一種治療肝炎的中藥復方制劑的制作方法

專利名稱：一種治療肝炎的中藥復方制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療肝炎的中藥復方制劑，具體而言，本發(fā)明涉及一種治療急性肝炎、慢性肝炎、遷延性肝炎的中藥復方制劑。

背景技術：
病毒性肝炎是指由一組肝炎病毒引起的以肝實質細胞變性、壞死為主要病變的一種常見傳染病。目前已證實引起病毒性肝炎的肝炎病毒有甲型(HAV)、乙型(HBV)、丙型(HCV)、丁型(HDV)、戊型(HEV)及庚型(HGV)六種。病毒性肝炎發(fā)病率較高且有不斷升高趨勢，流行地區(qū)廣泛，各種年齡及不同性別均可罹患，嚴重危害人類的健康。
根據(jù)臨床病理，病毒性肝炎分為普通型病毒肝炎和重型病毒性肝炎。其中，普通型病毒肝炎又可分為急性及慢性兩種類型。
急性肝炎最常見。臨床根據(jù)患者是否出現(xiàn)黃疸而分為黃疸型及無黃疸型兩種。我國以無黃疸型多見，且主要為乙型病毒性肝炎，一部分為丙型。黃疸型肝炎病變稍重，病程較短，多見于甲型、丁型和戊型肝炎。黃疸型與無黃疸型肝炎病理變化基本相同。出現(xiàn)的病理變化有肝臟腫大，質較軟，表面光滑。
慢性肝炎病毒性肝炎持續(xù)半年以上者即為慢性肝炎。病理變化為肝細胞變性、壞死，有碎片關壞死，纖維組織增生。
慢性遷延性肝炎是指病程超過半年，仍然遷延不愈，癥狀、體征和肝功能異常較輕，無自身免疫系統(tǒng)及其他系統(tǒng)表現(xiàn)的肝炎。病人經(jīng)常出現(xiàn)輕度乏力、肝區(qū)痛、食欲差、腹脹等，亦可無明顯癥狀。常伴有肝臟稍大，脾臟有時亦可腫大，但無進行性腫大。一般無黃疸，轉氨酶持續(xù)或間歇升高，血漿白蛋白與球蛋白數(shù)值基本正常，硫酸鋅濁度正常。病理基礎是脾腎氣虛，熱毒未盡。臨床多見肝郁脾虛、氣滯血瘀，治療關鍵是整體治療，調肝健脾，消補合用。
在傳統(tǒng)的中醫(yī)治肝方中，針對不同病證，一般使用以下中藥單方或組合加減治療，如逍遙散、柴胡疏肝湯、香砂六君子湯、茵陳蒿湯、附子理中湯、真武湯、滋水清肝飲、龍膽瀉肝湯、血府逐瘀湯、參苓自術散、平胃散等。目前市場上用于肝病輔助治療的西藥口服制劑有聯(lián)苯比酯、多烯磷脂酰膽堿、硫普羅寧等。重于利膽的西藥有熊去氧膽酸、苯丙醇、去氫膽酸。市場上的中藥方劑有龍膽瀉肝丸、參芪肝康膠囊、利膽片、日田青葉膽片、護肝軟膠囊等。在專利網(wǎng)站也檢索到一些治療肝炎的藥物，如從植物山豆根中提取治療肝炎用藥的方法(申請?zhí)?5100392)、一種治療肝炎的藥物(申請?zhí)?4118275)。
本申請人在研究傳統(tǒng)中草藥的基礎上，經(jīng)過多年的試驗，從廣西民間流傳的中藥驗方出發(fā)，利用本地藥材資源，將多種配方進行篩選，找到了對本病治療效果好的幾種藥物而完成了本發(fā)明。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種治療急性肝炎、慢性肝炎、遷延性肝炎的中藥復方制劑。
本發(fā)明專利所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的三七2070-2530、雞骨草3780-4620、廣金錢草1260-1540、人工牛黃198-242、豬膽粉11-15、蛇膽汁54-66； 更確切地，是由下述重量配比的原料制成的三七2300、雞骨草4200、廣金錢草1400、人工牛黃220、豬膽粉13、蛇膽汁60。
本發(fā)明專利對四氯化碳(CCl4)和D--半乳糖(D-Gal)誘發(fā)的大鼠和小鼠肝損害有保護作用；對α-萘異硫氰酸酯誘發(fā)小鼠黃疸和對雌激素誘發(fā)大鼠肝內(nèi)膽汁淤積有保護作用；有抑制二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹和抑制角叉菜膠誘發(fā)的大鼠足腫脹作用。并有提高小鼠的碳粒廓清速率、提高小鼠熱板痛閾和抑制醋酸誘發(fā)的小鼠扭體反應。提示本品具有保肝、利膽、抗炎、止痛和提高免疫功能的作用，可用于急、慢性肝炎，遷延性肝炎。
以下是本發(fā)明中藥制劑的藥材來源 (1)三七本品為五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.chen的干燥根。收載于《中國藥典》2005年版一部笫10頁。
(2)雞骨草本品為豆科植物毛相思子Abrus mollis Hance的干燥全株，收載于《中國藥典》2005年版一部笫134頁。
(3)廣金錢草本品為豆科植物廣金錢草DesmodumStyracifolium(Osb.)Merr.的干燥地上部分。收載于《中國藥典》2005年版一部笫30頁。
(4)人工牛黃本品為牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、?；撬?、膽紅素、膽固醇、微量元素等制成，收載于《中國藥典》2005年版一部笫4頁。
(5)豬膽粉本品為豬科動物豬Sus Scrofa dommestica Brisson膽汁的干燥品，收載于《中國藥典》2005年版一部笫222頁。
(6)蛇膽汁本品為眼鏡蛇科、游蛇科和蝰科動物多用蛇的膽汁，收載于《中國藥典》2005年版一部附錄第24頁。
本發(fā)明中藥復方制劑的有效成分優(yōu)選如下制備稱取三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉、蛇膽汁，其中三七粉碎成細粉；雞骨草、廣金錢草分別加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，干燥，粉碎，備用；將蛇膽汁、豬膽粉與適量的白酒及半量的三七細粉混勻，加入剩余的三七細粉、人工牛黃及上述雞骨草和廣金錢草的提取物，混勻，滅菌，過篩，得干膏粉。
本發(fā)明中藥復方制劑的有效成分亦可采取如下制備方法將三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉一起水煎2次，各3小時，合并煎液，過濾，得到所述原料的水提液，加入蛇膽汁，再加入乙醇至醇含量達到60％，沉淀，上清液回收乙醇，濃縮，干燥成干膏粉。
本發(fā)明中藥復方制劑的有效成分亦可采取如下制備方法將三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉、蛇膽汁加乙醇提取2次，各2小時，合并提取液。濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.3(70℃)的清膏，干燥并制成干膏粉。
本發(fā)明的中藥復方制劑可以將其有效成分和/或藥學上可接受的載體一起制成各種常用劑型，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、茶劑、合劑、糖漿劑、散劑等。
本發(fā)明的藥學上可接受的載體包括但不限于賦形劑，如淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氫鈣、硬脂酸鎂、微分硅膠等；崩解劑，如羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素等；潤滑劑，如硬脂酸鎂等；包糖衣材料，如蔗糖、滑石粉、明膠、色素、川蠟等；薄膜包衣材料，如胃溶型水、醇包衣材料等。
本發(fā)明的中藥復方制劑對治療肝炎具有很好的優(yōu)點和有益效果，這種優(yōu)點和有益效果可以通過以下臨床觀察證明。
臨床觀察結果 觀察目的考察本發(fā)明專利對急、慢性肝炎屬濕熱熏蒸證者的臨床療效及不良反應。
觀察對象與方法 一、病例選擇 (一)病原學診斷 甲型以下4項中具備任何1項者 1、急性期肝炎患者血清抗-HAVIgM陽性； 2、急性期及恢復期雙份血清抗-HAVIgG效價呈4倍以上增高； 3、急性早期糞便抗-HAV免疫電鏡檢查到HAV顆粒； 4、急性早期糞便中查到HAAg。
乙型以下4項中具備任何1項者 1、血清HbsAg陽性，或HbeAg陽性； 2、血清HbsAg陽性，但抗-HbcIgM陽性，或抗-HBs、或抗-HBc陽性； 3、血清HBV-DNA或DNA多聚酶陽性，或HbeAg、或抗Hbe陽性； 4、HBV感染指標不明顯或只有抗-HBc 1項指標陽性，而肝內(nèi)HbcAg、HbsAg或HBV-DNA陽性。
(二)臨床分型 1、急性黃疸型肝炎 (1)急性起病。
(2)具有不同程度的肝炎癥狀、體征及化驗異常。
(3)血清總膽紅質(TBIL)＞17.1μmol/L，尿膽紅素陽性。
(4)能排除其他原因引起的黃疸。
2、急性無黃疸型肝炎 (1)流行病學資料 密切接觸史指與已確診為病毒性肝炎病人(特別是急性期)同吃、同住、同生活或經(jīng)常接觸肝炎病毒污染物(如血液、糞便)而未采取防護措施者； 注射史指半年內(nèi)曾接受輸血、血液制品及消毒不嚴格的藥物注射、免疫接種、針刺治療等。
(2)癥狀指近期內(nèi)出現(xiàn)的、持續(xù)幾天以上的、無其他原因解釋的癥狀，如乏力、食欲減退、惡心、厭油膩、腹脹、溏便、肝區(qū)痛等。
(3)體征指肝腫大且動態(tài)性變化并有壓痛。部份病人可有脾腫大。
(4)化驗主要指ALT活力增高。
凡流行病學資料、癥狀、體征、化驗4項中3項明顯陽性(應包括化驗陽性)，或化驗及體征，或化驗及癥狀均明顯陽性，并排除其他疾病者可確診。
凡近期內(nèi)單項ALT增高，或僅有癥狀、體征，或僅有流行病學史及(2)、(3)兩項中1項，均為可疑者。如病原學診斷為陽性，且排除其他疾病，可以確診。
3、慢性遷延性肝炎有確診或可疑的急性肝炎病史(有時不明確)，病程超過半年尚未痊愈，病情較輕，可有肝區(qū)痛和乏力，可有ALT升高或輕度肝功能損害，而不夠診斷慢性活動性肝炎者。
4、慢性活動性肝炎 (1)癥狀既往有肝炎史(有時不明確)，目前有較明顯的肝炎癥狀，如乏力、食欲差、腹脹、溏便等。
(2)體征肝腫大，質地中等硬度以上，可黃疸、蜘蛛痣、肝病面容、肝掌或脾腫大，而排除其他原因者。
(3)實驗室檢查ALT活力反復或持續(xù)升高，或血漿白蛋白明顯降低，或白/球蛋白比例明顯異常，或丙種球蛋白明顯增高，或SB長期反復增高。
(4)肝外器官表現(xiàn)如關節(jié)炎、腎炎、脈管炎、皮疹或干燥綜合癥等，其中以腎炎較多見。以上4項中有3項為陽性，或(2)、(3)兩項為陽性，均可診斷為慢性活動性肝炎。
(三)濕熱熏蒸證中醫(yī)辨證標準 面目周身俱黃，呈現(xiàn)橘子色，煩熱脘悶，納呆嘔吐，口苦而干，脅痛腹脹，倦怠無力，或皮膚瘙癢，小便黃赤，大便秘結或溏，舌苔黃膩，脈弦滑數(shù)。
(四)肝功能損害診斷標準符合以下其中之一項者 1、谷丙轉氨酶(ALT)＞40u(Reitman法)。
2、血清總膽紅質(TBIL)＞17.1μmol/L。
3、直接膽紅質(DBIL)＞3.42μmol/L。
二、納入病例標準 1、納入標準符合以下標準者可納入觀察對象 (1)實驗室檢查表現(xiàn)肝功能有損害，谷丙轉氨酶(ALT)＞40u(Reitman法)。
(2)西醫(yī)診斷急、慢性乙型肝炎診斷標準。
(3)中醫(yī)診斷符合濕熱熏蒸證。
2、排除標準 (1)經(jīng)檢查證實由藥物中毒、乙醇中毒或惡性腫瘤所引起的肝功能損害者。
(2)年齡在18歲以下或65歲以上，妊娠或哺乳期婦女，對本藥過敏者。
(3)合并有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病，精神病患者。
(4)不符合納入標準，末按規(guī)定用藥，無法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。
三、中醫(yī)見證輕重程度分級標準及記分法見表1。
表1 中醫(yī)見證輕重程度分級標準及記分法 注舌脈具體描述，不記分。
四、觀察方法采用區(qū)組隨機、對照、非盲法觀察。
1、觀察對象共觀察800例。治療組400例，對照組400例。采用查隨機數(shù)字排列表法(數(shù)字排列表見附表)，按1∶1進行治療組與對照組的區(qū)組隨機分組。
(1)80例區(qū)組隨機分組方法 ①將80例受試者分成含量為10的8個區(qū)組，1～8為第一區(qū)組，9～16為第二區(qū)組，余類推。
②查隨機數(shù)字排列表，用抽簽法隨機抽取10行，每行取隨機數(shù)字1～8。
③按所取隨機數(shù)字出現(xiàn)的先后排列，凡奇數(shù)者(1、3、5、7)分配到A組，偶數(shù)者(2、4、6、8)分配到B組。
(2)60例區(qū)組隨機分組方法 ①將60例受試者分成含量為10的6個區(qū)組，1～6為第一區(qū)組，7～12為第二區(qū)組，余類推。
②查隨機數(shù)字排列表，用抽簽法隨機抽取10行，每行取隨機數(shù)字1～6。
③按所取隨機數(shù)字出現(xiàn)的先后排列，凡奇數(shù)者(1、3、5)分配到A組，偶數(shù)者(2、4、6)分配到B組。
2、用法用量 (1)治療組本發(fā)明專利實施例1，口服，每次2粒，每日3次。
(2)對照組雞骨草膠囊，口服，每次4粒，每日3次。
3、療程急性肝炎4周；慢性肝炎3個月。
4、觀察期間不用治療本病的其它類似藥物。
五、觀察指標 1、安全性檢查 (1)一般體檢項目。
(2)血、尿、便常規(guī)檢查。
(3)心、腎功能檢查。
2、療效性觀測 (1)相關癥狀與體征。
(2)肝功能的改變。
六、近期療效評定標準 1、急性肝炎 (1)有效主要癥候群消失；肝脾腫大消失或回縮，肝區(qū)無明顯壓痛和叩痛；肝功能檢查正常。見癥積分減少70％以上。
(2)無效未達有效標準。
2、慢性肝炎 (1)有效主要癥候群消失或基本消失；肝脾腫大穩(wěn)定不變，且無明顯壓痛及叩痛；肝功能檢查正?；蛟迪陆?0％以上。見癥積分減少70％以上。
(2)無效未達有效標準。
七、統(tǒng)計學處理等級資料用Ridit分析法，計數(shù)資料用X2檢驗，計量資料用t(U)檢驗。
結果 一、一般資料與可比性檢查 1、性別比較 表2 性別(例)比較(X2檢驗)
注*為治療組和對照組進行X2檢驗的X2值。
各病種治療組和對照組性別比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
2、年齡比較 表3 年齡(歲)比較(Ridit分析)

注*為治療組和對照組進行Ridit分析的U值。
各病種治療組和對照組年齡比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
3、病程比較 表4 急性甲肝病程(月)比較(Ridit分析)
注治療組和對照組病程比較，U＝0.34，P＞0.05，差異無顯著性意義。
表5 急性乙肝病程(月)比較(Ridit分析)
注治療組和對照組病程比較，U＝0.53，P＞0.05，差異無顯著性意義。
表6 慢遷肝病程(年)比較(Ridit分析)
注治療組和對照組病程比較，U＝0.89，P＞0.05，差異無顯著性意義。
表7 慢活肝病程(年)比較(Ridit分析)
注治療組和對照組病程比較，U＝0.29，P＞0.05，差異無顯著性意義。
4、治療前總積分比較 表8 治療前總積分(X±SD)比較(t檢驗)

注*為治療組與對照組進行t檢驗的U值。
各病種治療前總積分比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
上述治療前可比性檢測表明，兩組在性別、年齡、病程、治療前病情等比較，差異均無顯著性意義。提示影響兩組預后的主要因素具有均衡性。
二、療效比較 1、總療效比較 表9總療效比較(X2檢驗)
注*為治療組和對照組進行X2檢驗的X2值。
各病種治療組和對照組療效比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
2、臨床癥狀療效比較 表10急性甲肝患者(例)臨床癥狀療效比較(Ridit分析)

注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各見證均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表11 急性乙肝患者(例)臨床癥狀療效比較(Ridit分析)

注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各見證均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表12 慢遷肝患者(例)臨床癥狀療效比較(Ridit分析)
注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各見證均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表13 慢活肝患者(例)臨床癥狀療效比較(Ridit分析)

注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各見證均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
3、肝功能療效比較 表14 急性甲肝患者(例)治療后肝功能療效比較(Ridit分析)
注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各組肝功能均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表15 急性乙肝患者治療后肝功能療效比較(Ridit分析)

注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各組肝功能均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表16 慢遷肝患者治療后肝功能療效比較(Ridit分析)
注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各組肝功能均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
表17 慢活肝患者治療后肝功能療效比較(Ridit分析)
注*為治療組與對照組進行Ridit分析的U值。
治療后，各組肝功能均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，P均＞0.05，差異無顯著性意義。
三、安全性檢測 1、治療組與開放治療組 (1)血常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(2)尿常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(3)大便常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的275例治療后復查，均未見異常。
(4)心電圖治療前檢測了400例，其中在正常范圍的383例治療后復查，均未見異常。
(5)BCr治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(6)BUN治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
2、對照組 (1)血常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(2)尿常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(3)大便常規(guī)治療前檢測了400例，其中在正常范圍的250例治療后復查，均未見異常。
(4)心電圖治療前檢測了400例，其中在正常范圍的387例治療后復查，均未見異常。
(5)BCr治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
(6)BUN治療前檢測了400例，其中在正常范圍的400例治療后復查，均未見異常。
四、不良反應觀察兩組用藥后均未出現(xiàn)不良反應癥狀。
討論與結論 1、治療組治療濕熱熏蒸證急性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性遷延性肝炎和慢性活動性肝炎的臨床總有效率分別為89％、82％、76％和64％％；對照組治療濕熱熏蒸證急性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性遷延性肝炎和慢性活動性肝炎的臨床總有效率分別為95％、90％、70％和55％，兩組比較無顯著性差異。提示本發(fā)明專利實施例1對濕熱熏蒸證急慢性肝炎均有較好的臨床療效，與對照藥相似。
2、臨床癥狀療效結果表明，濕熱熏蒸證急性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性遷延性肝炎和慢性活動性肝炎各組病人治療后黃疸、脅痛、納呆、嘔惡、口苦而干、脘痞腹脹、倦怠乏力、便溏以及肝脾腫大等癥狀體征均有明顯改善。兩組比較，差異無顯著性意義。提示本發(fā)明專利實施例1可明顯改善濕熱熏蒸證急性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性遷延性肝炎和慢性活動性肝炎的臨床癥狀，與對照藥相似。
3、肝功能療效結果表明，治療后各組肝功能均有明顯好轉，P＜0.01；但治療組與對照組比較，差異無顯著性意義。提示本發(fā)明專利實施例1對濕熱熏蒸證性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性遷延性肝炎和慢性活動性肝炎患者均有明顯的保肝護肝作用，與對照藥相似。
4、本研究對400例治療組患者進行了血、尿、便常規(guī)檢查，心電圖和腎功能檢查，均未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應和毒副作用，提示本品臨床使用安全可靠。
長期毒性試驗 摘要 本發(fā)明專利實施例1分別以9.84、4.92、2.46g藥材/kg/d(分別相當于臨床日劑量0.082g藥材/kg/d的120倍、60倍、30倍)給大鼠灌胃給藥，連續(xù)6個月。動物的一般表現(xiàn)、血常規(guī)、肝腎功能、主要臟器組織學檢查，未發(fā)現(xiàn)明顯的毒性反應發(fā)生。
試驗目的 考察本品連續(xù)重復給藥對動物所產(chǎn)生的毒性反應及其嚴重程度，為臨床安全用藥提供參考。
受試藥物 本發(fā)明專利實施例1，每粒(0.3g)相當于總藥材0.82克，批號20030321，臨床用量為每次2粒，一日2-3次。臨用時以蒸餾水配制成所需濃度使用。各組用藥劑量以藥材g/kg體重表示。
試驗動物 Wistar大白鼠，普通級，廣西中醫(yī)學院實驗動物室提供(合格證號桂醫(yī)動字第11005號)，大鼠分性別分籠飼養(yǎng)，每籠5只，喂標準顆粒料，實驗室溫度23±3℃，相對濕度70±5％。
試驗方法 參照《中藥新藥研究技術要求》中長期毒性試驗方法進行。選取健康正常大白鼠160只，體重95±15g，隨機分為4個組，每組40只，雌雄各半。給藥方法模擬本品臨床給藥途徑(口服)，采用灌胃給藥，每天一次，每次20ml/kg體重。劑量設置分別為臨床日劑量(4.92g藥材/60kg)的120倍、60倍、30倍，相當于總藥材9.84g/kg、4.92g/kg、2.46g/kg三個劑量組和一個蒸餾水對照組。藥后每周稱一次體重，按體重調整給藥量。給藥期間觀察動物進食、活動、糞便等一般表現(xiàn)及毒性反應情況。給藥滿3個月時，每組處死12只(雌雄各6只)，末次藥后第二天，每組處死16只(雌雄各8只)大鼠，取血檢測血液學和血液生化學指標。用BC2000型全自動血細胞分析儀測血液學指標；用玻片法測定凝血時間；用日本奧林巴斯AU-400型全自動生化分析儀測定血液生化學指標。并取各鼠的心、肝、脾、肺、腎、子宮、卵巢、睪丸稱重，計算每100g體重相應臟器系數(shù)。同時留取各鼠的心、肝、脾、肺、腎、胃、小腸、腎上腺、卵巢、睪丸作病理組織學檢查。剩余大鼠停藥觀察2周按同樣方法檢測上述指標。各給藥組測定值與蒸餾水組比較，用t值法或校正t值法進行統(tǒng)計學分析，測定結果綜合評價藥物的安全性。
試驗周期長期毒性試驗時間為6個月(停藥后觀察2周)。
觀察指標1、一般表現(xiàn)進食、體重、外觀行為、活動、糞便等。
2、血液學指標紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白(HB)、血小板計數(shù)(PLT)、白細胞計數(shù)(WBC)及其分類淋巴細胞(LYM)、中間細胞(MID)、粒細胞(Gran)、凝血時間(CT)。
3、生化學指標谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(G)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、總膽固醇(CHOL)、堿性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU). 4、主要臟器肉眼和組織學檢查。
試驗結果 1、一般情況給藥期間，各組大鼠的外觀行為、四肢活動、進食正常；糞便性狀為棕褐色藥性便。給藥及停藥期間，大鼠體重增長正常，給藥組與正常對照組之間差異無顯著性意義。
2、血液學檢查給藥中期、給藥6個月和停藥2周，給藥組與正常對照組比較，各指標無顯著性差異。
3、血液生化學檢查給藥中期、給藥6個月及停藥2周，各檢測值給藥組與蒸餾水組之間差異無顯著性意義。
4、臟器系數(shù)檢查給藥中期、給藥6個月及停藥后2周，給藥組與正常對照組比較大鼠的臟器系數(shù)差異無顯著性意義 結語本發(fā)明專利實施例1以9.84g、4.92g及2.46g藥材/kg/d給大鼠灌胃給藥，連續(xù)6個月，大鼠的一般狀況良好，體重增長正常；血液學檢查、血液生化學檢查及臟器系數(shù)檢查，給藥組與對照組之間差異無顯著性意義。主要臟器的病理組織學檢查，未見因藥物毒性引起的明顯病理改變。以上結果提示按本發(fā)明專利實施例1按臨床擬用的劑量、途徑及療程使用應是安全的。
急性毒性試驗 試驗目的觀察本品最大濃度、最大允許給藥體積一日三次灌胃給藥后，動物的毒性反應情況，測定最大耐受量及相當臨床劑量的倍數(shù)。
受試藥物本發(fā)明專利實施例1，每粒相當于藥材0.82克，臨床用量以成人體重60公斤計，每公斤體重為0.082克生藥。實驗前用蒸餾水配成最大濃度(以灌胃針頭能抽吸為度)。
動物NIH小鼠體重19-22克，20只，雌雄各半，廣西中醫(yī)學院實驗動物室提供。合格證號桂醫(yī)動字第11004號。動物分性別飼養(yǎng)，每籠10只。喂標準顆粒飼料，實驗室溫度23±3℃，相對濕度70±5％。
試驗方法選用正常小鼠20只，禁食12小時后，將本品按每次40ml/kg體重灌胃給藥，一日三次。觀察記錄7天內(nèi)各動物的活動、糞便、進食和體重等情況變化。
試驗結果一目內(nèi)灌胃本品120ml/kg(相當藥材61.2g/kg)，7天內(nèi)小鼠的外觀、行為、四肢活動、皮膚、進食、排泄等均未見異常，無動物死亡，體重增長正常。
附表 本發(fā)明專利實施例1急性毒性試驗的體重變化情況(g，X±SD)
結論本發(fā)明專利實施例1給小鼠灌胃61.2g生藥/kg/日，相當于臨床日劑量(0.082g/kg)的746倍，未見小鼠死亡。提示，本品按臨床擬用劑量和用藥途徑應是安全的。

具體實施例方式 下面通過實施例進一步說明本發(fā)明。應該理解的是，本發(fā)明的實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。除非另有說明，本發(fā)明中的百分數(shù)是重量百分數(shù)，v/v表示溶液的體積比。
實施例1浸膏粉1的制備 稱取下列重量的原料三七2300g、雞骨草4200g、廣金錢草1400g、人工牛黃220g、豬膽粉13g、蛇膽汁60g。
三七粉碎成細粉；雞骨草、廣金錢草分別加8倍水煎煮二次，每次2.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.2-1.3(75℃)，干燥，粉碎，備用；將蛇膽汁、豬膽粉與40ml白酒及半量的三七細粉混勻，加入剩余的三七細粉、人工牛黃及上述雞骨草和廣金錢草的提取物，混勻，滅菌，過篩，得干浸膏粉。
實施例2浸膏粉2的制備 稱取下列重量的原料三七2185g、雞骨草4410g、廣金錢草1330g、人工牛黃231g、豬膽粉12g、蛇膽汁63g。
三七粉碎成細粉；雞骨草、廣金錢草分別加8倍水煎煮二次，每次2.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25-1.4(70℃)，干燥，粉碎，備用；將蛇膽汁、豬膽粉與50ml白酒及半量的三七細粉混勻，加入剩余的三七細粉、人工牛黃及上述雞骨草和廣金錢草的提取物，混勻，滅菌，過篩，得干浸膏粉。
實施例3浸膏粉3的制備 稱取下列重量的原料三七2415g、雞骨草3990g、廣金錢草1470g、人工牛黃209g、豬膽粉14g、蛇膽汁57g。
三七粉碎成細粉；雞骨草、廣金錢草分別加8倍水煎煮二次，每次2.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15-1.25(80℃)，干燥，粉碎，備用；將蛇膽汁、豬膽粉與45ml白酒及半量的三七細粉混勻，加入剩余的三七細粉、人工牛黃及上述雞骨草和廣金錢草的提取物，混勻，滅菌，過篩，得干浸膏粉。
實施例4本發(fā)明膠囊劑的制備 將按實施例1制得的浸膏粉，加入0.3％硬脂酸鎂，混勻，裝入膠囊，制成膠囊劑。
實施例5丸劑的制備 將按實施例2制得的浸膏粉，再拌入20～80％蜜糖或水，制成丸劑。
實施例6茶劑、顆粒劑的制備 稱取下列重量的原料三七2070g、雞骨草4620g、廣金錢草1260g、人工牛黃242g、豬膽粉11g、蛇膽汁66g。
將以上藥材加60％乙醇提取2次，各2小時，合并提取液。濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.25(70℃)的清膏，干燥并制成干膏粉。取干浸膏1份，蔗糖2.4份，糊精1份，用70％乙醇制成軟材，過12-14目篩制成顆粒，干燥，即得顆粒劑；或壓制成塊狀，制成茶劑。
實施例7合劑的制備 稱取下列重量的原料三七2250g、雞骨草4250g、廣金錢草1500g、人工牛黃200g、豬膽粉13g、蛇膽汁60g。
將三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉一起水煎2次，各3小時，合并煎液，過濾，得到所述原料的水提液，加入蛇膽汁，再加入乙醇至醇含量達到60％，沉淀，上清液回收乙醇并濃縮成相對密度為1.10～1.25(70℃)的清膏，再加入10～55％蔗糖、0.1～1％山梨酸鉀、0.1～0.3％尼泊金乙酯，混合均勻，即得到產(chǎn)品。
實施例8散劑的制備 將按實施例3制得的浸膏，按常規(guī)方法制成散劑，即得。
實施例9片劑的制備 將按實施例1制得的浸膏粉1份，與淀粉一份制成顆粒干燥，加入羧甲基纖維素鈉0.3％、硬脂酸鎂0.3％，壓片，即得本發(fā)明片劑。
實施例10糖漿劑的制備 稱取下列重量的原料三七2350g、雞骨草4150g、廣金錢草1300g、人工牛黃250g、豬膽粉13g、蛇膽汁60g。
將三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉一起水煎2次，各3小時，合并煎液，過濾，得到所述原料的水提液，加入蛇膽汁，再加入乙醇至醇含量達到60％，沉淀，上清液回收乙醇并濃縮成相對密度為1.10～1.25(70℃)的清膏，再加入蔗糖40～70％、山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％合并，制成糖漿劑。
權利要求
1.一種治療肝炎的中藥復方制劑，它是由有效成分和/或藥學上可接受的載體組成，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成三七2070-2530、雞骨草3780-4620、廣金錢草1260-1540、人工牛黃198-242、豬膽粉11-15、蛇膽汁54-66。
2.根據(jù)權利要求1所述的中藥復方制劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成三七2185-2415、雞骨草3990-4410、廣金錢草1330-1470、人工牛黃209-231、豬膽粉12-14、蛇膽汁57-63。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的中藥復方制劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成三七2300、雞骨草4200、廣金錢草1400、人工牛黃220、豬膽粉13、蛇膽汁60。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療肝炎的中藥復方制劑。本發(fā)明提供了一種治療急性肝炎、慢性肝炎、遷延性肝炎及由于肝炎引起的肝腫大的中藥復方制劑。本發(fā)明中藥復方制劑所含的有效成分是由下述原料制成三七、雞骨草、廣金錢草、人工牛黃、豬膽粉、蛇膽汁。
文檔編號A61K35/58GK101757102SQ20101010330
公開日2010年6月30日 申請日期2010年1月29日 優(yōu)先權日2010年1月29日
發(fā)明者許淑清 申請人:廣西梧州制藥(集團)股份有限公司