專利名稱：一種含頭孢美唑和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體是由頭孢美唑鈉和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑組成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
頭孢美唑是日本三共公司開發(fā)的第2代頭霉素類抗菌藥。對(duì)陰性桿菌產(chǎn)生的廣譜β-內(nèi)酰胺酶有較好的穩(wěn)定性，大腸桿菌、克雷伯肺炎桿菌、奇異變形桿菌、志賀菌屬、沙門菌屬等陰性桿菌對(duì)本品有較好的敏感性，金葡菌、A組溶血性鏈球菌、卡他布拉漢菌對(duì)本品高度敏感，對(duì)脆弱擬桿菌有較好的抗菌活性。臨床上用于敏感菌引起的呼吸系統(tǒng)感染、膽道感染、泌尿系感染、婦產(chǎn)科細(xì)菌感染、皮膚軟組織感染及手術(shù)后預(yù)防感染等。
頭孢美唑通過抑制增殖期細(xì)菌的細(xì)胞壁合成而發(fā)揮殺菌作用，頭孢美唑具有對(duì)人體細(xì)胞幾乎無毒性(各年齡段均可選用)，對(duì)β-內(nèi)酰胺酶包括超廣譜酶高度穩(wěn)定，對(duì)耐藥性強(qiáng)的產(chǎn)酶菌同樣具有極強(qiáng)的抗菌力，可有效突破血腦屏障(進(jìn)入炎癥腦脊液中殺菌)，頭孢美唑在代謝中92％以具有抗菌活性的原形隨尿排泄(對(duì)復(fù)雜性尿路感染適用)等特點(diǎn)。長期的臨床應(yīng)用不僅驗(yàn)證了頭孢美唑的安全性，而且證明了頭孢美唑獨(dú)特的抗菌優(yōu)勢，特別是在厭氧菌感染、耐藥性強(qiáng)的產(chǎn)酶菌感染，院內(nèi)感染的治療中，顯示了卓越的療效。由于本化合物在7-a位上有甲氧基，故對(duì)各種β-內(nèi)酰胺酶包括脆弱類桿菌所產(chǎn)生都有很強(qiáng)的耐受性和穩(wěn)定性，β-內(nèi)酰胺酶不能明顯水解本品，因此頭孢美唑被認(rèn)為是對(duì)β-內(nèi)酰胺酶最穩(wěn)定的頭霉素。這使本藥物在臨床中有較好的應(yīng)用前景，可適用于其他抗生素?zé)o效的嚴(yán)重感染病例中。在國內(nèi)外所進(jìn)行的大型臨床研究中，均未發(fā)現(xiàn)與本藥物治療相關(guān)的嚴(yán)重不良反應(yīng)。在中國和日本進(jìn)行的臨床研究中，不良反應(yīng)發(fā)生率均為2.1％，而在美國的研究中，不良反應(yīng)發(fā)生率也僅為8.78％。
但頭孢美唑的缺點(diǎn)是腸桿菌屬、假單胞菌屬、耐甲氧西林金葡菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌對(duì)本品不敏感或耐藥。近年的研究發(fā)現(xiàn)頭孢美唑?qū)SBLS高度穩(wěn)定，但對(duì)AmpC酶穩(wěn)定性差，產(chǎn)AmpC酶菌株對(duì)其多呈現(xiàn)耐藥(朱德妹等.頭孢美唑?qū)Ξa(chǎn)ESBLS腸桿菌科細(xì)菌的體外抗菌作用研究.中國感染與化療雜志.2009，9(1)1-9)。
AmpCβ-內(nèi)酰胺酶(簡稱AmpC酶)是由腸桿菌科細(xì)菌或和綠膿假單胞菌的染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)產(chǎn)生的一類β-內(nèi)酰胺酶，屬β-內(nèi)酰胺酶Ambler分子結(jié)構(gòu)分類法中的C類和Bush Jacoby Medeiros功能分類法中第一群，即作用于頭孢菌素、且不被克拉維酸所抑制的β-內(nèi)酰胺酶。故AmpC酶又稱作為頭孢菌素酶。AmpC酶按其產(chǎn)生的方式分為3類誘導(dǎo)高產(chǎn)酶、持續(xù)高產(chǎn)酶和持續(xù)低產(chǎn)酶。近年來，隨著β-內(nèi)酰胺類抗生素，尤其是頭孢菌素的廣泛應(yīng)用，產(chǎn)AmpC酶的革蘭陰性桿菌越來越多見，尤其是出現(xiàn)了(去阻遏)持續(xù)高產(chǎn)AmpC酶和質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶，導(dǎo)致耐藥菌株廣泛傳播和臨床對(duì)該類細(xì)菌感染的治療困難，已引起臨床的高度重視。
發(fā)明內(nèi)容
我們在研究中意外發(fā)現(xiàn)頭孢美唑鈉中加入特定的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑后，其治療抗菌譜及活性能得到較大提高，對(duì)一些原說明書中列出的對(duì)頭孢美唑鈉制劑具有抗性的菌株也有了很好的抗菌活性，所述β-內(nèi)酰胺酶抑制劑選自舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉中的一種，而單獨(dú)應(yīng)用時(shí)頭孢美唑鈉并沒有該作用。
基于上述發(fā)現(xiàn)，因此本發(fā)明的目的是提供一種以頭孢美唑和特定β-內(nèi)酰胺酶抑制劑為活性成分的藥物組合物；組合物協(xié)同作用，對(duì)AmpC酶具有很好的穩(wěn)定性，組合后使頭孢美唑藥物抗菌譜更廣，更有利于臨床治療。
本發(fā)明使用的頭孢美唑具體為頭孢美唑鈉。
本發(fā)明的另一目的是提供配制一種以頭孢美唑鈉和特定β-內(nèi)酰胺酶抑制劑為活性成分的藥物組合物的方法，所述β-內(nèi)酰胺酶抑制劑選自舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉中的一種。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 一種含頭孢美唑和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥物組合物是由頭孢美唑鈉1-8重量份和1重量份選自舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉中的一種組成。
所述的藥物組合物的藥物劑型是注射制劑，包括粉針劑及凍干粉針劑。
本發(fā)明藥物組合物的粉針劑及凍干粉針劑可以采用制劑的常規(guī)方法制備得到。
一種含頭孢美唑和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥物組合物的制備方法，其中凍干制劑包括以下步驟 (1)按配方量取頭孢美唑鈉1-8重量份和1重量份選自舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉； (2)無菌條件下將藥物、凍干劑溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
粉針劑的制備方法為在無菌條件下將藥物混合，分裝，即得。
組合物對(duì)產(chǎn)AmpC酶菌株的敏感性和穩(wěn)定性試驗(yàn) 1.材料與方法 1.1實(shí)驗(yàn)菌株收集臨床標(biāo)本中分離的陰溝腸桿菌100株，排除同一患者同一部位重復(fù)分離的菌株。其中來源于痰標(biāo)本50株，尿標(biāo)本28株，膿液15株，其他7株。
1.2藥物頭孢噻啶、頭孢美唑鈉、舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(8∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(4∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(2∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(1∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(8∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(4∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(2∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(1∶1)為抗菌藥物。
1.3AmpC酶制備及檢測用三維試驗(yàn)法檢測AmpC酶。將收集的80株陰溝腸桿菌，接種于普通血平皿上過夜培養(yǎng)；次日制成0.5麥?zhǔn)蠁挝痪?；?0μl菌液加入12ml蛋白胨水中，35℃200r/min孵育5h，離心20min，將沉淀反復(fù)凍融，加入1.5ml0.01M PBS液中混勻，14000r/min離心20min，棄沉淀，取上清液經(jīng)常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)陰性后，即為酶提取液，放置于-40℃冰箱中保存?zhèn)溆?。將E.coli ATCC25922接種于M2H瓊脂平皿上，取一30μg頭孢西丁紙片貼于平皿中心，使用消毒的手術(shù)刀片在距紙片邊緣5mm處放射性地切出3～4條狹縫，取40μl粗提酶液由里向外加入狹縫內(nèi)，將培養(yǎng)基35℃孵育過夜觀察結(jié)果。若觀察到狹縫與抑菌圈交接處出現(xiàn)擴(kuò)大的長菌區(qū)域，則為AmpC酶陽性株。
1.4ESBLs的檢測按照NCCLS 1999年推薦的紙片擴(kuò)散確證法進(jìn)行檢測。將AmpC陽性的菌株制成0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木海臃N于M2H瓊脂平板上，將頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸，頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸兩組紙片貼于平板上，35℃孵育過夜，當(dāng)任何一組藥物的抑菌環(huán)直徑差≥5mm時(shí)，判定為ESBLs陽性株。其中用肺炎克雷伯菌ATCC700603作為陽性對(duì)照，大腸埃希菌ATCC25922作為質(zhì)控菌。
1.5接合試驗(yàn)根據(jù)Bonnet方法進(jìn)行。供體菌為僅產(chǎn)AmpC酶菌株；受體菌為大腸埃希菌NK544，培養(yǎng)基為BHI肉湯和含有抗生素的中國藍(lán)平皿。
1.6藥物敏感試驗(yàn)采用Kirby2Bauer瓊脂擴(kuò)散法對(duì)產(chǎn)AmpC酶菌株和接合子進(jìn)行常藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按照NCCLS1999年標(biāo)準(zhǔn)判讀。用大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853標(biāo)準(zhǔn)菌株做質(zhì)控。
1.7相對(duì)水解率的測定以頭孢噻啶的水解率為100％，計(jì)算其他11種抗菌藥物或組合的相對(duì)水解率。頭孢噻啶、頭孢美唑鈉、舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(8∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(4∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(2∶1)、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(1∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(8∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(4∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(2∶1)、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(1∶1)為酶作用底物。底物終濃度為4mg/L，在3ml底物中加入20μl酶提取液，置于37℃孵箱中孵育18h測定抑菌環(huán)直徑，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算殘余抗生素的量。
2.結(jié)果 2.1產(chǎn)AmpC和ESBLs100株陰溝腸桿菌中。34株(34％)產(chǎn)AmpC酶，18株(18％)產(chǎn)ESBLs，13株(13％)同時(shí)產(chǎn)AmpC和ESBLs。34株AmpC陽性株中，接合成功者6株。即有6株菌的耐藥性成功地轉(zhuǎn)入受體菌。
2.2藥敏試驗(yàn)結(jié)果以AmpC陽性株頭孢噻啶(樣品1號(hào))的敏感率為0；頭孢美唑鈉(樣品2號(hào))、舒巴坦鈉(樣品3號(hào))、他唑巴坦鈉(樣品4號(hào))、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(8∶1)(樣品5號(hào))、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(4∶1)(樣品6號(hào))、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(2∶1)(樣品7號(hào))、頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉(1∶1)(樣品8號(hào))、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(8∶1)(樣品9號(hào))、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(4∶1)(樣品10號(hào))、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(2∶1)(樣品11號(hào))、頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉(1∶1)(樣品12號(hào))的敏感率依次為18.6％、43.5％、45.2％、86.8％、92.6％、95.7％、97.2％、87.1％、93.1％、96.0％、97.8％。頭孢美唑鈉(2號(hào))、舒巴坦鈉(3號(hào))、他唑巴坦鈉(4號(hào))單獨(dú)使用時(shí)對(duì)接合子的敏感性明顯下降，而頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉組合物組對(duì)接合子依然有很好的敏感性。見表1。
表1產(chǎn)AmpC菌株及接合子對(duì)抗菌藥物的敏感性(％)
2.3相對(duì)水解率結(jié)果頭孢美唑鈉、舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉單獨(dú)存在的相對(duì)水解率均為100％的菌株數(shù)分別為18、15、17株，而組合物組除4株菌的相對(duì)水解率在10％-20％外，其余菌株相對(duì)水解率均＜10％，顯示了組合物組對(duì)AmpC酶的穩(wěn)定性。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 在腸桿菌科細(xì)菌引起的醫(yī)院感染中，陰溝腸桿菌僅次于大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。但由于高產(chǎn)AmpC酶導(dǎo)致對(duì)多種抗生素耐藥，治療陰溝腸桿菌引起的感染是臨床面臨的巨大壓力，其耐藥性的迅速產(chǎn)生使原本有效的抗生素?zé)o效。
陰溝腸桿菌以高產(chǎn)AmpC酶為主，其次為ESBLs和同時(shí)產(chǎn)AmpC及ESBLs者。藥敏試驗(yàn)中6株接合子對(duì)單獨(dú)使用的抗菌藥物的耐藥性明顯增加。而本發(fā)明組合物對(duì)AmpC菌株及接合子的敏感性和水解穩(wěn)定性均很好，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明組合物具有比較好的協(xié)同作用，對(duì)產(chǎn)AmpC酶細(xì)菌的敏感性及穩(wěn)定性與單用頭孢美唑鈉、舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉比較有了預(yù)料之外的顯著提高。本申請(qǐng)的組合物可以有效解決目前上述頭孢美唑鈉、舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉單獨(dú)使用中耐藥性問題，提高臨床應(yīng)用效果。
制備實(shí)施例 實(shí)施例1凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉50g，甘露醇100g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉； 2)、將藥物、甘露醇溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例2凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉25g，甘露醇100g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉； 2)、將藥物、甘露醇溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例3凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉12.5g，葡萄糖120g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉； 2)、將藥物、葡萄糖溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例4凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉100g，甘露醇100g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和舒巴坦鈉； 2)、將藥物、甘露醇溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例5凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉50g，右旋糖酐80g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉； 2)、將藥物、右旋糖酐溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例6凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉25g，甘露醇100g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉； 2)、將藥物、甘露醇溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例7凍干粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉12.5g，山梨醇110g，pH調(diào)節(jié)劑適量，注射用水加至2000ml。
制備方法 1)、按配方量取頭孢美唑鈉和他唑巴坦鈉； 2)、將藥物、右旋糖酐溶于80％處方用水量的注射用水中，溶液經(jīng)0.22μm濾膜無菌過濾后，補(bǔ)足處方量注射用水，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例8無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉100g， 制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例9無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉50g， 制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例10無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉25g， 制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例11無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉20g， 制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例12無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉12.5g。
制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例13無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉20g。
制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例14無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉100g。
制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例15無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，他唑巴坦鈉50g。
制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
實(shí)施例16無菌粉針劑 組成頭孢美唑鈉100g，舒巴坦鈉25g。
制備方法將上述藥物在無菌條件下混合均勻，分裝，即得。
權(quán)利要求
1.一種含頭孢美唑和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥物組合物，其特征在于活性成分由頭孢美唑鈉和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑舒巴坦鈉或他唑巴坦鈉的一種組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于活性成分組成為頭孢美唑鈉1-8重量份、舒巴坦鈉或他唑巴坦鈉1重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其特征在于制備成注射制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中所述注射制劑為凍干制劑或粉針劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的組合物的制備方法，其特征在于采用凍干制劑的常規(guī)方法制備而成。
6.根據(jù)權(quán)利要求4的組合物的制備方法，其特征在于采用粉針制劑的常規(guī)方法制備而成。
全文摘要
本發(fā)明的一種含頭孢美唑和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥物組合物屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體是由頭孢美唑鈉1-8重量份和特定β-內(nèi)酰胺酶抑制劑1重量份組成的藥物組合物，所述β-內(nèi)酰胺酶抑制劑選自舒巴坦鈉、他唑巴坦鈉中的一種。本發(fā)明的藥物組合物能擴(kuò)大藥物頭孢美唑鈉的抗菌譜，降低細(xì)菌的耐藥性。
文檔編號(hào)A61P31/04GK101816791SQ201010103219
公開日2010年9月1日 申請(qǐng)日期2010年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月1日
發(fā)明者鄭飛雄 申請(qǐng)人:鄭飛雄