專利名稱：：一種抗?jié)h坦病毒藥物阿比朵爾的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種抗病毒藥物，更具體涉及一種阿比朵爾抗?jié)h坦病毒的藥物，具體地說，本發(fā)明是一種具有良好抗病毒活性的新化合物，其能在細(xì)胞和動(dòng)物體內(nèi)及人體內(nèi)發(fā)揮抗?jié)h坦病毒的作用，該藥物對(duì)漢坦病毒引起的腎綜合征出血熱(HFRS)既有預(yù)防作用，也有治療作用，未發(fā)現(xiàn)毒副作用。
背景技術(shù)：
：腎綜合征出血熱(hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome,HFRS)是由漢坦病毒(Hantaviruses,HV)引起的經(jīng)嚙齒類動(dòng)物傳播的自然疫源性疾病，人通過氣溶膠吸入、傷口、消化道等途徑感染，該病死亡率高，危害性大，曾被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為可通過氣溶膠傳播的潛在生物武器。中國的發(fā)病人數(shù)占世界總發(fā)病人數(shù)的90.94%，是HFRS的重疫區(qū)。文獻(xiàn)報(bào)道，在HFRS早期使用利巴韋林，可減輕病毒血癥，降低死亡率，因此利巴韋林是目前公認(rèn)的治療HFRS有效的藥物。但在臨床應(yīng)用中，發(fā)現(xiàn)其可引起溶血、降低血紅蛋白，患者不能耐受治療等毒副作用，故研發(fā)新的抗?jié)h坦病毒藥物具有現(xiàn)實(shí)意義。阿比朵爾是非核苷類免疫剌激劑，在體內(nèi)可誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素，對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬功能有顯著的活化作用，具有免疫調(diào)節(jié)作用D我們采用新的合成方法及原料，合成了具有我國知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新藥(CN200510018613.9)，并證明了該藥動(dòng)物體內(nèi)具有抗柯薩奇病毒B3、柯薩奇病毒B5、腺病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒等呼吸道病毒的作用，但其對(duì)漢坦病毒的作用還未見報(bào)道和發(fā)現(xiàn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是在于提供了一種阿比朵爾抗?jié)h坦病毒的藥物，阿比朵爾在制3備治療或預(yù)防漢坦病毒引起的腎綜合征出血熱的藥物中的應(yīng)用，阿比朵爾是非核苷類抗病毒藥物，具有誘生干擾素、增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能及免疫調(diào)節(jié)作用，在體外能保護(hù)細(xì)胞免受漢坦病毒的感染，在體內(nèi)可提高漢坦病毒致死感染動(dòng)物的生存率及平均生存天數(shù)；阿比朵爾在體內(nèi)和體外均有抑制漢坦病毒的作用，臨床上可用于漢坦病毒引起的腎綜合征出血熱(HFRS)病人的治療，人群能較好耐受，未發(fā)現(xiàn)毒副作用，該藥物無毒。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明釆用以下技術(shù)措施一種抗病毒新藥一一阿比朵爾(ArbidolHydrochloride),化學(xué)名為6-溴-4-(二甲氨甲基)-5-羥基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-111-吲哚-3-羥酸乙酯鹽酸鹽-水合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下其中HO-表示羥基，Br-表示溴，CHr表示甲基，CH2N(CH3)2-表示二甲氨甲基，COOC2Hr羧酸乙酯，CH2S-表示硫甲基，HCL表示鹽酸，H20表示水。阿比朵爾為白色晶狀粉末，分子量為531.89,不含影響生物活性的額外化合物和其他雜質(zhì)。阿比朵爾是申請(qǐng)人合成的，其具體合成工藝見文獻(xiàn)(一種抗呼吸道病毒的藥物及用途，專利號(hào)CN200510018613.9)阿比朵爾為水溶性藥物，但溶解度一般，DMSO(二甲基亞砜)可促進(jìn)其溶解。藥物對(duì)小鼠i性作用表現(xiàn)為食欲減退、聳毛、消痩、死亡。藥物對(duì)細(xì)胞的毒性表現(xiàn)一定濃度范圍內(nèi)細(xì)胞變圓、細(xì)胞壁增厚，脫落且吸收度A值下降。阿比朵爾在體外具有明顯抑制漢坦病毒的作用。具體體現(xiàn)在感染前給藥及感染后給藥，病毒感染細(xì)胞陽性率、熒光強(qiáng)度隨濃度增加下降，具有劑量效應(yīng);5pg/ml阿比朵爾在-24h、-12h、0h、2h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)作用后，可明顯降低病毒感染陽性率，具有時(shí)間效應(yīng)；-24h、-12h作用后，病毒mRNA表達(dá)水平下降。阿比朵爾對(duì)乳鼠感染坦病毒具有保護(hù)和治療作用。感染前24h給藥，隨著藥物劑量的增加，小鼠死亡率降低，平均生存時(shí)間延長。感染后24h給藥組，不能提高動(dòng)物的生存率，但可延長動(dòng)物的平均生存天數(shù)。阿比朵爾在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)漢坦病毒具有抑制作用。感染前24h給藥，可減輕組織(肺、腎、腦)病理改變，降低病毒抗原與mRNA表達(dá)水平，調(diào)節(jié)血清中a腫瘤壞死因子水平。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果1、對(duì)漢坦病毒感染既有預(yù)防作用，也有治療作用；2、既有抑制病毒復(fù)制作用，亦有誘導(dǎo)細(xì)胞抗病毒狀態(tài)作用；3、可口服給藥，使用方便；4、為非核苷類藥物，毒性不明顯，腎綜合征出血熱(HFRS)病人耐受性好。圖l為5微克/毫升阿比朵爾不同時(shí)間作用對(duì)漢坦病毒感染細(xì)胞陽性率作用示意圖，圖中結(jié)果顯示于-24h、-12h、0h、+21^以5微克/毫升阿比朵爾作用￥61"0E6細(xì)胞，均可以降低病毒抗原的表達(dá)，與病毒對(duì)照組比較，p<0.05，并具有時(shí)間效應(yīng)。其中*與病毒對(duì)照組比較，AO.05l.VC;2.+2h;3.Oh;4.-12h;5.-24h;圖2為5微克/毫升阿比朵爾不同時(shí)間作用對(duì)漢坦病毒核酸影響示意圖，A為PCR圖片，B為半定量結(jié)果。結(jié)果顯示感染前24h、12h給藥，可降低病毒mRNA的表達(dá)，與病毒對(duì)照組比較，；X0.05，而0h、+211給藥組與對(duì)照組比較，病毒mRNA表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)意i,p>0.05.其中BC.空白對(duì)照；M.分子量對(duì)照；VC.病毒對(duì)照l.VC;2.+2h;3.Oh;4.-12h;5.-24h;*與病毒對(duì)照組比較，p<0.05圖3為阿比朵爾對(duì)漢坦病毒致死性乳鼠感染的保護(hù)作用，圖中A結(jié)果提示感染前24h起始灌胃，可明顯提高乳鼠的生存率及平均天數(shù)，感染乳鼠的體重于感染后28d恢復(fù)；B結(jié)果提示感染后24h起始灌胃，雖不能提高乳鼠生存率，但可以延長平均生存天數(shù)。A.感染前24h用藥組；B.感染后24h用藥組J/K0.05vs.安慰劑對(duì)照組#;<0.05vs.5mg/kg/d.圖4為半定量RT-PCR檢測(cè)不同時(shí)間組織中病毒inRNA表達(dá)水平，結(jié)果提示感染前24h給乳鼠灌藥，可明顯降低肝腎腦組織中病毒mRNA的表達(dá)水平，并具有時(shí)間效應(yīng)。其中HD:20mg/kg/d;MD:10mg/kg/d:LD:5mg/kg/d;VC:安慰劑對(duì)照組；Al.感染后8d檢測(cè)結(jié)果；A2.感染后12d檢測(cè)結(jié)果；A3.感染后16天檢測(cè)結(jié)果；.*;〈0.05vs.安慰劑對(duì)照組#<0.05vs.HD.§p<0.05vs.MD.具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:阿比朵爾對(duì)VeroE6細(xì)胞的毒性作用按照之前的合成工藝(一種抗呼吸道病毒的藥物及用途，專利號(hào)-CN200510018613.9)，我們合成了阿比朵爾，并經(jīng)高效液相檢測(cè)其中無雜質(zhì)及其他成分。將阿比朵爾溶于二甲基亞砜(DMSO)，再溶于雙蒸水中，制成200pg/ml的儲(chǔ)備液，濾過除菌，保存于4。C。用含2。/。小牛血清的MEM細(xì)胞維持液將阿比朵爾稀釋成不同的濃度，200W加入96孔培養(yǎng)板的單層VeroE6細(xì)胞中，同時(shí)設(shè)細(xì)胞對(duì)照，IO天后，觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化并用MTT法進(jìn)行活細(xì)胞染色，讀取ffi570值，根據(jù)OD值計(jì)算細(xì)胞存活率判斷不同濃度藥物對(duì)細(xì)胞毒性的大小，同時(shí)設(shè)溶劑對(duì)照(DMSO:ddH20為1:9混合后過濾除菌，與實(shí)驗(yàn)組相同稀釋比例加入細(xì)胞)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示阿比朵爾對(duì)VeroE6細(xì)胞的毒性表現(xiàn)為細(xì)胞變圓、細(xì)胞壁增厚，脫落且吸光度A值下降。其最大無毒濃度為8^/ml，以SPSS11.5的Probit回歸法處理數(shù)據(jù).，其半數(shù)無毒濃度(CC50)為15.6化g/ml。實(shí)施例2:阿比朵爾體外抗?jié)h坦病毒作用將Vero-E6細(xì)胞接種至6孔板，待長成單層。以O(shè).5-8^g/ml對(duì)倍稀釋的阿比朵爾，按不同方式給藥。具體如下，I(藥物對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用)藥物與細(xì)胞37。C作用2h后，棄去含藥維持液，PBS洗滌兩次，吸附病毒37'C2h，洗滌兩次后更換細(xì)胞維持液；II(直接殺傷)病毒液與不同濃度藥物37。C作用2h,后將混合液與細(xì)胞孵育37。C2h，棄混合液，PBS洗滌兩次，更換細(xì)胞維持液；III(抑制病毒復(fù)制)病毒液吸附細(xì)胞37。C2h，洗滌兩次，加含藥維持液；同時(shí)設(shè)立未感6染細(xì)胞對(duì)照、病毒對(duì)照組，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。37°C、5%C02培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞狀況適時(shí)換維持液或含藥維持液，第10天消化細(xì)胞，點(diǎn)片以間接免疫熒光法(IFA)檢測(cè)病毒抗原；剩下細(xì)胞取l/2體積細(xì)胞懸液，以含1。/。BSA的PBS(PH7.2)洗兩次，棄上清，l毫升90。/。甲醇4。C固定15min，PBS洗滌兩次，棄上清，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度，加入50(il不同濃度A35單克隆抗體37。C孵育lh，同上洗滌2次，加50nl不同濃度的FITC標(biāo)記羊抗鼠抗體避光孵育45min,同上洗滌2次,重懸于500ialPBS中，過膜，以至少l(^個(gè)細(xì)胞在Beclanan流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析；剩余細(xì)胞以TRAZOL按照試劑說明提取細(xì)胞總RNA，取ly1RNA樣品100倍稀釋后在熒光酶標(biāo)儀上分別測(cè)0D260和0D280值；確定其濃度和純度定量。各樣本取l.0ug總RNA逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括10xBufferRT2^、10mMdNTPMixl|xl、lOURnasin、20pmol隨機(jī)引物和轉(zhuǎn)錄酶M-MLVlpl(200U4U)，無RNase水補(bǔ)足體積至20y1，充分混勻，短暫離心收集反應(yīng)液至管底，將反應(yīng)管放入PCR(E卯endorf公司)儀進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄42°C60min，95°C5min得到cDNA模板。在50W的PCR反應(yīng)體系中加入10XBuffer5W,SMF、SMR引物各lOpmol，10mMdNTPH10^1cDNA模板，Taq酶(200u/ri)l叱以DEPC處理的去離子水，補(bǔ)足終體積50Pl。以hctin為內(nèi)參，同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和空白對(duì)照。將反應(yīng)管放入PCR(Eppendorf公司)儀進(jìn)行擴(kuò)增94。C預(yù)變性180s，94°C45s，55°C45s,72°C45s共30個(gè)循環(huán)，72。C延伸420s。取5WPCR產(chǎn)物在1多瓊脂糖凝膠上電泳，并設(shè)分子量對(duì)照，EB染色后在紫外透射儀下觀察結(jié)果，以Bandscan5.0(Glyko,Japan)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。另取5卩g/ml的阿比朵爾，分別于-24h、-12h、0h及2h(感染時(shí)為0h)給藥，病毒核酸抗原檢測(cè)同f。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，分別以0.5、1、2、4、8Pg/nil濃度阿比朵爾按三種方式作用至病毒感染細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示，藥物抗吸附組，病毒感染細(xì)胞陽性率有明顯降低；藥物抑制病毒復(fù)制組次之；藥物對(duì)病毒直接作用組，各濃度對(duì)病毒感染后抗原的表達(dá)無明顯影響，見表l。在熒光顯微鏡下觀察，陰性對(duì)照細(xì)胞未見熒光，病毒對(duì)照細(xì)胞可見胞漿中有翠綠色熒光，強(qiáng)度為++—+++，藥物抗吸附組與藥物抑制病毒復(fù)制組，隨著藥物濃度的增加，可見有熒光的細(xì)胞數(shù)目減少及熒光強(qiáng)度減弱，與流式細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果一致。5化/ml阿比朵爾在感染的不同時(shí)間作用后，流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)檢測(cè)各組病毒感染細(xì)胞的陽性率，-24h、-12h組陽性率明顯降低，3次不同實(shí)驗(yàn)陽性率的均數(shù)分別為19.73%、25.16%，0h、.2h組的陽性率均數(shù)為28.63%,34.70°/。，各組陽性率與病毒對(duì)照組(40.97%)比較，/X0.05，結(jié)果見圖l。RT-PCR擴(kuò)增，進(jìn)行半定量分析(n=3)，結(jié)果顯示-24h、-12h給藥，病毒mRNA表達(dá)量與病毒對(duì)照比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(;X0.05);Oh、2h組病毒mRNA表達(dá)量與病毒對(duì)照比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(pX).05);見圖2。表l阿比朵爾對(duì)漢坦病毒感染VeroE6細(xì)胞的抑制作用濃度(lVml)I(抗感染)II(直接殺傷)ffi(抑制病毒復(fù)制)FACS(%)IFAFACS(%)IFAFACS(o/o)IFA0.5*8.57±1.17+25.60±1.08++*6.67±0.78+1*2,90±0.60+/-20.37±1.21++/+*8.50±1.35+2*8.00±0.85+20.23±1.12++/+*11.40±1,10+4*3.23±1.22+/-25.33±0.91++*7.87±0.75+8*2.47±1,58+/-26.37±1.40++*1.60±1.37+/-VC26.6±0.74++26.8±2.71++19.03±2.91++aX±SD承與VC組比較，/XO.05注aX±SD*與病毒對(duì)照組比較，p<0.05實(shí)施例3:阿比朵爾對(duì)乳鼠的毒性作用首先做最大耐受量試驗(yàn)。最大耐受量(MTD)試驗(yàn)即以最大允許濃度和動(dòng)物能耐受的最大容積給藥一次，觀察14天，記錄動(dòng)物反應(yīng)情況。觀察期內(nèi)如動(dòng)物不出現(xiàn)死亡或中毒癥狀，則認(rèn)為該藥對(duì)某種動(dòng)物某種給藥途徑的MTD為某一數(shù)值(mg'kg"或g'kg'1)。阿比朵爾灌胃給藥，lmg'kg-1，0.5mH0g'1鼠觀察14天，觀察動(dòng)物有無中毒和死亡的情況，根據(jù)最大耐受量試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行急性毒性和亞急性試驗(yàn)。Balb/C1日齡乳鼠灌胃給藥lmg'kg",14d內(nèi)動(dòng)物無中毒和死亡情況，說明阿比朵爾對(duì)Balb/cl日齡乳鼠灌胃給藥途徑MTD為lmg'kg-l，為實(shí)際8無毒物質(zhì)。結(jié)果提示，阿比朵爾對(duì)1日齡乳鼠的LD50為78.42mg.kg:d—、在40mg.kg—'.d—'之下各劑量組，動(dòng)物無死亡，且體重與正常組間比較，無明顯差異。實(shí)施例4:阿比朵爾在乳鼠體內(nèi)的抗?jié)h坦病毒作用隨機(jī)將乳鼠分組(F30/組)，即正常對(duì)照組、安慰劑對(duì)照組、5mg/kg/d組、10mg/kg/d組、20mg/kg/d組。將正常對(duì)照組顱內(nèi)注射2%MEM培養(yǎng)基，其余組顱內(nèi)接種20W100LDs。的漢坦病毒。灌藥起始時(shí)間為-24h、+24h(以接種病毒時(shí)間為Oh)，按體重分別灌胃以0.5%羧甲基纖維素混懸的不同濃度藥物2(H4qd，正常對(duì)照組與安慰劑對(duì)照組灌20W0.5y。羧甲基纖維素，各組動(dòng)物每日稱重，根據(jù)體重變化調(diào)整灌胃藥物濃度，連續(xù)灌藥10天。于28天內(nèi)觀察動(dòng)物癥狀體征的變化及死亡率。分別于感染后4、8、12、16天處死4只動(dòng)物，取肺、腦、腎及血清。各組織樣本1/3經(jīng)4%多聚甲醛固定，病理切片；1/3用于冰凍切片，間接免疫熒光(IFA)檢測(cè)病毒抗原；余下部分，提取組織總RNA，半定量RT-PCR檢測(cè)病毒mRNA表達(dá)水平。存活動(dòng)物28d處死，處理同前。血清中TNF-a含量以雙抗體夾心法ELISA檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為感染后ll-13d內(nèi)動(dòng)物出現(xiàn)體重減輕，聳毛，弓背，尾強(qiáng)直，反應(yīng)性增高，后肢癱瘓，發(fā)病后三天內(nèi)死亡。在肺、腎、腦組織中可檢測(cè)到病毒'的特異性抗原。器官組織勻漿液接種至Vero-E6細(xì)胞15d,IFA法可在胞漿中檢測(cè)到翠綠色的顆粒狀或片狀熒光。提前給藥組中，10mg/kg/d、20mg/kg/d組動(dòng)物出現(xiàn)癥狀的時(shí)間較安慰劑對(duì)照組晚，且癥狀輕微，初始死亡時(shí)間延后，存活鼠發(fā)病后7-10d癥'狀逐漸消失，體重恢復(fù)正常。5mg/kg/d組與安慰劑對(duì)照組間在出現(xiàn)癥狀的時(shí)間及病情輕重上均無差異；感染后給藥組中，10mg/kg/d組、20mg/kg/d組出現(xiàn)癥狀時(shí)間較對(duì)照組延后。經(jīng)阿比朵爾感染前給藥，10mg/kg/d、20rag/kg/d組存活率為33.3%，60%，平均生存天數(shù)為21.50、23.80d，與安慰劑對(duì)照組比較，顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，代0.05，5mg/kg/d組的存活率及平均生存天數(shù)與安慰劑對(duì)照組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，/">0.05;感染后給藥，各組動(dòng)物存活率均為0，10mg/kg/d、20mg/kg/d組的平均生存天數(shù)分別為16.44、16眉，與安慰劑對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(代0.Q5)。結(jié)果見圖3實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，感染后12天，可明顯降低用藥組動(dòng)物肺組織中病毒抗原的表達(dá)，感染后28天的存活動(dòng)物腦組織中病毒抗原消失，除1只動(dòng)物外，肺組織與腎組織中亦無病毒抗原表達(dá)。見表3。表3阿比朵爾對(duì)漢坦病毒感染乳鼠組織中病毒抗原表達(dá)的作用官20mg/kg/d.10mg/kg/d5mg/kg/dplacebocontrols12dpi28dpi12dpi28dp12dpi28dpi12dpi28dpi++++++/+++ND+++/+++NDb+b++++/+++++/+++++/+++ND+++/+++NDb十b++++/++++-/++++/+++ND+++/+++NDb_^_b+_a.熒光以"+"判斷.-0%;+00/。~25%;++25%~50o/o;+++50%~750/o;++++75%~100%;b.感染28天無存活動(dòng)物ND:未檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，感染后12天，可明顯減輕用藥組動(dòng)物肺組織中病理改變，感染后28天的存活動(dòng)物肺組織中病變消失，腦組織與腎組織中出血灶減少。半定量RT-PCR結(jié)果顯示，感染后4天，組織中檢測(cè)不到病毒mRNA;感染后8天，用藥組動(dòng)物肺組織中病毒mRNA水平表達(dá)下降，呈劑量效應(yīng)；感染后16天，用藥組動(dòng)物肺、腦組織中病毒mRNA水平表達(dá)下降，呈劑量效應(yīng)，腎組織大劑量組(20mg/kg/d)mRNA水平表達(dá)下降。結(jié)果見圖4.血清中TNF-a檢測(cè)結(jié)果表明，感染后第4天，病毒對(duì)照組可誘生高水平的TNF-a(183.58pg/ml)，各用藥組TNF-a血清水平降低，呈劑量效應(yīng)。見表4。實(shí)施例5:阿比朵爾治療流行性出血熱(HFRS)的臨床研究采用隨機(jī)、雙盲和安慰劑對(duì)照的臨床實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。受試對(duì)象為年齡》18歲，《65歲；發(fā)熱》37.8。C，HFRSIgM抗體陽性，符合HFRS病例診斷標(biāo)準(zhǔn)；出現(xiàn)癥狀后不超過36h，共入組32例。合格的受試者隨機(jī)接受阿比朵爾膠囊治療或安慰劑治療，300mg/次，2次/d,歷時(shí)5d。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示按照規(guī)定服用藥物并完肺+/++-/+腎+++-/+腦+++-成所有隨訪且實(shí)驗(yàn)室檢查證明為漢坦病毒感染的病例，實(shí)驗(yàn)組為16例，對(duì)照組為16例。兩組疾病緩解率經(jīng)生存分析Logrank檢驗(yàn)，試驗(yàn)組緩解率高于對(duì)照組。試驗(yàn)組疾病持續(xù)時(shí)間中位數(shù)為76h，對(duì)照組疾病持續(xù)時(shí)間中位數(shù)為98h，兩組比較差異有顯著性(P<0.01)。試驗(yàn)組癥狀總分下降值的曲線下面積中位數(shù)為758，對(duì)照組中位數(shù)為632，兩組經(jīng)Wilcoxon檢驗(yàn)差異有顯著性(P<0.01)。所有受試對(duì)象未出現(xiàn)明顯的可能與研究藥物有關(guān)的不良反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明阿比朵爾在HFRS發(fā)病后早期使用可以縮短疾病的持續(xù)時(shí)間，減輕癥狀的嚴(yán)重程度和死亡率，對(duì)HFRS有很好的治療作用，而且安全性和耐受性好，適合在臨床使用。表4阿比朵爾對(duì)漢坦病毒感染乳鼠血清中TNF-a的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>a.感染前24h起始灌胃10db.最低檢測(cè)限為15.63pg/mlc.病毒對(duì)照組灌胃0.5%羧甲基纖維素ND:未檢測(cè)**與病毒對(duì)照組比較，^<0.01。權(quán)利要求1、一種阿比朵爾在制備治療或預(yù)防漢坦病毒引起的腎綜合征出血熱的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種抗?jié)h坦病毒藥物阿比朵爾的用途，阿比朵爾在體外具有明顯抑制漢坦病毒的作用，病毒進(jìn)入細(xì)胞前給藥抗病毒作用強(qiáng)于病毒進(jìn)入細(xì)胞后給藥。具體體現(xiàn)在感染前給藥及感染后給藥，病毒感染細(xì)胞陽性率、熒光強(qiáng)度隨濃度增加下降，具有劑量效應(yīng)；可明顯降低病毒感染陽性率，病毒mRNA表達(dá)下降。阿比朵爾對(duì)乳鼠感染漢坦病毒具有保護(hù)和治療作用，保護(hù)作用強(qiáng)于治療作用。感染前24h給藥，隨著藥物劑量的增加，小鼠死亡率降低，平均生存天數(shù)延長。感染后24h給藥組，不能提高動(dòng)物的生存率，但可延長動(dòng)物的平均生存天數(shù)。阿比朵爾在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)漢坦病毒具有抑制作用。感染前24h給藥，可減輕組織(肺、腎、腦)病理改變，對(duì)HFRS有治療作用。該藥物對(duì)漢坦病毒引起的腎綜合征出血熱(HFRS)病人既有預(yù)防作用，也有治療作用，未發(fā)現(xiàn)毒副作用。文檔編號(hào)A61K31/404GK101461805SQ20091006053公開日2009年6月24日申請(qǐng)日期2009年1月16日優(yōu)先權(quán)日2009年1月16日發(fā)明者劉穎娟,楊占秋,王又又,石麗橋,凡羅,紅肖,鄧海英,瓊鐘申請(qǐng)人:武漢大學(xué)