專利名稱：降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物制藥技術領域，具體涉及一種可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑，具有無毒、無副作用、無殘留、易于腸道定植的特點，該制劑還可在常溫條件下保存12個月。
背景技術：
血清膽固醇水平偏高是世界上導致人類死亡率較高的心血管疾病的主要病因之一，通常傳統(tǒng)藥物治療作用單一、副作用較多，而通過減少或降低外源性膽固醇的攝入量則是目前調節(jié)機體膽固醇水平偏高所普遍采用的措施；微生態(tài)制劑在發(fā)揮調節(jié)腸道等諸多功 能的同時，可以達到單純降低膽固醇而不影響其他營養(yǎng)物質吸收的效果，因此已引起世界相關領域的高度重視。20世紀70年代，Mann和Spoerry先后通過對大量飲用酸乳等發(fā)酵乳制品的非洲Masai人血清膽固醇的研究、對常飲酸乳的美國人的調查，以及直接對酸乳的研究均發(fā)現(xiàn)乳酸菌具有降低人體血清膽固醇的作用。迄今，有大量實驗證實不同種類的乳酸菌具有降低膽固醇的效果。有關乳酸菌降膽固醇的研究主要集中于乳酸桿菌的不同種類，其中以雙歧桿菌的材料最為豐富，所選用的菌株類型也最多。國外對降膽固醇乳酸菌的研究較早。Gilliland(1977)對腸道乳桿菌的降膽固醇作用進行了研究，提出了乳酸菌在生長過程中通過降解膽鹽促進膽固醇的分解代謝，從而降低膽固醇含量的觀點。Gilliland(1985)和其它研究人員進一步指出，在厭氧條件和含有適量膽鹽的高膽固醇培養(yǎng)基中生長時，嗜酸乳桿菌菌體細胞可以吸收膽固醇而降低介質中膽固醇的含量。Rasic等證實了純培養(yǎng)條件下部分乳酸菌和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)對膽固醇的吸收作用。Lin等人給血清總膽固醇水平偏高的患者服用嗜酸乳桿菌和保加利亞乳桿菌制劑，8個月后發(fā)現(xiàn)被測人群血清膽固醇含量均顯著下降。國際上對有微生態(tài)制劑的基本要求之一是耐久存。一般含未經(jīng)基因工程改造活菌的微生態(tài)制劑放置于常溫條件下，平均壽命大約30天左右，而通過基因改造的活菌菌雖然穩(wěn)定性改善，但在應用安全方面存在很大爭議。目前國內外微生態(tài)制劑保存條件多為低溫保存，因此，微生態(tài)制劑的運輸、保存及使用均很不方便。為了提高微生態(tài)制劑的利用率，方便其運輸、保存及使用，人們正在積極探索提高微生態(tài)制劑耐常溫保存能力的方法。相關的現(xiàn)有技術包括CN1844352ACN1219583ACN101988039ACN1566329A這些現(xiàn)有技術均在保護劑上進行改進，保護劑組成復雜，其最終的效果不如人意，即使是在號稱能保存12個月的現(xiàn)有技術中也是需要在低溫下保存才能實現(xiàn)。
本發(fā)明利用長雙歧桿菌NQ-1501菌株具有的降低人體血清膽固醇的能力，并通過特殊工藝將其制成微生態(tài)制劑，該制劑可在常溫條件下保存12個月。
發(fā)明內容
本發(fā)明屬于生物制藥技術領域，具體涉及一種可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑，具有無毒、無副作用、無殘留、易于腸道定植的特點，該制劑還可在常溫條件下保存12個月。本發(fā)明使用的微生物學分析方法以證明長雙歧桿菌NQ-1501菌株具有極強的降低膽固醇的能力，然后可以使用傳統(tǒng)的菌粉生產工藝將長雙歧桿菌NQ-1501菌株制成菌粉，而后摸索制劑的工藝過程及制劑劑型，最后用于人體，用以降低人體血清中膽固醇含·量，并可達到常溫保存12個月的效果。為了方便公眾獲得，長雙歧桿菌NQ-1501菌株可以通過國內商業(yè)渠道從雙奇公司購買。本發(fā)明的一個目的是提供一種用于可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑的制備方法，該制劑可在常溫條件下保存12個月。具體步驟為將長雙歧桿菌NQ-1501菌株制成菌粉，并將菌粉與輔料淀粉按照1: 9的比例充分混合，制成片劑、膠囊及散劑。特別地，本發(fā)明也對長雙歧桿菌NQ-1501的菌粉的制備過程進行了優(yōu)化，優(yōu)選為長雙歧桿菌NQ-1501的最佳發(fā)酵時間為8h，發(fā)酵溫度為40°C，厭氧培養(yǎng)；將所得發(fā)酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到濕菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍干機中凍干，得到白色粉末狀菌粉；其中，長雙歧桿菌NQ-1501的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基1. 2%乳糖，O. 8%牛肉膏，O. 4%檸檬酸三胺，O. 4%乙酸鉀，O. 04%硫酸鎂，O. 05% L-半胱氨酸鹽酸鹽，O. 08% 吐溫-80。特別地，所述保護劑成分及添加比例優(yōu)選為在300ml體系中加入20ml 60%脫脂奶粉，5ml 5%淀粉。在本發(fā)明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照I 9的比例充分混合，用壓片機壓制成兩面扁平的片劑，平均片重O. 4g，片劑Ig重，活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2片，30日為I療程。在本發(fā)明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照I 9的比例充分混合，裝在以明膠為主要原料制成的圓筒狀膠殼中的膠囊中，膠囊體積為
O.48ml, I膠囊體積活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2粒，30日為I療程。在本發(fā)明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照I 9的比例充分混合，制成的粉末狀散劑，裝在鋁塑袋中，每袋lg，活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2g，30日為I療程。本發(fā)明的另一個目的是提供一種前述方法制備出來的可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑，該制劑可在常溫條件下保存12個月。本發(fā)明的另一個目的是提供了前述微生態(tài)制劑在制備降低人體血清膽固醇含量的藥物中的用途。本發(fā)明的另一個目的是提供了長雙歧桿菌NQ-1501在制備降低人體血清膽固醇含量的藥物中的用途。
本發(fā)明的優(yōu)點在于1、長雙歧桿菌NQ-1501菌株性能優(yōu)良，發(fā)酵用時短，凍干穩(wěn)定性較好，菌粉活菌數(shù)較多，且無毒、拮抗效果明顯，降低膽固醇效果明顯；2、采用了簡單的制劑工藝以及簡單的制劑原料，能使制劑達到常溫保存12個月的效果；3、制備方法實用性強、操作簡單、周期短、步驟簡便合理，具有成本低、產率高、適宜規(guī)模化生產等優(yōu)點。
圖1為本發(fā)明膽固醇標準曲線圖。
具體實施例方式以上概括的描述了本發(fā)明，可通過參照本文提供的某些具體實施例進一步理解本發(fā)明，這些實施例僅是為了說明而不是限制本發(fā)明。實施例1.長雙歧桿菌NQ-1501菌株菌粉的生產工藝選取雙奇公司的長雙歧桿菌NQ-1501菌株作為制劑的唯一菌株。長雙歧桿菌NQ-1501菌株的最佳發(fā)酵時間為8h，發(fā)酵溫度為40°C，厭氧培養(yǎng)；長雙歧桿菌NQ-1501菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基1. 2%乳糖，O. 8%牛肉膏，O. 4%檸檬酸三胺，O. 4%乙酸鉀，O. 04%硫酸鎂，O. 05% L-半胱氨酸鹽酸鹽，O. 08%吐溫-80。將所得發(fā)酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到濕菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍干機中凍干，得到白色粉末狀菌粉。保護劑成分及添加比例為名稱濃度(％ )添加量(/300ml)脫脂奶粉50%20ml淀粉5%5實施例2.可常溫保存的降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑的制作將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照1: 9的比例充分混合，制成片劑、膠囊及散劑。a、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照1: 9的比例充分混合，用壓片機壓制成兩面扁平的片劑，平均片重O. 4g，片劑Ig重，活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2片，30日為I療程。b、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照1: 9的比例充分混合，裝在以明膠為主要原料制成的圓筒狀膠殼中的膠囊中，膠囊體積為O. 48ml, I膠囊體積活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2粒，30日為I療程。C、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料淀粉，按照1: 9的比例充分混合，制成的粉末狀散劑，裝在鋁塑袋中，每袋lg，活菌數(shù)為200億左右，成年人的用量為I日2g，30日為I療程。實施例2、長雙歧桿菌NQ-1501菌株制劑常溫條件下保存穩(wěn)定性試驗結果表
權利要求
1.一種用于可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑的制備方法，包括將長雙歧桿菌NQ-1501菌株制成菌粉，并將菌粉與輔料淀粉按照1: 9的比例混合，制成制劑。
2.權利要求1所述的微生態(tài)制劑的制備方法，其中所述制劑形式為片劑、膠囊或散劑。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的微生態(tài)制劑的制備方法，其中長雙歧桿菌NQ-1501的菌粉的制備過程為長雙歧桿菌NQ-1501的發(fā)酵時間為8h，發(fā)酵溫度為40°C，厭氧培養(yǎng)；將所得發(fā)酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到濕菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍干機中凍干，得到白色粉末狀菌粉。
4.權利要求3所述的微生態(tài)制劑的制備方法，其中所述長雙歧桿菌NQ-1501的發(fā)酵 的培養(yǎng)基為1. 2%乳糖，O. 8%牛肉膏，O. 4%檸檬酸三胺，O. 4%乙酸鉀，O. 04%硫酸鎂，O. 05% L-半胱氨酸鹽酸鹽，O. 08%吐溫-80。
5.根據(jù)權利要求3或4所述的微生態(tài)制劑的制備方法，其中保護劑成分及添加比例為在300ml體系中加入20ml 50%脫脂奶粉，5ml 5%淀粉。
6.權利要求1-4所述的微生態(tài)制劑的制備方法制備的微生態(tài)制劑。
7.權利要求5所述的微生態(tài)制劑在制備降低人體血清膽固醇含量的藥物中的用途。
8.長雙歧桿菌NQ-1501在制備降低人體血清膽固醇含量的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于可以降低人體血清膽固醇含量的微生態(tài)制劑的制備方法，該制劑可在常溫條件下保存12個月。通過將長雙歧桿菌NQ-1501菌株制成菌粉，并將菌粉與輔料混合制成制劑。該制劑可以達到單純降低膽固醇而不影響其他營養(yǎng)物質吸收的效果，且克服了微生態(tài)制劑不能常溫保存的缺點。
文檔編號A61K35/74GK103006713SQ20121052859
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月11日 優(yōu)先權日2012年12月11日
發(fā)明者黃少磊, 劉彥民, 張春霞, 劉斌, 王春穎, 李康寧, 程超, 馮謙, 龔虹, 馬曉紅, 李曉軍, 李云旭, 韓志, 邰海歐 申請人:內蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司