專利名稱：乳香部分的治療應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及乳香以及其中所發(fā)現(xiàn)的化合物包括聚合月桂烯的治療應(yīng)用。更具體地，本發(fā)明涉及用包含聚合月桂烯的組合物治療神經(jīng)功能缺損的方法。
背景技術(shù)：
對得自植物和植物產(chǎn)品、用于多種治療應(yīng)用的新藥物實(shí)體的追尋來源于古代并持續(xù)至今。一種這樣的來源是乳香(mastic)，也被稱為乳香(gum mastic)或乳香(mastic gum)，其是作為漆樹科(Anacardiaceae)成員洋乳香樹(Pistacia lentiscus L)的滲出物獲得的樹脂。乳香在古地中海世界被用于胃腸功能紊亂，如胃痛、消化不良和消化性潰瘍。已公開向患有十二指腸潰瘍的人類患者和患有誘發(fā)性胃潰瘍和十二指腸潰瘍的實(shí)驗(yàn)大鼠口服給予乳香具有治療作用(Al-Habbal等(1984)Clin Exp Pharmacop Physio 11(5) :541-4 ;Said 等(1986) J Ethnopharmacol 15(3) :271-8)。雖然已公開乳香對幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)——引起消化性潰瘍病的病原體——具有體外殺菌作用 (Marone等(2001) J Chemother 13 :611-614)，但其他報(bào)道公開了乳香在被給予幽門螺旋桿菌(H. pylori)陽性人類患者(Bebb 等(2003) J Antimicrob Chemother 52:522-23)或給予實(shí)驗(yàn)感染小鼠(Loughlin 等(2003) J Antimicrob Chemother 51 :367-371)時不發(fā)揮抗細(xì)菌活性。希臘專利號GR 1，003，541 公開了提取自 Pistacia lentiscus var Chia 的葉、枝和果實(shí)的Chios乳香油的抗微生物和抗真菌作用。希臘專利號GR 1，003，868公開了得自 Pistacia lentiscus var. Chia的產(chǎn)物作為抗氧化劑、作為傷口愈合誘導(dǎo)劑和作為細(xì)胞生長抑制劑的應(yīng)用。美國專利申請公開號2005/0238740公開了提取自乳香樹脂的某些組分呈抗微生物和抗細(xì)胞增殖活性。根據(jù)該公開，第一提取物(被稱為“總組分”或“全部提取物”)包含除聚合物樹脂外的乳香的所有化合物；第二提取物是包含總組分所有三萜酸的酸性組分，第三提取物是包含總組分所有其他萜烯的中性組分。還公開了通過蒸餾得到的精油，其包含單萜，包括月桂烯。該申請公開了藥物制劑，其包含任選地與精油組合的上述總組分、 酸性組分或中性組分中的任意組分或其合成的等同物，或包含分離的成分產(chǎn)物或其合成的等同物；及其在用于治療微生物感染的方法中的應(yīng)用，該微生物感染包括幽門螺旋桿菌、丙酸桿菌(Propionibacterium)、葡萄球菌(Staphlococcus)、假單胞菌(Pseudomonas)禾口細(xì)胞過度增殖。被上述專利申請的發(fā)明人中的一些授權(quán)的？31^8(^08等Q007)公開了不含聚合物(TMEWP)的總?cè)橄闾崛∥锏闹苽?，其通過對粗乳香進(jìn)行極性溶劑萃取并從其中去除不溶性聚合物聚-β -月桂烯以及從TMEWP分離酸性和中性組分而制備(Paraschos等Q007) Antimicrob Agents Chemother 51 (2) :551-559)。根據(jù)該公開，向幽門螺旋桿菌感染的小鼠給予TMEWP 3個月時間造成細(xì)菌定殖30倍減少，很大程度上歸因于從酸性組分純化的特定化合物。作者指出，由于推測在前研究所用的粗乳香制品中高百分比的聚-月桂烯阻礙在口服給藥過程中潛在的體內(nèi)活性，因此制備了 TMEWP。作者進(jìn)一步公開，聚-β -月桂烯的去除造成具有抗幽門螺旋桿菌活性的治療部分增強(qiáng)。
EP專利申請?zhí)?520585公開了得自黃連木屬(Pistacia)植物的產(chǎn)物對于生產(chǎn)治療或預(yù)防癌癥的藥物的應(yīng)用。根據(jù)該公開，從不同黃連木屬物種的葉、枝、果實(shí)、堅(jiān)果和花蒸餾出的精油包含不同比例的大量單體萜烯化合物，特別是月桂烯。該申請還公開了油對某些腫瘤細(xì)胞系如結(jié)腸和卵巢腺癌具有活性，以及乙酸龍腦酯是唯一一個被發(fā)現(xiàn)具有抗癌活性的成分。國際專利申請公開號WO 2005/112967公開了從乳香提純具有抗增殖作用的抗癌物質(zhì)，該抗癌物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)于可溶性組分中，該可溶性組分通過如下得到將乳香懸浮在溶劑中，該溶劑選自非酸性脂肪烴、包含至少25%水溶性非酸性脂肪烴的水溶液或其組合；和去除不溶性組分。該申請還公開了治療癌癥細(xì)胞的方法，包括給予藥學(xué)有效量的乳香樹脂組分，該組分抑制癌癥細(xì)胞的生長。根據(jù)該公開，抗癌化合物對于多種癌癥細(xì)胞包括人類結(jié)腸癌癥細(xì)胞均有效。Van der Berg等(1998)公開了利用萃取和尺寸排阻層析分離和純化乳香的聚合物組分(Van der Berg 等(IggS)iTetrahedron Lett 3 :2645-2648) 根據(jù)該公開，該聚合物具有寬的分子量分布，即20，000至100，OOODa,由136Da的單體單元組成，并且具有1， 4-聚-β-月桂烯的結(jié)構(gòu)，其順式與反式構(gòu)型的比例為3 1。作者認(rèn)為，其公開是天然存在的單萜聚合物的首次報(bào)道。Barra等Q007)公開了從洋乳香樹(P. Ientiscus L.)對精油的萃取和氣相色譜分析(Barra 等(2007) J Agric Food Chem 55(17) :7093-7098)。根據(jù)該公開，確定了共 45種化合物，包括β-月桂烯作為其中一種主要化合物。Marner等(1991)公開了從乳香黃連木(P. Ientiscus)的乳香中確定多種三萜類(Marner等(1991) Phytochemistry，30， 3709-3712)。美國專利號5，506，406公開了乳香油，其通過將乳香溶于油或脂肪產(chǎn)生，并被裝入軟膠囊，該軟膠囊任選地進(jìn)一步包含兩親性物質(zhì)，如幾丁質(zhì)或殼聚糖。根據(jù)該公開，該膠囊有效消除和抑制幽門螺旋桿菌以及減少糞便的氣味。美國專利號5，637，290公開了口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，其包括牙膏和選自以下的成分的組合天然乳香、提取的乳香油和合成的乳香油劑。還公開了將乳香引入防曬霜、護(hù)發(fā)產(chǎn)品和化妝品的應(yīng)用。美國專利號6，623，728公開了美容護(hù)膚乳液組合物，其包含約0. OOlwt %至約 10wt%的溶解乳香；揮發(fā)性水混溶性溶劑；和美容上可接受的載體。根據(jù)該公開，該乳液優(yōu)選為水包油乳液，并且優(yōu)選的溶劑包括乙醇、甲醇、丙醇、異丙醇及其混合物。根據(jù)該公開， 使用同種溶劑得到溶解的乳香。美國專利號6，811，769公開了口服組合物，其包含乳香的油提取物，如用橄欖油或棕櫚油制備的油提取物；和消炎劑，如甘草酸。根據(jù)該公開，該組合物對牙周病相關(guān)細(xì)菌和對齲齒相關(guān)細(xì)菌具有抗細(xì)菌作用。美國專利號7，四4，651公開了類異戊二烯化合物——特別是萜烯化合物——對于抑制革蘭氏陽性細(xì)菌胞外蛋白質(zhì)——如金黃色葡萄球菌(S. aureus)產(chǎn)生的毒性休克綜合征毒素(Toxic Shock Syndrome Toxin)-1——生成的應(yīng)用。根據(jù)該公開，適當(dāng)?shù)妮葡┛梢允黔h(huán)狀的或無環(huán)的、飽和或不飽和的，并且除其他外還包括聚萜烯。還公開了這種化合物對于制備可被摻入水溶液的組合物如陰道清潔制劑的應(yīng)用。
美國專利號4，564，718公開了功能終止聚合物的制備——該功能終止聚合物被稱為“液體橡膠”，具有基本低于室溫的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度——其通過如下制備具有可用于聚合的雙鍵或共軛雙鍵的萜烯或其氧衍生物與提供所需功能終止的引發(fā)劑聚合。根據(jù)該公開，該聚合物優(yōu)選具有500至20，000的分子量，并且用于其制備的優(yōu)選無環(huán)單萜為β -月桂烯及其他。該專利公開了分子量約2000和約4000的聚合月桂烯的制備。該專利進(jìn)一步公開了該發(fā)明的聚合物可與其他試劑進(jìn)一步反應(yīng)，提供彈性劑、密封劑或粘合劑，或其可用作橡膠增韌劑。進(jìn)一步公開了從月桂烯制備羥基封端的聚月桂烯，及其對于制備聚氨酯彈性劑的應(yīng)用。Newmark 等 J. Polymer Sci 26,71-77(1988)公開了具有觀測分子量 87，000 和計(jì)算分子量46，000的聚月桂烯的合成。美國專利號4，374，957公開了粘性熱塑性彈性線性三嵌段聚合物，其相應(yīng)于式 A-B-A，其中A是單乙烯基芳烴的非彈性線性均聚物嵌段，其平均分子量在10，000和60，000 之間，且玻璃化轉(zhuǎn)變溫度在70°C以上，其中B是月桂烯的彈性均聚嵌段，其平均分子量在 50，000和200，000之間，且玻璃化轉(zhuǎn)變溫度在約_40°C以下。美國專利號5，759，569公開了可生物降解可堆肥的制品，其至少部分包含某些反式聚合物，其中該聚合物具有至少約20，000的重均分子量，并且通過聚合單體成分制成， 該單體成分包括(1)約70至100摩爾％的1，3_ 二烯，特別是β-月桂烯；和( 高達(dá)約 30摩爾％的其他相容的共聚單體。根據(jù)該公開，該制品除其他外包括包裝材料；一次性吸收劑制品(例如，尿布、衛(wèi)生棉)；服裝制品，如防護(hù)衣、手術(shù)簾、手術(shù)衣、手術(shù)單；機(jī)織、編織和非機(jī)織織物；手術(shù)海綿、棉球涂藥器、一次性注射器和容器。美國專利號7，232，872和7，214，750公開了聚合方法，包括使一種或多種單體——特別是月桂烯、一種或多種路易斯酸、一種或多種引發(fā)劑和含有一種或多種氫氟碳的稀釋劑在反應(yīng)器中接觸。美國專利申請公開號2007/0179260和美國專利號7，417，103公開了高方向規(guī)整度(regioregularity)的基于3，4_異戊二烯的聚合物及其制備方法。根據(jù)這些公開，該聚合物的數(shù)均分子量為5000至6，000，000，并且該聚合物也可包含1，4-異戊二烯如月桂烯單元。根據(jù)該公開，該聚合物由于其機(jī)械耐久性和熱耐久性適用作塑料材料。現(xiàn)有技術(shù)未公開乳香或其組分對于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的應(yīng)用?，F(xiàn)有技術(shù)未教導(dǎo)或暗示任何分離的乳香組分在用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的組合物中的應(yīng)用。現(xiàn)有技術(shù)也未教導(dǎo)或暗示無論得自乳香或化學(xué)合成的分離的聚合月桂烯組分有利地用作藥物組合物或治療應(yīng)用中的活性成分。發(fā)明概述本發(fā)明提供了具有神經(jīng)保護(hù)性和神經(jīng)再生性的組合物和用其治療一系列神經(jīng)系統(tǒng)疾病和病癥的方法。更具體地，現(xiàn)公開包含提取自乳香的分離組分(餾分，fraction)的組合物具有神經(jīng)保護(hù)活性，并可用于促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞類型及其他細(xì)胞類型的分化和成熟。本發(fā)明部分基于如下意外的發(fā)現(xiàn)乳香的分離組分呈神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)再生生物活性，其可用于多種治療用途。更具體地，包含這種分離組分的組合物具有誘導(dǎo)多種細(xì)胞型——包括神經(jīng)元細(xì)胞類型——細(xì)胞分化的活性。已在多種細(xì)胞系中觀測到分化誘導(dǎo)活性，包括來自外胚層、中胚層和內(nèi)胚層譜系的多種細(xì)胞類型。
可用本領(lǐng)域已知的乳香分離組分和提取物中的任一種實(shí)踐本發(fā)明所述的新方法和治療。但是，本發(fā)明進(jìn)一步公開，一些包含較高分子量乳香成分的選定組分尤其有益于在本發(fā)明所述組合物和方法中的應(yīng)用。已知乳香提取物包含聚合形式的單萜化合物，其被稱為月桂烯。由此進(jìn)一步首次公開的是，包含聚合月桂烯的乳香分離組分可用作治療神經(jīng)退行性疾病的藥物組合物的活性成分。適于用本發(fā)明的組合物治療的疾病包括不同類型的癡呆，包括但不限于阿爾茨海默病、中風(fēng)和帕金森病。同樣首次公開的是，聚合月桂烯的分離組分，無論得自植物來源或化學(xué)合成，均可用作治療神經(jīng)退行性疾病和治療組織損傷的藥物組合物的活性成分。本發(fā)明的教導(dǎo)已經(jīng)由包含聚合月桂烯的乳香分離組分和由化學(xué)合成的聚合月桂烯——相應(yīng)于從乳香分離的聚合物——示例。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)尤其令人驚訝并且意外，現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)公開了已去除聚合月桂烯的乳香提取物組分對于不同治療適應(yīng)癥的應(yīng)用。此外，現(xiàn)有技術(shù)認(rèn)為，得自乳香的聚合組分在治療上不可用，以及聚合月桂烯在治療組合物中的存在實(shí)際上抑制活性化合物有益的生物活性和生物利用度。因此，現(xiàn)有技術(shù)將乳香的治療活性歸因于多種低分子量萜烯型分子，特別是單體月桂烯和小低聚形式的月桂烯。但是，本發(fā)明的發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)，與現(xiàn)有技術(shù)的教導(dǎo)相反，即乳香提取物中存在的某些低分子量萜烯實(shí)際上妨礙和阻滯了本文公開的組分和組合物誘導(dǎo)細(xì)胞分化的活性。由此公開的是，本文公開的組分和組合物的新生物活性由于多種萜烯的某些單體和小低聚形式的存在而受到抑制。不希望受任何具體理論或作用機(jī)制束縛，如本文公開的包含聚合月桂烯的組合物誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞分化的活性使本發(fā)明可用于改善(再形成)神經(jīng)元間的連接和克服在受與突觸形成不足有關(guān)的病理影響的腦和神經(jīng)組織中有缺陷的神經(jīng)元間連通。該病理引起多種神經(jīng)系統(tǒng)病理，包括例如阿爾茨海默病。進(jìn)一步，本發(fā)明可用于逆轉(zhuǎn)作用于神經(jīng)系統(tǒng)的多種藥物如麻醉劑的不利影響。本發(fā)明進(jìn)一步可用于大量細(xì)胞和組織的復(fù)壯。如本文所用，“聚合月桂烯”包括聚合度至少為6的月桂烯聚合形式。聚合月桂烯無限制地包括，聚合β-月桂烯(聚月桂烯)、聚合α-月桂烯(聚-α-月桂烯)、其均聚物和包含月桂烯亞單元的雜聚物(也被稱為共聚物)。同樣包括聚合月桂烯化合物的幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體。如本文所用，β -月桂烯指7-甲基-3-亞甲基-1，6-辛二烯，α -月桂烯指結(jié)構(gòu)異構(gòu)體2-甲基-6-亞甲基-1，7-辛二烯。根據(jù)第一方面，本發(fā)明提供了治療神經(jīng)功能缺損的方法，該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物一一該組合物包含從乳香分離的提取物和藥學(xué)上可接受的載體，從而治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了治療神經(jīng)功能缺損的方法，該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物——該組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體，從而治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病或病癥的方法，包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，該組合物包含乳香的分離組分，其中該分離組分的特征在于其可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑和至少一種非極性有機(jī)溶劑，并且基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了促進(jìn)或誘導(dǎo)組織再生的方法，該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，該組合物包含乳香的分離組分，其中該分離組分的特征在于其可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑和至少一種非極性有機(jī)溶劑，并且基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物；從而促進(jìn)或誘導(dǎo)組織再生。根據(jù)還有另一方面，本發(fā)明提供了促進(jìn)或誘導(dǎo)組織再生的方法，該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，該組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體；從而治療組織損傷。如本文所用，組織修復(fù)包括誘導(dǎo)和促進(jìn)組織再生，包括神經(jīng)組織。在多個實(shí)施方式中，通過適當(dāng)?shù)耐緩綄?shí)施給藥步驟，該途徑選自口服、局部、經(jīng)皮或腸胃外。根據(jù)具體實(shí)施方式
，給藥途徑是通過局部應(yīng)用進(jìn)行的，該局部應(yīng)用選自以下皮膚、陰道、直腸、吸入、鼻內(nèi)、眼部、耳部和頰部。根據(jù)可選的實(shí)施方式，給藥途徑是通過腸胃外注射的。在多個實(shí)施方式中，通過腸胃外途徑實(shí)施給藥步驟，該腸胃外途徑選自靜脈內(nèi)、 肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、動脈內(nèi)、腦內(nèi)、腦室內(nèi)、骨內(nèi)和鞘內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，給藥步驟包括用組合物接觸特定類型或特定譜系或在特定分化階段的細(xì)胞。在具體實(shí)施方式
中，細(xì)胞選自神經(jīng)細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞和干細(xì)胞。在多個實(shí)施方式中，細(xì)胞是選自以下譜系的細(xì)胞外胚層、中胚層和內(nèi)胚層譜系。 在多個實(shí)施方式中，接觸細(xì)胞的步驟在體內(nèi)、離體或在體外實(shí)施。在具體實(shí)施方式
中，神經(jīng)功能缺損包括功能的減弱，該功能選自認(rèn)知功能、感覺功能、運(yùn)動功能、神經(jīng)心理功能、精神功能及其組合。在具體實(shí)施方式
中，神經(jīng)功能缺損與以下病癥或疾病有關(guān)包括，例如，創(chuàng)傷、血管性癡呆、老年性癡呆、阿爾茨海默病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化(ALS)、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、中風(fēng)、精神分裂癥、雙相性精神障礙、抑郁、肥胖、 厭食、惡病質(zhì)、感染和免疫性疾病。在具體實(shí)施方式
中，神經(jīng)功能缺損源于暴露于藥物，如麻醉劑。在具體實(shí)施方式
中，接觸細(xì)胞的步驟在體外或離體實(shí)施。在具體實(shí)施方式
中，細(xì)胞是干細(xì)胞。在具體實(shí)施方式
中，意圖將該細(xì)胞植入個體或移植到個體中。在具體實(shí)施方式
中，細(xì)胞是意圖植入個體或移植到個體中的器官或組織的細(xì)胞。在具體實(shí)施方式
中，該細(xì)胞分泌可溶性因子。在具體實(shí)施方式
中，組合物包含基于組合物總重量約0. 01至約25% (w/w)的乳香分離組分。在具體實(shí)施方式
中，組合物包含基于組合物總重量約0.01至約12% (w/w)的乳香分離組分。在具體實(shí)施方式
中，通過這樣的方法獲得乳香分離組分，其包括以下步驟用至少一種極性有機(jī)溶劑處理乳香和分離可溶于所述極性有機(jī)溶劑的組分。在具體實(shí)施方式
中， 通過這樣的方法獲得乳香分離組分，其包括以下步驟用至少一種非極性有機(jī)溶劑處理乳香和分離可溶于所述非極性有機(jī)溶劑的組分。在具體實(shí)施方式
中，乳香分離組分的特征在于其可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑和至少一種非極性有機(jī)溶劑。在具體實(shí)施方式
中，乳香分離組分的進(jìn)一步特征在于其基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物。在具體實(shí)施方式
中，乳香分離組分的特征在于其既可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑又可溶于至少一種非極性有機(jī)溶劑，并且基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物。在具體實(shí)施方式
中，通過這樣的方法獲得乳香的分離組分，其包括以下步驟(a)用極性有機(jī)溶劑處理乳香；(b)分離可溶于所述極性有機(jī)溶劑的組分；(c)任選地去除所述極性有機(jī)溶劑；(d)用非極性有機(jī)溶劑處理在步驟(b)或(C)得到的可溶性組分；(e)分離可溶于所述非極性有機(jī)溶劑的組分；和(f)任選地去除所述非極性有機(jī)溶劑；其中步驟(d)至(f)可先于步驟(a)至(C)。適于獲得可用于本發(fā)明方法的提取物的極性有機(jī)溶劑包括醇、醚、酯、酰胺、醛、 酮、腈及其組合。極性有機(jī)溶劑的具體實(shí)例為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、1-丁醇、2-丁醇、仲丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、新戊醇、3-甲基-1- 丁醇、2-甲基-1- 丁醇、3-甲基-2- 丁醇、2-甲基-2- 丁醇、乙二醇、乙二醇單甲醚、二乙醚、甲基乙醚、乙基丙醚、甲基丙醚、1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、二氫呋喃、呋喃、吡喃、二氫吡喃、四氫吡喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙醛、甲酸甲酯、甲酸乙酯、丙酸乙酯、丙酸甲酯、二氯甲烷、氯仿、二甲基甲酰胺、乙酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、丙酮、乙基甲基酮、二乙基酮、乙腈、丙腈及其組合。適于實(shí)施本發(fā)明的非極性溶劑包括無環(huán)或環(huán)狀的、飽和或不飽和的脂肪烴和芳烴，例如，C5-C10烷烴、C5-C10環(huán)烷烴、C6-C14芳烴及其組合。上述每一種均可被一個或多個鹵素任選地取代，例如，C7-C14全氟烷烴。非極性有機(jī)溶劑的具體實(shí)例為戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、環(huán)庚烷、苯、甲苯、二甲苯和異構(gòu)體及其混合物。在具體實(shí)施方式
中，獲得乳香分離組分的過程進(jìn)一步包括步驟(C)或步驟(f)后得到的可溶性組分的大小分級。在具體實(shí)施方式
中，大小分級包括尺寸排阻層析。在具體實(shí)施方式
中，步驟(c)或(f)包括通過選自旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、高真空應(yīng)用及其組合的手段去除溶劑。在具體實(shí)施方式
中，步驟(a)至(c)在步驟(d)至(f)前實(shí)施。在具體實(shí)施方式
中，步驟⑷至(f)在步驟(a)至(c)前實(shí)施。在具體實(shí)施方式
中，極性有機(jī)溶劑包括乙醇，非極性有機(jī)溶劑包括己烷。在具體實(shí)施方式
中，步驟(a)至(c)和步驟(d)至(f)各自獨(dú)立地實(shí)施多個循環(huán)。在具體實(shí)施方式
中，乳香得自黃連木屬物種，選自乳香黃連木、大西洋黃連木 (P. atlantica)、P. palestina、P. saportae、漂黃連木(P. terebinthus)、P. vera 禾口全緣葉黃連木(P. integerrima)。在具體實(shí)施方式
中，乳香的分離組分包括聚合月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，組合物包含基于組合物總重量約0. 01至約12% (w/w)的聚合月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯選自聚合月桂烯(聚月桂烯)、聚合 α -月桂烯(聚- α -月桂烯)、月桂烯共聚物及其組合。在具體實(shí)施方式
中，聚-月桂烯選自1，4_聚-β-月桂烯、3，4_聚-β-月桂烯、1，2_聚-β-月桂烯及其組合。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯包括月桂烯異構(gòu)體，該月桂烯異構(gòu)體選自順式異構(gòu)體、反式異構(gòu)體及其組合。在具體實(shí)施方式
中，1，4-聚-β -月桂烯選自順式1，4-聚-β -月桂烯、反式1，4-聚-β -月桂烯及其組合。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯包括順式1，4-聚-β -月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯具環(huán)狀構(gòu)象。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯具有支鏈構(gòu)象。 在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯的聚合度在至少約6至約1800的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，聚合度為至少約10。在具體實(shí)施方式
中，聚合度為至少約15。在具體實(shí)施方式
中，聚合度為至少約25。在具體實(shí)施方式
中，聚合度為至少約35。在具體實(shí)施方式
中，聚合度在約6至約30的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，聚合度在約30至約500的范圍內(nèi)，例如， 在約35至約150的范圍內(nèi)。
各種可能性均代表本發(fā)明單獨(dú)的實(shí)施方式。要理解的是，組合物可包含不同分子量的聚合月桂烯組分，例如在至少約800至約100,000的范圍內(nèi)或其多種組合。在具體實(shí)施方式
中，聚合月桂烯的多分散指數(shù)低于5。在具體實(shí)施方式
中，根據(jù)本發(fā)明其中一些方法所用的聚合月桂烯是化學(xué)合成產(chǎn)物。在具體實(shí)施方式
中，化學(xué)合成包括將單體月桂烯用作底物。在具體實(shí)施方式
中，底物是
月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，月桂烯底物得自植物。在具體實(shí)施方式
中，化學(xué)合成產(chǎn)物包括順式1，4_聚- β -月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，化學(xué)合成包括陰離子聚合反應(yīng)。在具體實(shí)施方式
中，將得自化學(xué)合成的聚合月桂烯溶于疏水性載體，如至少一種植物油。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分得自天然來源。在具體實(shí)施方式
中，天然來源是歸類為漆樹科的植物。在具體實(shí)施方式
中，該植物被歸類為選自以下的屬 黃連木屬(Pistacia)、松屬(Pinus)、云杉屬(Picea)、檜屬(Juniperus)、Alsies、落葉松屬(Larix)、金魚草屬(Antirrhinum)、乳香屬(Boswellia)、柑桔屬(Citrus)和三七草屬(Gynura)。在具體實(shí)施方式
中，該植物是黃連木屬物種，選自乳香黃連木、大西洋黃連木、P. palestina、P. saportae、黑黃連木、P. vera和全緣葉黃連木。在具體實(shí)施方式
中， 該植物是洋乳香樹。在具體實(shí)施方式
中，天然來源是植物材料選自樹脂、葉、枝、根、花、種子、芽、樹皮、堅(jiān)果和根。在具體實(shí)施方式
中，天然來源是歸類于選自以下屬的植物羅勒屬 (Ocimum)、月桂屬(Laurus)禾口薰衣草屬(Lavendula)0在具體實(shí)施方式
中，通過這樣的方法獲得含聚合月桂烯的分離組分，該方法包括以下步驟(a)用至少一種極性有機(jī)溶劑接觸植物材料；
(b)分離可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑的組分；(c)任選地去除所述極性有機(jī)溶劑；(d)用至少一種非極性有機(jī)溶劑處理在步驟(b)或(C)得到的可溶性組分；(e)分離可溶于所述非極性有機(jī)溶劑的組分；和(f)任選地去除所述非極性有機(jī)溶劑；其中步驟(d)至(f)可先于步驟(a)至(C)，并且其中步驟(a)至(C)和步驟(d) 至(f)各自獨(dú)立地實(shí)施多個循環(huán)；從而獲得含聚合月桂烯的分離組分。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分的純度為至少約80% (w/w) 0在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分的純度可以為至少約85% (w/w) 0在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分的純度為至少約90% (w/w)，或至少約93%，或至少約95 %，或至少約97 %，或至少約98 %，或至少約99 %。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分的純度為至少80%，并且聚合月桂烯的聚合度為至少6。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分的純度為至少90%，并且聚合月桂烯的聚合度為至少10。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w)的順式1， 4-聚-β -月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含順式1，4-聚-β -月桂烯和反式1，4_聚-β-月桂烯的混合物，其中混合物包含至少50% (w/w)的順式1， 4-聚-β-月桂烯。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w)的順式1，4_聚-β-月桂烯，該順式1，4_聚-β-月桂烯的數(shù)均分子量為至少800，或至少 1，000,或至少5，000,或至少10，000。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少80% (w/w)的順式1，4-聚-β-月桂烯，該順式1，4-聚-β-月桂烯的數(shù)均分子量在約800至約5，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少 90% (w/w)的順式1，4-聚-β-月桂烯，該順式1，4-聚-β-月桂烯的數(shù)均分子量在約 1000至約10，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w)的順式1，4_聚-β-月桂烯，該順式1，4_聚-β-月桂烯的數(shù)均分子量在約5000 至約20，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/ w)的順式1，4-聚-β -月桂烯，該順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約10，000至約20，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w) 的順式1，4_聚-β-月桂烯，該順式1，4_聚-β-月桂烯的數(shù)均分子量在約20，000至約 30，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w)的順式1，4-聚-β -月桂烯，該順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約30，000至約50，000 的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分包含至少90% (w/w)的順式1， 4-聚-β -月桂烯，該順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約50，000至約80，000的范圍內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，組合物包含低于約10% (w/w)，更優(yōu)選低于約5% (w/w)的萜烯化合物，該萜烯化合物可溶于極性有機(jī)溶劑且不溶于非極性有機(jī)溶劑。在具體實(shí)施方式
中，組合物基本不含萜烯化合物，該萜烯化合物可溶于極性有機(jī)溶劑且不溶于非極性有機(jī)溶劑。在具體實(shí)施方式
中，組合物包含低于約10% (w/w)，更優(yōu)選低于約5% (w/w)的單體萜烯化合物。在具體實(shí)施方式
中，組合物基本不含月桂烯單體。如本文所述，萜烯化合物包括單體和低聚形式的萜烯化合物，包括各種被歸類為單萜、二萜、倍半萜、三萜和四萜的萜烯化合物，包括其酸、醛和醇形式。在具體實(shí)施方式
中， 組合物包含低于約10% (w/w)，更優(yōu)選低于約5% (w/w)的單萜化合物，其選自β_月桂烯、α-月桂烯、順式α-羅勒烯、二氫月桂烯、檸檬烯、α-菔烯、β _菔烯及其組合。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分得自植物，并且組合物基本不含月桂烯單體和聚合度低于約6的月桂烯低聚形式。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分得自植物，并且組合物基本不含可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑且不溶于至少一種非極性有機(jī)溶劑的萜烯化合物。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分是化學(xué)合成產(chǎn)物，并且組合物基本不含月桂烯單體和聚合度低于約6的月桂烯低聚形式。在具體實(shí)施方式
中，含聚合月桂烯的分離組分是化學(xué)合成產(chǎn)物，并且組合物基本不含可溶于極性有機(jī)溶劑的萜烯化合物。在具體實(shí)施方式
中，藥學(xué)上可接受的載體包括疏水載體。在具體實(shí)施方式
中，藥學(xué)上可接受的疏水載體包括至少一種油。在具體實(shí)施方式
中，油選自礦物油、植物油及其組合。在具體實(shí)施方式
中，植物油選自杏仁油、油菜油、椰子油、玉米油、棉花籽油、葡萄籽油、 橄欖油、花生油、藏花油、芝麻油、大豆油及其組合。在具體實(shí)施方式
中，礦物油是輕礦物油。 在具體實(shí)施方式
中，疏水載體包括至少一種蠟。在具體實(shí)施方式
中，疏水載體包括至少一種油和至少一種蠟的組合。在具體實(shí)施方式
中，組合物的形式選自膠囊、片劑、脂質(zhì)體、栓劑、懸浮液、軟膏、乳劑、洗劑、溶液、乳液、膜、粘固劑、粉末、膠液、氣溶膠和噴霧劑。在具體實(shí)施方式
中，組合物是藥物組合物。在具體實(shí)施方式
中，組合物的形式適于美容性或皮膚病學(xué)給藥。在本文所公開方法的具體實(shí)施方式
中，給藥或接觸細(xì)胞的步驟包括使用制品，其中組合物處于制品上或制品內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，組合物以涂層的形式處于制品上。在具體實(shí)施方式
中，制品包括容器，其中組合物處于容器內(nèi)。在具體實(shí)施方式
中，制品選自織物制品、尿布、傷口敷料、醫(yī)療裝置、一個或多個針、一個或多個微針、注射裝置和噴霧器。在具體實(shí)施方式
中，制品包括多個微針。在具體實(shí)施方式
中，醫(yī)療裝置選自假肢、人造器官或其組件、閥門、導(dǎo)管、管、支架、人造膜、起搏器、傳感器、內(nèi)窺鏡、成像裝置、泵、導(dǎo)線和植入物。 在具體實(shí)施方式
中，植入物選自心臟植入物、耳蝸植入物、角膜植入物、顱植入物、牙齒植入物、頌面植入物、器官植入物、矯形植入物、血管植入物、關(guān)節(jié)內(nèi)植入物和胸植入物。在具體實(shí)施方式
中，在醫(yī)療裝置植入個體前或后實(shí)施本方法。在具體實(shí)施方式
中， 醫(yī)療裝置是器官植入物。在具體實(shí)施方式
中，器官植入物包括個體自身的細(xì)胞。在具體實(shí)施方式
中，在細(xì)胞、組織或器官移植到個體前或后實(shí)施本方法。在具體實(shí)施方式
中，給藥或接觸步驟包括選自以下的手段電穿孔、超聲處理、射頻、加壓噴霧及其組合。在具體實(shí)施方式
中，接觸步驟包括建立間液與組合物之間的接觸。在具體實(shí)施方式
中，建立間液與組合物之間接觸的步驟包括用針、微針或包含多個針或微針的設(shè)備刺穿和/或挑撥皮膚。在具體實(shí)施方式
中，個體是人類。在具體實(shí)施方式
中，個體選自非人哺乳動物、魚和鳥。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了乳香的分離組分用于制備治療神經(jīng)功能缺損的藥物的應(yīng)用。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了乳香的分離組分，用于治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物——該組合物包含乳香的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體，用于治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了含聚合月桂烯的分離組分，用于治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物——該組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的疏水載體，用于治療神經(jīng)功能缺損。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了乳香的分離組分用于制備誘導(dǎo)或促進(jìn)組織再生的藥物的應(yīng)用。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了乳香的分離組分，用于誘導(dǎo)或促進(jìn)組織再生。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物——該組合物包含乳香的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體，用于誘導(dǎo)或促進(jìn)組織再生。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了含聚合月桂烯的分離組分，用于誘導(dǎo)或促進(jìn)組織再生。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物——該組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的疏水載體，用于誘導(dǎo)或促進(jìn)組織再生。要明確理解的是，本發(fā)明的范圍包括較短和較長形式的聚合月桂烯，包括合成和半合成形式，包括月桂烯共聚物和用多個官能團(tuán)取代的衍生物以及與另外的分子的結(jié)合體一如本領(lǐng)域已知，并規(guī)定這些變體和改變保持本發(fā)明方法背景下的聚合月桂烯的治療能力。本發(fā)明其他目的、特征和優(yōu)勢將由于以下描述和附圖而更加明確。附圖簡述
圖1顯示利用SEDEX和PDA檢測器的乳香樹脂提取物尺寸排阻層析。圖2顯通過制備型尺寸排阻層析獲得的乳香樹脂提取物的低(圖2A)和重(圖 2B)分子量分?jǐn)?shù)。圖3顯示通過乳香樹脂提取物的制備型SEC獲得的重MW分?jǐn)?shù)的1H-NMR光譜。圖4顯示通過乳香樹脂提取物的制備型尺寸排阻層析獲得的重麗組分的13C-NMR 光譜。圖5顯示聚合月桂烯化學(xué)合成法獲得的高(圖5A)和低(圖5B)產(chǎn)物的分析型尺寸排阻層析。圖6顯示合成的1，4-聚-β -月桂烯的1H-NMR光譜。圖7顯示合成的1，4_聚-β-月桂烯的13C-NMR光譜。圖8顯示RPh-I對ARPE-19細(xì)胞的影響。圖8Α，用油載體處理的對照培養(yǎng)物；圖 8Β，給予RPh-I (0. 1 %;lmg/ml)和溫育后48小時的測試培養(yǎng)物；圖8C，給予RPh-I (0. 25%； 2. 5mg/ml)和溫育后48小時的測試培養(yǎng)物；圖8D，給予RPh-I (0. 25%；2. 5mg/ml)和溫育后 72小時的測試培養(yǎng)物。圖9顯示用RPh-I溫育72小時前(左側(cè))和后(右側(cè))的分化ARPE-19細(xì)胞的免疫熒光分析，表明經(jīng)處理后微管蛋白、β3( ΒΒ3)、活性調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白(Arc/ Arg3. 1)和神經(jīng)元正五聚蛋白(pentraxin) II (NPTX2)得到表達(dá)。圖10顯示RPh-I對ARPE-19細(xì)胞增殖的影響，如評價(jià)總蛋白含量的分析所監(jiān)測。圖11顯示多級分化的ARPE-19細(xì)胞。圖11A，分化級3 ；圖11B，分化級4 ；圖11C， 分化級5。圖12顯示RPh-I對人類黑素瘤細(xì)胞的影響。圖12A，油載體處理的對照細(xì)胞；圖 12B，48小時溫育后經(jīng)RPh-I(SyL)處理的細(xì)胞；圖12C，48小時溫育后經(jīng)RPh-I O μ L)處理的細(xì)胞；圖12D，72小時溫育后經(jīng)RPh-I(SyL)處理的細(xì)胞。圖13顯示化學(xué)合成的聚合月桂烯對RPh-I細(xì)胞的影響。圖13Α，經(jīng)組分18. 1誘導(dǎo)的分化；圖13Β，經(jīng)組分18. 2誘導(dǎo)的分化。
圖14顯示患有與脫毛癥有關(guān)的皮膚病變的衰老雄性金毛尋回犬(Golden Retriever male dog)經(jīng)RPh-I治療后的毛皮再生。圖14A，治療前；圖14B，治療2周后。圖15顯示實(shí)驗(yàn)小鼠中RPh-I對造成的傷口的傷口愈合的影響，由以下表示通過 SC注射(A組，灰色條)、局部(B組，黑色條)用RPh-I治療的小鼠以及僅用載體(C組，空白條)治療的小鼠在傷口造成后不同時間點(diǎn)的傷口大小(mm2)。圖16顯示血管性癡呆大鼠模型中RPh-I對腦血流灌注不足恢復(fù)的影響，由Morris 水迷宮測試進(jìn)行評價(jià)。對RPh-I治療的動物(A組；交叉線條)、載體治療的動物(B組；水平紋條)和假對照動物(實(shí)心條)的表現(xiàn)進(jìn)行以下測試在平臺位置的頻率(圖16A)；在平臺區(qū)域的耗時(圖16B)；找到平臺的等待時間(圖16C)；在區(qū)域1位置的頻率(圖16D)；在有光部分 (light part)的耗時(圖16E)；找到平臺的等待時間(圖16F)；和速率(圖16G)。圖17顯示RPh-I對體重增加的影響。圖17A顯示血管性癡呆大鼠模型中動物腦血流灌注不足后的體重增加。B組動物 (RPh-I治療的；三角符號)重量的恢復(fù)顯著快于A組動物(載體治療的；正方形符號)。圖17B顯示通過皮下給藥(A組；菱形標(biāo)志)或通過局部給藥(B組；正方形標(biāo)志) 用RPh-I治療或僅用載體(C組；三角符號)治療后的肥胖小鼠的體重增加(ob/ob)。B組和 C組小鼠分別增加10. 2%和9.1%。以斜率表示的所有組的體重增加速率相似(p = 0. 07 (A 對 B)、0· 08 (A 對 C)和 0. 43 (B 對 C))。圖18顯示大鼠中風(fēng)模型中RPh-I對從短暫大腦中動脈閉塞(tMCAO)恢復(fù)的影響。圖18A顯示用RPh-I (A組)或用載體(B組)治療大鼠的MCAO后所示以天(d)表示的不同時間點(diǎn)的神經(jīng)肌肉分值(神經(jīng)分值)。顯著差異僅在A組第8天與第14天之間和第8天與第觀天之間可見。圖18B顯示用RPh_l(A組；黑色條)或用載體(B組；空白條)治療大鼠的MCAO后不同時間點(diǎn)的階梯測試結(jié)果。僅在第觀天發(fā)現(xiàn)兩組間的顯著差異。圖18C顯示用RPh-I (A組)或用載體(B組)治療大鼠的MCAO后所示以天(d)表示的不同時間點(diǎn)的粘合劑去除測試結(jié)果。顯著差異僅在A組第2天與其他天之間可見。圖19顯示經(jīng)RPh-I治療和經(jīng)對照治療的大鼠在視神經(jīng)軸索顯微外科術(shù)(axotomy) 后存活的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC)的平均數(shù)。圖20顯示視網(wǎng)膜脫落后用RPh-I或載體治療的動物的脫落的視網(wǎng)膜(RD)和未損傷的視網(wǎng)膜(對照)中的SEMA3(圖20A)和胱天蛋白酶_3 (圖20B)表達(dá)的蛋白質(zhì)印跡分析。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了具有神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)再生特性的組合物和用其治療一系列神經(jīng)系統(tǒng)疾病和病癥的方法。更具體地，現(xiàn)公開包含提取自乳香的分離組分的組合物具有神經(jīng)保護(hù)活性，并且可用于促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞類型及其他細(xì)胞類型的分化和成熟。此外，已發(fā)現(xiàn)聚合月桂烯是這種乳香提取物的主要成分。聚合月桂烯的化學(xué)合成和生物測試已確定，該化合物呈現(xiàn)上述神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)再生生物活性。此外，這些發(fā)現(xiàn)大大出乎根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的意料之外，現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)得自乳香的聚合組分不具有治療有益性，并且事實(shí)上妨礙歸因于粗乳香制品和乳香提取物的某些生物活性。
本文首次公開，由于其刺激和誘導(dǎo)細(xì)胞再生的多種活性，本文所述的乳香分離組分可用作用于多種與神經(jīng)功能缺損有關(guān)的治療適應(yīng)癥和需要組織修復(fù)的病癥的藥物組合物的活性成分。在接觸人類和非人類個體的細(xì)胞時，組合物誘導(dǎo)多種組織、細(xì)胞區(qū)室和細(xì)胞譜系的細(xì)胞分化，包括皮膚、內(nèi)皮、粘膜、骨、腱和軟骨。此外，可利用藥物組合物的細(xì)胞分化活性促進(jìn)體內(nèi)并入醫(yī)療裝置、植入物和器官移植物。如本文所用，術(shù)語“乳香”(mastic、gum mastic和mastic gum)和“乳香樹脂”交替使用，意指以任何被歸類為漆樹科的樹的滲出物得到的樹脂(也被稱為油樹脂)。黃連木屬的樹——最顯著的是洋乳香樹，具體是P. Ientiscus L.cv.Chia栽培品種(在希臘的Chios島上栽培)，以其乳香高產(chǎn)量聞名。其他品種包括P. lentiscus. var. emarginata Engl.和P. lentiscus. var. Iatifolia Coss0更多黃連木屬物種包括例如，大西洋黃連木、P. palestina、P. saportae、黑黃連木、P. vera禾口全緣葉黃連木。如本文所用，術(shù)語“聚合物”指化合物或化合物的混合物，其包含具有同一化學(xué)結(jié)構(gòu)的重復(fù)亞單元(也被稱為單體)，其中單體共價(jià)連接?？尚纬删酆衔锏膯误w實(shí)例是萜烯， 例如單萜，如月桂烯。聚合物可具有不同的聚合度，因此包括多種鏈長的聚合形式。聚合物包括均聚物和雜聚物(也被稱為共聚物)，并且可具有多種異構(gòu)構(gòu)型和非對映異構(gòu)構(gòu)型。如本文所用，術(shù)語“聚合月桂烯”和“聚月桂烯”可交替地指由月桂烯單體形成的聚合物。聚合月桂烯包括具有不同聚合度的聚合形式，優(yōu)選聚合度為至少6的月桂烯聚合物。本發(fā)明無限制地包括聚合月桂烯(聚月桂烯)、聚合α-月桂烯(聚-α-月桂烯)、其均聚物、包含月桂烯單體的雜聚物(也被稱為共聚物)——該月桂烯單體與異種單體直接或間接共價(jià)連接、其反式和順式異構(gòu)體、其D-和L-對映異構(gòu)體或其組合。聚合月桂烯可以以分離的形式得自植物來源——具體得自乳香，或可以是化學(xué)合成反應(yīng)的產(chǎn)物。如本文所用，術(shù)語“乳香的分離組分(部分，餾分，fraction) ”指在至少一種極性或非極性有機(jī)溶劑或其組合中對乳香進(jìn)行萃取后得到的組分。本發(fā)明所述的分離組分一般可溶于極性和非極性有機(jī)溶劑中的一者或二者。如本文所用，術(shù)語“含聚合月桂烯的分離組分”指具有限定分子量或分子量范圍的聚合月桂烯制備物，其從該聚合月桂烯所分離的來源中存在的其他化學(xué)成分中分離出來， 該來源具體是化學(xué)反應(yīng)混合物或植物提取物。如本文所用，術(shù)語“純度”指特定化合物在制備物中的含量，表示為特定化合物相對于制備物中其他化合物的重量/重量基礎(chǔ)下的百分比。如本文所用，“均聚物”指由一類單體生成的聚合物。例如，聚合月桂烯在其僅由月桂烯單體例如月桂烯生成時是均聚物。均聚物也可以是由同一單體生成但具有不同聚合度——即鏈長——的聚合物的混合物。因此，聚合月桂烯可包括一系列具有不同鏈長從而不同分子量的化合物。進(jìn)一步，均聚物可包含具有不同異構(gòu)構(gòu)型的單體，例如，月桂烯和α-月桂烯。如本文所用，“雜聚物”和“共聚物”指由一個以上單體類型生成的聚合物。因此， 例如，月桂烯共聚物由月桂烯單體以及非月桂烯的異種類型的單體生成。如本領(lǐng)域已知，共聚物包括交替共聚物、周期共聚物、無規(guī)共聚物、嵌段共聚物和統(tǒng)計(jì)共聚物。如本文所用，“聚合度”指共價(jià)連接在一起以形成聚合物的單體或單體單元數(shù)，例如，聚合月桂烯化合物中的月桂烯單體數(shù)。如本文所用，“重均分子量”指如下式表示的具有不同鏈長分子的聚合物的平均分
子量
權(quán)利要求
1.治療神經(jīng)功能缺損的方法，所述方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物從而治療神經(jīng)功能缺損，所述組合物包含乳香的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)功能缺損包括選自以下功能的減弱認(rèn)知功能、感覺功能、運(yùn)動功能及其組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)功能缺損與選自以下的癥狀有關(guān)創(chuàng)傷、 血管性癡呆、老年性癡呆、阿爾茨海默病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化(ALS)、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、中風(fēng)、精神分裂癥、雙相性精神障礙、抑郁、肥胖、厭食、惡病質(zhì)、感染和免疫性疾病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述給藥步驟通過選自口服、局部、腸胃外和經(jīng)皮的途徑實(shí)施。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述給藥步驟通過選自靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、 腹膜內(nèi)、動脈內(nèi)、腦內(nèi)、腦室內(nèi)、骨內(nèi)和鞘內(nèi)的腸胃外途徑實(shí)施。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述給藥途徑是通過局部施用，所述局部施用選自皮膚、陰道、直腸、吸入、鼻內(nèi)、眼部、耳部和頰部。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中給藥步驟包括用所述組合物接觸個體的細(xì)胞，其中所述細(xì)胞選自神經(jīng)細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞和所述譜系的干細(xì)胞。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中接觸細(xì)胞的步驟在體內(nèi)、離體或在體外實(shí)施。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述細(xì)胞被意圖植入個體或移植到個體中。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述乳香分離組分的特征在于其可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑和至少一種非極性有機(jī)溶劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述乳香分離組分基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述乳香分離組分包括聚合月桂烯 (聚-β-月桂烯)。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述組合物包含基于組合物總重量約0.01至約 25% (w/w)的β-聚合月桂烯。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述聚-β-月桂烯選自順式1，4-聚-β -月桂烯、反式1，4_聚-β-月桂烯、3，4_聚-β-月桂烯、1，2_聚-β-月桂烯及其組合。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述聚合月桂烯包括順式1，4_聚-β-月桂烯。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述乳香分離組分包含至少90%的順式1， 4-聚-β-月桂烯。
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述乳香分離組分包含順式1，4_聚-β -月桂烯和反式1，4_聚-β-月桂烯的混合物，并且其中所述混合物包含至少75% (w/w)的順式 1，4_聚-β-月桂烯。
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述乳香分離組分包含至少75%(w/w)的順式 1，4-聚-β -月桂烯，所述順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約1000至約20，000的范圍內(nèi)。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述數(shù)均分子量在至少約5，000至約20，000的范圍內(nèi)。
20.促進(jìn)組織再生的方法，所述方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，所述組合物包含乳香的分離組分，其中所述分離組分的特征在于其可溶于至少一種極性有機(jī)溶劑和至少一種非極性有機(jī)溶劑，并且基本不含可溶于所述極性有機(jī)溶劑但不溶于所述非極性有機(jī)溶劑的化合物；從而促進(jìn)組織再生。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述極性有機(jī)溶劑選自醇、醚、酯、酰胺、醛、酮、 腈及其組合；或其中所述非極性有機(jī)溶劑選自無環(huán)的或環(huán)狀的、飽和或不飽和的脂肪烴和芳烴——其中每一個均任選地被一個或多個鹵素取代——及其組合。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述極性有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、1- 丁醇、2- 丁醇、仲丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、新戊醇、3-甲基-1- 丁醇、 2-甲基-1-丁醇、3-甲基-2-丁醇、2-甲基-2-丁醇、乙二醇、乙二醇單甲醚、二乙醚、甲基乙醚、乙基丙醚、甲基丙醚、1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、二氫呋喃、呋喃、吡喃、二氫吡喃、 四氫吡喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙醛、甲酸甲酯、甲酸乙酯、丙酸乙酯、丙酸甲酯、 二氯甲烷、氯仿、二甲基甲酰胺、乙酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、丙酮、乙基甲基酮、二乙基酮、乙腈、丙腈及其組合。
23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述非極性有機(jī)溶劑選自戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、環(huán)庚烷、苯、甲苯、二甲苯和異構(gòu)體及其混合物。
24.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述乳香分離組分基本不含選自β-月桂烯、 α -月桂烯、順式α -羅勒烯、二氫月桂烯、檸檬烯、α -菔烯、β -菔烯及其組合的單體萜烯化合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述乳香分離組分包含聚合β-月桂烯 (聚-β-月桂烯)。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述組合物包含基于組合物總重量約0.01至約 25% (w/w)的β-聚合月桂烯。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述聚-β-月桂烯選自順式1，4-聚-β -月桂烯、反式1，4_聚-β-月桂烯、3，4_聚-β-月桂烯、1，2_聚-β-月桂烯及其組合。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述聚合月桂烯包括順式1，4-聚-β-月桂烯。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀所述的方法，其中所述乳香分離組分包含至少90%的順式1， 4-聚-β-月桂烯。
30.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述乳香分離組分包含順式1，4_聚-β-月桂烯和反式1，4_聚-β-月桂烯的混合物，并且其中所述混合物包含至少75% (w/w)的順式 1，4_聚-β-月桂烯。
31.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述乳香分離組分包含至少75%(w/w)的順式 1，4-聚-β -月桂烯，所述順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約1000至約20，000的范圍內(nèi)。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述數(shù)均分子量在至少約5，000至約20，000的范圍內(nèi)。
33.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述給藥步驟通過選自口服、局部、腸胃外和經(jīng)皮的途徑實(shí)施。
34.治療神經(jīng)功能缺損的方法，所述方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，所述組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體；從而治療神經(jīng)功能缺損。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述神經(jīng)功能缺損包括選自以下的功能減弱 認(rèn)知功能、感覺功能、運(yùn)動功能及其組合。
36.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述神經(jīng)功能缺損與選自以下的病癥有關(guān)創(chuàng)傷、血管性癡呆、老年性癡呆、阿爾茨海默病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化(ALS)、多發(fā)性硬化癥、 帕金森病、中風(fēng)、精神分裂癥、雙相性精神障礙、抑郁、肥胖、厭食、惡病質(zhì)、感染和免疫性疾病。
37.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中給藥步驟通過選自口服、局部、腸胃外和經(jīng)皮的途徑實(shí)施。
38.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述組合物包含基于組合物總重量約0.01至約 25% (w/w)的聚合月桂烯。
39.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分是化學(xué)合成產(chǎn)物，或其中所述含聚合月桂烯的分離組分得自植物來源。
40.根據(jù)權(quán)利要求34和39中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述聚合月桂烯選自聚合β-月桂烯(聚月桂烯)、聚合α-月桂烯(聚-α-月桂烯)、月桂烯共聚物及其組合。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述聚-β-月桂烯選自順式1，4-聚-β -月桂烯、反式1，4_聚-β-月桂烯、3，4_聚-β-月桂烯、1，2_聚-β-月桂烯及其組合。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述聚合月桂烯包括順式1，4_聚-β-月桂烯。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分包含至少90%的順式1，4_聚-β-月桂烯。
44.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分包含順式1， 4-聚-β -月桂烯和反式1，4-聚-β -月桂烯的混合物，并且其中所述混合物包含至少75 % (w/w)的順式1，4-聚-β-月桂烯。
45.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中含聚合月桂烯的分離組分包含至少75%(w/w) 的順式1，4-聚-β -月桂烯，所述順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約1000至約 20，000的范圍內(nèi)。
46.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述組合物包含低于約5%的月桂烯單體和聚合度低于約6的月桂烯低聚形式。
47.誘導(dǎo)組織再生的方法，所述方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體給予治療有效量的組合物，所述組合物包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體；從而治療誘導(dǎo)組織再生。
48.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中給藥步驟通過選自口服、局部、腸胃外和經(jīng)皮的途徑實(shí)施。
49.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述組合物包含基于組合物總重量約0.01至約 25% (w/w)的聚合月桂烯。
50.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中含聚合月桂烯的分離組分是化學(xué)合成產(chǎn)物，或其中含聚合月桂烯的分離組分得自植物來源。
51.根據(jù)權(quán)利要求47和50中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述聚合月桂烯選自聚合β-月桂烯(聚月桂烯)、聚合α-月桂烯(聚-α-月桂烯)、月桂烯共聚物及其組合。
52.根據(jù)權(quán)利要求51所述的方法，其中所述聚-β-月桂烯選自順式1，4-聚-β -月桂烯、反式1，4_聚-β-月桂烯、3，4_聚-β-月桂烯、1，2_聚-β-月桂烯及其組合。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述聚合月桂烯包括順式1，4-聚-β-月桂烯。
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分包含至少90%的順式1，4_聚-β-月桂烯。
55.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分包含順式1， 4-聚-β -月桂烯和反式1，4-聚-β -月桂烯的混合物，并且其中所述混合物包含至少75 % (w/w)的順式1，4-聚-β-月桂烯。
56.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述含聚合月桂烯的分離組分包含至少75% (w/w)的順式1，4-聚-β -月桂烯，所述順式1，4-聚-β -月桂烯的數(shù)均分子量在約1000 至約20，000的范圍內(nèi)。
57.組合物，包含乳香的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體，用于治療神經(jīng)功能缺損。
58.組合物，包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體；用于治療神經(jīng)功能缺損。
59.組合物，包含乳香的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體，用于誘導(dǎo)組織再生。
60.組合物，包含含聚合月桂烯的分離組分和藥學(xué)上可接受的載體；用于誘導(dǎo)組織再生。
全文摘要
本發(fā)明涉及包含聚合月桂烯的藥物組合物和制劑。更具體地，本發(fā)明涉及包含在疏水載體中聚合月桂烯分離組分的組合物和制劑，其維持活性聚合物的生物活性。
文檔編號A61P17/02GK102413833SQ201080018569
公開日2012年4月11日 申請日期2010年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月4日
發(fā)明者Z·哈贊 申請人:瑞吉納拉制藥公司