專利名稱：藍(lán)萼香茶菜中二萜類化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是藍(lán)萼香茶菜中二萜類化合物藍(lán)萼甲 素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、.藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素和藍(lán)萼己素用于制備 抗癌藥物的用途。
背景技術(shù)：
藍(lán)萼甲素(Glaucocalyxin A) (RJOl)、藍(lán)萼乙素(Glaucocalyxin B) (RJ02)、藍(lán)萼丙素(Glaucocalyxin C)(RJ04)、藍(lán)萼丁素(Glaucocalyxin D) ( RJ03 )、藍(lán)萼戊素(Glaucocalyxin E) ( RJ05 )和藍(lán)萼己素 (Glaucocalyxin F) ( RJ06)是從唇形科香茶菜屬植物藍(lán)萼香茶菜 (i flMas/<3乂a/ om.c" (Burm. f.) Hara var. g/awcoc一;c (Maxim.) Hara ) 的全草中分離得到的貝殼杉烷型二萜類化合物桂明玉，等。藍(lán)萼香 茶菜化學(xué)成分研究II，中國(guó)藥學(xué)雜志，2000; 35 (6) 375; ZhaoBao Xiang (項(xiàng)昭保)，Hai Sheng Chen(陳海生)，et al. Two new diterpenoids from i a^肌'a /a/ om.c" var. x， Chinese Chemical Letter
2008;19:852-854; ZhaoBao Xiang(項(xiàng)昭保)，Hai Sheng Chen(陳海生)， et al. Diterpenoids from WaWas/a /opom'ca Asian Journal of Chemistry 2009; 21: 3;。有研究表明藍(lán)萼甲素具有顯著抑制ADP,AA,PAF等 誘導(dǎo)的兔血小板聚集張濱;等。藍(lán)萼甲素對(duì)兔血小板聚集及cAMP 含量的影響。中國(guó)藥理學(xué)報(bào)，1993; 14 (4): 347-350。藍(lán)萼己素為
3本發(fā)明人從藍(lán)萼香茶菜中分離得到的新化合物ZhaoBaoXiang (項(xiàng) 日召保),Hai Sheng Chen(陳海生)，et al. Two new diterpenoids from i a6do57'a 乂a/ ow/ca var. g/awcoca(yx ， Chinese Chemical Letter 2008;19:852-854。
上述化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下.
《5
《6 2
其中，基團(tuán)Ri選自H、 COCH3 ; R2選自COCH3、 H; R3選自H、 O; R4選自O(shè)H、 O; R5選自CH2、 H ; &選自CH2 、 CH3 ; 117選自O(shè)、 H; R8 選自O(shè)、 OH;
各化合物的基團(tuán)連接分別為
藍(lán)萼甲素R^R2-H; R3,R4=0;RS，R6=CH2;R7，R8=0
藍(lán)萼乙素 R, = H R2=COCH3;R3，R4-0;RS，R6=CH2;R7，R8=0 藍(lán)萼丁素R!-COCH3 R2=H;R3，R4=0;R5，R6=CH2;R7，R8=0 藍(lán)萼丙素R!-R2-H; R3,R4=0;R5，R6=CH2;R7,=H，Rs=OH 藍(lán)萼戊素R!-R2-H; R3，R4=0;R^=H，R6=CH3;R7，R8=O 藍(lán)萼己素R,-R2-H; R3-H;R4 0H;R5，-H，R6-CH3;R7，Rs-0
至今未見(jiàn)有關(guān)藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼
戊素、藍(lán)萼己素和藍(lán)萼X素具有抗癌活性的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素、 藍(lán)萼己素和藍(lán)萼X素提供一種制備抗癌藥物的用途。
本發(fā)明采用MTT法，用A549 (人肺癌細(xì)胞)、LOVO (人腸癌細(xì)胞)、6LCEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)、HL-60 (人白血病細(xì)胞)細(xì) 胞株對(duì)藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素和藍(lán)萼 己素進(jìn)行了細(xì)胞毒活性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們均具有顯著的細(xì)胞毒 活性，因此可用于制備抗癌藥物。
本發(fā)明為尋求抗癌藥物提供了一種新的來(lái)源。
具體實(shí)施例方式
下面通過(guò)體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)描述。
藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素、藍(lán)萼己素體外抗腫瘤活 性試驗(yàn)
1、 試驗(yàn)藥物
藍(lán)萼甲素(RJ0i)、藍(lán)萼乙素(RJ02)、藍(lán)萼丙素(RJ04)，藍(lán)萼丁素 (RJ03)、藍(lán)萼戊素(RJ05)，藍(lán)萼己素(RJ06)從藍(lán)萼香茶菜中分
離得到，制備方法詳見(jiàn)ZhaoBaoXiang(項(xiàng)昭保)，Hai Sheng Chen(陳
海生)，et al. Two new diterpenoids from i a6(ias7'a y^ow'ca var.
g/awcoca/>a， Chinese Chemical Letter 2008;19:852-854; Zhao Bao Xiang (項(xiàng)昭保)，Hai Sheng Chen(陳海生)，et al. Diterpenoids from AWcfcw'"
y'apow/c" Asian Journal of Chemistry 2009; 21: 3。
對(duì)照藥強(qiáng)力霉素(DOX)，石家莊瑞田生化有限公司。
2、 細(xì)胞株由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理研究室提供
①A549 (人肺癌細(xì)胞)；②LOVO (人腸癌細(xì)胞)；③6T-CEM (人 T細(xì)胞白血病細(xì)胞)； HL-60 (人白血病細(xì)胞)
3、 培養(yǎng)液RPMI1640+15。/。NBS+雙抗4其他材料
全自動(dòng)酶標(biāo)儀型號(hào)(WellscanMK-2)生產(chǎn)廠商Labsystems 進(jìn)口96孔培養(yǎng)板等
5、 實(shí)驗(yàn)方法
按常規(guī)采用MTT法，96孔板每孔加入濃度為4-5xl(^個(gè)/ml的細(xì) 胞懸液100ul，置37。C， .5。/。C02培養(yǎng)箱內(nèi)。24h后，加入樣品液， 10iU/孔，設(shè)雙復(fù)孔，37°C， 5% C02作用72h。每孔加入5mg/ml的 MTT溶液20lU，作用4h后加入溶解液，100" 1/孔，置培養(yǎng)箱內(nèi)， 溶解后用MK-2全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)570nm OD值。
6、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表i。
表l藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素、藍(lán)萼己素單體對(duì)人體腫
瘤細(xì)胞的體外增殖抑制作用
樣品名稱編號(hào)RJ01RJ02RJ03RJ04RJ05RJ06DOX
A549IC50( Ji g/ml)1.0561.5852.051>100>100>1000.0228
100ug/ml時(shí)IC0/。10010099.1032.7824.1826.2499.96
LOVOic50( y咖l)0.837〗.2361.835>100>100' >000.286
100ng/mJ時(shí)IC0/。100脂10026.1613.1932.卯99.59
HL-60IC50( li g/ml)0.1180.1560.217>100>100>1000.00352
100 u g/ml時(shí)IC%10010010021.6300100
CEMIC50( 11 g/ml)0.04900.05600.1240>100>100>000.0809
100 u g/ml時(shí)10%1001001008.66032.6580.77
由表1可見(jiàn)，藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼 戊素、藍(lán)萼己素對(duì)測(cè)試腫瘤細(xì)胞都有抑制作用，尤其是藍(lán)萼甲素(RJOl)、藍(lán)萼乙素(RJ02)、藍(lán)萼丙素(RJ04)對(duì)測(cè)試腫瘤細(xì)胞的 抑制作用很強(qiáng)。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、 藍(lán)萼戊素、藍(lán)萼己素均具有顯著抗腫瘤作用，因此可用于制備抗癌藥 物。
權(quán)利要求
1、二萜類化合物藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素和藍(lán)萼己素在制備抗癌藥物中的應(yīng)用，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下其中，基團(tuán)R1選自H、COCH3；R2選自COCH3、H；R3選自H、O；R4選自O(shè)H、O；R5選自CH2、H；R6選自CH2、CH3；R7選自O(shè)、H；R8選自O(shè)、OH；各化合物的基團(tuán)搭配分別為藍(lán)萼甲素R1＝R2＝H；R3，R4＝O；R5，R6＝CH2；R7，R8＝O；藍(lán)萼乙素R1＝H R2＝COCH3，R3，R4＝O；R5，R6＝CH2；R7，R8＝O；藍(lán)萼丁素R1＝COCH3R2＝H；R3，R4＝O；R5，R6＝CH2；R7，R8＝O；藍(lán)萼丙素R1＝R2＝H；R3，R4＝O；R5，R6＝CH2；R7，＝H，R8＝OH；藍(lán)萼戊素R1＝R2＝H；R3，R4＝O；R5，＝H，R6＝CH3；R7，R8＝O；藍(lán)萼己素R1＝R2＝H；R3＝H；R4＝OH；R5，＝H，R6＝CH3；R7，R8＝O。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是藍(lán)萼香茶菜中二萜類化合物藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素和藍(lán)萼己素用于制備抗癌藥物的用途。本發(fā)明采用MTT法進(jìn)行了細(xì)胞毒活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼乙素、藍(lán)萼丙素、藍(lán)萼丁素、藍(lán)萼戊素和藍(lán)萼己素均具有顯著細(xì)胞毒活性，因此可用于制備抗癌藥物。本發(fā)明為尋求抗癌藥物提供了一種新的來(lái)源。
文檔編號(hào)A61K31/122GK101455652SQ20091004488
公開(kāi)日2009年6月17日 申請(qǐng)日期2009年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月5日
發(fā)明者劉建國(guó), 趙衛(wèi)權(quán), 金永生, 陳海生, 項(xiàng)昭保 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)