專利名稱：：枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明與枇杷葉提取物用于降低血糖的藥物的劑型有關(guān)。
背景技術(shù)：
：枇杷葉提取物總?cè)扑岷芄帷R墩果酸、科羅索酸和山楂酸四種三萜酸。有文獻(xiàn)服道枇杷葉提取物可用來治療糖尿病和預(yù)防肥胖及減肥作用，可對血糖水平進(jìn)行有效的控制。枇杷葉總?cè)扑崮茌^快恢復(fù)胰島素敏感性，將血糖降到正常水平；同時具有減肥降脂的功能。枇杷葉提取物在臨床應(yīng)用中的劑型主要是膠囊，顆粒，口服液等，美國以科羅索酸為質(zhì)量指標(biāo)的減肥保健品已上市多年，枇杷葉提取物由于純度低，用于降低血糖的服用劑量比較大，每次約1一2克，每日3—6克，服用不便，口感不好，功能單一。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種服用方便，安全，口感好，可綜合調(diào)理身體代謝平衡，降低血糖和減肥效果好的枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的本發(fā)明枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片，它是由如下重量份的原料制成枇杷葉提取物0.5—2.0木脂素0.12—0.18檸檬酸0.7—1.1碳酸氫鈉0.4—0.8木糖醇0.08—0.12乳糖0.24—0.3矯味劑0.Ol—O.03先將枇杷葉提取物與木糖醇，乳糖以等量多次混合法混勻，再與其它原料用同法混勻后壓片。它還包括如下重量份的原料維生素C0.03_0.05維生素B20.002—0.004維生素B60.002—0.004枇杷葉提取物的制備方法如下(1)、將干燥的枇杷葉粉碎；(2)、用乙醇或甲醇或含水量《30X(w/w)的甲醇或乙醇加熱至70-85。C回流提取，枇杷葉與溶劑重量比為l:4至1:6，提取3次，每次2至3小時；(3)、濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；(4)、浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；(5)、過MCI柱分離純化，85%-90%(W/W)乙醇洗脫，洗脫液蒸干得淡黃色至類白色粉末，亦即枇杷葉提取物——枇杷葉總?cè)扑?。枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片服用更加方便。更重要的是該劑型符合大眾心理，使服用者感到是在飲用保健食品，而不是在吃藥，而且口感極佳，攜帶方便，人們普遍樂于接受。本發(fā)明還包含各類純天然維生素，主要包括維生素C、B2、B6等。維生素是機(jī)體維持正常生命活動所必不可少的一類有機(jī)物質(zhì)，參與機(jī)體新陳代謝，如果缺乏會導(dǎo)致一定疾病。人體不能夠自身合成維生素，必須從食物中獲得。維生素種類繁多，分為A、B、C、D、E等等。各種維生素對人體的作用是不同的，它們在人體的儲量也是不同的。除了從食物中獲得以外，人們應(yīng)該及時補(bǔ)充維生素特別是那些自身含量很少又不易從食物中獲得的。本發(fā)明嚴(yán)格選用天然維生素，與合成品相比，天然維生素更符合人體的需要。人工合成的維生素是在工廠或?qū)嶒炇覂?nèi)合成的化學(xué)物質(zhì)；而天然的維生素則是從食物中分離提取的。天然維生素取自綠色蔬菜和水果，具有許多合成維生素沒有的特點和功能，補(bǔ)充蔬菜和水果中所含的各種維生素。本發(fā)明以枇杷葉提取物為主要原料，配以多種維生素，與其他功能性塑身保健產(chǎn)品相比有許多突出優(yōu)點1、安全性高。枇杷葉提取物本身來源于果樹枇杷樹葉，可以正常代謝而不在體內(nèi)蓄積。枇杷葉已有上千年的藥用歷史，已在中國藥典2005版收載。安全可靠。本發(fā)明的枇杷葉提取物的純度高，用量少。2、效果顯著。本發(fā)明可快速減輕體重和起到預(yù)防肥胖的作用，不僅能把脂肪轉(zhuǎn)化為能量而不喪失肌肉和水分，還能夠達(dá)到從根本上減輕體重和改善體型的效果。3、綜合調(diào)理身體代謝平衡。杷葉提取物不僅能夠減肥，還可以降低血脂和調(diào)節(jié)血糖，再加上多種純天然維生素的補(bǔ)充攝取，可為機(jī)體提供全方位、健康的營養(yǎng)元素。4、本發(fā)明穩(wěn)定、性能良好，有較長的有效期；原料來源穩(wěn)定可靠，生產(chǎn)容易；不僅減肥降脂和降糖，預(yù)防肥胖，而且同時還補(bǔ)充多種天然維生素。'45、本發(fā)明經(jīng)體外PTP1B酶抑制活性的測試，枇杷葉總?cè)扑岬囊种苹钚訧Cs。為2.8ug/mL。此外，動物試驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明對四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠模型具有明顯的降血糖和減少飲水量、排尿樣的作用，并且三個月給藥后停止給藥，一個月內(nèi)，76%的小鼠的血糖水平可以基本保持穩(wěn)定。可見本發(fā)明提供的枇杷葉總?cè)h酸組合物有強(qiáng)PTP1B抑制活性，并且具有標(biāo)本兼治的效果，對于開發(fā)防和治療糖尿病、肥胖癥等由胰島素抵抗引起的疾病的保健品是可行的。藥效和毒理研究結(jié)果表明，本發(fā)明具有明顯的降糖作用，且安全無明顯毒副反應(yīng)。枇杷葉總?cè)扑峥梢暂^快速恢復(fù)胰島素敏感性。枇杷葉三萜酸組合物可以在對血糖水平進(jìn)行有效的控制的同時，改善胰島功能，增加胰島素敏感性，減低胰島素抵抗，提高機(jī)體免疫力，得到治標(biāo)治本的作用。其作用機(jī)理及其活性強(qiáng)度，可以作為n型糖尿病的防治保健藥。本發(fā)明工藝簡單、易于大規(guī)模生產(chǎn)，所得提取物的枇杷葉四種主要三萜酸含量高達(dá)85%以上。目前市場上提供的枇杷葉三萜酸的純度一般為50-60%,本發(fā)明采用最新的材料結(jié)合優(yōu)化的工藝條件，使產(chǎn)品的質(zhì)量得到大大的提高，而且操作簡單，易于放大。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述本發(fā)明的三種配方如下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>泡騰片制備工藝先將枇杷葉提取物、木糖醇、乳糖、分別過80目篩，再將剩余的分別過IOO目篩；稱取處方量的原輔料，先將原藥與木糖醇和乳糖、以等量多次混合法混勻，再與剩余的原料法混勻，用C25mm平凹壓片，經(jīng)檢驗合格后包裝，即得.枇杷葉提取物的制備方法如下實施例h干燥的枇杷葉30kg粉碎過20目篩，用150L80%乙醇加熱至70-85t:回流提取，提取3次，每次2小時；濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；通過MCIGEL柱，85%乙醇洗脫，分部收集，TLC檢測，蒸干得淡黃色至類白色粉末285g，四種三萜酸含量測定HPLC85.8%，亦即枇杷葉總?cè)h酸。實施例2:干燥的枇杷葉30kg粉碎過20目篩，用120L80%乙醇加熱至70-85。C回流提取，提取3次，每次2小時；濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；通過過MCIGEL柱，90。/。乙醇洗脫，分部收集，TLC檢測，蒸干得淡黃色至類白色粉末315g，四種三萜酸含量測定HPLC86.5%，亦即枇杷葉總?cè)扑?。實施?:干燥的枇杷葉30kg粉碎過20目篩，用120L90%乙醇加熱至70-85。C回流提取，提取3次，每次2小時；濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；通過過MCIGEL柱，80%乙醇洗脫，分部收集，TLC檢測，蒸干得淡黃色至類白色粉末330g，四種三萜酸含量測定HPLC85.7%,亦即枇杷葉總?cè)扑?。實施?:干燥的枇杷葉30kg粉碎過20目篩，用120L甲醇加熱至70-85〔回流提取，提取3次，每次2小時；濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；通過過MCIGEL柱，90%乙醇洗脫，分部收集，TLC檢測，蒸干得淡黃色至類白色粉末300g，四種三萜酸含量測定HPLC85.4%,亦即枇杷葉總?cè)扑?。實施?:干燥的枇杷葉300kg粉碎過20目篩，用900L80%乙醇加熱至7.0_85°C回流提取，提取3次，每次2小時；濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；通過過MCIGEL柱，90%乙醇洗脫，分部收集，TLC檢測，蒸干得淡黃色至類白色粉末2.7kg，四種三萜酸含量測定HPLC85.9%，亦即枇杷葉總?cè)扑帷１景l(fā)明的實驗例如下下面通過藥理試驗來說明本發(fā)明枇杷葉總?cè)扑岬纳锘钚砸?、PTP1B抑制活性測試(一)測試原理利用分子生物學(xué)手段在大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)人源蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酯酶lB(hPTPlB)催化結(jié)構(gòu)域，經(jīng)純化后的hPTPlB重組蛋白能水解底物對硝基苯基磷酸酯(PNPP)的磷酯鍵，得到的產(chǎn)物在410nnl處有很強(qiáng)的光吸收，因此可以通過直接檢測410nm處光吸收的變化以觀察酶的活性變化以及化合物對酶活性的抑制情況。標(biāo)準(zhǔn)的測活體系如下10mM三羥甲基氨基甲垸鹽酸鹽，PH7.6,10mM對硝基苯基磷酸酯，2X二甲亞砜(DMS0)，100nMhPTPlB。(二)觀察指標(biāo)動態(tài)測定波長為410nlm處的光吸收，時間為3分鐘，其動力學(xué)曲線一級反應(yīng)的斜率作為酶的活性指標(biāo)。.(三)樣品測試將所有被測樣品黃芪多糖、總?cè)扑峒皟烧叩牟煌壤M合物用DMSO配成lmg/ml溶液，從中取2uL的樣品放入一微孔，然后加入2uL的底物PNPP，93uL的緩沖液，5uL的PTPlB酶，搖勻后放入酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù)，經(jīng)數(shù)據(jù)處理得到抑制率。對抑制活性高于50%時，再配制系列濃度如10ug/mL，5ug/mL，lug/mL，0.5ug/mL,0.lug/mL等，測試抑制率，經(jīng)數(shù)據(jù)處理得出ICs。值。陽性對照品為正釩酸鈉(4ug/ml的DMSO溶液)。測試結(jié)果黃芪多糖的抑制活性ICs。為6.lug/mL，枇杷葉總?cè)扑岬囊种苹钚訧G。為2.8ug/mL。兩者最佳組合物的總抑制活性IC5。為1.9ug/mL。二、藥理活性實驗枇杷葉總?cè)扑釋λ难踵奏ふT發(fā)的糖尿病模型小鼠糖耐量的影響雄性四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病模型小鼠50只，體重23-26g，以生理鹽水為空白對照；60mg/kg正釩酸鈉水溶液為陽性對照晶；受試樣品為、枇杷葉總?cè)扑?，根?jù)實施例1的方法制備，模型小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別灌服生理鹽水、正釩酸鈉水溶液(60mg/kg)和受試樣品的1%羧甲基纖維素鈉懸液，(200mg/kg)，每日一次，連續(xù)4周，末次給藥后禁食12小時，灌服葡萄糖溶液(2g/kg)，30rain后取血測定血糖。試驗結(jié)果見下表生理鹽水組正釩酸鈉組枇杷葉總?cè)扑峤M血糖濃度27.821.219.5劑量60mg/kg200mg/kg24%30%_從上表可以看出，對于四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠模型'枇杷葉總?cè)剿峋忻黠@的降血糖作用。7本發(fā)明各測定方法如下枇杷葉總?cè)扑岬母咝б合嗌V含量測定色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一0.1%醋酸溶液(85:15)為流動相；檢測波長為215nm。理論板數(shù)按科羅索酸峰計算應(yīng)不低于4000。權(quán)利要求1、枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片，它是由如下重量份的原料制成枇杷葉提取物0.5-2.0木脂素0.12-0.18檸檬酸0.7-1.1碳酸氫鈉0.4-0.8木糖醇0.08-0.12乳糖0.24-0.3矯味劑0.01-0.03先將枇杷葉提取物與木糖醇，乳糖以等量多次混合法混勻，再與其它原料用同法混勻后壓片。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的泡騰片，其特征在于它還包括如下重量份的原料維生素C0.03—0.05維生素B20.002—0.004維生素B60.002—0.0043、根據(jù)權(quán)利要求l所述的泡騰片，其特征在于枇杷葉提取物的制備方法如下(1)、將干燥的枇杷葉粉碎；(2)、用乙醇或甲醇或含水量《30X(w/w)的甲醇或乙醇加熱至70-85'C回流提取，枇杷葉與溶劑重量比為l:4至1:6，提取3次，每次2至3小時；(3)、濾出提取液，減壓濃縮至浸膏；(4)、浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加熱使其溶解；(5)、過MCI柱分離純化，85%-90%(W/W)乙醇洗脫，洗脫液蒸干得淡黃色至類白色粉末，亦即枇杷葉提取物一一枇杷葉總?cè)扑?。全文摘要本發(fā)明枇杷葉提取物總?cè)扑崤蒡v片，解決已有枇杷葉提取物用于減肥降脂和降糖的藥物時純度低，服用量大，口感差，功能單一的問題。它是由如下重量份的原料制成枇杷葉提取物0.5-2.0，木脂素0.12-0.18，檸檬酸0.7-1.1，碳酸氫鈉0.4-0.8，木糖醇0.08-0.12，乳糖0.24-0.3，先將枇杷葉提取物與木糖醇，乳糖以等量多次混合法混勻，再與其它原料用同法混勻后壓片。文檔編號A61K31/4415GK101564446SQ200910059538公開日2009年10月28日申請日期2009年6月9日優(yōu)先權(quán)日2009年6月9日發(fā)明者放楊申請人:四川道地藥材科技開發(fā)有限公司