專利名稱：白薇總皂苷的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體地說，是關(guān)于白薇總皂苷用于制備抗病毒藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
白薇為蘿蘑科鵝絨藤屬植物直立白薇(Cynanchum atratum Bunge.)、蔓生白薇(Cynanchum versicolor Bunge.)的根?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，白薇具有明顯的退熱、抗炎作用(中國中藥雜志，1995，20 (12) :751.)。單純皰疫病毒HSV (Herpes simplex virus)屬于皰疫病毒科a病毒亞科,根據(jù)抗原性的差別分為I型和2型(HSV-1和HSV-2)，可引起口唇性皰疹、皰疹性角膜炎、皰疹性皮膚炎、陰部皰疹、卡波西病等，有時也是腦膜炎、腦炎的病因，HSV-I常引起腰部以上感染，尤 其眼及口腔部位的感染，HSV-I也能引起生殖器皰疹(10%)，HSV-2是生殖器皰疹的主要病原體(90% )，可通過胎盤及產(chǎn)道感染新生兒，導(dǎo)致流產(chǎn)及新生兒死亡，與宮頸癌的發(fā)生也有關(guān)，危害較大。水皰性口炎病毒VSV(Vesicular stomatitis virus)為彈狀病毒科、水皰病毒屬的成員，為單股負(fù)鏈RNA病毒，可引起水皰性ロ炎等疾病。水皰性ロ炎是多種哺乳動物的一種急性高度接觸性傳染病。以馬、牛、豬等動物較易感，綿羊和山羊也可感染。人也偶有感染，引起流感樣癥狀，嚴(yán)重者可引起腦炎。本病被國際獸疫局(OIE)列為A類疾病，在我國水皰性口炎為外來動物病，國家進出境動物檢疫對象中將VSV列為ニ類疫病。流行性感冒病毒，簡稱流感病毒，是ー種造成人類及動物患流行性感冒的RNA病毒，在分類學(xué)上，流感病毒屬于正黏液病毒科，它會造成急性上呼吸道感染，并借由空氣迅速的傳播，在世界各地常會有周期性的大流行。流行性感冒病毒在免疫力較弱的老人或小孩及ー些免疫失調(diào)的病人會引起較嚴(yán)重的癥狀，如肺炎或是心肺衰竭等。人類流感病毒根據(jù)其核蛋白的抗原性可分為3類甲型流感病毒、こ型流感病毒和丙型流感病毒，其中WSN病毒屬于甲型流感病毒。MHV68是鼠Y皰疹病毒68，是研究Y皰疹病毒的ー個很有價值的動物模型，Y皰疹病毒與一些惡性腫瘤密切相關(guān)，如Burkitt’ s淋巴瘤、鼻咽癌、Hodgkin’ s病、器官移植后淋巴組織增生癥及AIDS相關(guān)B淋巴瘤。
發(fā)明內(nèi)容
本申請的發(fā)明人在長期研究白薇的醫(yī)藥用途的過程中發(fā)現(xiàn)，白薇總皂苷對于多種病毒具有明顯的抑制作用。因此，本發(fā)明的首要目的就在于提供ー種白薇總皂苷用于制備抗病毒藥物的應(yīng)用。本發(fā)明的第二個目的在于提供ー種以白薇總皂苷為活性成分的藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明，所述白薇總皂苷可用于制備抗病毒藥物。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施例，所述病毒包括單純皰疹病毒，水皰性口炎病毒，流感病毒，以及鼠Y皰疹病毒68。其中，所述單純皰疹病毒包括HSV-I型和HSV-2型病毒。本發(fā)明的抗病毒的藥物組合物以治療有效量的白薇總皂苷為活性成分。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物組合物還包括ー種或多種可藥用載體。優(yōu)選的，所述可藥用載體選自軟磷脂、硬脂酸鋁、氧化鋁、離子交換材料、自乳化藥物傳遞系統(tǒng)、吐溫或其他表面活化劑、血清蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基こ酸、山梨酸、水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫ニ鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鎂、以及飽和脂肪酸部分甘油酯混合物。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物組合物還可以包括ー種或多種藥物輔料。優(yōu)選的，所述藥物輔料選自粘合劑、填充劑、崩解劑、潤滑劑、吸收促進劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、賦形齊U、稀釋劑、以及潤濕劑。本發(fā)明開辟了一種全新的白薇的醫(yī)藥用途，有助于白薇的進ー步開發(fā)利用。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明的白薇總皂苷的制備方法及醫(yī)藥用途作進ー步詳細(xì)說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。發(fā)明人長期從事白薇的醫(yī)藥用途研究，在長期的研究中發(fā)現(xiàn)，白薇總皂苷對于多種病毒都具有明顯的抑制作用，因而可以用于制備抗病毒的藥物。這些病毒包括單純皰疹病毒(HSV-1型和HSV-2型)，水皰性口炎病毒(VSV)，流感病毒(WSN)，以及鼠Y皰疹病毒68(MHV68)。本發(fā)明的白薇總皂苷可以單獨使用或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物包括作為活性成分的本發(fā)明的白薇總皂苷及可藥用載體。其中，“治療有效量”是指能夠達到治療效果的提取物的量。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解“治療有效量”可以隨著給藥的方式、載體的使用以及可能和其他治療劑合用等而有所不同?！翱伤幱幂d體”不會破壞本發(fā)明的白薇總皂苷的藥學(xué)活性，同時其有效用量，即能發(fā)揮藥物載體作用時的用量對人體無毒。所述可藥用載體包括但不限于軟磷脂、硬脂酸鋁、氧化鋁、離子交換材料、自乳化藥物傳遞系統(tǒng)、吐溫或其他表面活化劑、血清蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基こ酸、山梨酸、水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫ニ鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鎂、飽和脂肪酸部分甘油酯混合物等。本發(fā)明的組合物還可以進ー步包括ー種或多種藥物輔料，常用的藥物輔料如粘合劑(如微晶纖維素)、填充劑(如淀粉、葡萄糖、無水乳糖和乳糖珠粒)、崩解劑(如交聯(lián)PVP、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素)、潤滑劑(如硬脂酸鎂)以及吸收促進劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、賦形劑、稀釋劑、潤濕劑等。以下實施例中所使用的白薇的產(chǎn)地為河南。以下實施例中所涉及的百分比(％)，除特別說明外，均為質(zhì)量百分比。實施例I、白薇總皂苷的制備取白薇藥材粗粉200g，加10倍量70%的こ醇回流提取3次，2h/次，過濾。合并濾液，濾液減壓濃縮至姆毫升相當(dāng)于O. 5g生藥,濃縮液離心(3000r/min, 15min)得上清液,再將上清液加入6倍量的大孔吸附樹脂(AB8、DlOl、HP20等)柱上，上樣流速為6BV/h，先以蒸餾水6個柱體積，再依次以6倍柱體積30%、90%こ醇梯度洗脫，收集洗脫液,加壓濃縮適量，然后減壓冷凍干燥至干，粉碎得細(xì)粉即是白薇總皂苷樣品。其中白薇總皂苷含量50%以上。白薇總阜苷，棕黃色粉末，Lieberman-Buchard反應(yīng)呈陽性。實施例2、白薇總皂苷對HSV-I病毒的抑制作用實驗材料細(xì)胞非洲綠猴腎細(xì)胞(VeiO)，購自中科院細(xì)胞庫。病韋HSV_1_GFP。 受試藥物白薇總皂苷(實施例I制備的樣品)，溶解于DMSO中，制備得60mg/mL 母液。實驗方法Vero細(xì)胞按常規(guī)方法培養(yǎng)，次日接種于96孔板，待細(xì)胞貼壁后，病毒感染細(xì)胞，3小時后，去除含病毒培養(yǎng)液，以一定濃度的白薇總阜苷處理細(xì)胞，22小時后突光顯微鏡下觀察GFP蛋白表達情況。實驗結(jié)果如以下表I所示表I、白薇總阜苷對HSV-I病毒的抑制
藥物劑量(ug/mL) 抑制率％ IC50 (ug/mL)
3100
I75
白薇總皂苷--0.389
0.350
0.1O
—阿昔洛韋__0.4__50__以上實驗表明，在非洲綠猴腎細(xì)胞中，白薇總皂苷對HSV-I具有相當(dāng)明顯的抑制作用，且白薇總皂苷對HSV-I的抑制呈劑量依賴關(guān)系。實施例3、白薇總皂苷對HSV-2病毒的抑制作用實驗材料細(xì)胞非洲綠猴腎細(xì)胞(VeiO)，購自中科院細(xì)胞庫。病毒單純皰疹病毒HSV-2型Sm333標(biāo)準(zhǔn)毒株，由北京中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所提供。受試藥物白薇總皂苷(實施例I制備的樣品)，溶解于DMSO中，制備得60mg/mL母液。實驗方法Vero細(xì)胞按常規(guī)方法培養(yǎng)，次日，接種于96孔板，單層培養(yǎng)24小時后，吸棄上清液、洗滌，加入病毒液，吸附2小時后，吸去病毒，加入不同濃度的藥液，培養(yǎng)72小時后觀察CPE (病變)，設(shè)細(xì)胞對照組、病毒對照組、陽性對照組、實驗藥物組，同時觀察細(xì)胞病變情況。實驗結(jié)果如以下表2所示表2、白薇總阜苷對HSV-2病毒的抑制
權(quán)利要求
1.白薇總皂苷的應(yīng)用，其特征在于，用于制備抗病毒藥物。
2.如權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于，所述病毒包括單純皰疹病毒，水皰性口炎病毒，流感病毒，以及鼠Y皰疫病毒68。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述單純皰疹病毒包括HSV-I型和HSV-2型病毒。
4.ー種抗病毒的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物以治療有效量的白薇總皂苷為活性成分。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，還包括ー種或多種可藥用載體。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述可藥用載體選自軟磷脂、硬脂酸鋁、氧化鋁、離子交換材料、自乳化藥物傳遞系統(tǒng)、吐溫或其他表面活化劑、血清蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基こ酸、山梨酸、水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫ニ鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鎂、以及飽和脂肪酸部分甘油酯混合物。
7.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，還包括ー種或多種藥物輔料。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物輔料選自粘合劑、填充劑、崩解劑、潤滑劑、吸收促進劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、賦形劑、稀釋劑、以及潤濕劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白薇總皂苷用于制備抗病毒藥物的應(yīng)用。此外還公開了一種藥物組合物，該組合物以治療有效量的白薇總皂苷為活性成分。本公開公開了一種白薇總皂苷的全新的醫(yī)藥用途，有助于白薇的進一步開發(fā)利用。
文檔編號A61P31/22GK102670684SQ20121010007
公開日2012年9月19日 申請日期2012年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月7日
發(fā)明者宗偉英, 王永兵, 王滔, 肖功勝, 魏晨 申請人:中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院湖州營養(yǎng)與健康產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新中心