專利名稱：：一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑。
背景技術(shù)：
：蚯蚓，又稱地龍、曲蟮，環(huán)節(jié)動(dòng)物門寡毛綱陸生動(dòng)物。我國對(duì)蚯蚓的藥用歷史悠久，是一種傳統(tǒng)的中藥。全世界已知的蚯蚓種類有3000多種，分為水棲種類、陸棲種類以及少數(shù)寄生，可供養(yǎng)殖的陸棲蚯蚓種類只有十幾種。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展關(guān)于蚯蚓的藥理活性的研究也越來越多，但是主要還是集中在其纖溶活性方面，關(guān)于其他的藥理活性的研究還很少，而將提純后的蚯蚓蛋白制成外用凝膠劑用于燙傷治療的研究就更少。
發(fā)明內(nèi)容針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明對(duì)蚯蚓蛋白進(jìn)行樂分離純化，得到一種對(duì)燒燙傷具有良好的促進(jìn)愈合效果的蛋白，將其研制成水溶性凝膠制劑，并對(duì)其可能的促進(jìn)燒燙傷愈合作用的機(jī)理進(jìn)行了研究。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的—種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，包括以下組分蒸餾水，凝膠基質(zhì)，保濕劑，蚯蚓蛋白，其中，凝膠基質(zhì)的濃度為525g/L，優(yōu)選15g/L，保濕劑的濃度為50300g/L，優(yōu)選180g/L，蚯蚓蛋白的質(zhì)量濃度為0.23%，優(yōu)選1%。所述水溶性凝膠劑還包括防腐劑。所述防腐劑為尼泊金乙酯。所述凝膠基質(zhì)為卡波姆-940、海藻酸鹽、西黃蓍膠或明膠，優(yōu)選卡波姆-940。所述保濕劑為丙二醇或/和甘油(兩者之間，任意比例混合都可以)。所述蚯蚓蛋白為干蚯蚓經(jīng)分離提取所得蛋白，亦可采用酶解技術(shù)獲得，比如采用中國專利申請(qǐng)?zhí)枮?00910016682.4的發(fā)明專利中記載的方法制取。—種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑的制備方法，步驟如下1)將凝膠基質(zhì)撒入蒸餾水中密閉放置過夜，使其充分溶脹；2)在溶脹好的凝膠基質(zhì)溶液中加入保濕劑，混合均勻；3)在溶脹好的基質(zhì)溶液中加入防腐劑；4)攪拌均勻，加入pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH到68;5)加蒸餾水定容，攪拌均勻；6)加入蚯蚓蛋白，攪拌均勻，即得水溶性凝膠劑。所述步驟4)中，pH調(diào)節(jié)劑為三乙醇胺、乙二胺、月桂胺、碳酸氫鈉或氫氧化鈉。本發(fā)明的水溶性凝膠劑具有較高藥用價(jià)值，凝膠劑具有使創(chuàng)口與外界隔絕，防止細(xì)菌侵入傷口；吸收創(chuàng)面的多余滲出液，保持創(chuàng)面濕潤兼具水化吸收雙重功效，自主地濕化創(chuàng)面促進(jìn)肉芽生長和上皮再生；可以與創(chuàng)面充分接觸，特別適用于燙傷等不規(guī)則創(chuàng)口；此外，凝膠劑還具有緩釋作用、潤滑性、無剌激損傷，無局部毒副作用，冷卻止痛且價(jià)廉，可以避免換藥敷料粘連創(chuàng)面造成新的創(chuàng)面，增加患者順應(yīng)性。所以具有以上特點(diǎn)的凝膠劑是非常理想的應(yīng)用于燒燙傷的治療，也可以應(yīng)用于創(chuàng)傷愈合或開放傷口的炎癥治療，或應(yīng)用于其他各種疾病反應(yīng)的治療或輔助治療。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明實(shí)施例1:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將1.5g卡波姆-940撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的卡波姆溶液中加入丙二醇15g;3)在溶脹好的卡波姆溶液中加入甘油3g;4)在溶脹好的卡波姆溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入三乙醇胺5g;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白lg攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。實(shí)施例2:蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備與實(shí)施例1相比，其不同點(diǎn)在于步驟1)中采用殼聚糖為凝膠劑基質(zhì)；步驟2)至步驟7)同實(shí)施例1。實(shí)施例3:蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備與實(shí)施例1相比，其不同點(diǎn)在于步驟2)選擇PEG-400等多元醇為保濕劑；步驟1)、3)至步驟7)同實(shí)施例1。實(shí)施例4:蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備與實(shí)施例1相比，其不同點(diǎn)在于步驟1)至步驟2)同實(shí)施例1，步驟3)采用PEG-400等多元醇為保濕劑；步驟4)至步驟7)同實(shí)施例1。實(shí)施例5:蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備與實(shí)施例l相比，其不同點(diǎn)在于步驟l)至步驟3)同實(shí)施例1，步驟4)采用苯甲酸、山梨酸、為防腐劑；步驟5)至步驟7)同實(shí)施例l。實(shí)施例6:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備與實(shí)施例1相比，其不同點(diǎn)在于步驟1)至步驟4)同實(shí)施例1，步驟4)采用乙二胺、月桂胺、碳酸氫鈉、氫氧化鈉等進(jìn)行pH調(diào)節(jié)；步驟6)至步驟7)同實(shí)施例1。實(shí)施例7:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將2.5g明膠撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的明膠溶液中加入丙二醇20g;3)在溶脹好的明膠溶液中加入甘油10g;4)在溶脹好的明膠溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入乙二胺，調(diào)節(jié)pH到68;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白2.lg，攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。4實(shí)施例8:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將0.5g西黃蓍膠撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的西黃蓍膠溶液中加入丙二醇lg;3)在溶脹好的西黃蓍膠溶液中加入甘油4g;4)在溶脹好的西黃蓍膠液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入月桂胺，調(diào)節(jié)pH到68;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白0.5g，攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。實(shí)施例9:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將2.0g海藻酸鹽撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的海藻酸鹽溶液中加入丙二醇10g;3)在溶脹好的海藻酸鹽溶液中加入甘油5g;4)在溶脹好的海藻酸鹽溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入碳酸氫鈉，調(diào)節(jié)pH到68;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白2.5g，攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。實(shí)施例10:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將1.Og卡波姆-940撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的卡波姆溶液中加入丙二醇15g;3)在溶脹好的卡波姆溶液中加入甘油5g;4)在溶脹好的卡波姆溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入三乙醇胺，調(diào)節(jié)pH到68;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白3g，攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。實(shí)施例11:以蚯蚓蛋白為有效成分治療燒燙傷的水溶性凝膠制備步驟如下1)將1.5g明膠撒入70ml蒸餾水中密閉放置過夜使其充分溶脹；2)在溶脹好的明膠溶液中加入丙二醇5g;3)在溶脹好的明膠溶液中加入甘油15g;4)在溶脹好的明膠溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)攪拌均勻，加入三乙醇胺，調(diào)節(jié)pH到68;6)加蒸餾水至100ml，攪拌均勻即得凝膠劑；7)加蚯蚓蛋白1.3g，攪拌均勻即成水溶性凝膠蛋白。實(shí)驗(yàn)例1:含有蚯蚓蛋白的水溶性凝膠劑對(duì)大鼠二度燙傷的治療作用實(shí)驗(yàn)1.1試驗(yàn)材料1.1.1試劑與耗材[OOSS]大鼠白介素-6ELISA試劑盒(上海西唐生物科技有限公司)。大鼠腫瘤壞死因子ELISA試劑盒(上海西唐生物科技有限公司)。受試品依據(jù)實(shí)施例1方案制備的含有蚯蚓蛋白的水溶性凝膠制劑。對(duì)照品美寶濕潤燒傷膏(汕頭市美寶制藥有限公司)。[OO92]戊巴比妥鈉(上海西唐生物科技公司)。直徑3cm銅棒(lkg)。1.1.2動(dòng)物雄性Wistar大鼠(68周，210280g)40只，由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證編號(hào)SCXK(魯)-20030004。1.2實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為模型組、陽性藥物組、高劑量組、中劑量組和低劑量組，每組8只大鼠。用2.5%戊巴比妥鈉對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔內(nèi)注射麻醉，然后將大鼠背部兩側(cè)脫毛。用2.5%戊巴比妥鈉對(duì)大鼠進(jìn)行麻醉，將銅棒放于沸水中煮5min，然后把銅棒放于拔完毛后的大鼠背部兩側(cè)分別燙傷4秒。含有蚯蚓蛋白的水溶性凝膠制劑每天3次對(duì)燙傷創(chuàng)面給藥。模型組以生理鹽水給藥，對(duì)照組以對(duì)照藥物給藥。取實(shí)驗(yàn)中各大鼠的燙傷皮膚，勻漿后分別用大鼠白介素-6ELISA試劑盒及大鼠腫瘤壞死因子ELISA試劑盒測(cè)定其TNF-a和IL-6含量，結(jié)果見表1和表2。1.3結(jié)果與討論表1:傷后3-7d大鼠皮膚IL-6水平(ng/g，(;±s)，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注同一時(shí)相點(diǎn)與模型組比較^P<0.05)，**(P<0.01)表2:傷后3-7d大鼠皮膚TNF-a水平(ng/g，(；土s),n=<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注同一時(shí)相點(diǎn)與模型組比較*(P<0.05)，**(P<0.01)炎癥因子含量測(cè)定結(jié)果顯示，含有蚯蚓蛋白的水溶性凝膠劑對(duì)炎癥因子具有良好的抑制作用，因此，該蛋白對(duì)于炎癥的治療應(yīng)具顯著效果。由上可見，本發(fā)明所制備的含有蚯蚓蛋白的水溶性凝膠劑具有顯著抗燒燙傷藥理學(xué)活性，可以用于治療燒燙傷，完全可以開發(fā)成為新型藥物。權(quán)利要求一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，其特征在于，包括以下組分蒸餾水，凝膠基質(zhì)，保濕劑，蚯蚓蛋白，其中，凝膠基質(zhì)的濃度為5～25g/L，保濕劑的濃度為50～300g/L，蚯蚓蛋白的質(zhì)量濃度為0.2～3％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，其特征在于還包括防腐劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，其特征在于所述防腐劑為尼泊金乙酯。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，其特征在于所述凝膠基質(zhì)為卡波姆-940、海藻酸鹽、西黃蓍膠或明膠。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，其特征在于所述保濕劑為丙二醇或/和甘油。6.權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑的制備方法，其特征在于步驟如下1)將凝膠基質(zhì)撒入蒸餾水中密閉放置過夜，使其充分溶脹；2)在溶脹好的凝膠基質(zhì)溶液中加入保濕劑，混合均勻；3)在溶脹好的基質(zhì)溶液中加入防腐劑；4)攪拌均勻，加入pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH到68;5)加蒸餾水，攪拌均勻；6)加入蚯蚓蛋白，攪拌均勻，即得水溶性凝膠劑。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑的制備方法，其特征在于所述步驟4)中，pH調(diào)節(jié)劑為三乙醇胺、乙二胺、月桂胺、碳酸氫鈉或氫氧化鈉。8.權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑在制備治療燒燙傷藥物中的應(yīng)用。9.權(quán)利要求1所述的一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療燒燙傷的水溶性凝膠劑，包括以下組分蒸餾水，凝膠基質(zhì)，保濕劑，蚯蚓蛋白，其中，凝膠基質(zhì)的濃度為5～25g/L，優(yōu)選15g/L，保濕劑的濃度為50～300g/L，優(yōu)選180g/L，蚯蚓蛋白的質(zhì)量濃度為0.2～3％，優(yōu)選1％。本發(fā)明的凝膠劑是非常理想的應(yīng)用于燒燙傷的治療，也可以應(yīng)用于創(chuàng)傷愈合或開放傷口的炎癥治療，或應(yīng)用于其他各種疾病反應(yīng)的治療或輔助治療。文檔編號(hào)A61P17/02GK101773662SQ20101011810公開日2010年7月14日申請(qǐng)日期2010年3月5日優(yōu)先權(quán)日2010年3月5日發(fā)明者吉愛國,李振,王允山申請(qǐng)人:山東大學(xué)威海分校;濟(jì)寧華能制藥廠