專利名稱：紫杉醇膽固醇復(fù)合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紫杉醇膽固醇復(fù)合物及其制備方法，本發(fā)明還涉及該紫杉醇膽固 醇復(fù)合物的用途，屬醫(yī)藥制劑技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紫杉醇(paditaxel，Taxol)具有重要的抗腫瘤活性，臨床上廣泛用于卵巢癌、和 乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、頭癌和頸癌等的治療。由于其幾乎不溶于水(0. 006 μ g/ml)，目前用 于臨床的紫杉醇注射劑Taxol 系采用Oemopher EL(聚氧乙基蓖麻油)/乙醇(50 50， V/V)的混合溶液5ml溶解30mg的紫杉醇制成。由于處方中含有大量的Cremopher EL,易 引起體內(nèi)組胺釋放，導(dǎo)致嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。為此，臨床使用時(shí)需進(jìn)行如下脫敏處理治療前 12小時(shí)口服地塞米松10mg，治療前6小時(shí)再口服地塞米松10mg，治療前30 60分鐘給予 苯海拉明肌注20mg、靜注西咪替丁 300mg或雷尼替丁 50mg。即使如此，臨床上仍有5% 30%的病人出現(xiàn)不同程度的過敏反應(yīng)。此外，以Cremopher EL/乙醇增溶的紫杉醇濃溶液， 稀釋后存在物理穩(wěn)定性問題，如環(huán)境溫度偏低或滴注時(shí)間過長，均有可能析出藥物，存在安 全性隱患。針對紫杉醇注射劑存在的問題，近十余年來，國內(nèi)外藥劑學(xué)工作者開展了廣泛的 研究。如與環(huán)糊精制成包合物，可提高藥物溶解度，但大量環(huán)糊精的引入臨床應(yīng)用量存在 極高的腎毒性；將紫杉醇制成脂質(zhì)體，單純用磷脂有聚集現(xiàn)象，而采用磷脂和磷脂酰甘油酯 (PC)，用氯仿做溶劑不聚集，但存在脂質(zhì)體包封率低、易泄漏、有機(jī)溶劑不易除盡等問題，產(chǎn) 業(yè)化發(fā)展受到限制；聚合物納米粒包封率高，長期貯存穩(wěn)定性良好，但同樣存在載藥量低、 有機(jī)溶劑不易除盡的困擾。利用藥物的親脂性，將藥物溶于油中作為油相，以天然磷脂為乳化劑，經(jīng)高壓均質(zhì) 乳化，可制備平均粒徑在600nm以下、滿足靜脈注射要求的水包油亞微乳。藥物存在于乳 滴的內(nèi)油相及油水界面，避免與水及空氣接觸，在滅菌和貯存過程具有良好的穩(wěn)定性。作 為一種新型的藥物傳輸系統(tǒng)，亞微乳克服了難溶性藥物因溶解度低和穩(wěn)定性差而不利于制 成液體制劑的缺陷，與傳統(tǒng)的增溶方法相比，處方中無需加入大量的表面活性劑，可避免因 Cremopher EL的存在而引發(fā)的過敏反應(yīng)。亞微乳為熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，藥物在油中溶解度的高低直接影響到亞微乳制備的 可行性。紫杉醇不僅水溶性差，且在油中溶解度亦較低，僅為0. 25mg/ml，如直接制備亞微 乳，載藥量低于0. 02mg/ml，無法滿足臨床治療的要求，且滅菌和貯存過程中藥物易從油相 轉(zhuǎn)移至水相，導(dǎo)致破乳、聚集和沉淀。為提高藥物在油相中的溶解度、突破理化性質(zhì)對紫杉醇亞微乳劑研究的限制，我 們前期對“紫杉醇脂質(zhì)復(fù)合物”及“以脂質(zhì)復(fù)合物為中間載體的紫杉醇亞微乳劑”進(jìn)行了 研究，并申請了兩項(xiàng)專利申請?zhí)枮?00810168213.X的“紫杉醇脂質(zhì)復(fù)合物”和申請?zhí)枮?200810168212. 5的“以脂質(zhì)復(fù)合物為中間載體的紫杉醇亞微乳劑”。200810168213. X公開的紫杉醇脂質(zhì)復(fù)合物，優(yōu)選的天然脂質(zhì)材料為蛋黃卵磷脂、大豆磷脂和膽固醇，紫杉醇和脂質(zhì)材料的重量比例為1 1 19，S卩脂質(zhì)材料的用量高達(dá)紫 杉醇的1 19倍。而200810168212. 5公開的亞微乳劑，則是以200810168213. X公開的紫 杉醇脂質(zhì)復(fù)合物為中間載體。因此，200810168213. X和200810168212. 5專利中提到的技術(shù) 方案存在以下缺陷1)制備成本高復(fù)合物中脂質(zhì)材料的用量高達(dá)紫杉醇的1 19倍，制備過程中溶 劑用量大幅增加，揮干溶劑所需時(shí)間延長，導(dǎo)致制造成本增高，不符合藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)原則；2)脂質(zhì)攝入量過大根據(jù)紫杉醇每次給藥300mg計(jì)算，攝入的脂質(zhì)材料相當(dāng)于 0. 3g 5. 7g。比如，對于其中作為脂質(zhì)材料的膽固醇而言，一般認(rèn)為健康成人每天膽固醇 的攝入量最好不超過300mg(相當(dāng)于1個(gè)雞蛋黃中含的膽固醇量)，但現(xiàn)有專利涉及的復(fù)合 物及其制劑，按照二者的比例1 1-19計(jì)算，最高攝入量相當(dāng)于19個(gè)雞蛋黃，明顯偏高，存 在安全性隱患。3)不利于后期亞微乳劑的制備和貯存將復(fù)合物作為中間載體制備亞微乳劑時(shí)， 根據(jù)臨床治療劑量和特定的紫杉醇濃度，復(fù)合物中的脂質(zhì)材料用量越高，則亞微乳的內(nèi)油 相中所包裹的復(fù)合物總量就越多。受內(nèi)油相油滴體積和油水界面的限制，包裹的復(fù)合物總 量越多，包封率就越低，且制得的亞微乳劑穩(wěn)定性越差。經(jīng)對200810168212. 5專利所述的 亞微乳進(jìn)行考察，包封率在70-80%，25°C貯存12個(gè)月時(shí)出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象。為此，在上述兩項(xiàng)專利申請基礎(chǔ)上，為提供脂質(zhì)材料用量少的復(fù)合物，降低成本并 提高臨床用藥的有效性和安全性，本申請經(jīng)過大量的試驗(yàn)研究，對脂質(zhì)材料及其用量進(jìn)行 了進(jìn)一步篩選和優(yōu)化。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在眾多的脂質(zhì)材料中，膽固醇為最佳的脂質(zhì)材料，并 且當(dāng)紫杉醇與膽固醇的用重量比例為1 0.09 0.90時(shí)，藥物與膽固醇即可完全復(fù)合，使 藥物在油中的溶解度得到最大程度的改善和提高提高。以本發(fā)明專利所述的復(fù)合物為中間 載體制備水包油亞微乳劑，因包裹的復(fù)合物總量減少，制得的亞微乳劑不僅包封率更高，且 長期貯存不易破乳，物理穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性優(yōu)于200810168212. 5專利所述的亞微乳劑。 本發(fā)明提供的膽固醇復(fù)合物，為后續(xù)亞微乳劑的質(zhì)量可控性及臨床用藥的有效性和安全性 奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其由紫杉醇與膽固醇復(fù) 合而成。紫杉醇與膽固醇的摩爾比為5 1至0.5 1，優(yōu)選3 1至0.75 1，更優(yōu)選 2 1至1 1 ；相應(yīng)地，按重量比例計(jì)，紫杉醇與膽固醇的重量比為1 0.09 0.90，優(yōu) 選 1 0. 15 0. 60，更優(yōu)選 1 0.23 0.45。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物的制備方法，所述紫 杉醇膽固醇復(fù)合物可以是按照如下方法1或2制備的。方法1包括如下步驟a.將紫杉醇與膽固醇按比例混合，加入適量有機(jī)溶劑溶解，任選地加入抗氧化穩(wěn) 定劑；b.在合適的溫度條件下攪拌，去除有機(jī)溶劑，真空干燥即得。方法2包括如下步驟a.將紫杉醇與膽固醇，分別加入適量的不同的有機(jī)溶劑溶解，將其混合，任選地加入抗氧化穩(wěn)定劑；b.在合適的溫度條件下攪拌，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或噴霧干燥去除有機(jī)溶劑，真空干燥 即得。在本發(fā)明的制備方法中，所述有機(jī)溶劑可選自二氯甲烷、乙醇、甲醇、苯甲醇、丙 酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、叔丁醇中的一種或多種；優(yōu)選地，可選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯和四 氫呋喃中的一種或多種。當(dāng)選用多種有機(jī)溶劑時(shí)，其是指所選有機(jī)溶劑的混合物。在本發(fā)明的制備方法中，有機(jī)溶劑的去除是通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或噴霧干燥實(shí)現(xiàn)的。在本發(fā)明的制備方法中，“按比例混合”是指按照本申請上述給出的紫杉醇與膽固 醇的比例混合，即紫杉醇與膽固醇的摩爾比為5 1至0.5 1，優(yōu)選3 1至0.75 1， 更優(yōu)選2 1至1 1 ；“適量的有機(jī)溶劑”中的“適量”是指本領(lǐng)域技術(shù)人員按照常規(guī)技術(shù) 可確定用于溶解紫杉醇與膽固醇的混合物的量，比如，紫杉醇與膽固醇復(fù)合物在溶液中的 濃度以紫杉醇計(jì)算，可以為0. 5 16mg/ml，優(yōu)選1. 0 8. Omg/ml ；“合適的溫度條件”系指 溫度可以在 25°C -70°C，優(yōu)選；35-55°C，例如 25°C、35°C、45°C、55°C或 70V?！ぴ诒景l(fā)明的制備方法中，攪拌反應(yīng)的時(shí)間和真空干燥的時(shí)間都可以由本領(lǐng)域技 術(shù)人員按照常規(guī)技術(shù)確定，比如攪拌反應(yīng)的時(shí)間可以是0. 5-3. O小時(shí)，例如0. 5小時(shí)、1. O小 時(shí)、1. 5小時(shí)或2. O小時(shí)，真空干燥的時(shí)間可以是8小時(shí)-48小時(shí)，例如8小時(shí)、12小時(shí)、16 小時(shí)或24小時(shí)。在本發(fā)明的制備方法中，可以考慮加入適量的抗氧化穩(wěn)定劑，抗氧化穩(wěn)定劑用量 是本領(lǐng)域在制備脂質(zhì)復(fù)合物中通常采用的用量，一般不超過紫杉醇與膽固醇兩者重量之和 的(重量)。本發(fā)明還提供本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物在制備水包油型亞微乳劑、干乳劑、 自微乳系統(tǒng)或口服制劑中的應(yīng)用。其中水包油亞微乳制劑或干乳劑是通過將本發(fā)明所述的 紫杉醇膽固醇復(fù)合物溶于油相制備得到的，其可通過注射給藥用于腫瘤的臨床治療，該制 劑載藥量高、穩(wěn)定性好，并且處方中不含Cremopher EL，安全性優(yōu)于市售注射劑。自微乳系 統(tǒng)是通過將本發(fā)明所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物溶于油相，加入適量助表面活性劑制備得到 的，其可通過注射、粘膜或口服給藥，用于腫瘤的臨床治療?？诜苿?，特別是固體制劑比如 膠囊或片劑等，是通過將本發(fā)明所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，加入藥劑學(xué)上允許的藥用賦 形劑制備得到的，其可通過口服給藥用于的腫瘤的臨床治療，具有更高的生物利用度。本發(fā)明還提供本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用，所述的癌 選自卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、頭癌癥或頸癌。在本發(fā)明中，如果沒有特別地指出，本文所用的科學(xué)和技術(shù)術(shù)語以及名稱都具有 與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員常規(guī)理解相同的意思；并且，如果沒有特別地指出，其中所 采用的物質(zhì)及其含量或比例、裝置、儀器、制備條件等都是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的或者其 根據(jù)本發(fā)明的描述可得知的。本發(fā)明提供的紫杉醇膽固醇復(fù)合物特別地具有如下優(yōu)點(diǎn)1)脂質(zhì)材料用量少、制備成本低藥物與脂質(zhì)材料復(fù)合完全是藥物在油中溶解度 得到最大改善和提高的前提。與本領(lǐng)域已知的紫杉醇復(fù)合物，包括專利200810168213. X中 制備得到的紫杉醇復(fù)合物相比，本發(fā)明的脂質(zhì)材料膽固醇的重量比例由紫杉醇的1 19倍 降至0. 90倍以下，但仍能確保紫杉醇與膽固醇復(fù)合完全，并使油中溶解度得到最大程度的提高，以滿足后續(xù)亞微乳劑的制備。即采用增加紫杉醇與膽固醇中紫杉醇的比例仍能達(dá)到 較高的溶解度。由于膽固醇用量顯著降低，使得制備過程中的溶劑用量減少，蒸發(fā)溶劑所需 時(shí)間縮短，大大降低了制備成本。2)脂質(zhì)攝入量少根據(jù)紫杉醇每次給藥300mg計(jì)算，每次攝入的膽固醇的量可控 制在27mg 270mg，不超過1個(gè)雞蛋黃中所含的膽固醇的量。3)有利于提高亞微乳劑的包封率和穩(wěn)定性本發(fā)明提供的復(fù)合物中膽固醇的重 量僅為紫杉醇的0. 09 0. 90倍，將其溶于植物油中制備水包油亞微乳劑時(shí)，內(nèi)油相中包裹 的復(fù)合物總量較少，有利于提高包封率，且長期貯存不易破乳，物理穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性更 好。經(jīng)比較研究，以本發(fā)明的復(fù)合物為中間載體制備的亞微乳劑，包封率高達(dá)85% 96%， 25°C貯存12個(gè)月質(zhì)量穩(wěn)定，而200810168212. 5專利所述的亞微乳劑包封率為70%左右， 25°C貯存12個(gè)月出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象，雜質(zhì)明顯升高。4)安全性高本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，在處方中不含CremopherEL，避免了 市售注射劑因含有大量Cremopher EL而引發(fā)的嚴(yán)重過敏反應(yīng)，同時(shí)明顯降低了膽固醇的含 量，減少了因膽固醇大量攝入而可能引發(fā)的不良反應(yīng)。下面將參照
和實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng) 理解，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例以及使用的制備方法。而且，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā) 明的描述可以對本發(fā)明進(jìn)行對其進(jìn)行等同替換、組合、改良或修飾，但這些都將包括在本發(fā) 明的范圍內(nèi)。
圖1 試驗(yàn)例2中不同摩爾比的復(fù)合物和物理混合物的DSC曲線2 試驗(yàn)例5的X-射線衍射3 試驗(yàn)例6的紅外光譜4 試驗(yàn)例7的紫外光譜圖
具體實(shí)施例方式制備實(shí)施例實(shí)施例1紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇9. 0g，膽固醇0. Slg置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入丙酮3000ml將其溶解，在 40°C的溫度下攪拌1小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)40°C減壓真空干燥 12小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 2g，收率93. 8%。實(shí)施例2紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇9. Og,膽固醇0. 99g置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入四氫呋喃3000ml將其溶解， 在25°C的溫度下攪拌1小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)25°C減壓真空干 燥12小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 5g，收率95. 0%。實(shí)施例3紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇8. 5g，膽固醇1. 275g置于三角瓶中，加入四氫呋喃3000ml將其溶解，在 45°C溫度條件下攪拌1. 5小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)45°C減壓真空 干燥16小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 3g，收率95. 1%。
實(shí)施例4紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇8. 0g，膽固醇1. 84g置于三角瓶中，加入丙酮IOOOml將其溶解，在35°C 溫度條件下攪拌1小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)35°C減壓真空干燥10 小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 2g，收率93. 5%。實(shí)施例5紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇7. 0g，膽固醇3. 15g置于三角瓶中，加入丙酮32500ml將其溶解，在50°C 溫度條件下攪拌2小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)50°C減壓真空干燥15 小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 5g，收率93. 6%。實(shí)施例6紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇7. 0g，膽固醇4. 2g置于三角瓶中，加入5000ml的乙酸乙酯將其溶解，在 55°C溫度條件下攪拌1小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)40°C減壓真空干 燥15小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物10. 4g，收率92. 9%。實(shí)施例7紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇5. 2g，膽固醇4. 68g，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入3000ml的二氯甲烷將其溶 解，在60°C溫度條件下攪拌2. 5小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)55°C減 壓真空干燥15小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 3g，收率94. 1 %。實(shí)施例8紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇5. 2g，膽固醇4. 68g，維生素E 0. 05g，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入4000ml的 四氫呋喃將其溶解，在40°C溫度條件下攪拌1小時(shí)，噴霧干燥15小時(shí)去除溶劑，經(jīng)55°C減 壓真空干燥15小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 2g，收率93. 1%。實(shí)施例9紫杉醇膽固醇復(fù)合物取紫杉醇5. 2g，膽固醇4.68g，維生素E 0. 05g，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入5200ml 的乙醇和叔丁醇的混合物將其溶解，在45°C溫度條件下攪拌1小時(shí)，移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法去除溶劑，經(jīng)65°C減壓真空干燥15小時(shí)，得到紫杉醇膽固醇復(fù)合物9. 3g，收率 94. 1%。實(shí)施例10 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的亞微乳劑取甘油25g溶于約720ml注射用水中，加熱至40_60°C，加入精制大豆卵磷脂15g 和泊洛沙姆(188) 30g，置組織搗碎機(jī)中處理，使成均勻水相，保持在該溫度下；另分別取實(shí) 施例1至實(shí)施例9中的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇500mg)，加入200ml大豆 油中，加熱到40 60°C，制成油相。在攪拌條件下將水相緩緩加入至油相，攪拌使形成均勻 初乳。將初乳迅速轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)數(shù)次，用0. lmol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 0-6. 0， 并加水至1000ml，收集全部乳液，115°C滅菌30分鐘，即得載藥量為0. 5mg/ml的亞微乳劑。 激光粒度測定儀測定，平均粒徑為125nm-150nm。實(shí)施例11 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的亞微乳劑取甘油12.5g溶于約300ml注射用水中，加熱至約50°C，加入精制蛋黃卵磷脂 7. 5g和泊洛沙姆(188) 15g，置組織搗碎機(jī)中處理，使成均勻水相，保持在該溫度下；另取實(shí) 施例5的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇500mg)，加入125ml大豆油中，加熱到 約50°C，制成油相。在攪拌條件下將水相緩緩加入至油相，高速攪拌使形成均勻初乳。將 初乳迅速轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)數(shù)次，用0. lmol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 0-6. 0，并加水至500ml，收集全部乳液，115°C滅菌30分鐘，即得載藥量為1. Omg/ml的亞微乳劑。激光粒度 測定儀測定，平均粒徑為230nm-250nm。實(shí)施例12 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的亞微乳劑取甘油12. 5g溶于約300ml注射用水中，加熱至55°C，加入精制大豆卵磷脂7. 5g 和泊洛沙姆(188) 15g，置組織搗碎機(jī)處理，使成均勻水相，保持在該溫度下；另取實(shí)施例1 至實(shí)施例9中的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇600mg)，加入125ml大豆油中， 加熱到55°C，制成油相。在攪拌條件下將水相緩緩加入至油相，高速攪拌使形成均勻初乳。 將初乳迅速轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)數(shù)次，用0. lmol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 0-6. 0，并加水 至500ml，收集全部乳液，115°C滅菌30分鐘，即得載藥量為1. ang/ml的亞微乳劑。激光粒 度測定儀測定，平均粒徑為125nmj65nm。實(shí)施例13 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的亞微乳劑取甘油12. 5g溶于約300ml注射用水中，加熱至60°C，加入精制大豆卵磷脂7. 5g 和泊洛沙姆(188) 15g，置組織搗碎機(jī)處理，高速攪拌使成均勻水相，保持在該溫度下；另分 別取實(shí)施例1至實(shí)施例9中的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇IOOOmg)，加入 150ml大豆油中，加熱到60°C，制成油相。在攪拌條件下將水相緩緩加入至油相，高速攪拌 使形成均勻初乳。將初乳迅速轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)數(shù)次，用0. lmol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH 至4. 0-6. 0，并加水至500ml，收集全部乳液，115°C滅菌30分鐘，即得載藥量為2. Omg/ml的 亞微乳劑。激光粒度測定儀測定，平均粒徑為125nm-200nm。實(shí)施例14 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的干乳劑取甘油12. 5g溶于約300ml注射用水中，加熱至40_60°C，加入精制大豆卵磷脂 7. 5g和泊洛沙姆(188) 15g，置組織搗碎機(jī)處理，使成均勻水相，保持在該溫度下；另分別取 實(shí)施例1至實(shí)施例9中的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇500mg)，加入125ml 大豆油中，加熱到40 60°C，制成油相。在攪拌條件下將水相緩緩加入至油相，置組織搗碎 機(jī)中高速攪拌使形成均勻初乳。將初乳迅速轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)數(shù)次，用0. lmol/L的 鹽酸調(diào)節(jié)PH至4. 0-6. 0,并加水至500ml，加入3% (W/V)甘露醇溶解，經(jīng)微孔濾膜過濾，進(jìn) 行冷凍干燥，即得干乳劑。收集全部乳液，115°C滅菌30分鐘，即得載藥量為0. 5mg/ml的亞 微乳劑。激光粒度測定儀測定，平均粒徑為125nm-200nm。實(shí)施例15 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的自微乳劑分別取實(shí)施例1-9的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇500mg)，加入中 鏈油25ml，攪拌使溶解，加入8ml PEG400、2. 5ml吐溫80，攪拌均勻，即得均勻透明的自微乳 系統(tǒng)。取上述自微乳系統(tǒng)10ml，加入5%葡萄糖注射液至50ml，即刻形成微乳，粒徑小于 IOOnm0實(shí)施例16 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的膠囊劑分別取實(shí)施例1-9的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇500mg)，裝入2 號硬膠囊中，即得。實(shí)施例17 以紫杉醇膽固醇復(fù)合物為中間載體的片劑分別取實(shí)施例1-9的紫杉醇/膽固醇復(fù)合物適量(相當(dāng)于紫杉醇600mg)，加入 微晶纖維素500mg，乳糖500mg，硬脂酸鎂適量，混合混勻，壓片，片重470mg，每片含紫杉醇150mg。試驗(yàn)例試驗(yàn)例1本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物在油中溶解度的影響因素分析紫杉醇膽固醇的投料比例取實(shí)施例1-7的紫杉醇膽固醇復(fù)合物lg，分別加入注射用大豆油20g，60°C水浴加 熱Ih并振搖，得到過飽和溶液，取樣過濾，稱取續(xù)濾液適量，無水乙醇定容后取20 μ L注入 液相色譜儀，以Kromasil-C18O50mmX4. 6mm，5ym)為色譜柱，乙腈-水(54 46)為流動 相，流速1. OmL/min，檢測波長230nm，依法測定，計(jì)算紫杉醇在植物油中的溶解度。另將紫杉醇與膽固醇按摩爾比為0.33 1,0. 20 1和0. 10 1，重量比為 1 1.37,1 2.沈和1 4. 50進(jìn)行投料，制備3組膽固醇復(fù)合物(參比1、參比2和參比 3)，照上述測定方法，同法測定3組樣品在油中溶解度，考察膽固醇用量增加對油溶性改善 的意義。測定結(jié)果見下表。表1紫杉醇與膽固醇投料比例對復(fù)合物油溶性的影響
權(quán)利要求
1.一種紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其特征在于，由紫杉醇與膽固醇復(fù)合而成，紫杉醇與膽固 醇的重量比為1 0.09 0.90。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其特征在于，紫杉醇與膽固醇的重量 比為 1 0. 15 0. 60。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其特征在于，紫杉醇與膽固醇的重量 比為 1 0. 23 0. 45。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物 還含有抗氧化穩(wěn)定劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物，其特征在于，所述抗氧化穩(wěn)定劑選自 亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、維生素C、EDTA及其鹽、維生素E及其衍生物中的至少一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物的制備方法，其特征在于， 包括如下步驟a.將紫杉醇與膽固醇按比例混合，加入適量有機(jī)溶劑溶解，任選地加入抗氧化穩(wěn)定劑；b.在合適的溫度條件下攪拌，去除有機(jī)溶劑，真空干燥即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，在步驟a.)中，將分別取紫杉醇與膽 固醇，采用不同的有機(jī)溶劑溶解，之后混合。
8.根據(jù)權(quán)利要求6-7中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述有機(jī)溶劑可選自二 氯甲烷、乙醇、甲醇、苯甲醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、叔丁醇中的一種或多種。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-7中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述有機(jī)溶劑可選自乙 醇、丙酮、乙酸乙酯和四氫呋喃中的一種或多種。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的紫杉醇膽固醇復(fù)合物在制備水包油型亞微乳 劑、干乳劑、自微乳系統(tǒng)或口服制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種紫杉醇膽固醇復(fù)合物。本發(fā)明的紫杉醇膽固醇復(fù)合物由紫杉醇和膽固醇復(fù)合而成，紫杉醇和膽固醇的重量比例為1∶0.09～0.90，優(yōu)選1∶0.15～0.60，更優(yōu)選1∶0.23～0.45。本發(fā)明還公開了紫杉醇膽固醇復(fù)合物的制備方法及其在制備亞微乳、干乳劑、自微乳及固體口服制劑中的應(yīng)用。紫杉醇與膽固醇通過分子間非化學(xué)鍵結(jié)合形成復(fù)合物，使藥物在植物油和正辛醇中的溶解度得到最大程度的改善與提高，為制備包封率高、安全性好、質(zhì)量穩(wěn)定的新型乳劑及高生物利用度口服制劑提供了良好的中間載體。
文檔編號A61P5/00GK102048725SQ200910236960
公開日2011年5月11日 申請日期2009年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月29日
發(fā)明者劉玉玲, 夏學(xué)軍, 汪仁蕓, 王洪亮, 郭瑞芳, 金篤嘉 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所