專利名稱：一種門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體注射液，具體涉及門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，及其制 法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
門冬氨酸鳥氨酸，是提供尿素和谷氨酰胺合成的必需物質(zhì)。谷氨酰胺是氨的解毒 產(chǎn)物，同時(shí)也是氨的儲存及運(yùn)輸形式；在生理和病理?xiàng)l件下，尿素的合成及谷氨酰胺的合成 會受到鳥氨酸、門冬氨酸和其他二羧基化合物的影響。鳥氨酸幾乎涉及尿素循環(huán)的活化和 氨的解毒全過程。在此過程中形成精氨酸，繼而分裂出尿素形成鳥氨酸。門冬氨酸參與肝 細(xì)胞內(nèi)核酸的合成，以利于修復(fù)被損傷的肝細(xì)胞。另外，由于門冬氨酸對肝細(xì)胞內(nèi)三羧酸循 環(huán)代謝過程的間接促進(jìn)作用，促進(jìn)了肝細(xì)胞內(nèi)的能量生成，使得被拐傷的肝細(xì)胞的各項(xiàng)功 能得以恢復(fù)。臨床上適用于治療因急、慢性肝病如肝硬化、脂肪肝和肝炎所致的高血氨癥， 特別適用于因肝臟疾患引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的解除及肝昏迷的搶救。另外，門冬氨酸鳥氨酸能夠改善人體內(nèi)支鏈氨基酸與芳香族氨基酸的正向比例， 防止酚類和有毒物質(zhì)在體內(nèi)的蓄積，避免酚類及芳香族氨基酸在人腦形成假性神經(jīng)遞質(zhì)， 使人體代謝產(chǎn)生的有毒的芳香族氨基酸比例明顯降低，維護(hù)了體內(nèi)正常氨基酸的平衡和谷 氨酸水平的平衡，避免了這一系列生理平衡被打破導(dǎo)致的水電解質(zhì)紊亂引起對人體器官的 多種損害。目前已有門冬氨酸鳥氨酸注射液和凍干粉針劑上市，但產(chǎn)品質(zhì)量很不穩(wěn)定，不能 達(dá)到有效期的質(zhì)量要求。在中國專利CN1679610A公開了一種復(fù)方門冬氨酸鳥氨酸藥物組 合物的制備方法，并沒有采取特殊的方法保護(hù)，而是常用的生產(chǎn)工藝，制備的制劑穩(wěn)定性較 差，長期放置變質(zhì)，影響了藥品質(zhì)量。針對目前的門冬氨酸鳥氨酸溶液長期放置易變質(zhì)，穩(wěn)定性差的問題，本發(fā)明人經(jīng) 過長期認(rèn)真的研究發(fā)現(xiàn)，通過PH值梯度法將門冬氨酸鳥氨酸用脂質(zhì)體進(jìn)行包裹，解決了上 述存在的問題，獲得了穩(wěn)定性非常好的注射劑，從而完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其包括活性成分門冬 氨酸鳥氨酸、二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑，各組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸 鳥氨酸ι份；二棕櫚酰磷脂酰甘油3-20份；膽固醇1. 8-12份；抗氧劑0. 05-0. 2份。作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，所述組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸鳥氨酸 1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油5-13份；膽固醇2. 4-6份；抗氧劑0. 08-0. 1份。在本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸鳥 氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油3份；膽固醇1. 8份；抗氧劑0. 05份。在本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸鳥 氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油5份；膽固醇2. 4份；抗氧劑0. 08份。
在本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸鳥 氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油13份；膽固醇6份；抗氧劑0. 1份。在本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組分的重量份數(shù)比例為門冬氨酸鳥 氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油20份；膽固醇12份；抗氧劑0. 2份。在本發(fā)明中，所述抗氧劑選自亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合 亞硫酸氫鈉、維生素E、抗壞血酸棕櫚酸酯、叔丁基對羥基茴香醚中的一種，優(yōu)選為叔丁基對 羥基茴香醚。在本發(fā)明所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液中，其還可以包括藥學(xué)上可接受的 載體，比如如滲透壓調(diào)節(jié)劑和緩沖溶液。滲透壓調(diào)節(jié)劑用量為1.6-25份，緩沖溶液用量為 12-20份。其中，滲透壓調(diào)節(jié)劑的用量為使能夠調(diào)節(jié)藥液(所述注射液)和血漿具有相同 滲透壓的溶液，不會引起血象的任何異常變化。本發(fā)明中的滲透壓調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、葡萄 糖、甘露醇、山梨醇、甘油、木糖醇等中的一種，優(yōu)選為甘油。其中，緩沖溶液選自PH值為5. 6 的磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種， 優(yōu)選為醋酸_醋酸鈉緩沖溶液。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種本發(fā)明所述門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的 制備方法，其包括步驟(1)將處方量的二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑溶于有機(jī)溶劑中，緩慢注入 硫酸銨溶液，加熱攪拌蒸除有機(jī)溶劑，超聲5-lOmin，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于滲透壓調(diào)節(jié)劑水溶液中，除 去脂質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析好的空白脂質(zhì)體在55-60°C保溫，在攪拌下緩慢加入門冬氨酸鳥氨酸 的水溶液，繼續(xù)保溫20-30min，加入緩沖溶液，混勻，即得門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。在上述制備方法中，滲透壓調(diào)節(jié)劑水溶液的濃度可以為0. 9-20% (g/ml)，門冬氨 酸鳥氨酸的水溶液的濃度為10% (g/ml)。在上述制備方法中，有機(jī)溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、異丙醇、丙 酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一種或幾種，優(yōu)選為體積比為4 1的乙醚和正己烷混合溶 劑。有機(jī)溶劑的用量以完全溶解二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑為宜，具體用量可以 由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)結(jié)合常規(guī)技術(shù)確定，優(yōu)選為二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽 固醇和抗氧劑三者之和與有機(jī)溶劑的重量體積比例為1 5-10 (g/ml)。在上述制備方法中，硫酸銨溶液的濃度為0.01-0. 2mol/L，用量為有機(jī)溶劑的 0. 5-1倍(ν/ν)。其中將透析袋置于滲透壓調(diào)節(jié)劑水溶液中的透析時(shí)間可以為18-22小時(shí)。在本文中，如果沒有特別地說明，含量或用量都以重量份計(jì)；如果沒有特別地說 明，所采用的裝置、儀器、原料、物質(zhì)、用量、方法、時(shí)間、溫度及其它條件等都為本領(lǐng)域眾所 周知的，或者是本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本申請的描述結(jié)合現(xiàn)有技術(shù)可以獲得的。本發(fā)明提供的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)考察，在高溫40°C、 相對濕度75% 士 5%條件下加速試驗(yàn)6個(gè)月，各項(xiàng)檢測指標(biāo)沒有明顯變化。本發(fā)明提供的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、異常毒性試驗(yàn) 和熱源檢查，均符合規(guī)定，安全性得到證明。本發(fā)明提供的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有意想不到的效果，主要優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)在提高了門冬氨酸鳥氨酸的穩(wěn)定性，延長了有效期，保障了產(chǎn)品質(zhì)量； 脂質(zhì)體載體二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇在體內(nèi)可降解，提高了生物利用度，減少了毒副作 用；生產(chǎn)工藝簡單，易操作，成本低，產(chǎn)率高，適合于規(guī)模化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。實(shí)施例1門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制備處方(100瓶)組分門冬氨酸鳥氨酸二棕櫚酰磷脂酰甘油膽固醇叔丁基對羥基茴香醚甘油制備工藝(1)將150g 二棕櫚酰磷脂酰甘油、90g膽固醇和2. 5g叔丁基對羥基茴香醚溶于 1300ml體積比為4 1的乙醚和正己烷混合溶劑中，攪拌下緩慢注入0. Olmol/L硫酸銨溶 液1300ml，加熱攪拌蒸除混合溶劑，置冰浴中超聲lOmin，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于含80g甘油的溶液2000ml中 透析20小時(shí)，除去脂質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析好的空白脂質(zhì)體在60°C保溫，在攪拌下緩慢加入含50g門冬氨酸鳥氨 酸的水溶液500ml，繼續(xù)保溫30min，加入pH值5. 6醋酸-醋酸鈉緩沖液600ml，混勻，即得 門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。實(shí)施例2門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制備處方(100瓶)組分門冬氨酸鳥氨酸二棕櫚酰磷脂酰甘油膽固醇甲醛合亞硫酸氫鈉山梨醇制備工藝(1)將500g 二棕櫚酰磷脂酰甘油、240g膽固醇和8g甲醛合亞硫酸氫鈉溶于 5000ml體積比為2 1的叔丁醇和丙酮混合溶劑中，攪拌下緩慢注入0.2mol/L硫酸銨溶液 2500ml，加熱攪拌蒸除混合溶劑，置冰浴中超聲5min，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于含350g山梨醇溶液3000ml 中透析22小時(shí)，除去脂質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析好的空白脂質(zhì)體55°C保溫，在攪拌下緩慢加入IOOg門冬氨酸鳥氨酸的 水溶液1000ml，繼續(xù)保溫20min，加入pH值5. 6枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液1500ml，混勻，即
含量 50g 150g 90g 2. 5g 80g
用量 IOOg 500g 240g 8g
350g得門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。實(shí)施例3門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制備處方(100瓶)組分用量門冬氨酸鳥氨酸50g二棕櫚酰磷脂酰甘油650g膽固醇300g抗壞血酸棕櫚酸酯 5g氯化鈉540g制備工藝(1)將650g 二棕櫚酰磷脂酰甘油、300g膽固醇和5g抗壞血酸棕櫚酸酯溶于 7000ml體積比為1 2的氯仿和正丁醇混合溶劑中，攪拌下緩慢注入0. lmol/L硫酸銨溶液 5000ml，加熱攪拌蒸除混合溶劑，置冰浴中超聲lOmin，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于含540g氯化鈉溶液6000ml 中透析18小時(shí)，除去脂質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析好的空白脂質(zhì)體60°C保溫，在攪拌下緩慢加入50g門冬氨酸鳥氨酸的 水溶液500ml，繼續(xù)保溫20min，加入pH值5. 6磷酸-磷酸氫二鈉緩沖液IOOOml，混勻，即得 門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。實(shí)施例4門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制備處方(100瓶)組分用量門冬氨酸鳥氨酸 IOOg二棕櫚酰磷脂酰甘油2000g膽固醇1200g維生素E20g葡萄糖2500g制備工藝(1)將2000g 二棕櫚酰磷脂酰甘油、1200g膽固醇和20g維生素E溶于20000ml 體積比為3 2的乙醇和正己烷混合溶劑中，攪拌下緩慢注入0.08mol/L硫酸銨溶液 12000ml，加熱攪拌蒸除混合溶劑，置冰浴中超聲5min，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于含2500g葡萄糖溶液 12500ml中透析19小時(shí)，除去脂質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析好的空白脂質(zhì)體60°C保溫，在攪拌下緩慢加入IOOg門冬氨酸鳥氨酸的 水溶液1000ml，繼續(xù)保溫20min，加入pH值5. 6硼酸-硼砂緩沖液1500ml，混勻，即得門冬 氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。試驗(yàn)例1脂質(zhì)體的考察將實(shí)施例1-4中所制備的樣品進(jìn)行質(zhì)量考察，主要進(jìn)行脂質(zhì)體形態(tài)觀察、粒徑測 定和脂質(zhì)體包封率測定。其中脂質(zhì)體形態(tài)和粒徑測定采用光學(xué)顯微鏡法和statistic^. 0統(tǒng)計(jì)軟件運(yùn)算觀察約2000粒求平均值。包封率測定采用柱層析分離結(jié)合分光光度法測定，該方法操作步 驟為用柱層析分離將藥物溶液中的脂質(zhì)體分離出來，利用表面活性劑破壞脂質(zhì)體雙分子 層，使藥物釋放出來后再以紫外分光光度法與標(biāo)準(zhǔn)品對照計(jì)算出包封率。各項(xiàng)結(jié)果統(tǒng)計(jì)如 下表1 表1脂質(zhì)體的考察
脂質(zhì)體形態(tài)平均粒徑(nm)包封率(％ )實(shí)施例1球形或橢圓形實(shí)體22086. 7實(shí)施例2球形或橢圓形實(shí)體18085. 8實(shí)施例3球形或橢圓形實(shí)體23087. 1實(shí)施例4球形或橢圓形實(shí)體25086. 3以上結(jié)果充分說明了本發(fā)明實(shí)施例1-4制備的脂質(zhì)體效果很好，形態(tài)規(guī)則，粒徑 大小均一，包封率較高，證明了本發(fā)明的實(shí)際可行性。試驗(yàn)例2穩(wěn)定性考察將以上各實(shí)施例制備的樣品與上市的門冬氨酸鳥氨酸注射液(德國麥?zhǔn)洗笏帍S 公司生產(chǎn)，批號0807071586-1)和門冬氨酸鳥氨酸粉針劑(武漢啟瑞藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批 號20090106)在高溫40°C、相對濕度75% 士5%條件下6個(gè)月，進(jìn)行加速試驗(yàn)考察，結(jié)果見表2。表2加速試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
一種門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于其包括活性成分門冬氨酸鳥氨酸、二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于各組分的重量份 數(shù)比例為門冬氨酸鳥氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油3-20份；膽固醇1. 8-12份；抗氧劑 0. 05-0. 2 份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于各組分的重量份 數(shù)比例為門冬氨酸鳥氨酸1份；二棕櫚酰磷脂酰甘油5-13份；膽固醇2. 4-6份；抗氧劑 0. 08-0. 1 份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于所述 抗氧劑選自亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亞硫酸氫鈉、維生素E、抗 壞血酸棕櫚酸酯、叔丁基對羥基茴香醚中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于其還 包括滲透壓調(diào)節(jié)劑和緩沖溶液，滲透壓調(diào)節(jié)劑用量為1. 6-25份，緩沖溶液用量為12-20份。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于所述滲透壓調(diào)節(jié) 劑選自氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘油、木糖醇中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，其特征在于所述緩沖溶液選 自pH值為5. 6的磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩 沖液中的一種。
8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液的制備方法，其包括步驟(1)將處方量的二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑溶于有機(jī)溶劑中，緩慢注入硫酸 銨溶液，加熱攪拌蒸除有機(jī)溶劑，超聲5-lOmin，得空白脂質(zhì)體；(2)將空白脂質(zhì)體置于透析袋中，封口，將透析袋置于滲透壓調(diào)節(jié)劑水溶液中，除去脂 質(zhì)體外相中的硫酸銨；(3)將透析過的空白脂質(zhì)體在55-60°C保溫，在攪拌下緩慢加入門冬氨酸鳥氨酸的水 溶液，繼續(xù)保溫20-30min，加入緩沖溶液，混勻，即得門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧 劑三者與有機(jī)溶劑的重量體積比例為1 5-10(g/ml)；硫酸銨溶液的濃度為0.01-0. 2mol/ L，用量為有機(jī)溶劑的0. 5-1倍。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于有機(jī)溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁 醇、正丁醇、異丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明描述了一種門冬氨酸鳥氨酸脂質(zhì)體注射液，所述注射液主要包括活性成分門冬氨酸鳥氨酸、二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇和抗氧劑，重量份數(shù)比例為1∶3-20∶1.8-12∶0.05-0.2，提高了門冬氨酸鳥氨酸的穩(wěn)定性，延長了有效期，保障了產(chǎn)品質(zhì)量；脂質(zhì)體載體二棕櫚酰磷脂酰甘油、膽固醇在體內(nèi)可降解，提高了生物利用度，減少了毒副作用；生產(chǎn)工藝簡單，易操作，成本低，產(chǎn)率高，適合于規(guī)?；a(chǎn)。
文檔編號A61K47/24GK101961315SQ201010277428
公開日2011年2月2日 申請日期2010年9月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月10日
發(fā)明者楊明貴 申請人:海南美蘭史克制藥有限公司