酚紅(CR)的染料，其不能很好地溶于水。使用本技術(shù)可以遞送的另一種藥物為抗纖維化藥物氟尿嘧啶(5-FU)，該藥物可溶于DMSO/DMF/甲醇但不溶于水。[0183]將CR包封入微球中的目的為確定當(dāng)在植入位點(diǎn)處受到摩擦?xí)r微球是否會(huì)破裂。在這種情況下，CR以固體形式被包封，其僅以最少量溶于水應(yīng)該不會(huì)通過(guò)擴(kuò)散穿過(guò)微球壁，僅當(dāng)微球壁破裂后被釋放。釋放后，CR與周?chē)h(huán)境反應(yīng)并在中性pH的體液中將顏色從黃色變到紫色。對(duì)于5-FU，其以液體狀也以粉末狀并入微球中。在兩種情況下的藥物釋放是可測(cè)量的。[0184]在藥物釋放過(guò)程中，為了保持在核-殼PLLA-PLGA微球中的殼屏障，PLLA應(yīng)該降解得比PLGA慢很多。由于殼中富含PLLA，一旦PLGA降解，就會(huì)在殼中形成孔，使得藥物可以通過(guò)擴(kuò)散釋放。降解PLGA和PLLA所需的時(shí)間取決于其分子量。因此，可以將分子量較低的PLGA與分子量較低的PLLA結(jié)合而不會(huì)影響釋放特性，只要PLLA降解得仍然比PLGA慢很多。[0185]圖16中顯示了第一聚合物降解后本發(fā)明的顆粒的顯微圖像。顆粒已被打破以暴露出其內(nèi)部結(jié)構(gòu)?？梢郧宄乜匆?jiàn)顆粒的核中有大洞而在其周?chē)臍ぶ杏锌?，它們都是顆粒中的第一聚合物降解產(chǎn)生的。【權(quán)利要求】1.包含多個(gè)微粒的物質(zhì)，所述微粒包括:包含第一聚合物的核，和包圍在所述核周?chē)⑶野龅谝痪酆衔锖偷诙酆衔锏臍ぃ龅诙酆衔锝到獾帽人龅谝痪酆衔锫?.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)，其中所述第二聚合物生物降解得比所述第一聚合物慢。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的物質(zhì)，其中所述第二聚合物為半晶質(zhì)的。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第二聚合物的分子量為大約IOOkDa或更大。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物的分子量為大約I至大約60kDa。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物的分子量大于大約75kDa07.根據(jù)權(quán)利要求1至6中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述微粒中所述第二聚合物與所述第一聚合物的重量比在大約1:1到大約2:1的范圍內(nèi)。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物的降解不產(chǎn)生有毒產(chǎn)物。9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且所述第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物在所述殼中以少于大約25wt%的量存在。11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物和第二聚合物至少部分不互溶，任選地基本上不互溶。12.權(quán)利要求11所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物形成多個(gè)穿過(guò)所述殼的連續(xù)通道。13.根據(jù)權(quán)利要求1至12中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述核包含可釋放材料。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料為顆粒狀的。15.根據(jù)權(quán)利要求13或14所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料吸附在所述核中的納米顆粒上或吸附在所述核中的納米顆粒中，或既吸附在所述核中的納米顆粒上又吸附在所述核中的納米顆粒中。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的物質(zhì)，其中所述納米顆粒為無(wú)機(jī)納米顆粒。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的物質(zhì)，其中所述納米顆粒包括磷灰石。18.根據(jù)權(quán)利要求14至17中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述第一聚合物和第二聚合物基本上不互溶并且所述第一聚合物形成多個(gè)穿過(guò)所述殼的連續(xù)通道，并且其中所述納米顆粒，如果存在，或所述可釋放材料的顆粒，如果存在，小于所述通道的直徑。19.根據(jù)權(quán)利要求13至18中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料為治療性物質(zhì)。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的物質(zhì)，其中所述治療性物質(zhì)為藥物。21.根據(jù)權(quán)利要求13至20中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料選自蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、酶、DNA、DNA片段、RNA、RNA片段、多糖、激素、生長(zhǎng)因子、非以上任一種的藥物和它們中的任何兩種或更多種的混合物。22.根據(jù)權(quán)利要求13至21中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料為親水性的。23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料可以分散在水中或溶解在水中。24.根據(jù)權(quán)利要求13至21中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述可釋放材料為疏水性的。25.根據(jù)權(quán)利要求1至24中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述微粒分散在載體中。26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的物質(zhì)，其中所述載體為水凝膠、膜或支架。27.根據(jù)權(quán)利要求1至26中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中所述微粒至少部分粘結(jié)在一起形成固體物質(zhì)。28.包含至少兩種不同物質(zhì)的組合物質(zhì)，每種所述物質(zhì)為根據(jù)權(quán)利要求1至27中的任一項(xiàng)所述的物質(zhì)，其中:每種所述物質(zhì)的微粒的核包含可釋放材料，并且所述不同物質(zhì)的所述微粒的殼為使得它們?cè)谙嗤瑮l件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解，從而在所述不同物質(zhì)的微粒中的所述可釋放材料能夠順序釋放。29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的組合物質(zhì)，其中至少兩種所述不同物質(zhì)的所述可釋放材料相同。30.根據(jù)權(quán)利要求28所述的組合物質(zhì)，其中每種所述不同物質(zhì)的所述可釋放材料與每種其他的不同物質(zhì)的所述可釋放材料不相同。31.根據(jù)權(quán)利要求28至30中的任一項(xiàng)所述的組合物質(zhì)，其中所述不同物質(zhì)的所述微粒的殼具有不同的厚度，使得它們?cè)谙嗤瑮l件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解。32.根據(jù)權(quán)利要求28至31中的任一項(xiàng)所述的組合物質(zhì)，其中所述不同物質(zhì)的所述微粒的第二聚合物的分子量不相同，以便所述不同物質(zhì)的殼在相同條件下經(jīng)過(guò)不同的時(shí)間降解。33.根據(jù)權(quán)利要求28至32中的任一項(xiàng)所述的組合物質(zhì)，其中每種所述不同物質(zhì)的所述微粒的第一聚合物相同并且每種所述不同物質(zhì)的所述微粒的第二聚合物相同。34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的組合物質(zhì)，其中所述第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且所述第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。35.用于制備包含多個(gè)微粒的物質(zhì)的方法，所述方法包括:將包含在第一溶劑中的第一聚合物的第一溶液與包含在第二溶劑中的第二聚合物的第二溶液合并，以形成混合的聚合物溶液，所述第二聚合物降解得比所述第一聚合物慢并且所述第一聚合物和第二聚合物至少部分不互溶，任選地基本不互溶，并且所述第一溶劑和第二溶劑相互混溶；將所述混合的聚合物溶液在水性介質(zhì)中乳化以形成乳液，所述水性介質(zhì)與所述第一溶劑和第二溶劑至少部分不互溶；隨后將所述乳液老化足夠的時(shí)間以允許在所述乳液的液滴中所述第一聚合物與所述第二聚合物至少部分分離，以形成包含所述第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野龅谝痪酆衔锖退龅诙酆衔锏臍ぃ灰约俺ニ龅谝蝗軇┖偷诙軇┮孕纬勺鳛樗詰腋∫旱乃鑫镔|(zhì)，其中每個(gè)所述微粒包括包含所述第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野龅谝痪酆衔锖退龅诙酆衔锏臍ぁ?6.根據(jù)權(quán)利要求35所述的方法，其中所述第一溶劑和第二溶劑相同。37.根據(jù)權(quán)利要求35或36所述的方法，其中所述水性介質(zhì)至少部分被所述第一溶劑和/或第二溶劑飽和。38.根據(jù)權(quán)利要求35至37中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述水性介質(zhì)包含乳化劑。39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其中所述乳化劑為甲基纖維素。40.根據(jù)權(quán)利要求35至39中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一溶液包含可釋放材料，借此所述微粒的核包含所述可釋放材料。41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述可釋放材料為顆粒狀的。42.根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的方法，其中所述可釋放材料吸附在納米顆粒上或吸附在納米顆粒中，或者既吸附在納米顆粒上又吸附在納米顆粒中。43.根據(jù)權(quán)利要求40至42中的任一項(xiàng)所述的方法，包括通過(guò)將前驅(qū)體溶液與所述可釋放材料合并而制備所述第一溶液的步驟，所述前驅(qū)體溶液包含在所述第一溶劑中的所述第一聚合物。44.根據(jù)權(quán)利要求40至43中的任一項(xiàng)所述的方法，其中可釋放材料與第一聚合物的重量比小于1:1。45.根據(jù)權(quán)利要求35至44中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二聚合物為半晶質(zhì)的。46.根據(jù)權(quán)利要求35至45中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二聚合物的分子量為大約IOOkDa或更大。`47.根據(jù)權(quán)利要求35至46中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一聚合物的分子量小于大約40kDa,任選地小于大約35kDa,任選地大約3kDa到大約40kDa,任選地大約3kDa到大約24kDa，任選地大約7kDa到大約24kDa。48.根據(jù)權(quán)利要求35至47中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一聚合物的分子量大于大約75kDa。49.根據(jù)權(quán)利要求35至48中的任一項(xiàng)所述的方法，其中在所述混合的聚合物溶液中所述第二聚合物與所述第一聚合物的重量比為使得所述方法形成包括包含所述第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)⑶野龅谝痪酆衔锖退龅诙酆衔锏臍さ奈⒘！?0.根據(jù)權(quán)利要求49所述的方法，其中在所述混合的聚合物溶液中所述第二聚合物與所述第一聚合物的重量比在大約1:1到大約2:1的范圍內(nèi)。51.根據(jù)權(quán)利要求35至50中的任一項(xiàng)所述的方法，包括以下步驟:選擇所述第一聚合物的分子量、所述第二聚合物的分子量和所述第一聚合物和第二聚合物的比例中的任何一種，使得可釋放材料，如果存在于所述微粒的核中，可以以所需的速率或在所需的延遲時(shí)段里從所述微粒中釋放。52.根據(jù)權(quán)利要求35至51中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一聚合物為其降解不產(chǎn)生有毒產(chǎn)物。53.根據(jù)權(quán)利要求35至52中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一聚合物為聚(D，L-乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)并且所述第二聚合物為聚(L-乳酸)(PLLA)。54.根據(jù)權(quán)利要求35至53中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述老化步驟在連續(xù)攪拌下進(jìn)行。55.根據(jù)權(quán)利要求35至54中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述溶劑萃取步驟與所述老化步驟至少部分同時(shí)進(jìn)行，借此所述老化和溶劑去除步驟有足夠的時(shí)間以允許在所述乳液的液滴中所述第一聚合物與所述第二聚合物至少部分地分離，以便形成包含所述第一聚合物的核和包圍在所述核周?chē)野龅谝痪酆衔锖退龅诙酆衔锏臍ぁ?6.根據(jù)權(quán)利要求35至55中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一溶劑和第二溶劑與所述水性液體部分混溶并且除去所述溶劑的步驟包括用所述水性液體稀釋作為水性懸浮液的所述顆粒狀物質(zhì)，所述水性液體中既不含有所述第一溶劑也不含有所述第二溶劑。57.根據(jù)權(quán)利要求35至56中的任一項(xiàng)所述的方法，包括從所述水性液體中分離所述顆粒狀物質(zhì)。58.根據(jù)權(quán)利要求57所述的方法，包括在模具中以足夠的溫度加熱所述分離出的顆粒狀物質(zhì)足夠的時(shí)間，使得所述微粒粘結(jié)在一起，以便由所述顆粒狀物質(zhì)形成小球。59.根據(jù)權(quán)利要求58所述的方法，其中所述足夠的溫度為所述第二聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度或者高于所述溫度。60.根據(jù)權(quán)利要求58或59所述的方法，其中所述第一溶液包含可釋放材料并且所述足夠的溫度低于所述可釋放材料在所述足夠的時(shí)間內(nèi)降解的溫度。61.用于向液體遞送材料的方法，所述方法包括在能降解所述第一聚合物的降解劑的存在下將根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)暴露于所述液體，所述物質(zhì)為其中所述微粒的核含有所述材料的物質(zhì)。62.權(quán)利要求61所述的方法，其中所述液體為所述降解劑或包含所述降解劑。63.根據(jù)權(quán)利要求61或62所述的方法，其用于非治療、非診斷的目的。64.根據(jù)權(quán)利要求61或62所述的方法，其中所述材料為治療性物質(zhì)并且所述液體為體液，因此所述方法用于將所述治療性物質(zhì)遞送給患者。65.根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述患者為非人類。66.根據(jù)權(quán)利要求61至66中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述物質(zhì)的微粒粘結(jié)在一起。67.根據(jù)權(quán)利要求13所述的物質(zhì)用于治療患者，任選地非人類患者中的疾病狀態(tài)的用途，其中所述可釋放材料被指明用于治療所述疾病狀態(tài)。68.根據(jù)權(quán)利要求67所述的用途，其中所述疾病狀態(tài)為疼痛并且所述可釋放材料為止痛劑。69.根據(jù)權(quán)利要求67所述的物質(zhì)的用途，其中所述疾病狀態(tài)為青光眼，其中所述可釋放材料被指明用于治療青光眼。70.根據(jù)權(quán)利要求69所述的用途，其中所述可釋放材料為酒石酸溴莫尼定。71.根據(jù)權(quán)利要求67所述的用途，其中所述可釋放材料為抗纖維化劑。72.根據(jù)權(quán)利要求71所述的用途，其中所述抗纖維化劑為氟尿嘧啶?！疚臋n編號(hào)】A61K9/54GK103703079SQ201280036962【公開(kāi)日】2014年4月2日申請(qǐng)日期:2012年6月8日優(yōu)先權(quán)日:2011年6月9日【發(fā)明者】J·Y·英,S·佩克,派馬克爾恩·皮塔克馬諾羅姆,西提·薩哈拉·穆哈默德申請(qǐng)人:新加坡科技研究局