專利名稱：一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種含有溶菌酶及氟苯尼考的混懸劑組合物及 其制備方法。
背景技術(shù)：
溶菌酶是具有溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的一類酶的總稱，其抗菌作用是通過破壞細(xì)胞壁中 的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的0_1，4糖苷鍵，使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解 成可溶性糖肽，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可以與各種誘發(fā)炎癥 的酸性物質(zhì)結(jié)合，使其失活。溶菌酶在臨床上用于各種細(xì)菌和病毒引起的感染、炎癥的治療 和預(yù)防，以及防治慢性呼吸道、慢性支氣管炎，也可以用于包括非特異性的防御感染免疫反 應(yīng)。溶菌酶抗病毒作用是通過與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形 成復(fù)鹽，使病毒失活。研究發(fā)現(xiàn)，溶菌酶不僅對(duì)革蘭氏陽性菌具有較強(qiáng)的殺滅作用，而且具 有良好的抗病毒活性。溶菌酶作為一種天然的蛋白質(zhì)，具有很好的安全性和抗耐藥性，尤其 是目前由于抗生素濫用愈演愈烈的耐藥性問題，使得溶菌酶在臨床應(yīng)用上有很大的優(yōu)勢(shì)。 但是，溶菌酶作為一種蛋白類藥物，同樣存在受到胃酸容易降解失活的問題，使得口服用藥 收效甚微，因此急需開發(fā)新的口服制劑。氟苯尼考具有抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)、吸收良好等優(yōu)點(diǎn)，且相對(duì)比較安全。目前市 場(chǎng)銷售的氟苯尼考制劑主要為粉劑、預(yù)混劑、溶液劑和注射劑。溶液劑和注射劑在治療嚴(yán)重 細(xì)菌性感染方面有其獨(dú)特之處，但由于氟苯尼考難溶于水，在制備時(shí)要加入大量的有機(jī)溶 劑使其溶解，因此在制劑上的費(fèi)用較高，生產(chǎn)復(fù)雜、對(duì)在線生產(chǎn)員工的身體有其危害性等問 題，且對(duì)用藥動(dòng)物有不良應(yīng)激反應(yīng)和刺激性。而粉劑和預(yù)混劑雖然預(yù)防用藥時(shí)給藥不方便、 不易溶水，通過混飼給藥治療效果較差等問題。因此開發(fā)氟苯尼考的混懸劑組合物具有實(shí) 際意義，該組合物的抗菌范圍廣、應(yīng)用范圍廣，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，成本低，用藥安全等特點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑。一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的混懸劑，其特征在于主要成分由氟苯尼 考和溶菌酶組成。一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的組合物，其特征在于主要成分由以下配比 組成溶菌酶1-15 ；氟苯尼考1-30份。其中優(yōu)選于溶菌酶7. 5份、氟苯尼考15份本發(fā)明的另一目的是提供一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的制備方法，包括 如下步驟溶菌酶1-15 ；氟苯尼考1-30份；吐溫-80 2-10份；枸櫞酸鈉1_8份；尼泊金甲 酯0. 1-1. 0份；丙二醇5-20份；注射用水90-100份，并且溶菌酶與氟苯尼考的質(zhì)量比為 1:5-5: 10。
1.稱取溶菌酶1-15和氟苯尼考1-30份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 2-10 份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入枸櫞酸鈉1-8份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入尼泊金甲酯0. 1-1.0份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入丙二醇5-20份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.最后，用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆颍?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩 次均質(zhì)化即得。攪拌時(shí)，攪拌子轉(zhuǎn)速為1000-2000rpm，時(shí)間為30-80分鐘，溫度為室溫，即能形成 外觀均一的含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑產(chǎn)品。一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的制備方法，其中優(yōu)選于溶菌酶7. 5份，氟苯尼考1-30份；吐溫_80，8份；枸櫞酸鈉，1. 6份；尼泊金甲酯， 0. 3份；丙二醇15份；最后用注射用水定容到100份1.稱取溶菌酶7. 5份和氟苯尼考15份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 8份， 充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入枸櫞酸鈉1. 6份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入尼泊金甲酯0. 3份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.加入丙二醇15份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?.最后，用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆?，?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩 次均質(zhì)化即得。攪拌時(shí)，攪拌子轉(zhuǎn)速為1500rpm，時(shí)間為50分鐘，溫度為室溫，即能形成外觀均一 的含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑產(chǎn)品。下面以臨床試驗(yàn)說明本發(fā)明藥物的治療效果應(yīng)用本藥物組合治療雞慢性呼吸道病，雞慢性呼吸道病又稱雞敗血支原體(霉形 體)感染，是由支原體引起的一種呼吸道疾病，其特征是病程長，病理變化發(fā)展慢，臨床上 主要表現(xiàn)為呼吸嗚音、咳嗽、鼻漏及氣囊炎等。該病是養(yǎng)雞業(yè)中常見的多發(fā)病。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明，但所描述內(nèi)容不作為限定本發(fā)明保護(hù) 范圍的依據(jù)。實(shí)施例一一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物及制備方法(1)稱取溶菌酶5份，氟苯尼考10份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 6份，充 分?jǐn)嚢杈鶆颍?2)加入枸櫞酸鈉1份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?3)加入尼泊金甲酯0. 3份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?4)加入丙二醇10份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?5)最后用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆颍?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩 次均質(zhì)化即得。轉(zhuǎn)速為1500rpm，時(shí)間為45分鐘，溫度為室溫。
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實(shí)施例二 一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物及制備方法(1)稱取溶菌酶7. 5份，氟苯尼考15份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 8份， 充分?jǐn)嚢杈鶆颍?2)加入枸櫞酸鈉1. 6份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?3).加入尼泊金甲酯0. 3份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?4)加入丙二醇15份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?5)最后用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆?，?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩 次均質(zhì)化即得。轉(zhuǎn)速為1500rpm，時(shí)間為60分鐘，溫度為室溫。實(shí)施例三一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物及制備方法(1)稱取溶菌酶10份，氟苯尼考20份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 9份，充 分?jǐn)嚢杈鶆颍?2)加入枸櫞酸鈉2份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?3)加入尼泊金甲酯0. 3份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?4)加入丙二醇18份，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?5)最后用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆?，?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩 次均質(zhì)化即得。轉(zhuǎn)速為1500rpm，時(shí)間為45分鐘，溫度為室溫。臨床實(shí)驗(yàn)人工誘發(fā)肉雞慢性呼吸道病例，進(jìn)行溶菌酶混懸劑組合物對(duì)慢性呼吸道病的臨床 試驗(yàn)，試驗(yàn)期間分別統(tǒng)計(jì)死亡率、治愈率、有效率和增重。試驗(yàn)具體情況如下1.材料和方法1. 1試驗(yàn)材料1. 1. 1試驗(yàn)藥物一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物(實(shí)施例二 )，推薦劑 量為每1L水中加本品0.66g，自由飲用，每日一次，連用3日；對(duì)照藥物A 溶菌酶，生產(chǎn)單 位大連三儀動(dòng)物藥品有限公司，使用劑量為混飲或餛飼，推薦劑量為每1L水中加本品lg， 每日一次，連用三日；對(duì)照藥物B 氟苯尼考溶液，生產(chǎn)單位山東中牧獸藥有限公司，推薦劑 量為每1L水中加本品lg，自由飲用，每日兩次，連用3日。1. 1. 2試驗(yàn)菌株雞敗血支原體MG BG44T株購自中國獸藥監(jiān)察所。1. 1. 3試驗(yàn)動(dòng)物10日齡肉雞300只，從天津市靜?？h某養(yǎng)雞場(chǎng)，按常規(guī)程序進(jìn)行飼 養(yǎng)管理，試驗(yàn)前飼喂不含抗菌藥物的全價(jià)飼料，自由飲水，將其隨機(jī)分成六組，第一組為復(fù) 方溶菌酶混懸劑組合物實(shí)驗(yàn)組；第二組為藥物A對(duì)照組；第三組為藥物B對(duì)照組；第四組為 感染對(duì)照組；第五組為健康對(duì)照(不感染)組；第六組為安全劑量組。1. 2試驗(yàn)方法1. 2. 1人工誘發(fā)雞敗血支原體病雞敗血支原體MG BG44T株凍干管經(jīng)4次傳代，生 長濁度達(dá)109CCU/ml即成接種支原體液。除健康對(duì)照組和安全劑量組外，每只雞左、右胸氣 囊各接種支原體液1ml，另用0. 5ml支原體液滴鼻。
1. 2. 2給藥及性狀記錄接種前后分別觀察每只雞的臨床癥狀，如精神狀態(tài)、食欲、 呼吸等變化情況，記錄體重。試驗(yàn)雞接種支原體后，按天記錄各組雞的臨床癥狀、精神狀況， 記錄發(fā)病數(shù)、剖檢死亡雞，試驗(yàn)雞接種支原體7d后，對(duì)各組雞進(jìn)行混飲給藥治療，連續(xù)給藥 3d。每次用藥后觀察臨床癥狀。記錄死亡數(shù)并對(duì)死亡雞進(jìn)行尸體剖檢，觀察氣囊病變，以確 定死因。所有實(shí)驗(yàn)雞繼續(xù)觀察至接種后第14d。1.2. 3療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)死亡率試驗(yàn)期間凡出現(xiàn)雞敗血支原體病典型癥狀并死亡，尸體剖檢氣囊有典型 病變特征的則判斷為死亡。根據(jù)死亡數(shù)計(jì)算死亡率。治愈率凡在試驗(yàn)期間，雞用藥后精神狀態(tài)、食欲、呼吸恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)咳嗽、 啰音、張口呼吸，流鼻液等臨床癥狀者，均屬治愈。根據(jù)治愈雞數(shù)占整個(gè)試驗(yàn)組的比例計(jì)算 治愈率。有效率用藥后，試驗(yàn)雞的精神、食欲、呼吸有明顯好轉(zhuǎn)，體重較用藥前增加者，判 斷為有效。據(jù)此計(jì)算有效率。增重根據(jù)給藥前及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的雞體重，計(jì)算每只雞的增重量，然后算出每組試 驗(yàn)雞的平均增重量。1. 2. 4數(shù)據(jù)的分析處理用生物統(tǒng)計(jì)進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)，其中死亡率、治愈率及 有效率均用卡方檢驗(yàn)，各組之間的差異和增重采用t檢驗(yàn)。2 結(jié)果各組雞的死亡率、治愈率、有效率、平均增重量見表。表臨床驗(yàn)證試驗(yàn)療效結(jié)果 2. 1死亡率各用藥組相比較，復(fù)方溶菌酶混懸劑組合物實(shí)驗(yàn)組死亡率較低。藥物A 和藥物B對(duì)照組及感染對(duì)照組死亡率相對(duì)較高。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，復(fù)方溶菌酶混懸劑組合 物實(shí)驗(yàn)組的死亡率顯著低于對(duì)照組的死亡率。2. 2治愈率與有效率復(fù)方溶菌酶混懸劑組合物實(shí)驗(yàn)組的治愈率較高，均超過 90%。2. 3增重量以復(fù)方溶菌酶混懸劑組合物實(shí)驗(yàn)組最高。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，用藥組增重與感染對(duì)照組比較差異極顯著(P < 0. 01)。2. 4安全性試驗(yàn)健康雞自由飲用11. 25g/3L水濃度的復(fù)方溶菌酶混懸劑組合物， 連用3天。用藥期間，雞精神活潑，采食正常、羽毛豐滿，剖檢后內(nèi)臟器官及組織未見異常。3 結(jié)論3. 1復(fù)方溶菌酶混懸劑組合物用于治療雞敗血支原體病感染具有良好的治療效 果，且治愈率、有效率顯著優(yōu)于對(duì)照組；死亡率顯著低于對(duì)照組。3. 2經(jīng)對(duì)健康雞的安全性試驗(yàn)(推薦劑量3倍飲水用3天)表明，使用期間未見臨 床異常表現(xiàn)，對(duì)健康雞無明顯影響，說明本制劑是安全的。本發(fā)明的有益效果1、該發(fā)明采用了混懸劑型，由于混懸劑的粒子超微細(xì)，比通常的制劑給藥方便，成 本低，對(duì)動(dòng)物機(jī)體和體內(nèi)細(xì)胞具有良好的滲透性，吸收率高，低劑量就能發(fā)揮良好的藥效， 并能減少環(huán)境污染。并提高了藥物的生物利用度及延長了有效血藥濃度在體內(nèi)的維持時(shí) 間。2、該發(fā)明可以提高藥物的生物利用度，最大程度的發(fā)揮藥物組方的抗菌作用，并 且提供確實(shí)、長久的保護(hù)。可以用于預(yù)防和治療各種畜禽敗血支原體病感染。3.在生產(chǎn)的過程中需要的設(shè)備簡(jiǎn)單，降低了生產(chǎn)成本，節(jié)省了大量的人力物力，也 不產(chǎn)生環(huán)境污染，適于在畜牧業(yè)中推廣應(yīng)用。4.對(duì)用于治療畜禽敗血支原體病感染等疾病具有良好的治療效果。
權(quán)利要求
一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的制劑，其特征在于主要成分由氟苯尼考和溶菌酶組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的組合物，其特征在于 主要成分由以下配比組成溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份。其中優(yōu)選于溶菌酶7. 5份、氟苯尼考15份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的制備方法，包括 如下步驟溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份；吐溫-802-10份；枸櫞酸鈉1-8份；尼泊金甲酯 0. 1-1. 0份；丙二醇5-20份；注射用水90-100份。(1)稱取溶菌酶1-15份、氟苯尼考1-30份放入適量注射用水中，加入吐溫-802-10 份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?2)加入枸櫞酸鈉1-8份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?3)加入尼泊金甲酯0.1-1.0份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?4)加入丙二醇5-20份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?5)最后，加注射用水90-100份，充分?jǐn)嚢杈鶆?，?0-100Mpa壓力下進(jìn)行均質(zhì)化即得。 攪拌時(shí)，攪拌子轉(zhuǎn)速為1000-2000rpm，時(shí)間為30-80分鐘，溫度為室溫，即能形成外觀均一的含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑產(chǎn)品。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑的制備方法， 包括如下步驟溶菌酶7. 5份，氟苯尼考15份；吐溫-80，8份；枸櫞酸鈉，1. 6份；尼泊金甲酯，0. 3份； 丙二醇15份；最后用注射用水定容到100份(1)稱取溶菌酶7.5份和氟苯尼考15份放入適量注射用水中，加入吐溫-80 8份，充分 攪拌均勻。(2)加入枸櫞酸鈉1.6份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?3)加入尼泊金甲酯0.3份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?4)加入丙二醇15份，充分?jǐn)嚢杈鶆颉?5)最后，用注射用水定容至100份，充分?jǐn)嚢柚辆鶆?，?0-100Mpa壓力下進(jìn)行兩次均 質(zhì)化即得。攪拌時(shí)，攪拌子轉(zhuǎn)速為1500rpm，時(shí)間為50分鐘，溫度為室溫，即能形成外觀均一的含 有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑產(chǎn)品。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物，其特征在于該 組合物可以用于治療畜禽敗血支原體病感染等疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有溶菌酶和氟苯尼考的混懸劑組合物，是由溶菌酶和氟苯尼考與吐溫-80、枸櫞酸鈉、尼泊金甲酯、丙二醇、注射用水配制成的微乳溶液。此組合物選用溶菌酶和氟苯尼考的配伍，不僅拓寬了抗菌譜，而且高效、低毒、低殘留且不易產(chǎn)生耐藥性；制成混懸劑不僅可以解決氟苯尼考微溶于水的問題，提高了其生物利用度，也保護(hù)了溶菌酶在胃腸液中的活性，同時(shí)也對(duì)二者起到了緩釋作用，使藥物在體內(nèi)維持長時(shí)間的有效血藥濃度，集速效、高效、長效優(yōu)點(diǎn)于一身，可以用于治療畜禽敗血支原體病感染。
文檔編號(hào)A61P11/00GK101874774SQ200910068698
公開日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2009年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月29日
發(fā)明者馬麗偉 申請(qǐng)人:天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司