專利名稱：通過反義寡核苷酸來調(diào)制toll樣受體8表達(dá)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及Toll樣受體8 (TLR8)。具體而言，本發(fā)明涉及反義寡核苷酸及其在治療或預(yù)防與TLR8有關(guān)的或者可受益于調(diào)制TLR8表達(dá)的疾病中的用途，所述反義寡核苷酸與編碼TLR8的核酸特異性雜交，從而調(diào)制TLR8表達(dá)和活性。相關(guān)技術(shù)的概述Toll樣受體(TLR)存在于免疫系統(tǒng)的許多細(xì)胞上，而且已經(jīng)被證明涉及先天性免疫應(yīng)答(Hornung, V.等，(2002) J. Immunol. 168 :4531-4537)。TLR 是哺乳動物識別外來分子并發(fā)動對外來分子的免疫應(yīng)答的關(guān)鍵手段，而且還提供了聯(lián)系先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的(Akira, S φ (2001) Nature Immunol. 2 :675-680 ；Medzhitov, R. (2001) Nature Rev. Immunol. 1 :135-145)。在哺乳動物中，此家族由稱作TLRl至TLRll的至少11種蛋白質(zhì)組成，已知所述蛋白質(zhì)識別來自細(xì)菌、真菌、寄生物和病毒的病原體相關(guān)分子樣式(PAMP)，并誘導(dǎo)由許多轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。一些TLR位于細(xì)胞表面上以檢測胞外病原體并啟動對胞外病原體的應(yīng)答，而其它 TLR位于細(xì)胞內(nèi)部以檢測胞內(nèi)病原體并啟動對胞內(nèi)病原體的應(yīng)答。表1列出了各種TLR、 它們已知的激動劑和已知含有TLR的細(xì)胞類型(Diebold, S. S.等(2004) Science 303 1529-1531 ；Liew, F.等(2005)Nature5 :446-458 ;Hemmi H 等(2002)Nat Immunol 3 196-200 Jurk M等，O002)Nat Immunol 3 :499 ；Lee J等 O003)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100 :6646-6651) ； (Alexopoulou, L. (2001)Nature 413:732-738)。表 權(quán)利要求
1.靶向TLRSmRNA(SEQID NO :223)的長度為20至50個核苷酸的合成的反義寡核苷酸，其中所述反義寡核苷酸具有包含SEQ ID NO :26、46、53、84、85、91、102、116、131、143、 146、152、157、180、182、189或197的序列，且其中所述寡核苷酸與人TLR8特異性雜交，并且抑制人TLR8的表達(dá)。
2.權(quán)利要求1的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有至少一個核苷酸間聯(lián)接，其選自下組烴基膦酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯和甲基膦酸酯。
3.權(quán)利要求2的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有至少一個硫代磷酸酯核苷酸間聯(lián)接。
4.權(quán)利要求1的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸或其組合。
5.權(quán)利要求4的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一個2’-0_取代的核糖核苷酸。
6.一種組合物，其包含依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸和生理學(xué)可接受載體。
7.一種用于抑制TLR8表達(dá)的方法，該方法包括施用依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸。
8.一種用于抑制TLR8表達(dá)的方法，該方法包括施用依照權(quán)利要求6的組合物。
9.一種用于抑制哺乳動物中TLR8表達(dá)的方法，該方法包括對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸。
10.一種用于抑制哺乳動物中TLR8表達(dá)的方法，該方法包括對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
11.一種用于抑制哺乳動物中TLR8介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸。
12.一種用于抑制哺乳動物中TLR8介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
13.一種用于治療性處理患有由TLR8介導(dǎo)的疾病的哺乳動物的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸。
14.一種用于治療性處理患有由TLR8介導(dǎo)的疾病的哺乳動物的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
15.一種用于在患有由TLR8介導(dǎo)的疾病或病癥的哺乳動物中預(yù)防疾病或病癥的方法， 該方法包括以預(yù)防有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸。
16.一種用于在患有由TLR8介導(dǎo)的疾病或病癥的哺乳動物中預(yù)防疾病或病癥的方法， 該方法包括以預(yù)防有效量對所述哺乳動物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
17.一種用于下調(diào)TLR8表達(dá)從而阻止由可激活TLR8的化合物導(dǎo)致的不期望的TLR8介導(dǎo)性免疫刺激的方法，該方法包括將依照權(quán)利要求1-5中任一項的合成的反義寡核苷酸與一種或多種包含免疫刺激性基序的化合物組合施用，所述免疫刺激性基序若無所述反義寡核苷酸的存在則會激活TLR8介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。
18.一種用于下調(diào)TLR8表達(dá)從而阻止由可激活TLR8的化合物導(dǎo)致的不期望的TLR8介導(dǎo)性免疫刺激的方法，該方法包括將依照權(quán)利要求6的組合物與一種或多種包含免疫刺激性基序的化合物組合施用，所述免疫刺激性基序若無所述組合物的存在則會激活TLR8介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。
19.依照權(quán)利要求9-16中任一項的方法，其中所述哺乳動物是人。
20.依照權(quán)利要求13-16中任一項的方法，其中所述疾病選自癌癥、自身免疫性病癥、 氣道炎癥、炎性病癥、感染性疾病、瘧疾、萊姆病、眼部感染、結(jié)膜炎、皮膚病癥、銀屑病、硬皮病、心血管疾病、動脈粥樣硬化、慢性疲乏綜合征、結(jié)節(jié)病、移植排斥、變態(tài)反應(yīng)、哮喘或由病原體引起的疾病。
21.依照權(quán)利要求20的方法，其中所述自身免疫性病癥選自紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、I 型糖尿病、腸易激綜合征、克羅恩氏病(Chron’ s disease)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、感染性休克、 普禿、急性播散性腦脊髓炎、阿狄森氏綜合征、強直性脊柱炎、抗磷脂抗體綜合征、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、大皰性類天皰瘡、查加斯病(chagas disease)、慢性阻塞性肺病、腹部疾病、皮肌炎、子宮內(nèi)膜異位癥、肺出血腎炎綜合征、格雷夫斯氏病、格-巴二氏綜合征、橋本氏病、化膿性汗腺炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、間質(zhì)性膀胱炎、硬斑病、重癥肌無力、發(fā)作性睡病、神經(jīng)性肌強直、天皰瘡、惡性貧血、多肌炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、精神分裂癥、斯耶格倫氏綜合征、顳動脈炎(“巨細(xì)胞動脈炎”)、血管炎、白癜風(fēng)、外陰痛和韋格納氏肉芽腫病。
22.依照權(quán)利要求20的方法，其中所述炎性病癥選自氣道炎癥、哮喘、自身免疫性疾病、慢性炎癥、慢性前列腺炎、腎小球腎炎、貝切特氏病、超敏感性、炎性腸病、再灌注損傷、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植排斥、潰瘍性結(jié)腸炎、葡萄膜炎、結(jié)膜炎和血管炎。
23.依照權(quán)利要求17或18的方法，其中所述化合物是一種或多種包含原本會激活 TLR8介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的免疫刺激性基序的非TLR8反義寡核苷酸。
24.依照權(quán)利要求7-18中任一項的方法，其中施用路徑選自胃腸外、肌肉內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、粘膜投遞、口服、舌下、經(jīng)皮、局部、吸入、鼻內(nèi)、氣霧劑、眼內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、 陰道、基因槍、皮膚貼片、滴眼劑或漱口劑。
25.依照權(quán)利要求7-18中任一項的方法，包括進(jìn)一步施用一種或多種疫苗、抗原、抗體、細(xì)胞毒劑、變應(yīng)原、抗生素、反義寡核苷酸、TLR激動劑、TLR拮抗劑、siRNA、miRNA、反義寡核苷酸、適體、蛋白質(zhì)、基因療法載體、DNA疫苗、佐劑、共刺激分子或其組合。
26.—種抑制哺乳動物中TLR8表達(dá)和活性的方法，包括對哺乳動物施用與TLR8mRNA互補的反義寡核苷酸和TLR8蛋白的拮抗劑。
27.權(quán)利要求沈的方法，其中所述TLR8拮抗劑選自下組抗TLR8抗體或其結(jié)合片段或肽模擬物、基于RNA的化合物、基于寡核苷酸的化合物、和/或TLR8活性的小分子抑制劑。
全文摘要
提供了用于下調(diào)TLR8表達(dá)的反義寡核苷酸化合物、組合物和方法。所述組合物包含靶向編碼TLR8的核酸的反義寡核苷酸。所述組合物還可以包含與其它治療性和/或預(yù)防性化合物和/或組合物組合的靶向編碼TLR8的核酸的反義寡核苷酸。提供了使用這些化合物和組合物來下調(diào)TLR8表達(dá)以及預(yù)防或治療可受益于調(diào)制TLR8表達(dá)的疾病的方法。
文檔編號A61K39/395GK102256594SQ200980139329
公開日2011年11月23日 申請日期2009年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月4日
發(fā)明者?？舶?坎迪瑪拉, 拉克什米.巴加特, 王大慶, 蘇德希爾.阿格拉沃爾, 郁東, 馬利卡爾朱納.帕塔 申請人:艾德拉藥物股份有限公司