專利名稱：一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效部位群的提取純化技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，該方法能有效提取出空心蓮子草中的總黃酮和總皂苷。
背景技術(shù)：
2S 胃〒胃[Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb]力 禾斗 (Amaranthaceae)蓮子草屬(Alternanthera)多年生宿根草本植物，曾收載于《中國藥典》 1977年版一部，具有清熱解毒、涼血利尿的功效。近20年的文獻(xiàn)報(bào)道，空心蓮子草具有抗病毒、調(diào)節(jié)免疫、抗肝損傷等作用，臨床上用于治療蕁麻疹、流行性感冒、乙型腦炎、流行性出血熱等病毒性疾患。蓮子草屬植物含有多種化學(xué)成分，迄今已從中分離鑒定的化學(xué)成分包括三萜類、黃酮類、生物堿、內(nèi)酰胺、有機(jī)酸類、植物留醇類、氨基酸和無機(jī)鹽等。本實(shí)驗(yàn)室近20多年對空心蓮子草的抗病毒研究表明，乙酸乙酯部位和正丁醇部位為主要活性部位。 因此，開發(fā)空心蓮子草有效部位群提取物具有重要意義。目前關(guān)于空心蓮子草的藥效物質(zhì)的提取純化方法僅收載于1977年版《中國藥典》，其方法為水提醇沉，并用醋酸鉛沉淀，再用硫化氫脫鉛。此方法工藝落后，質(zhì)量不可控， 并且非常容易引起鉛中毒，因此日后的藥典中并未將此制備工藝收錄其中。目前關(guān)于空心蓮子草的藥效物質(zhì)的提取純化方法尚未見報(bào)道，而國內(nèi)外有效抗病毒藥物較少，抗病毒藥物仍是國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)?？招纳徸硬莸淖匀毁Y源十分豐富，具有廣譜抗病毒作用，而且積累了一定臨床用藥經(jīng)驗(yàn)，因此其開發(fā)應(yīng)用前景廣闊。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)措施如下一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟如下a.[Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb] MM (H 空心蓮子草干燥后粉碎成段，長度約1cm)，每次按照其重量的6-10倍加入50-70ν/ν%乙醇先浸泡0. 5-2小時(shí)，再加熱回流提取1-3小時(shí)后過濾得乙醇提取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；b.將合并的乙醇提取液減壓回收乙醇，然后將剩余藥液用蒸餾水稀釋至以生藥量計(jì)濃度為0. 1-0. 2g/ml，靜置過濾后，得到濾液；c.濾液以每小時(shí)0.5-3倍柱床體積的流速通過徑高比為1 4-1 12的DlOl大孔吸附樹脂柱(樹脂重量藥材重量=1 0.4-1 0.6)，然后先用2-5倍樹脂質(zhì)量的水以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速進(jìn)行洗脫并棄去水洗液，再用2-4倍柱床體積的10-30v/
的乙醇以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速進(jìn)行洗脫并棄去醇洗液，最后再用2-6倍柱床體積的40-90ν/ν%的乙醇以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質(zhì)并收
3集此部分乙醇洗脫液；d.將步驟C收集的乙醇洗脫液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為 1. 01-1. 10，濃縮液經(jīng)噴霧干燥，即得到空心蓮子草有效部位群的提取物。上述提取方法的優(yōu)選條件為步驟a中，每次按照藥材重量的6-10倍加入60V/V%乙醇浸泡1小時(shí)，然后回流提取，提取次數(shù)為3次，第一次為2小時(shí)，第二次為1小時(shí)，第三次為1小時(shí)；步驟b中，將合并的乙醇提取液減壓回收，然后將剩余藥液稀釋至以生藥量計(jì)濃度為 0. 15g/ml ；步驟c中，首先將濾液以每小時(shí)2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 8的DlOl 大孔樹脂進(jìn)行吸附，然后用4. 5倍樹脂質(zhì)量的水以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質(zhì)并收集此部分乙醇洗脫液；步驟d中，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)口溫度為175°C，出風(fēng)口溫度為85°C，霧化盤轉(zhuǎn)速為20000轉(zhuǎn)/分鐘。利用本發(fā)明方法制備得到的提取物中總黃酮的含量可達(dá)3-5wt%，轉(zhuǎn)移率為 50-70% ；總皂苷的含量可達(dá)15-18wt%，轉(zhuǎn)移率為40-60%。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法具有以下優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明采用乙醇作為空心蓮子草的提取溶媒，提取液用DlOl大孔吸附樹脂純化得到總黃酮和總皂苷提取物，工藝流程簡單，有效物質(zhì)含量較高，生產(chǎn)成本低，節(jié)約了能源，控制了環(huán)境污染，減少了生產(chǎn)中的安全隱患，符合中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的要求。2.本發(fā)明采用DlOl大孔吸附樹脂技術(shù)提取純化有效部位群，具有工藝簡單，成本低的優(yōu)點(diǎn)，樹脂可反復(fù)使用，適合工業(yè)生產(chǎn)的特點(diǎn)。與77年版《中國藥典》的鉛鹽沉淀法相比，用藥更安全，質(zhì)量更可控。而且本發(fā)明方法中的相關(guān)技術(shù)參數(shù)進(jìn)行了細(xì)致周密的考察， 優(yōu)選出最佳條件，并進(jìn)行了中試驗(yàn)證，證明可過渡到產(chǎn)業(yè)化，提高了有效物質(zhì)的純度。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例對本發(fā)明方法做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。實(shí)施例1一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，步驟如下a、稱取空心蓮子草藥材，按照其重量的6-10倍加入濃度為60v/v%的乙醇先浸泡 Ih,然后回流提取，共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；第一次提取時(shí)60V/V%的乙醇加入量為藥材重量的10倍，第二次為藥材重量的8 倍，第三次為藥材重量的6倍；第一次回流提取的時(shí)間為2小時(shí)，第二和第三次回流提取的時(shí)間均為1小時(shí)。b、將乙醇提取液減壓回收乙醇，剩余的藥液稀釋至以生藥量計(jì)濃度為0. 15g/ml, 靜置后過濾，得到濾液；C、濾液首先以每小時(shí)2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 8的DlOl大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附(樹脂重量藥材重量=1 0. 5)，先用4. 5倍樹脂質(zhì)量的水以每小時(shí)2倍柱床體積的流速進(jìn)行洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時(shí)2 倍柱體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后再用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質(zhì)并收集此部分乙醇洗脫液；d、將步驟c收集的乙醇洗脫液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，藥液濃縮至相對密度為 1. 05，濃縮液經(jīng)噴霧干燥，得到空心蓮子草有效部位群提取物；噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)口溫度為175°C，出風(fēng)口溫度為85°C，霧化盤轉(zhuǎn)速為20000
轉(zhuǎn)/分鐘。得到的提取物中總黃酮的含量達(dá)5wt%，轉(zhuǎn)移率為65% ；總皂苷的含量達(dá)17wt%， 轉(zhuǎn)移率為57%。實(shí)施例2中試放大試驗(yàn)一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，步驟如下a、稱取12Kg空心蓮子草藥材，每次加6-10倍藥材重量的60V/V%乙醇先浸泡1小時(shí)后，再加熱回流提取，一共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；第一次提取時(shí)60V/V%乙醇加入量為藥材重量的10倍，第二次為藥材重量的8倍， 第三次為藥材重量的6倍；第一次回流提取的時(shí)間為2小時(shí)，第二和第三次回流提取的時(shí)間均為1小時(shí)；b、將乙醇提取液減壓回收乙醇，剩余藥液稀釋至體積為80L(以生藥量計(jì)濃度為 0. 15g/ml)，抽濾得上樣藥液；C、將MKg藥用級DlOl型大孔吸附樹脂用適量乙醇浸泡，濕法裝柱，處理后備用。 以2Bv/h的加樣流速進(jìn)行吸附，樹脂床徑高比為1 8，吸附完畢后，用4. 5倍樹脂質(zhì)量的蒸餾水以2Bv/h的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積20v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積流速進(jìn)行洗脫并棄去醇洗液，最后再用4倍樹脂柱體積的70v/v%乙醇以2Bv/h的流速進(jìn)行洗脫，收集此部分乙醇洗脫液；d、將步驟c收集的乙醇洗脫液減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為1. 05，然后將濃縮液噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)口溫度為175°C，出風(fēng)口溫度為85°C，霧化盤轉(zhuǎn)速為20000轉(zhuǎn)/分鐘)，得到空心蓮子草有效部位群提取物。采用紫外-可見分光光度法測量提取物中有關(guān)物質(zhì)的含量，計(jì)算轉(zhuǎn)移率(轉(zhuǎn)移率 =提取物中的含量/原藥材中的含量X100% )和收膏率(收膏率=提取物總重量/原藥材總重量X 100% )o采用上述方法，取12Kg空心蓮子草藥材，共3批，進(jìn)行空心蓮子草有效部位群提取純化中試放大試驗(yàn)，結(jié)果見下表。中試試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟如下a.稱取空心蓮子草藥材，每次按照其重量的6-10倍加入50-70v/v%乙醇先浸泡0.5-2 小時(shí)，再加熱回流提取1-3小時(shí)后過濾得乙醇提取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；b.將合并的乙醇提取液減壓回收乙醇，然后將剩余藥液用蒸餾水稀釋至以生藥量計(jì)濃度為0. 1-0. 2g/ml，靜置過濾后，得到濾液；c.濾液以每小時(shí)0.5-3倍柱床體積的流速通過徑高比為1 :4-1 12的DlOl大孔吸附樹脂柱，然后先用2-5倍樹脂質(zhì)量的水以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速進(jìn)行洗脫并棄去水洗液，再用2-4倍柱床體積的10-30V/V%的乙醇以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速進(jìn)行洗脫并棄去醇洗液，最后用2-6倍柱床體積的40-90V/V%的乙醇以每小時(shí)0. 5-3倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質(zhì)并收集此部分乙醇洗脫液；所述DlOl大孔吸附樹脂柱中樹脂重量藥材重量=1 0. 4-1:0. 6 ；d.將步驟c收集的乙醇洗脫液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為 1. 01-1. 10，濃縮液經(jīng)噴霧干燥，即得到空心蓮子草有效部位群的提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟d中，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)口溫度為175°C，出風(fēng)口溫度為85°C，霧化盤轉(zhuǎn)速為20000轉(zhuǎn)/分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟a中，每次按照藥材重量的6-10倍加入60v/v%乙醇先浸泡1小時(shí)，然后加熱回流提取，提取次數(shù)為3次，第一次為2小時(shí)，第二次為1小時(shí)，第三次為1小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟b中，將合并的乙醇提取液減壓回收，然后將剩余藥液稀釋至以生藥量計(jì)濃度為0. 15g/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟c中，首先將濾液以每小時(shí)2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 :8的DlOl大孔樹脂進(jìn)行吸附，然后用4. 5倍樹脂質(zhì)量的水以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時(shí)2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質(zhì)并收集此部分乙醇洗脫液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟為1、取空心蓮子草藥材用乙醇回流提取；2、將醇提液減壓回收，并將藥液稀釋后過濾；3、濾液通過D101大孔吸附樹脂柱吸附并用蒸餾水和不同濃度的乙醇洗脫；4、將洗脫液減壓回收，濃縮至相對密度1.01-1.10，干燥即得。本發(fā)明得到空心蓮子草有效部位群提取物產(chǎn)品中總黃酮含量可達(dá)3-5wt%，轉(zhuǎn)移率為50-70%；總皂苷含量可達(dá)15-18wt%，轉(zhuǎn)移率為40-60%。本發(fā)明所得有效部位群提取物的制備工藝國內(nèi)外未見相關(guān)資料報(bào)道。其提取純化工藝簡單，有效物質(zhì)含量較高，降低了生產(chǎn)成本，節(jié)約了能源，減少了生產(chǎn)中的安全隱患，符合中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的要求。
文檔編號A61P31/12GK102274254SQ201110222188
公開日2011年12月14日 申請日期2011年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月4日
發(fā)明者劉國慶, 劉焱文, 葉曉川, 張衛(wèi)元, 張周菊, 李森, 陳樹和 申請人:武漢回盛生物科技有限公司