專利名稱：：一種補肝腎強筋骨的中藥復方制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種補肝腎強筋骨的中藥復方制劑，具體而言，本發(fā)明涉及一種補肝腎、強筋骨，生精補血、補中益氣的中藥復方制劑。
背景技術(shù)：
：肝和腎在生理上是互相資生密切聯(lián)系的。腎陰不足必然導致肝陰不足；肝陰不變，也會使腎陰虧損。故臨床上肝腎陰虛的癥狀常同時出現(xiàn)，如眩暈頭脹、視物不明、耳鳴、五心煩熱、遺精、失眠.腰膝酸痛、舌紅少津、脈弦細數(shù)或細而無力等?？梢娪谪氀?、神經(jīng)官能癥、耳源性眩暈、月經(jīng)不調(diào)等內(nèi)傷雜病或急性熱病的末期。腎虛是腎臟精氣陰陽不足所產(chǎn)生的諸如精神疲乏、頭暈耳鳴、健忘脫發(fā)、腰脊酸痛、遺精陽痿、男子不育、女子不孕、更年期綜合征等多種病證的一個綜合概念。關(guān)于腎虛形成的原因，可歸結(jié)為兩個方面，一為先天稟賦不足，二為后天因素引起。氣血兩虛中醫(yī)指氣虛與血虛同時存在的證候。證因多有久病不愈，氣血兩傷，或先有血需，而后導致氣虛。反之也是這樣，氣血虛衰或氣血失和，相互為用的功能減退，對經(jīng)脈、筋肉、皮膚的滋養(yǎng)作用減弱，從而產(chǎn)生肢體筋肉等運動失?；蚋杏X異常的病理狀態(tài)。其臨床表現(xiàn)在肢體皮膚上可見肢體麻木運動不便，甚則不用，肌膚干燥、瘙癢、欠溫，甚則肌膚甲錯等癥；內(nèi)科臨床表現(xiàn)為少氣懶言，神疲乏力，或有自汗，心悸多夢，頭暈目眩，面色淡白或面色萎黃，舌質(zhì)淡嫩，脈細無力。本申請人在研究傳統(tǒng)中草藥的基礎(chǔ)上，經(jīng)過多年的試驗，從廣西民間流傳的中藥驗方出發(fā)，將多種配方進行篩選，找到了對本病治療效果好的幾種藥物而完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種補肝腎、強筋骨，生精補血、補中益氣的中藥復方制劑。本發(fā)明專利所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的蛤蚧23-29、黃芪23-29、枸杞子23-29、肉灰蓉23-29、杜仲30_36、黃精(制)30-36、狗脊23-29、巴戟天18-22、白術(shù)18-22、白芍23-29、熟地黃35_43、茯苳23-29、山藥23-29、黨參30-36、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2250-2750;更確切地，是由下述重量配比的原料制成的蛤蚧26、黃芪26、枸杞子26、肉蓯蓉26、杜仲33、黃精(制)33、狗脊26、巴戟天20、白術(shù)20、白芍26、熟地黃39、茯苓26、山藥26、黨參33、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2500。以下是本發(fā)明中藥制劑的藥材來源蛤蚧為壁虎科動物蛤蚧GekkogeckoLinnaeus的干燥體。收載于《中國藥典》2005年版一部第240頁。黃芪為豆禾斗植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。收載于《中國藥典》2005年版一部第212頁。枸杞子為茄科植物寧夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果實。收載于《中國藥典》2005年版一部第174頁。肉灰蓉為列當科植物肉灰蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖。收載于《中國藥典》2005年版一部第90頁。杜仲為杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥樹皮。收載于《中國藥典》2005年版一部第114頁。黃精為百合科植物滇黃精Polygonatumkingia誦Coll.etHemsl.、黃精PolygonatumsibiricumRed.或多花黃精PolygonatumcyrtonemaHua的干燥豐艮莖。收載于《中國藥典》2005年版一部第215頁。狗脊為蚌殼蕨科植物金毛狗脊Cibotiumbarometz(L.)J.Sm.的干燥根莖。收載于《中國藥典》2005年版一部第155頁。巴戟天為茜草科植物巴戟天MorindaofficinalisHow的干燥根。收載于《中國藥典》2005年版一部第55頁。白術(shù)為菊科植物白術(shù)Atractylodesmacroc印halaKoidz.的干燥根莖。收載于《中國藥典》2005年版一部第68頁。白芍為毛茛科植物芍藥PaeonialactifloraPall.的干燥根。收載于《中國藥典》2005年版一部第68頁。熟地黃為玄參科植物地黃RehmanniaglutinosaLibosch.的新鮮或干燥塊莖的炮制加工品。收載于《中國藥典》2005年版一部第83頁。茯苳為多孔菌科真菌茯苳Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。收載于《中國藥典》2005年版一部第166頁。山藥為薯蕷科植物薯蕷Dioscoreao卯ositaThunb.的干燥根莖。收載于《中國藥典》2005年版一部第21頁。黨參為桔?？浦参稂h參Codonopsispilosula(Franch.)Nannf.、素花黨參CodonopsispilosulaNannf.Var.modesta(Nannf.)LT.Shen或川黨參CodonopsistangshenOliv.的干燥根。收載于《中國藥典》2005年版一部第199頁。雞為雉科動物家雞GallusgallusdomesticusBrisson的骨肉。去除毛、皮、內(nèi)臟。本發(fā)明中藥復方制劑的有效成分優(yōu)選如下制備稱取蛤蚧、黃芪、枸杞子、肉蓯蓉、杜仲、黃精(制)、狗脊、巴戟天、白術(shù)、白芍、熟地黃、茯苓、山藥、黨參、雞(除去毛皮、內(nèi)臟)。除雞外，其余蛤蚧等十四味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加水煎煮三次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至適量，另加蛋清(或黃豆粉)，攪勻，濾過，濾液濃縮后干燥，粉碎成浸膏粉。上述浸膏粉和/或藥學上可接受的載體一起制成各種常用劑型，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、茶劑、合劑、糖漿劑、散劑等《中國藥典》中收載的劑型。本發(fā)明的藥學上可接受的載體包括但不限于賦形劑，如淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氫鈣、硬脂酸鎂、微分硅膠等；崩解劑，如羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素等；潤滑劑，如硬脂酸鎂等；包糖衣材料，如蔗糖、滑石粉、明膠、色素、川蠟等；薄膜包衣材料，如胃溶型水、醇包衣材料等。4毒件試驗—、本發(fā)明專利大鼠長期毒性試驗1、摘要本發(fā)明專利實施例4給大鼠ig給藥12周，試驗結(jié)果表明，大劑量組(94.7g生藥/kg)、中劑量組(56.8g生藥/kg)、小劑量組(28.4gg生藥/kg)及對照組，體重增長正常，9個血液學指標，9個血液生化學指標、5個主要臟器系數(shù)均無明顯差異、13個主要臟器組織學檢查均未見明顯形態(tài)學改變，對生殖系統(tǒng)也無明顯毒性反應。2、試驗目的觀察連續(xù)給予本發(fā)明專利后，對機體產(chǎn)生的毒性反應的毒性反應及反應恢復程度，為臨床使用提供參考。3、受試藥物本發(fā)明專利實施例4，每ml相當生藥4.74g，廣西梧州制藥(集團)股份有限公司提供。臨用時加水配成所需濃度供用。4、動物SD大鼠，普通級，廣西中醫(yī)藥研究所動物室提供。動物進入實驗室后飼養(yǎng)一周供用。年齡6-7周齡體重110-140g性別雌雄各半每組動物數(shù)20只實驗室溫度、濕度室溫23±3"，濕度60±5%(空調(diào)房)。5、試驗方法劑量選擇參照成人臨床日劑量20m1/日，即0.95生藥/kg體重，設三個劑量組，一個對照組。大劑量組94.7g生藥/kg體重/日(相當成人日劑量的100倍);中劑量組56.8g生藥/kg體重/日(相當成人日劑量的60倍)；小劑量組28.4g生藥/kg體重/日(相當成人日劑量的30倍)。對照組常水給藥方法ig給藥，2ml/100g體重，每天一次，每周根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量。6、試驗周期連續(xù)給藥12周，為臨床用藥療程的3倍。7、觀察項目停藥次日，每組處死大鼠10只(其中雄性6只，雌性4只)，余下早6只及^4只與未給藥的同齡大鼠按6":早為2:1的比例搭配，合籠喂養(yǎng)21天后觀察子代繁殖情況。處死動物前用戊巴比妥鈉麻醉，腹主動脈取血，測定血液學9個指標，血液生化學9個指標，剖取5個主要臟器稱重，留13個主要臟器作病理組織學檢查。7.1—般癥狀每天給藥后觀察動物外觀和行為活動，食量變化以及毛色、糞便等。7.2體重變化每周稱一次體重，觀察藥物對體重的影響。7.3血液學檢查計數(shù)白細胞、紅細胞及血小板總數(shù)、網(wǎng)織紅細胞及白細胞分類、測定血紅蛋白值和凝血時間。7.4血液生化學檢查谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、總膽紅素、尿素氮、肌酐、總膽固醇、血糖等9項指標測定。7.5重要臟器肉眼觀察和組織學檢查7.5.1系統(tǒng)尸檢活殺動物主要臟器進行大體肉眼觀察。7.5.2臟器系數(shù)稱心、肝、脾、肺、腎、睪丸或卵巢重量，計算臟器系數(shù)。7.5.3留取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、胃、小腸、腦、睪丸、子宮、卵巢用10%福爾馬林液固定，常規(guī)制片，HE染色，鏡檢，觀察藥物對各臟器組織有無形態(tài)學病理變化。7.6生殖試驗記錄受孕鼠數(shù)、胎鼠數(shù)及死胎數(shù)，計算死胎率。8、試驗結(jié)果8.1—般狀態(tài)各組動物行為，食量以及毛色、糞便均正常。8.2體重變化各組動物體重增長正常，無明顯差異，見表1表1本發(fā)明專利實施例4給藥12周大鼠體重增長數(shù)(g)給藥時間(w)大劑量組中劑量組小劑量組對照組給藥前93.4±14.692.2±14.689.6±10.293.2±11.6140.2±11.744.9±12,146.2±6.951.0±11.4281.8±13.76.2±12.475.7±7.688.8±17.03121.8±17.298.2±19.7113.7±7.7113.4±22.04148.1±17.6122.6±31.5147,9±10.2136.6±26.35158.3±21.0131.6±36,2162.5±12.6148.2±32.16171..6±23.7140.6±38.7176.5±15.7158.8±38.57187.6±26.8161.6±43.0192.2±17.8181.5±50.08203.0±32.6180.9±48.0204.7±19.1201.3±54.99213.5±35.2199.0±52.9212.2±18.3221.3±65.810225.6±40.7218.5±51.8224.0±24.6227.4±67.911239.5±46.4241.5±47.7237.3±34.6233.6±63.612253.4±58.9256.5±51.7253.0±43.3242.2±62.78.3血液學檢查[OOSS]參考《醫(yī)學動物實驗方法》中動物常用指標的檢驗方法，測定藥后12周大鼠9個血液學指標，結(jié)果之間未發(fā)現(xiàn)明顯的異常，見表2。表2本發(fā)明專利實施例4給藥12周大鼠血常規(guī)檢查結(jié)果項目大劑量組中劑量組小劑量組對照組血紅蛋白(g/L)114.1±12.7107,2±9.1116.9±17.1105.5±13.8紅細胞總數(shù)(io7U7.2±0.77.2±0.27.1±0.47.2±0.2白細胞總數(shù)(io7U7.7±1.18.1±1.17.8±0.98.0±0.7白細胞分類中性(%)13.6±4.114.2±4.713.3±5.012.8±3.0白細胞分類淋巴(%)85.2±3.683.5±4.684.9±5.684.8±3.3白細胞分類單核(%)1.7±1.72.3±1.31.8±0.92.6±3.1網(wǎng)織紅細胞數(shù)tt)4.6±2.24.8±2.34.5±1.15.4±2.7血小板總數(shù)(io7u322±38327±35337±22332±33凝血時間(分)2.8±1.12.9土1,42.6±0.62.7±1.38.4血液生化學檢查檢查試劑和方法見表3表3血液生化分析的方法、試制、波長檢測項目方法試劑波長nm批號廠家谷丙轉(zhuǎn)氨酶賴氏法試劑盒520970807上海榮盛生物試劑廠谷草轉(zhuǎn)氨酶賴氏法試劑盒520970118上海榮盛生物試劑肌酐苦味酸試劑盒500970115上海榮盛生物試劑尿素氮酶法試劑盒500970102東甌生物工程試劑廠總膽固醇酵素法試劑盒505970103東甌生物工程試劑廠血糖酶法試劑盒505970124東甌生物工程試劑廠總膽紅素重氮法試劑盒540961003北京中生高技術(shù)公司總蛋白Biuret試劑盒540961216北京中生高技術(shù)公司白蛋白BCG法試劑盒620961128北京中生高技術(shù)公司結(jié)果給藥組與對照組比較，各項生化指標均無顯著性差異。見表4表4本發(fā)明專利實施例4給藥12周大鼠血液生化值<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>8.5病理學檢查8.5.1系統(tǒng)尸檢各組動物主要臟器外觀檢查均未見異常。8.5.2組織學檢査全部動物心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、胃、小腸、腦、睪丸、子宮、卵巢，均未發(fā)現(xiàn)因藥物所致的形態(tài)學改變(見所附組織學檢查報告)。8.5.3臟器系數(shù)給藥組臟器系數(shù)與對照組比較，無顯著性差異，見表5表5本發(fā)明專利實施例4給藥12周臟器系數(shù)值(g/l00g體重)項目大劑量組中劑量組小劑量組對照組心0.32±0.060.32±0.050.30±0.040.33±0.04肝3.59±0.853.07±0.323.27±0.373.39±0.46脾0.18±0,030.17±0.020.15±0.030.17±0.02肺0,64±0.150.64±0.160.60±0.080.78±0.26腎0.67±0.060.59±0.050.60±0.040.62±0.27子宮卵巢0.24±0.040,21±0.030.20±0.040.23±0.04睪丸1.02±0.080.98±0.120.96±0.051.05±0.098.5.4對子代的影響結(jié)果表明，本品對繁殖子代無明顯影響，與對照組比較，受孕鼠數(shù)、胎鼠數(shù)、死胎數(shù)經(jīng)X2檢驗差異無顯著性意義。見表6表6本發(fā)明專利實施例4對雌鼠繁殖子代的影響組別雌鼠數(shù)受孕鼠數(shù)胎鼠數(shù)死胎數(shù)死胎率(％)大劑量組6(3)5363600中劑量組6(3)6404000小劑量組6(3)6444400對照組6(3)6424200注括號內(nèi)數(shù)字為未給藥雄鼠數(shù)。表6-2本發(fā)明專利實施例4對雄鼠繁殖子代的影響組別雄鼠數(shù)受孕鼠數(shù)胎鼠數(shù)死胎數(shù)死胎率(％)注括號內(nèi)數(shù)字為未給藥雌鼠數(shù)9、試驗結(jié)論以本發(fā)明專利實施例494.7g生藥/kg、56.8g生藥/kg、28.4g生藥/kg給大鼠ig給藥12W，大鼠一般情況良好，體重增長正常，血液學、血液生化學檢查，主要臟器系數(shù)檢查均正常，主要臟器組織學檢查，未見本發(fā)明專利所致的病理變化，本發(fā)明專利對繁殖子代也無明顯影響。從以上結(jié)果可見，本發(fā)明專利毒性低，按臨床擬用劑量、療程、用法應用應是安全的。二、本發(fā)明專利急性毒性試驗報告1、摘要本發(fā)明專利實施例4分別給小鼠ig及ip給藥，觀察7天，未見動物出現(xiàn)毒副反應，動物體重增加，最大耐受量為568g生藥/kg及177.5g生藥/kg，分別為臨床擬用日劑量(0.95克/g/kg/d，，成人體重60kg計)的598倍及187倍。2、試驗目的觀察本發(fā)明專利不同給藥途徑對小鼠的急性毒性反應。3、受試藥物名稱本發(fā)明專利提供單位廣西梧州制藥(集團)股份有限公司含量每毫升相當生藥2.84g。配制方法將原藥液200ml隔水蒸發(fā)濃縮至80ml，即每ml相當生藥7.lg，供試驗用。溶劑蒸餾水4、動物來源種屬昆明種小鼠，廣西中醫(yī)藥研究所動物室提供。大劑量組4(8)85800中劑量組4(8)85800小劑量組4(8)74800對照組4(8)86000體重18-22g性別雌雄各半動物數(shù)根據(jù)預測試驗未見動物出現(xiàn)明顯毒性反應，因此，測定動物的最大耐受量。ig及ip給藥二組動物，每組20只。5、試驗方法給藥途徑兩種給藥途徑，ig(與臨床用藥途徑一致)及ip給藥。劑量ig給藥日總劑量為568g生藥/kg，ip給藥日總劑量為177.5g生藥/kg。給藥體積最大濃度7.lg生藥/ml，最大給藥體積ig給藥為0.4ml/10g體重，ip給藥為0.25ml/10g體重，12h內(nèi)給藥兩次。動物反應全部動物皮毛、呼吸、行為、食欲及大小便正常，體重增加，未出現(xiàn)毒性反應。最大耐受量本發(fā)明專利實施例4給小鼠ig及ip給藥，最大耐受量分別為568g生藥/kg及177.5g生藥/kg;臨床成人日總量為20ml(以60kg體重計)即0.95g生藥/kg，分別相當臨床日用量的598倍及187倍。6、結(jié)果給藥后兩組動物體重增加，未見毒性反應，見表7:表7本發(fā)明專利實施例4對小鼠體重的影響10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>7、結(jié)論本發(fā)明專利實施例4按最大濃度，最大體積給小鼠ig及ip給藥，動物未出現(xiàn)毒性反應，體重增加，本品ig給藥最大耐受量大于568g生藥/kg，為臨床擬用日劑量的598倍；ip給藥最大耐受量大于177.5g生藥/kg，為臨床擬用日用劑量的187倍。結(jié)果顯示，從急性毒性考慮，本品按臨床擬用劑量應用應是安全的。M日月斜l,，微l摘要本發(fā)明專利對去勢成年腎虛大鼠的陰莖外部剌激有興奮趨勢，能增加成年雄性大鼠的交配能力；對氫化可的松所致的陽虛證小鼠，能明顯減輕陽虛癥狀，使體重增加，體溫回升，自主活動和低溫下的應激能力明顯增強；能升高鹽酸苯肼引起的血虛證小鼠紅細胞總數(shù)，增強血虛證小鼠的自主活動能力和耐低溫的應激能力，表明本品具有溫補腎陽，補益氣血的功效。2試驗目的考察該藥對腎虛、陽虛、血虛動物的影B向，證明其是否具有溫補腎陽、補益氣血的功效。為臨床使用提供依據(jù)。3受試藥物名稱本發(fā)明專利提供單位廣西梧州制藥(集團)股份有限公司含量每毫升含藥材2.84g溶劑蒸餾水配制方法用蒸餾水配成所需的濃度4動物來源種屬NIH小鼠，普通級，廣西中醫(yī)藥研究所動物室供體重小鼠1823克，大鼠240340克。按試驗需要選用。性別按試驗需要各組動物數(shù)每組10只實驗室溫度、濕度室溫約25°C，相對濕度60±5%5主要試劑氫化可的松注射液100mgX20ml，上海信誼藥廠甲基睪酮片5mgX100片上海信誼藥廠0142]苯甲酸雌二醇注射液，上海第九制藥廠黃體酮注射液，上海第九制藥廠參茸補腎丸梧州市人民制藥廠復方阿膠漿山東阿膠漿(集團)股份有限公司生脈飲廣西醫(yī)藥研究所制藥廠鹽酸苯肼上海試劑三廠6試驗方法選擇根據(jù)本發(fā)明專利的主治功用及《中藥新藥研究指南》中補腎壯陽中藥的藥效學研究，選擇了壯陽試驗和交配試驗，應用去勢成年雄性大鼠進行試驗，觀察對陰莖勃起的影響；測定去勢大鼠血中睪丸素含量，并取附性腺器官稱重；對成年雄性大鼠性交功能的影響；觀察成年大鼠用藥后的交配試驗，記錄捕捉潛伏期、捕捉率、交配潛伏期、交配率。用氫化可的松藥物造成小鼠腎陽虛證、用鹽酸苯肼試劑造成小鼠血虛模型后再給予本發(fā)明專利，觀察動物體重、體溫、活動能力、應激能力等方面的影響，以此考察本發(fā)明專利溫補腎陽，益氣補血的功效。7試驗主要步驟7.1去勢成年腎虛大鼠陰莖勃起試驗SD雄性大鼠50只，取40只大鼠按常規(guī)手術(shù)切除兩側(cè)睪丸作為去勢大鼠，術(shù)后一周開始分組，分為給藥組ig本發(fā)明專利實施例428.Og/kg和11.2g/kg，陽性對照組ig甲基睪酮片25mg/kg，去勢大鼠對照組ig常水，每天一次，連續(xù)24天；另10只作為未去勢正常大鼠ig常水。末次藥后一小時，分別用剌激棒輕度剌激陰莖，以剌激開始至陰莖勃起為勃起潛伏期(秒)，剌激2分鐘未勃起者以2分鐘算。各組與去勢大鼠對照組比較，t或t'檢驗統(tǒng)計分析。7.2去勢成年大鼠附性腺器官的重量及血中睪丸素的含量去勢$大鼠40只，給藥組分別ig本發(fā)明專利實施例428.Og/kg和11.2g/kg，每天一次，連續(xù)30天。末次藥后24小時，眼球取血測定血清睪丸素，并立即斷頭處死，剖取包皮腺、精液囊和前列腺稱重，計算臟器重量系數(shù)(每100g體重相當于臟器mg數(shù))，用t或t'檢驗統(tǒng)計分析。7.3成年雄性大鼠交配能力的試驗取成年雄性大鼠40只，分為4組，給藥組分別ig本發(fā)明專利實施例428.0g/kg和11.2g/kg，每天一次，連續(xù)20天。另取40只雌性成年大鼠，按常規(guī)手術(shù)切除兩側(cè)卵巢，術(shù)后20天進行交配(期間不給受試物)。交配前48小時肌注苯甲酸雌二醇注射液2iig/只，連續(xù)2天。試驗當日肌注黃體酮注射液500iig/只，隔4小時與上述雄鼠進行交配。末次藥后雄性大鼠單獨放入55X35X20cm籠中，適應環(huán)境5分鐘，然后放入一只上述雌鼠，開始記錄下列指標①自雌鼠投入雄鼠第一次撲捉雌鼠的時間為撲捉潛伏期；②自雌鼠投入雄鼠發(fā)生第一次射精的時間為射精潛伏期；③記錄20分鐘雄鼠撲捉雌鼠次數(shù)及射精次數(shù)，并計算各組動物的撲捉率及射精率。用t或t'檢驗統(tǒng)計分析。7.4陽虛證小鼠體重、體溫、活動能力和應激能力的試驗選取150只NIH小鼠，雌雄各半，分三批，每批取50只小鼠分為5組，每組10只。第一組為正常對照組，ig蒸餾水，第2-5組每天皮下注射氫化可的松注射液50mg/kg，連續(xù)6天，造成陽虛證模型。其中第2組為陽虛證模型組，第3-5組陽虛證模型小鼠分別ig參茸補腎丸9g/kg及本發(fā)明專利實施例428.0g/kg和11.2g/kg。每天一次，連續(xù)7或10天。末次藥后一小時，第一批鼠測量各組小鼠體重、體溫、活動能力，第二批鼠測低溫下的應激能力，第三批測游泳的應激能力。各組數(shù)值與陽虛模型組比較，t或t'檢驗統(tǒng)計分析。7.5血虛小鼠體重、體溫、活動能力和應激能力的試驗選取NIH小鼠150只，雌雄各半，分三批，每批取50只小鼠分為5組，每組10只。第一組為正常對照組ig蒸餾水，第2-5組于1、4、8天皮下注射0.5%鹽酸苯肼液，第一次0.3ml/只，第2-3次O.15m1/只。其中第2組為血虛證模型組，第3_5組血虛證模型小鼠分別ig復方阿膠漿20ml/kg及本發(fā)明專利實施例428.Og/kg和11.2g/kg，每天一次，連續(xù)10天。末次藥后第一批鼠測量各組小鼠體重、體溫、活動能力，第二批鼠測低溫下的應激能力，第三批測游泳的應激能力。各組數(shù)值與血虛模型組比較，t或t'檢驗統(tǒng)計分析。8動物給藥后反應8.1定量觀察指標去勢成年腎虛大鼠陰莖勃起的時間、血清睪丸素的含量、附性腺器官的重量系數(shù)；成年雄性大鼠的性交能力的測定；陽虛小鼠和血虛小鼠的體重、體溫、活動能力和應激能力的試驗。8.2觀察時間7-30天，據(jù)試驗要求安排。9劑量設置二個劑量28.0g/kg、11.2g/kg，以每kg體重相當于本發(fā)明專利實施例4原藥材量表示。相當于臨床擬用量的29.5倍和11.8倍。10給藥方法動物試驗均采用灌胃(ig)給藥方法，模擬與臨床一致的口服液給藥途徑。給藥次數(shù)為連續(xù)多次，給藥時間7-30天，據(jù)試驗要求測定。ll試驗對照空白對照蒸餾水或常水陽性藥對照選擇功用明確和給藥途徑相似的已知藥物對照，如甲基睪酮片、參茸補腎丸、復方阿膠漿、生脈飲。12試驗結(jié)果12.1對去勢成年腎虛大鼠陰莖勃起功能的影響本發(fā)明專利實施例4ig給藥24天后，大劑量組能提高去勢大鼠陰莖對外部剌激的興奮性，動物陰莖勃起的潛伏期有縮短趨勢(P>0.05)，結(jié)果見表8.表8本發(fā)明專利對去勢成年大鼠陰莖勃起功能影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與對照組比較t或t'檢驗，*P<0.05，**P<0.01，下同12.2對去勢成年大鼠血清睪丸素的含量及附性腺器官重量的影響本發(fā)明專利實施例4ig給藥30天后，血清睪丸素(磁分離法)有所提高，但無統(tǒng)計學意義；包皮腺、前列腺與精液囊重量系數(shù)與去勢對照組比較無顯著性差異。結(jié)果見表9。表9本發(fā)明專利對去勢成年大鼠血清睪丸素及附性腺器官的影響組另lj劑量/kg.d體重(g)包皮腺系數(shù)前列腺+精液囊系數(shù)血清睪丸素(mg/100g體重)(mg/100g體重)(Hg/ml)去勢對照組(水)20mlx30311.5±26.345.9±8.088.7±13.518.5±8.0甲基睪酮片25mgx30294.9±25.169.9±10.8**300.1±76.8**35.4±18.2*本發(fā)明專利實施例428.0gx30325.7±34.639.6±12.977.6±11.319.3±11.9本發(fā)明專利實施例4U.2gx30310.9±44.840.8±9.886.0±14.422.9±15.312.3對成年雄性大鼠交配能力的影響本發(fā)明專利實施例4ig20天后雄鼠交配能力增強，表現(xiàn)為合籠后撲捉雌鼠潛伏期和射精潛伏期有所縮短，20分鐘內(nèi)完成撲捉及射精次數(shù)有所增多，但各組的數(shù)據(jù)離散大，經(jīng)t或t'檢驗，差異無顯著性意義。結(jié)果見表IO。表IO本發(fā)明專利對大鼠交配能力的影響撲捉射精組另lj劑量/kg.d潛伏期(秒)次數(shù)%潛伏期(秒)次數(shù)%正常對照組(水)20mlx20255±3310.9±1.240282±3690.3±0.540參茸補腎丸9gx20366±2494.1±4.4*80375±3530.8±1.060本發(fā)明專利實施例428.0gx20如±123.71.4±1.85040±1001.1±2.230本發(fā)明專利實施例411.2gx20171±2461.6±3.64370±1711.6±2.82812.4對陽虛證小鼠體重、體溫、活動能力和應激能力的影響氫化可的松注射液造成小鼠陽證模型后，動物出現(xiàn)明顯的陽虛現(xiàn)象，體重減輕，體溫下降，活動能力減弱。經(jīng)用本發(fā)明專利實施例4和參茸補腎丸后，小鼠的各項陽虛癥狀得到緩解，尤其是本發(fā)明專利實施例4的大劑量組小鼠的體重增長，體溫回升，延長低溫下的生存時間和負重(10%)游泳時間，經(jīng)t或t'檢驗，差異有顯著或非常顯著性意義。結(jié)果見表11。表ll本發(fā)明專利對陽虛證小鼠的影響14<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>12.5對血虛證小鼠體重、體溫、活動能力和應激能力的影響鹽酸苯肼造成小鼠溶血性血虛模型后，動物外周血紅細胞數(shù)減少，血紅蛋白含量降低，活動能力減弱，給予本發(fā)明專利實施例4后，血虛癥狀有所緩解，高劑量組RBC升高、活動能力、應激能力均增高，經(jīng)t或t'檢驗，差異有顯著性意義。結(jié)果見表12，表13。表12本發(fā)明專利對血虛證小鼠的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表13本發(fā)明專利對血虛證小鼠活動能力的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>13試驗結(jié)論本發(fā)明專利對去勢成年腎虛大鼠的陰莖勃起有興奮趨勢，表現(xiàn)為大劑量給藥組陰莖勃起潛伏期明顯短于去勢對照組，對附性腺器官重量系數(shù)無明顯影響，對成年雄性大鼠的交配能力有增強的趨勢，合籠后雄鼠捕捉雌鼠的潛伏期和射精潛伏期有所縮短，撲捉次數(shù)和射精次數(shù)有所增多。對氫化可的松注射液所致的陽虛證小鼠，本發(fā)明專利能明顯減少陽虛證癥狀，表現(xiàn)為小鼠體重明顯增加，體溫回升，低溫下的應激能力增強；對鹽酸苯肼引起的血虛證小鼠，本發(fā)明專利能升高小鼠Rbc總數(shù)，能增強小鼠的活動能力和耐低溫的應激能力。試驗結(jié)果顯示，本發(fā)明專利具有一定的溫補腎陽，補益氣血的功效。輛日月斜隱微傾摘要就本發(fā)明專利對300例氣血兩虛證和腎陽虛證患者進行了臨床驗證，結(jié)果證明本發(fā)明專利具有益氣補血、溫補腎陽之功效，可用于氣血不足所致的頭暈目眩、神疲乏力、氣短自汗、面色蒼白、心悸失眠等證以及腎陽虧虛所致的畏寒肢冷、腰膝酸痛、性功能低下、精神不振、氣短而喘、夜尿頻多等癥。本組300例，治療氣血兩虛證和腎陽虛證總有效率分別為82.0%和86.0%。對照組100例，其中治療氣血兩虛證和腎陽虛證總有效率分別為82.0%和80.0%。本發(fā)明專利安全可靠，無明顯不良反應和毒副作用?！⒁话阗Y料所納入之觀察對象均為中醫(yī)辯證屬于氣血兩虛證及腎陽虛證患者。共400例。治療組300例，其中氣血兩虛證和腎陽虛證患者各150例，使用本發(fā)明專利；對照組100例，其中氣血兩虛證和腎陽虛證患者各50例。兩癥證治療組和對照組性別、年齡分布以及病程、治療前病情比較見表14。表14、治療組與對照組性別、年齡、病程及治療前病情(積分)比較<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注兩組比較，P均〉0.05二、病例選擇(—)納入標準符合下列條件者之一均可納入觀察對象1、中醫(yī)辯證屬于氣血兩虛證患者。2、中醫(yī)辯證屬于腎陽虛證患者。(二)排除標準(包括不適應證和剔除標準)1、有明顯兼夾證或合并證者。2、年齡在18歲以下或65歲以上，妊娠或哺乳期婦女，過敏體質(zhì)及對本藥過敏者。3、合并有心血管、腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病，精神病患者。4、不符合納入標準，未按規(guī)定用藥，無法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。三、診斷標準(—)中醫(yī)診斷標準1、氣血兩虛證頭暈目眩、神疲乏力、氣短自汗、面色蒼白、心悸失眠、舌質(zhì)淡、苔白、脈細弱。2、腎陽虛證腰膝酸痛、畏寒肢冷，性功能低下，精神不振，氣短而喘、夜尿頻多、舌質(zhì)胖大，苔白、脈沉。(二)西醫(yī)診斷標準本證涉及的西醫(yī)疾病按該病最新的診斷標準執(zhí)行。觀察方法共觀察400例，隨機分為2組。其中治療組300例，使用本發(fā)明專利實施例4，每次10ml，每日2次，連用4周。對照組100例，氣血兩虛證者使用十全大補丸，溫開水沖服，一次一丸，一日2-3次，連用4周；腎陽虛證者使用桂附地黃丸(每丸重9克)，一次一丸，一日2次，連用4周。試驗前常規(guī)對受試者作詳細體格檢查，符合病例選擇標準者即納入觀察對象。服藥后每周隨診l次，詢問服藥情況，記錄病情及副作用。治療效果用記分法評定，各見證按無、輕、中、重分別記0、2、4、6分。療效判斷直接由觀察者作出。觀察期間不用其他類似藥物。結(jié)果—、療效評定標準(—)癥狀輕重程度分級標準及記分法見表15表15、癥狀輕重程度分級標準及記分法輕度(2分)中度(4分)重度(6)氣血兩虛證頭暈目眩偶爾或活動后出現(xiàn)間斷出現(xiàn)經(jīng)常出現(xiàn)神疲乏力稍倦，不耐勞動，可堅持較重，勉強可堅持四肢無力，不能堅輕體力勞動日常活動持曰?；顒託舛膛紶柍霈F(xiàn)間斷出現(xiàn)經(jīng)常出現(xiàn)自汗偶爾出現(xiàn)間斷出現(xiàn)經(jīng)常出現(xiàn)心悸偶爾或活動后出現(xiàn)坐立時出現(xiàn)平躺時出現(xiàn)失眠常覺醒或睡而不穩(wěn)，晨醒睡眠不足4小時，徹夜不眠，難以堅過早，不影響工作尚能堅持工作持正常工作面色少華少華無華蒼白或萎黃腎陽虛證腰膝酸痛偶爾發(fā)作反復發(fā)作持續(xù)發(fā)作不易緩解畏寒肢冷手足發(fā)冷四肢發(fā)冷全身發(fā)冷得溫不解性功能低下性欲降低偶有性要求陽萎或?qū)m寒不孕精神不振精神不振精神萎靡精神萎靡反應遲鈍氣短而喘勞作后氣促動則氣促安靜時即氣促夜尿頻多每晚2次每晚3—4次每晚5次以上(二)療效評定標準1、顯效氣血兩虛證或腎陽虛證的癥狀、體征明顯好轉(zhuǎn)或消失，見證積分減少61%以上。2、有效氣血兩虛證或腎陽虛證的癥狀、體征好轉(zhuǎn)，見證積分減少31-60%。3、無效達不到以上標準者。二、療效分析1、見證積分治療前后比較見表16表16、兩組見證積分治療前后比較(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注前后比較，P均〈0.012、表17治療組與對照組療效比較(Ridit分析)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>不良反應中醫(yī)辯證屬于氣血兩虛和腎陽虛證患者各150例，在觀察期間均未發(fā)生明顯不良反應和毒副作用。典型病例例1:劉某，女性，48歲。因失眠反復5年，加重2周就診，訴5年來經(jīng)常入睡困難，每晚睡眠僅約3小時，長期須服安定片才能入睡。常伴心悸不安，活動后頭暈、神疲乏力、氣短自汗，明顯影響工作與休息。近2周因過度勞累，癥狀明顯加重，晚上服2片安定片尚不易入睡，白天活動則覺頭暈目眩、神疲乏力、心悸不安、不能堅持工作。檢查面色少華，精神不振，心、肺、肝、脾未見異常，神經(jīng)系統(tǒng)檢查未見異常，舌質(zhì)淡、苔白，脈細弱。血常規(guī)HB102/L，RBC4.2X1012/L，WBC4.7X109/L。中醫(yī)診斷不寐(氣血兩虛證)，西醫(yī)診斷疑為腦動脈硬化。予以本發(fā)明專利治療，每次10ml，每日2次，連用4周。服藥l周后自覺頭暈及心悸減輕，睡眠好轉(zhuǎn)，每晚能入睡4小時，2周后頭暈目眩、神疲乏力、氣短自汗減輕，晚寐能入睡5小時，心悸不安明顯減輕，4周后睡眠恢復，正常每晚能入睡6小時。頭暈、乏力、氣短、心悸等癥消失。復查血常規(guī)HB107g/L，RBC4.4X1012/L，WBC4.8X109/L。療效評定顯效。例2:李某，男，44歲?；颊咭蜓偹嵬?年半來診。自述近3年半出現(xiàn)側(cè)腰部酸痛，勞累時加重，休息后減輕，常覺彎腰工作困難，腰部按摩或用拳叩擊腰部可使疼痛減輕。病情纏綿不愈，常畏寒肢冷，氣短乏力，夜多小便，約每晚3次。檢查生命體征正常，精神不振，面色蒼白，心肺肝脾未見異常，兩側(cè)骶棘肌緊張，壓痛，除腰腿活動未見異常，舌淡胖，苔白潤，脈沉細。腰骶部X線片未見異常征常。中醫(yī)診斷腰痛(腎陽虛證)，西醫(yī)診斷慢性腰肌勞損。予本發(fā)明專利治療，每次10ml，每日2次，連用4周。服藥l周后，腰痛及畏寒肢冷減輕，夜尿消失。2周后，腰痛進一步減輕，精神轉(zhuǎn)佳。至第3周后，畏寒肢冷、氣短乏力消失。4周后精神佳，腰痛酸痛消失，能做彎腰工作。療效評定顯效。討論1、本試驗選擇了300例患者進行觀察，并以十全大補丸和桂附地黃丸各50例作為陽性對照。兩病證治療組和對照組性別、年齡分布、病源構(gòu)成、病程以及治療前病情比較均無明顯差異(P>0.05，見表1)，提示資料具有可比性。2、本組所選擇的病例均為中醫(yī)辯證屬于氣血兩虛證和腎陽虛證患者，治療后氣血兩虛證患者頭暈目眩、神疲乏力、氣短自汗、面色蒼白、心悸失眠等證，以及腎陽虛證患者腰膝酸痛、畏寒肢冷、性功能低下、精神不振、氣短而喘、夜尿頻多等證均有明顯好轉(zhuǎn)(P<0.01，見表3)，提示本發(fā)明專利具有益氣補血、溫補腎陽之功效。3、治療組300例，治療氣血兩虛證或腎陽虛證總有效率分別為83.3%和86.0%。兩病證治療組和對照組療效均無明顯差異(P>0.05，見表4)，提示本發(fā)明專利治療氣血兩虛證療效和十全大補丸相似，治療腎陽虛證者療效和桂附地黃丸相似。4、本組300例臨床觀察，均未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應和毒副作用，提示本品使用安全可靠。結(jié)論本發(fā)明專利具有益氣補血、溫補腎陽之功效，可用于氣血不足所致的頭暈目眩、神疲乏力、氣短自汗、面色蒼白、心悸失眠等癥，以及腎陽虧虛所致的腰膝酸痛、畏寒肢冷、性功能低下、精神不振、氣短而喘、夜尿頻多等癥。本發(fā)明專利安全可靠，無明顯不良反應和毒副作用，可推廣臨床使用。具體實施例方式下面通過實施例進一步說明本發(fā)明。應該理解的是，本發(fā)明的實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。除非另有說明，本發(fā)明中的百分數(shù)是重量百分數(shù)，v/v表示溶液的體積比。實施例1:浸膏粉1的制備稱取蛤階26g、黃芪26g、枸杞子26g、肉灰蓉26g、杜仲33g、黃精(制)33g、狗脊26g、巴戟天20g、白術(shù)20g、白芍26g、熟地黃39g、茯苓26g、山藥26g、黨參33g、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2500g，除雞外，其余蛤蚧等十四味加IO倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加三倍水量煎煮三次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至1.02(80°C)，另加黃豆粉80g，攪勻，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.3(70°C)，干燥，粉碎成浸膏粉。實施例2:浸膏粉2的制備稱取蛤階23g、黃芪29g、枸杞子23g、肉灰蓉29g、杜仲30g、黃精(制)36g、狗脊23g、巴戟天22g、白術(shù)18g、白芍29g、熟地黃35g、茯苓29g、山藥23g、黨參36g、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2250g，除雞外，其余蛤蚧等十四味加8倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加四倍水量煎煮三次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至1.03(70°C)，另加蛋清800g，攪勻，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(75°C)，干燥，粉碎成浸膏粉。實施例3:浸膏粉3的制備稱取蛤階29g、黃芪23g、枸杞子29g、肉灰蓉23g、杜仲36g、黃精(制)30g、狗脊29g、巴戟天18g、白術(shù)22g、白芍23g、熟地黃43g、茯苓23g、山藥29g、黨參30g、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2750g，除雞外，其余蛤蚧等十四味加12倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加三倍水量煎煮三次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至1.01(75°C)，另加蛋清1000g，攪勻，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(70°C)，干燥，粉碎成浸膏粉。實施例4:本發(fā)明合劑的制備稱取蛤階26g、黃芪26g、枸杞子26g、肉灰蓉26g、杜仲33g、黃精(制)33g、狗脊26g、巴戟天20g、白術(shù)20g、白芍26g、熟地黃39g、茯苓26g、山藥26g、黨參33g、雞(除去毛皮內(nèi)臟)2500g，除雞外，其余蛤蚧等十四味加IO倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加三倍水量煎煮三次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至1.02(80°C)，另加黃豆粉90g，攪勻，濾過，濾液加水至11500ml，攪勻，灌封，滅菌，即得。實施例5:丸劑的制備將按實施例2制得的浸膏粉，取干浸膏1份，再拌入2080%蜜糖或水，制成丸劑。實施例6:顆粒劑、茶劑的制備將按實施例2制得的浸膏粉，取干浸膏1份，蔗糖2.4份，糊精1份，用70%乙醇制成軟材，過12-14目篩制成顆粒，干燥，即得顆粒劑；或壓制成塊狀，制成茶劑。實施例7:本發(fā)明膠囊劑的制備將按實施例1制得的浸膏粉，加入0.3%硬脂酸鎂，混勻，裝入膠囊，制成膠囊劑。實施例8:片劑的制備將按實施例1制得的浸膏粉1份，與淀粉一份制成顆粒干燥，加入羧甲基纖維素鈉0.3%、硬脂酸鎂0.3%，壓片，或直接包裝，即得本發(fā)明片劑。實施例9:糖漿劑的制備稱取蛤階27g、黃芪25g、枸杞子27g、肉灰蓉25g、杜仲34g、黃精(制)32g、狗脊27g、巴戟天19g、白術(shù)21g、白芍25g、熟地黃41g、茯苓25g、山藥27g、黨參32g、雞(除去毛皮及內(nèi)臟)2600g，除雞外，其余蛤蚧等十四味加11倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過；雞加四倍水量煎煮二次，每次2小時，合并煎液，放冷，除去油層，加入上述濾液，濃縮至1.01(80°C)，另加蛋清850g，攪勻，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15(70°C)，，再加入蔗糖4070%、山梨酸鉀0.11%、尼泊金乙酯0.10.3%合并，制成糖漿劑。權(quán)利要求一種補肝腎強筋骨的中藥復方制劑，它是由有效成分和/或藥學上可接受的載體組成，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成蛤蚧23-29、黃芪23-29、枸杞子23-29、肉蓯蓉23-29、杜仲30-36、制過的黃精30-36、狗脊23-29、巴戟天18-22、白術(shù)18-22、白芍23-29、熟地黃35-43、茯苓23-29、山藥23-29、黨參30-36、除去毛皮及內(nèi)臟的雞2250-2750。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥復方制劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成蛤蚧25-27、黃芪25-27、枸杞子25-27、肉蓯蓉25_27、杜仲30_36、制過的黃精30-36、狗脊25-27、巴戟天19-21、白術(shù)19-21、白芍25-27、熟地黃37-41、茯苳25-27、山藥25-27、黨參30-36、除去毛皮及內(nèi)臟的雞2250-2750。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的中藥復方制劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成蛤蚧26、黃芪26、枸杞子26、肉蓯蓉26、杜仲33、制過的黃精33、狗脊26、巴戟天20、白術(shù)20、白芍26、熟地黃39、茯苳26、山藥26、黨參33、除去毛皮及內(nèi)臟的雞2500。全文摘要本發(fā)明涉及一種補肝腎強筋骨的中藥復方制劑。本發(fā)明提供了一種補肝腎、強筋骨，生精補血、補中益氣的中藥復方制劑，適用于氣血兩虧，身體虛弱，精神不振，失眠健忘。本發(fā)明中藥復方制劑所含的有效成分是由下述原料制成蛤蚧、黃芪、枸杞子、肉蓯蓉、杜仲、制過的黃精、狗脊、巴戟天、白術(shù)、白芍、熟地黃、茯苓、山藥、黨參、除去毛皮及內(nèi)臟的雞。文檔編號A61P1/16GK101732566SQ201010103359公開日2010年6月16日申請日期2010年1月29日優(yōu)先權(quán)日2010年1月29日發(fā)明者許淑清申請人:廣西梧州制藥(集團)股份有限公司