專利名稱：黃體酮用于制備治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃體酮在制備治療腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的應(yīng)用。提供
一種保護(hù)腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥患者的腦神經(jīng)元繼發(fā)性損傷，幫助恢復(fù)腦內(nèi)正常的生 理環(huán)境和神經(jīng)功能恢復(fù)，防止急性腦組織壞死，并降低死亡率的藥物途徑。
(二)
背景技術(shù)：
在急性重癥出血性及失血性腦急性反應(yīng)性炎癥中，腦中風(fēng)及腦外傷最為常見，是
威脅人類生命的重要疾患和臨床上致死致殘的重要原因，衛(wèi)生部公布的全國(guó)死因調(diào)查結(jié)果
顯示，腦血管病已成為我國(guó)城鄉(xiāng)居民首位死亡原因，占死亡總數(shù)的22.45%。據(jù)調(diào)查，全國(guó)
每年新發(fā)腦卒中約200萬人，每年死于腦血管病約150萬人。近年來腦血管急性反應(yīng)性炎
癥，由于交通事故、運(yùn)動(dòng)和自然災(zāi)害等所導(dǎo)致的發(fā)病率上升很快，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在我國(guó)，外傷性腦
急性反應(yīng)性炎癥在全身各部位損傷中占第二位，病死率更是高達(dá)35 50%。 急性腦中風(fēng)及腦急性反應(yīng)性炎癥由于發(fā)病急、病情重，傷后病理過程十分復(fù)雜，具
有很高的病死率，目前國(guó)際上急性腦中風(fēng)及腦急性反應(yīng)性炎癥的病死率仍高據(jù)不下，治療
十分困難，中西醫(yī)治療目前無理想效果的藥物，也還沒有一種有效的治療方法能明顯改善
腦中風(fēng)及腦急性反應(yīng)性炎癥后的腦神經(jīng)功能恢復(fù)，或能降低死亡率，急性腦中風(fēng)及腦急性
反應(yīng)性炎癥其所帶來的長(zhǎng)期身體障礙對(duì)社會(huì)和醫(yī)療制度來說更是巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而成為
了世界難題。因此找到一種合適的治療急性腦中風(fēng)及腦急性反應(yīng)性炎癥的方法具有非常重
要的社會(huì)意義。 急性腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥發(fā)生后，一系列的反應(yīng)，如炎癥免疫反應(yīng)，乙酰膽 堿，GABAA和NMDA受體系統(tǒng)的破壞等會(huì)引起神經(jīng)元的減少。而腦水腫，腦血管的破壞和增強(qiáng) 的炎癥免疫反應(yīng)經(jīng)常會(huì)引起進(jìn)一步的神經(jīng)元變性，從而導(dǎo)致嚴(yán)重的繼發(fā)性損傷。因此，治療 急性腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥的目的在于調(diào)控腦急性反應(yīng)性炎癥中的細(xì)胞因子(IL-27， IL-12， IL-1， I型IFNs等)，防止神經(jīng)功能缺失及細(xì)胞凋亡，保護(hù)腦神經(jīng)元的繼發(fā)性損傷，并 幫助恢復(fù)腦內(nèi)正常的生理環(huán)境。 目前臨床用于治療急性腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥的方法，主要包括臨床監(jiān)測(cè)， 對(duì)癥支持和手術(shù)治療。但是在面對(duì)頻發(fā)的腦血管病、交通事故所導(dǎo)致的急性腦中風(fēng)與腦急 性反應(yīng)性炎癥患者，傳統(tǒng)的藥物不能降低急性重癥患者的病死率，總是缺少一種簡(jiǎn)單而行 之有效的治療藥物。
(三)
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供黃體酮在制備治療腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的應(yīng)
用，提供了一種行之有效的治療相關(guān)急性腦血管炎癥疾病的藥物。 本發(fā)明采用的技術(shù)方案是 黃體酮在制備治療腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的應(yīng)用。所述腦中風(fēng)包 括急性腦梗塞、腦出血或蜘蛛膜下腔出血。所述腦急性反應(yīng)性炎癥為急性腦血管外傷后水腫引起的腦組織壞死或腦功能障礙。 所述藥物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法，制備成靜脈注射劑、肌肉注射劑、皮埋劑或鼻內(nèi)滴 劑。所述藥物需在在腦中風(fēng)與腦急性反應(yīng)性炎癥8小時(shí)內(nèi)，通過連續(xù)給予注射劑、皮埋劑或 鼻內(nèi)滴劑的給藥途徑進(jìn)行給藥。 所述藥物為靜脈注射劑時(shí)，所述靜脈注射劑有效劑量為0. 5mg 1. 5mg/kg體重每 12小時(shí)，自第一次給藥后，給藥需至少持續(xù)5天。 所述藥物為肌肉注射劑時(shí)，所述肌肉注射劑有效劑量為1. 0mg 3. 0mg/kg體重每 12小時(shí)，自第一次給藥后，給藥需至少持續(xù)5天。 所述藥物為皮埋劑時(shí)，所述皮埋劑有效劑量為5. Omg 12. Omg/kg體重每72小 時(shí)，自第一次給藥后，給藥需至少持續(xù)21天。 所述鼻內(nèi)滴劑時(shí)，所述鼻內(nèi)滴劑鼻內(nèi)滴劑有效劑量濃度為0. 1 03mg/ml，5 10
次/天，自第一次給藥后，給藥需至少持續(xù)5天。 黃體酮(結(jié)構(gòu)見下式)是口服避孕藥內(nèi)的一種雌性激素，由卵巢和胎盤產(chǎn)生，臨床
上一般被用于調(diào)節(jié)生殖相關(guān)的功能作用。
<formula>formula see original document page 4</formula> 本申請(qǐng)?zhí)峁┑闹委熌X中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的方法不同于以往的治療方法，突 破了傳統(tǒng)的黃體酮僅用于婦產(chǎn)科疾病的局限，開辟了急性腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥治療 的新方式和給藥途徑。 一系列的動(dòng)物試驗(yàn)和臨床測(cè)試證明，該方法能有效地防治急性腦中 風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥中神經(jīng)功能缺失、細(xì)胞凋亡和腦的繼發(fā)性損傷，并促進(jìn)腦內(nèi)正常生 理環(huán)境和功能的恢復(fù)。 考慮到要堅(jiān)持較長(zhǎng)期的黃體酮治療需要患者很強(qiáng)的依從性，特別對(duì)于腦中風(fēng)的高 齡人及外傷性腦急性反應(yīng)性炎癥，本發(fā)明藥物優(yōu)先采用肌肉注射、靜脈注射及皮埋劑的方 式給藥。 皮埋劑是一類可經(jīng)針頭導(dǎo)入皮下的控釋制劑，又稱皮下控釋劑型.它以零級(jí)動(dòng)力 學(xué)釋放速率持續(xù)釋放藥物，釋放的藥物經(jīng)皮下吸收后直接進(jìn)入血液循環(huán)發(fā)揮其作用，有較 高的生物利用度和較長(zhǎng)的給藥時(shí)間，特別適合應(yīng)用于依從性不高的患者；此外皮埋劑還有 許多其他的優(yōu)點(diǎn)如消除因間歇給藥產(chǎn)生的峰谷現(xiàn)象；可在特定的作用部位以相對(duì)恒定的 速率持續(xù)釋放藥物，并維持藥物的治療濃度。 本發(fā)明是在制備治療治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中黃體酮的應(yīng)用。黃 體酮已證實(shí)是一種存在于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)，不需依賴內(nèi)分泌腺體的"神經(jīng)甾體激素"， 可在腦中的膠質(zhì)細(xì)胞相應(yīng)酶的作用下以膽固醇為原料合成。實(shí)驗(yàn)證實(shí)活性甾體激素可與 細(xì)胞內(nèi)受體結(jié)合，對(duì)腦的發(fā)育和成年期腦功能產(chǎn)生長(zhǎng)期的效應(yīng)，并且參與應(yīng)激反應(yīng)。
黃體酮治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的機(jī)制尚未完全闡明，我們的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提示，黃體酮對(duì)腦血管急性反應(yīng)性炎癥有保護(hù)作用，它可能能夠通過阻滯與Na+-K+-ATP酶介 導(dǎo)的Na+進(jìn)入腦血管和腦組織而減輕腦水腫；孕酮受體廣泛的分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，腦血管 急性反應(yīng)性炎癥后給予孕酮治療可以防止神經(jīng)細(xì)胞的死亡、提高神經(jīng)功能的恢復(fù)。另外， 黃體酮通過保護(hù)腦血管的調(diào)節(jié)功能，調(diào)節(jié)一氧化氮的形成，抗凋亡等機(jī)制發(fā)揮作用。研究顯 示，在中樞神經(jīng)組織中，黃體酮治療能減少細(xì)胞因子的產(chǎn)生和減弱免疫反應(yīng)，從而保護(hù)神經(jīng) 元。 本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在提供了黃體酮在制備治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎 癥的藥物中的新用途，可有效防止腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥引起的急性腦組織壞死，促 進(jìn)腦急性反應(yīng)性炎癥患者的神經(jīng)功能恢復(fù)，并降低死亡率，具有重大臨床應(yīng)用前景。
圖1A為腦失血組術(shù)后3天，神經(jīng)細(xì)胞壞死，胞體收縮，神經(jīng)元丟失現(xiàn)象；圖1B為黃
體酮組治療3天，細(xì)胞及細(xì)胞間質(zhì)腫脹程度輕，可見結(jié)構(gòu)恢復(fù)良好的神經(jīng)細(xì)胞。 圖2A為腦血管創(chuàng)傷7天后細(xì)胞及血管周圍廣泛無結(jié)構(gòu)區(qū)；圖2B為腦血管創(chuàng)傷7
天后黃體酮治療組，可見神經(jīng)元結(jié)構(gòu)保持和恢復(fù)。 圖3為本發(fā)明的臨床試驗(yàn)流程圖； 圖4為黃體酮組和安慰劑處理組急性重癥中風(fēng)患者顱內(nèi)壓比較結(jié)果。 具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此 實(shí)驗(yàn)中所用的注射劑和皮埋劑 注射劑為黃體酮的滅菌油溶液，含黃體酮標(biāo)示量為93. 0 107. 0% (生產(chǎn)產(chǎn)家 天津制藥廠，規(guī)格10mg/mL)，是用天然或常規(guī)人工合成的黃體酮為原料，經(jīng)過制劑學(xué)常規(guī)技 術(shù)制得的注射劑。 皮埋劑是將黃體酮加生理鹽水至100mL，攪勻，用10wt^氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至
7.0，濾過，濃縮至黃體酮濃度為5mg/mL，滅菌，以硅橡膠(長(zhǎng)34mm，直徑2. 4mm的管)為載
體(生產(chǎn)產(chǎn)家芬蘭Leiras公司)，灌封，滅菌，分別制成含黃體酮0. 5mg、 lmg和1. 5mg規(guī)
格的皮埋劑，備用。 實(shí)施例1 :長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn) 大劑量的犬長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)(靜脈注射15mg/kg體重，每12小時(shí)給藥1次，給藥時(shí) 間為20周)和大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)(皮埋劑給藥240mg/kg體重，每72小時(shí)給藥l次，給藥 時(shí)間為24周)。 結(jié)果表明，受試動(dòng)物均未見異常變化，血液生化指標(biāo)檢查、各主要臟器均未見異
常，說明該藥應(yīng)用大劑量安全無毒，臨床用藥將將比較安全。小鼠精神神經(jīng)系統(tǒng)的藥理學(xué)研
究結(jié)果顯示，對(duì)小鼠行為活動(dòng)表現(xiàn)及平衡能力無明顯抑制作用。對(duì)麻醉犬心血管及呼吸系
統(tǒng)的指標(biāo)如血壓、心率、心電圖、呼吸頻率及幅度及無明顯影響。因此注射用黃體酮毒理學(xué)
研究表明治療出血性腦中風(fēng)安全有效，并具有較好的臨床應(yīng)用劑量安全性范圍。 實(shí)施例2 :黃體酮對(duì)大鼠腦血管障礙和腦急性反應(yīng)性炎癥后神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用 雄性SD大鼠lOO只，隨機(jī)分四組(l)假手術(shù)組，不插入線栓；(2)失血再灌注組通過結(jié)扎雙側(cè)頸動(dòng)脈后再解除動(dòng)脈夾，利用線栓法阻斷大腦中動(dòng)脈(MCA0)制作大鼠局灶 性失血再灌注腦血管障礙和腦急性反應(yīng)性炎癥模型，不給藥；(3)失血再灌注組+生理鹽水 注射組(生理鹽水組)，同(2)建立大鼠局灶性失血再灌注腦血管障礙和腦急性反應(yīng)性炎癥 模型，術(shù)后6h腹腔注射生理鹽水lmL，每日注射2次，連續(xù)5d ; (4)失血再灌注組+黃體酮 注射液0.5mg/kg肌肉注射組(黃體酮組)；同(2)建立大鼠局灶性失血再灌注腦血管障礙 和腦急性反應(yīng)性炎癥模型，術(shù)后6h肌肉注射黃體酮注射液，每日給藥2次(0. 5mg/kg)，連續(xù) 給藥5日。 建模后12， 24， 72h，和7d的各組分別測(cè)定腦組織含水量，觀察腦組織病理形態(tài)學(xué) 變化，Hoechst染色觀察神經(jīng)細(xì)胞凋亡的情況。并用標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū) 神經(jīng)細(xì)胞凋亡和大鼠海馬CA1區(qū)Bcl-2，Bax的表達(dá)。采用方差分析和t檢驗(yàn)進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì) 比較。 結(jié)果顯示 腦組織含水量比較腦失血組和生理鹽水注射組[(81. 3±1. 21) %， (81. 7±1. 03) % ]均顯著高于黃體酮組(77. 9±0. 67) %，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P < 0. 01)。 腦組織病理形態(tài)學(xué)變化比較組織化學(xué)染色顯示腦血管障礙組和生理鹽水組表現(xiàn) 的大鼠的受損側(cè)和對(duì)側(cè)均有嚴(yán)重腦水腫，水腫區(qū)腦組織腫脹明顯，透亮度增加，血管周圍間 隙增寬，并可見大量灶性出血，神經(jīng)細(xì)胞液化壞死現(xiàn)象(圖1A)。而黃體酮組則明顯較輕， 神經(jīng)細(xì)胞壞死現(xiàn)象較損傷組合生理鹽水注射組明顯減少，尤其是細(xì)胞及細(xì)胞間質(zhì)腫脹程度 輕，許多神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)仍維持良好(圖1B)。 熒光Hoechst染色細(xì)胞凋亡計(jì)數(shù)(個(gè)/高倍視野)腦血管障礙組(32. 20 ±2. 71) 和生理鹽水組(28. 71 ±2. 19)顯著高于黃體酮組(11. 09±1. 37)相差顯著(P < 0. 001)。
假手術(shù)組未見神經(jīng)細(xì)胞凋亡，Bcl-2和Bax陽性細(xì)胞；黃體酮組傷后12， 24和72h 神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)分別為8. 96±1.41 ;11.23士1.07 ;9. 67±1. 58，低于損傷組細(xì)胞凋亡數(shù) 33. 67±1. 96 ;29. 28±1. 07 ;26. 78±1. 83，差異顯著(P < 0. 01)。黃體酮組大鼠腦組織中 Bcl-2陽性神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)高于損傷組(P < 0. 05，P < 0. 01) ，Bax陽性神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)低于損 傷組(P < 0. 01);黃體酮組損傷后12，24，72h和7d Bcl-2/Bax細(xì)胞比值分別大于損傷組 Bcl-2/Bas比值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 001)。 本研究結(jié)果提示，肌肉注射黃體酮的方法能有效地減輕腦血管病變導(dǎo)致腦失血的 范圍和程度，通過促進(jìn)Bcl-2的表達(dá)，抑制Bax的表達(dá)，增加Bcl-2/Bax比值，減少神經(jīng)細(xì)胞 凋亡，從而對(duì)腦血管障礙引起的腦中風(fēng)起到腦神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用，從而對(duì)急性腦中風(fēng)患 者帶來有效的治療效果。 實(shí)施例3 :黃體酮皮埋劑對(duì)大鼠腦水腫的治療作用 雄性SD大鼠80只(4 5周齡，體重150g左右)，隨機(jī)分為正常組、創(chuàng)傷組、 生理鹽水對(duì)照組、黃體酮皮埋劑治療組。①正常組，不作任何處理；②創(chuàng)傷組，自由落體 (1000g cm)打擊左頂葉制成腦急性反應(yīng)性炎癥模型，不給藥；③生理鹽水組，同②制成腦 急性反應(yīng)性炎癥模型，術(shù)后6h腹腔注射生理鹽水2mL，每72h注射一次，連續(xù)7d ; 黃體酮 組，同②制成腦急性反應(yīng)性炎癥模型，術(shù)后6h皮下埋植皮埋劑(以黃體酮質(zhì)量計(jì)為1. 5mg/ 只，每72h給藥一次)，連續(xù)7d。創(chuàng)傷24h和7d后行觀察指標(biāo)測(cè)定(1)磁共振鼠腦T2像檢查并測(cè)定兩倍放大像水腫區(qū)及對(duì)側(cè)相應(yīng)區(qū)圖像信號(hào)值。每側(cè)隨機(jī)選三個(gè)視野互不重疊， 計(jì)算均值。(2)干濕重法測(cè)定腦含水量大鼠處死，開顱，以創(chuàng)傷灶及對(duì)側(cè)相應(yīng)處為中心各 取約3X3X4mm腦組織稱濕重?？鞠鋖l(TC 24h后稱干重。含水量=(濕重-干重)/濕 重X100%。 (3)病理切片常規(guī)HE染色，用CMIAS圖像分析系統(tǒng)測(cè)量創(chuàng)傷水腫區(qū)與對(duì)側(cè)相 應(yīng)處面密度。面密度=腦組織面積/視野面積。每側(cè)隨機(jī)選10個(gè)視野(1X10、m2)，計(jì)算 均值。(4)電鏡6%戊二醛磷酸鹽緩沖液固定2處后取創(chuàng)傷區(qū)邊緣腦組織。磷酸緩沖液洗 滌，鋨酸固定，脫水，包埋，超薄切片，醋酸鈉枸櫞酸鹽雙重染色，H600透射電鏡觀察。
結(jié)果顯示1).磁共振顯示創(chuàng)傷組24h后T2像上見傷側(cè)皮層、海馬廣泛長(zhǎng)T2 影。治療組T2加權(quán)像上，傷側(cè)長(zhǎng)T2范圍明顯減小，傷側(cè)與對(duì)側(cè)圖像信號(hào)值差小于創(chuàng)傷組
(P < 0. 01);對(duì)照組較傷組無明顯改變。創(chuàng)傷7d后磁共振信號(hào)值(加權(quán)像)治療組創(chuàng)傷 側(cè)信號(hào)值與創(chuàng)傷組或?qū)φ战M比較明顯下降(P<0.01);治療組，創(chuàng)傷組，對(duì)照組傷側(cè)信號(hào)值 明顯高于對(duì)側(cè)(P < 0. 01)。正常組與各組對(duì)側(cè)比較無顯著差異；2).腦組織含水量的變化
如表1所示24h創(chuàng)傷后，創(chuàng)傷組、對(duì)照組及治療組中，傷側(cè)腦含水量與對(duì)側(cè)或正常組比較升 高(P < 0. 01)。孕酮皮埋劑治療組與創(chuàng)傷組相比有明顯下降(P < 0. 01)。創(chuàng)傷及對(duì)照組 傷側(cè)腦組織含水量無顯著差異(P > 0. 05)。
表1 :腦水含量百分比變化(x士s)
組別11創(chuàng)傷側(cè)(％)對(duì)側(cè)(％ )
正常組創(chuàng)傷組 治療組對(duì)照組10 10 10 1077. 19±0. 63 81.59±1.11# 79. 71±1. 49#* 81. 67±1. 39#------ 77. 15± 1. 35 77. 22±0. 85 77. 42±0. 88 #與正常組或?qū)?cè)比較P < 0. 01 ;*與創(chuàng)傷組或?qū)φ战M比較P < 0. 01. 3).病理切
片創(chuàng)傷組傷側(cè)皮層、海馬胞體收縮，細(xì)胞周圍間隙加大，并可見神經(jīng)元丟失；治療組水腫 及變性、壞死較創(chuàng)傷組明顯減輕。對(duì)照組較創(chuàng)傷組無明顯差異。創(chuàng)傷24h后，治療組傷側(cè) 面密度明顯高于創(chuàng)傷組和對(duì)照組(P<0.01);創(chuàng)傷7d后，治療組創(chuàng)傷側(cè)面密度高于創(chuàng)傷 組或?qū)φ战M(P < 0. 05);而治療組，創(chuàng)傷組，對(duì)照組傷側(cè)面密度明顯低于對(duì)側(cè)(P < 0. 01)。 4).電鏡與免疫組化觀察創(chuàng)傷組細(xì)胞及血管周圍廣泛無結(jié)構(gòu)區(qū)(圖2.A)。細(xì)胞異染色質(zhì)
凝聚，細(xì)胞器破壞，核膜不清，神經(jīng)纖維退行性變。微血管內(nèi)皮不整，紅細(xì)胞變形，組織間隙
見散在紅細(xì)胞及碎片。創(chuàng)傷7d后，黃體酮酮皮埋劑治療組較創(chuàng)傷組破壞程度明顯減輕，可 見較多神經(jīng)元恢復(fù)(圖2. B)。對(duì)照組較創(chuàng)傷組無明顯改變。 該研究結(jié)果提示黃體酮皮埋劑對(duì)于腦急性反應(yīng)性炎癥腦水腫具有一定的治療作 用，有望成為緩慢釋放地防治創(chuàng)傷性腦水腫的一種新的給藥途徑選擇。 迄今為止，尚無任何一項(xiàng)大型隨機(jī)臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示某一種藥物對(duì)腦中風(fēng)和腦急 性反應(yīng)性炎癥有確切的療效。主要因?yàn)槟X中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥人群內(nèi)在的異質(zhì)性所 致，同時(shí)繼發(fā)性腦損害是由多種因素引起的，其針對(duì)性治療藥物應(yīng)該具備綜合性特點(diǎn)?，F(xiàn) 在人們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到，用于治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物必須具備針對(duì)多種損傷因 素、改善預(yù)后的特性上，并通過多種不同的機(jī)制減輕腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥后的繼發(fā) 性腦損害，達(dá)到腦保護(hù)作用，因而臨床研究的方法是發(fā)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)藥物作用的最有效方法。
實(shí)施例4 :黃體酮對(duì)患者的腦組織與神經(jīng)功能恢復(fù)作用及其預(yù)后臨床研究
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本發(fā)明以臨床研究的方法，對(duì)120例腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性外傷患者進(jìn)行了隨機(jī) 雙盲的科學(xué)對(duì)比研究。臨床試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃體酮可以顯著促進(jìn)腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥 患者短期和較長(zhǎng)期的神經(jīng)功能恢復(fù)，并明顯降低腦中風(fēng)后的死亡率。結(jié)果提示了黃體酮給 藥是治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的一種有效的方法。 本研究通過國(guó)際臨床試驗(yàn)注冊(cè)網(wǎng)站，注冊(cè)了該項(xiàng)目的臨床研究，并通過了倫理 委員會(huì)的批準(zhǔn)及病人知情同意書的簽署，征集了 200名腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥患 者，年齡在20 69歲之間，按國(guó)際臨床評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過復(fù)生和穩(wěn)定后格拉斯哥昏迷評(píng)分 (GCS)《8的患者被投入研究，而凡是在入院前30天內(nèi)接受或使用過藥物如孕酮或雌激 素的、大腦嚴(yán)重缺氧損傷導(dǎo)致腦死亡的、臨床條件不穩(wěn)定(氧分壓< 60mmHg或心臟收縮壓 < 90mmHg或兩者兼具)的、懷孕和處于哺乳期的和那些導(dǎo)致慢性脊髓損傷的患者被本研究 排除不采用。最終選出112名符合試驗(yàn)條件的患者進(jìn)行隨機(jī)、雙盲試驗(yàn)(試驗(yàn)設(shè)計(jì)見圖1)， 其中32例患者在傷后8小時(shí)內(nèi)進(jìn)行1. Oml/kg黃體酮注射液肌肉注射治療(肌注組)，30 例患者在傷后8小時(shí)內(nèi)給予1. Oml/kg黃體酮皮埋劑(皮埋組)，另外58例患者給予安慰劑 肌肉注射治療(安慰劑組)，接受黃體酮治療的患者在接下去的7天內(nèi)每隔12小時(shí)進(jìn)行更 進(jìn)一步的注射治療。 1)黃體酮組和安慰劑組患者的人口統(tǒng)計(jì)特征如表2所示，兩組之間的同齡群組 被很好地平衡無顯著性差異，且不同處理組患者的用藥史、給藥和治療方法無顯著性差異。
表2 :兩組患者的臨床和人口統(tǒng)計(jì)特征(括號(hào)內(nèi)為占總數(shù)百分比)
入院特征安慰劑/n = 58黃體酮/例數(shù)62P值
男性41(71% )44(71 % )> 0. 05
女性17(29% )18(29% )> 0. 05
平均(標(biāo)準(zhǔn)差)年齡(年)31(9% )30(11)> 0. 05
受傷到接受治療的平均(標(biāo)準(zhǔn)差)時(shí)間(小時(shí))3. 65(1.46% )3. 80(2. 03% )> 0. 05
格拉斯哥昏迷評(píng)分的平均(標(biāo)準(zhǔn)差)分?jǐn)?shù)6. 1(1. 3% )6. 0(1. 8% )> 0. 05
格拉斯哥昏迷評(píng)分3 514(25% )16(26% )> 0. 05
原因
外傷50(86% )53(85% )> 0. 05
中風(fēng)6(10% )7(11% )> 0. 05
其他2(3% )2(3% )> 0. 05
外科手術(shù)治療19(31% )18(26% )> 0. 05
瞳孔反應(yīng)
雙側(cè)正常19(33% )20(32% )> 0. 05
異常39(67% )42(68% )> 0. 05
Marshall CT掃描分級(jí)
I00
II6(10% )7(11% )> 0. 05
III17(28% )20(32% )> 0. 05
IV9(16% )9(15% )> 0. 05
V18(31% )16(26% )> 0. 05
VI8(14% )10(16% )> 0. 05 2)格拉斯哥預(yù)后評(píng)分系統(tǒng)(GOS國(guó)際臨床評(píng)分標(biāo)準(zhǔn))的預(yù)后評(píng)估患者結(jié)局分為
8有效(恢復(fù)良好、中等度殘疾)和無利(重度殘疾、植物狀態(tài)、死亡)。結(jié)果(見表3)表明， 在治療后的第3和6個(gè)月，與安慰劑組相比，黃體酮組中有更多的患者出現(xiàn)了有益的治療作 用(p〈0.01)，其中肌注組與皮埋組的治療作用相差無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。肌注組和皮埋組均能 促進(jìn)6個(gè)月的生存率，兩組均未出現(xiàn)并發(fā)癥和不良反應(yīng)。 表3 :黃體酮組與安慰劑組病人治療3個(gè)月和6個(gè)月后國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)格拉斯哥預(yù)后評(píng)
分比較(括號(hào)內(nèi)為占總數(shù)百分比)
格拉斯哥預(yù)后評(píng)分黃體酮組(n = 62)安慰劑組(n = 58)
3個(gè)月
恢復(fù)良好15(24% )6(腦)
中等13(21% )11(19% )
重度殘疾12(19% )9(16% )
植物狀態(tài)9(15% )12(21% )
死亡13(21% )20(34% )
6個(gè)月
恢復(fù)良好21(34% )15(26% )
中等15(24% )9(16% )
重度殘疾6(腦)8(14% )
植物狀態(tài)7(11% )6(腦)
死亡13(21% )20(34% ) 3)格拉斯哥預(yù)后評(píng)分后的二元分析結(jié)果表明，在3個(gè)月后黃體酮組中45%的患 者以及安慰劑組中29%的患者出現(xiàn)了有效的治療效果，而黃體酮治療組中55%的患者及 安慰劑組中71%的患者出現(xiàn)了無的治療結(jié)果，且差異均達(dá)到顯著水平(p<0.05)。 6個(gè)月 后黃體酮組中58%的患者以及安慰劑組中41%的患者出現(xiàn)了有效的治療效果，而黃體酮 治療組中42%的患者及安慰劑組中59%的患者出現(xiàn)了無利的治療結(jié)局，差異均為非常顯 著(p < 0.01)。 4)功能獨(dú)立性評(píng)定結(jié)果FIM評(píng)分3個(gè)月后，安慰劑組評(píng)分為7. 35 ;而黃體酮組的 評(píng)分為8. 02，兩組相差異顯著(p < 0. 05) ，6個(gè)月后安慰劑組為8. 95 ;肌注組和皮埋組分別 達(dá)到10. 02和9. 87，與安慰劑組相比差異極顯著(p < 0. 01)，這表明黃體酮治療患者顯示 了良好的功能恢復(fù)。 5)死亡率在6個(gè)月的治療中，共有33名患者(25% )死亡，黃體酮組在6個(gè)月的 死亡率上明顯較安慰劑組低，分別為18%和32%。 6)顱內(nèi)壓檢測(cè)對(duì)黃體酮組50名患者和安慰劑處理組的35名患者在受傷后24小 時(shí)、72小時(shí)和7天進(jìn)行顱內(nèi)壓檢測(cè)，結(jié)果(見圖4)表明兩個(gè)處理組患者的顱內(nèi)壓無顯著性 差異，兩個(gè)黃體酮治療組患者均無不良反應(yīng)出現(xiàn)。 綜上研究結(jié)果表明黃體酮肌注和皮埋劑給藥的方法在腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎 癥患者具有促進(jìn)腦神經(jīng)功能恢復(fù)的療效，并具有較長(zhǎng)期腦神經(jīng)保護(hù)功效。這種研究結(jié)果有 力的支持下述結(jié)論黃體酮能用來治療和促進(jìn)失血性腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的功能恢 復(fù)或降低死亡率，或者治療腦細(xì)胞的病變。 對(duì)本技術(shù)領(lǐng)域人員是顯而易見的，配方的成分改變能影響配方的一些性能。如生 物粘著力聚合物的濃度加以調(diào)節(jié)后能提供更大或更小的生物粘著力。油與水比較時(shí)，其相
9對(duì)濃度能加以改變來調(diào)節(jié)黃體酮的從藥物輸送系統(tǒng)釋放速率。PH值也可以加以適當(dāng)改變，
或者經(jīng)調(diào)節(jié)后影響黃體酮從藥物釋放系統(tǒng)釋放速率和配方的生物粘著力。 以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例，顯然本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還
可有許多變形和變動(dòng)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的
所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
黃體酮在制備治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的應(yīng)用。
2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述腦中風(fēng)為急性腦梗塞、腦出血或蜘蛛膜 下腔出血。
3. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述腦急性反應(yīng)性炎癥為外傷性血管炎癥和 急性腦組織壞死或腦功能障礙。
4. 如權(quán)利要求1 3之一所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物制備成靜脈注射劑、肌肉注 射劑、皮埋劑或鼻內(nèi)滴劑。
5. 如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為靜脈注射劑，所述靜脈注射劑有 效劑量為0. 5mg 1. 5mg/kg體重每12小時(shí)，有效療程為5天。
6. 如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為肌肉注射劑，所述肌肉注射劑有 效劑量為1. 0mg 3. 0mg/kg體重每12小時(shí)，有效療程為5天。
7. 如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為皮埋劑，所述皮埋劑有效劑量為 5. 0mg 12. 0mg/kg體重每72小時(shí)。
8. 如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為鼻內(nèi)滴劑，所述藥物為鼻內(nèi)滴劑 為濃度0. 2mg/ml，有效劑量為1 2ml/天，有效療程為5天。
全文摘要
本發(fā)明提供了黃體酮在制備治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的應(yīng)用。所述藥物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法，制備成靜脈注射劑、肌肉注射劑、皮埋劑或鼻內(nèi)滴劑。所述藥物需在腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥后8小時(shí)內(nèi)，通過連續(xù)給予注射劑或皮埋劑的給藥途徑進(jìn)行給藥。本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)為提供了黃體酮在制備治療腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥的藥物中的新用途和技術(shù)，可有效防止腦中風(fēng)和腦急性反應(yīng)性炎癥導(dǎo)致的神經(jīng)功能缺失及細(xì)胞凋亡，并保護(hù)腦血管受損的繼發(fā)性損傷和組織壞死，幫助恢復(fù)腦內(nèi)正常的免疫和生理環(huán)境，促進(jìn)患者的神經(jīng)功能恢復(fù)，降低死亡率，具有明顯的臨床療效和應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61P9/00GK101780093SQ20091025287
公開日2010年7月21日 申請(qǐng)日期2009年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月4日
發(fā)明者嚴(yán)偉琪 申請(qǐng)人:嚴(yán)偉琪