專利名稱：磁性脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體，特別是磁性脂質(zhì)體。還涉及磁性脂質(zhì)體的制備方法。
背景技術(shù)：
文獻l"公開號為CN100998563"的中國發(fā)明專利公開了一種載藥磁性脂質(zhì)體的制備方法， 首先將多柔比星藥物溶解于制備好的磁液里形成多柔比星磁液，將L-a-磷脂酰乙醇胺、膽固 醇、L-a-磷脂酰膽堿按7:2:1的重量比制得脂質(zhì)體薄膜，再將多柔比星磁液加入形成脂質(zhì) 體薄膜的茄形瓶里，在室溫下進行旋渦振蕩30min直至薄膜脫落完全，將初液倒入試管內(nèi)進 行超聲粉碎間斷脈沖20min，靜置12小時形成磁性多柔比星脂質(zhì)體。
文獻2"公開號為CN1559439"的中國發(fā)明專利公開了一種載藥磁性脂質(zhì)體的制備方法， 首先采用薄膜旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在茄形瓶內(nèi)壁形成一均勻的脂質(zhì)體薄膜，制備砒霜與錳鋅鐵氧體磁 性納米粒子的混懸液，將此混懸液加到上述含薄膜的茄形瓶中，40±5°(3恒溫震蕩至薄膜脫落， 反復(fù)凍融及超聲處理3次制得納米砒霜磁性脂質(zhì)體。
文獻3"M. M. Elmi, M. N. Sarbolouki. A simple method for preparation of immunomagnetic liposomes. Int. J. Pharm. 2001, 215(1~2): 45-50"公開一種逆向蒸發(fā)法制備磁性脂質(zhì)體的方法， 其工藝流程為將脂質(zhì)混合物溶于有機溶劑中，加入含有磁性粒子和藥物的緩沖液，超聲處 理使其形成穩(wěn)定乳劑，于42。C時減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，達到膠態(tài)后，再滴加緩沖液，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)， 得到水性溶液，除去未包封的磁性粒子和藥物，得到磁性脂質(zhì)體。
以上文獻所公開的磁性脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)如圖2所示，脂質(zhì)體3將磁性微粒2和藥物1一同包 裹在其內(nèi)部，這種結(jié)構(gòu)存在一些局限性。第一，磁含量不高、磁響應(yīng)性低。由于脂質(zhì)體，特 別是小單室脂質(zhì)體(SUV)的磷脂雙層的內(nèi)部空間有限，導(dǎo)致僅有較少量的磁性微?？梢园?在脂質(zhì)體內(nèi)部；并且磁性微粒密度較大、易沉降，在脂質(zhì)體水合形成囊泡的同時，難以均勻 包覆其中。第二，藥物的包載量低。由于脂質(zhì)體內(nèi)部空間有限，當(dāng)磁性微粒占據(jù)其中時，導(dǎo) 致藥物的包載量下降。
發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)方法制備的脂質(zhì)體磁含量低、藥物的包載量低的不足，本發(fā)明提供一 種磁性脂質(zhì)體，脂質(zhì)體內(nèi)包載藥物，磁性微粒沉積在脂質(zhì)體表面，可以在提高藥物的包載量 的同時，提高磁含量。本發(fā)明還提供這種磁性脂質(zhì)體的制備方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案 一種磁性脂質(zhì)體，包括藥物、脂質(zhì)體和磁 性微粒，其特點是所述脂質(zhì)體內(nèi)部是藥物，脂質(zhì)體表面是磁性微粒。一種上述磁性脂質(zhì)體的制備方法，其特點是包括下述步驟
(a) 分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于體積比甲醇氯仿=1:2混合溶劑中，分別得到 0.1g/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將蛋黃卵磷脂溶液和膽固醇溶液在茄形 瓶中以2:1 2.5:1的摩爾比進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜；
(b) 將pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液加入到已形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，蛋黃卵磷脂 溶液和膽固醇溶液的總體積與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為1:4 1:10，使用旋渦混合器旋混 20 40min，使用高速分散均質(zhì)機分散5-10min，充分水合以后離心水洗2 3次，得到表面帶 有負電的脂質(zhì)體；
(c) 將步驟(b)得到的表面帶有負電性的脂質(zhì)體分散在濃度為0.8~1.2mg/(ml 0.5MNaCl) 的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，脂質(zhì)體與聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液的質(zhì)量比為 1:60" : 100，靜置吸附20~40min后離心水洗；
(d) 將步驟(c)得到的脂質(zhì)體分散在濃度為0.3 0.6mg/(ml0.5MNaCl)的聚苯乙烯磺酸 鈉水溶液中，脂質(zhì)體與聚苯乙烯磺酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:60一100，靜置吸附20~40min 后離心水洗；
(e) 將歩驟(d)得到的脂質(zhì)體分散在濃度為0.8~1.2mg/(ml 0.5M NaCl)的聚二烯丙基 二甲基氯化銨水溶液中，脂質(zhì)體與聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液的質(zhì)量比為1:60 1:100， 靜置吸附20~40min后離心水洗；
(f) 將質(zhì)量百分濃度2%、帶有負電的Fe3CU納米微粒磁流體稀液慢慢加入步驟(e)得 到的脂質(zhì)體中，脂質(zhì)體與磁流體稀液的質(zhì)量比為1:0.8 1:2.5，靜置吸附2(K40min后進行分 離，得到磁性脂質(zhì)體。
本發(fā)明的有益效果是由于脂質(zhì)體內(nèi)包載藥物，磁性微粒沉積在脂質(zhì)體表面，脂質(zhì)體內(nèi) 部空間的有限空間全部包載藥物，提高了藥物的包載量，同時提高了磁含量。
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作詳細說明。
圖1是本發(fā)明磁性脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)示意圖。 圖2是現(xiàn)有技術(shù)磁性脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)示意圖。 圖3是本發(fā)明磁性脂質(zhì)體的TEM照片。
具體實施例方式
參照圖l、圖3，本發(fā)明的磁性脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)是，脂質(zhì)體3內(nèi)部是藥物1，脂質(zhì)體3表面是 磁性微粒2。從磁性脂質(zhì)體的TEM照片可以清楚地看到脂質(zhì)體內(nèi)部的藥物以及表面的磁性微粒。 實施例1:分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于甲醇-氯仿混合有機溶劑(1:2， v/v)中，得到O.lg/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將lOmL蛋黃卵磷脂溶液和2.5mL 膽固醇溶液在茄形瓶中進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜。將50mL磷酸鹽緩沖溶液(pH， 7.4)加入形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，使用旋渦混合器旋混20min，使用高速分散均質(zhì)機分 散5min，充分水合以后離心水洗2次，得到表面帶有負電的脂質(zhì)體。將上述表面帶有負電的 脂質(zhì)體lg分散在60mL濃度為0.8mg/(ml 0.5MNaCl)的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中， 靜置吸附20min后離心水洗；再分散在60mL濃度為0.5mg/(ml 0.5M NaCl)的聚苯乙烯磺酸鈉 水溶液中，靜置吸附20min后離心水洗；再分散在60mL濃度為0.8mg/(ml 0.5MNaCl)的聚 二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，靜置吸附20min后離心水洗。將lg濃度為2。/。的磁流體稀 液慢慢加入上述脂質(zhì)體中，靜置吸附20min后進行分離，得到磁性脂質(zhì)體。
實施例2:分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于甲醇-氯仿混合有機溶劑(1:2， v/v)中， 得到O.lg/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將10mL蛋黃卵磷脂溶液和2mL 膽固醇溶液在茄形瓶中進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜。將60mL磷酸鹽緩沖溶液(pH， 7.4)加入形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，使用旋渦混合器旋混30min，使用高速分散均質(zhì)機分 散6min，充分水合以后離心水洗3次，得到表面帶有負電的脂質(zhì)體。將上述表面帶有負電的 脂質(zhì)體lg分散在70mL濃度為lmg/(ml 0.5M NaCl)的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中， 靜置吸附20min后離心水洗；再分散在70mL濃度為0.4mg/(ml 0.5MNaCl)的聚苯乙烯磺酸鈉 水溶液中，靜置吸附20min后離心水洗；再分散在70mL濃度為lmg/(ml0.5MNaCl)的聚二 烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，靜置吸附20min后離心水洗。將1.5g濃度為2%的磁流體稀 液慢慢加入上述脂質(zhì)體中，靜置吸附20min后逬行分離，得到磁性脂質(zhì)體。
實施例3:分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于甲醇-氯仿混合有機溶劑(1:2， v/v)中， 得到O.lg/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將10mL蛋黃卵磷脂溶液和2mL 膽固醇溶液在茄形瓶中進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜。將70mL磷酸鹽緩沖溶液(pH， 7.4)加入形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，使用旋渦混合器旋混30min，使用高速分散均質(zhì)機分 散8min，充分水合以后離心水洗2次，得到表面帶有負電的脂質(zhì)體。將上述表面帶有負電的 脂質(zhì)體lg分散在70mL濃度為1.2mg/(ml 0.5MNaCl)的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中， 靜置吸附30min后離心水洗；再分散在70mL濃度為0.5mg/(ml 0.5M NaCl)的聚苯乙烯磺酸鈉 水溶液中，靜置吸附30min后離心水洗；再分散在70mL濃度為1.2mg/(ml 0.5MNaCl)的聚 二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，靜置吸附30min后離心水洗。將1.8g濃度為2°/。的磁流體 稀液慢慢加入上述脂質(zhì)體中，靜置吸附30min后進行分離，得到磁性脂質(zhì)體。
實施例4:分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于甲醇-氯仿混合有機溶劑(1:2， v/v)中， 得到O.lg/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將lOmL蛋黃卵磷脂溶液和2.5mL膽固醇溶液在茄形瓶中進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜。將60mL磷酸鹽緩沖溶液(pH， 7.4)加入形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，使用旋渦混合器旋混40min，使用高速分散均質(zhì)機分 散10min，充分水合以后離心水洗3次，得到表面帶有負電的脂質(zhì)體。將上述表面帶有負電 的脂質(zhì)體lg分散在80mL濃度為1.2mg/(ml 0.5M NaCl)的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液 中，靜置吸附40min后離心水洗；再分散在80mL濃度為0.6mg/(ml 0.5M NaCl)的聚苯乙烯磺 酸鈉水溶液中，靜置吸附40min后離心水洗；再分散在80mL濃度為1.2mg/(ml 0.5MNaCl)的 聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，靜置吸附40min后離心水洗。將2.5g濃度為2%的磁流 體稀液慢慢加入上述脂質(zhì)體中，靜置吸附40min后進行分離，得到磁性脂質(zhì)體。
在制備磁性脂質(zhì)體的過程中，對上述方法所涉及的各種比例范圍、濃度范圍、時間范圍 進行了多次試制，均取得了良好的效果。
權(quán)利要求
1、一種磁性脂質(zhì)體，包括藥物、脂質(zhì)體和磁性微粒，其特征在于所述脂質(zhì)體內(nèi)部是藥物，脂質(zhì)體表面是磁性微粒。
2、 一種權(quán)利要求l所述磁性脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于包括下述步驟(a) 分別將蛋黃卵磷脂、膽固醇溶解于體積比甲醇氯仿=1:2混合溶劑中，分別得到 0.1g/mL的蛋黃卵磷脂溶液和O.lg/mL的膽固醇溶液，將蛋黃卵磷脂溶液和膽固醇溶液在茄形 瓶中以2:1 2.5:1的摩爾比進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜；(b) 將pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液加入到已形成脂質(zhì)體薄膜的茄形瓶中，蛋黃卵磷脂 溶液和膽固醇溶液的總體積與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為1:4 1:10，使用旋渦混合器旋混 20 40min，使用高速分散均質(zhì)機分散5 10min，充分水合以后離心水洗2~3次，得到表面帶 有負電的脂質(zhì)體；(c) 將步驟(b)得到的表面帶有負電性的脂質(zhì)體分散在濃度為0.8 1.2mg/(ml0.5MNaCl) 的聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液中，脂質(zhì)體與聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液的質(zhì)量比為 1:60~1:100，靜置吸附20 40min后離心水洗；(d) 將步驟(c)得到的脂質(zhì)體分散在濃度為0.3 0.6mg/(ml0.5MNaCl)的聚苯乙烯磺酸 鈉水溶液中，脂質(zhì)體與聚苯乙烯磺酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:60 1:100，靜置吸附20 40min 后離心水洗；(e) 將步驟(d)得到的脂質(zhì)體分散在濃度為0.8~1.2mg/(ml 0.5M NaCl)的聚二烯丙基 二甲基氯化銨水溶液中，脂質(zhì)體與聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液的質(zhì)量比為1:60 1:100， 靜置吸附20~40min后離心水洗；(f) 將質(zhì)量百分濃度2%、帶有負電的Fe304納米微粒磁流體稀液慢慢加入步驟(e)得 到的脂質(zhì)體中，脂質(zhì)體與磁流體稀液的質(zhì)量比為1:0.8 1:2.5，靜置吸附20 40min后進行分 離，得到磁性脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種磁性脂質(zhì)體及其制備方法，該磁性脂質(zhì)體將藥物包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部，磁性微粒包覆在脂質(zhì)體外面。制備方法是將蛋黃卵磷脂溶液和膽固醇溶液在茄形瓶中以2∶1～2.5∶1的摩爾比進行混合，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成脂質(zhì)體薄膜；再使用磷酸鹽緩沖溶液對脂質(zhì)體薄膜進行充分水合得到表面帶有負電的脂質(zhì)體；然后交替吸附陽離子聚電解質(zhì)——聚二烯丙基二甲基氯化銨、陰離子聚電解質(zhì)——聚苯乙烯磺酸鈉、陽離子聚電解質(zhì)——聚二烯丙基二甲基氯化銨，最后通過電荷作用、自組裝法將表面帶負電的Fe<sub>3</sub>O<sub>4</sub>磁性粒子沉積到脂質(zhì)體表面，得到磁性脂質(zhì)體。由于脂質(zhì)體內(nèi)包載藥物，磁性微粒沉積在脂質(zhì)體表面，脂質(zhì)體內(nèi)部空間的有限空間全部包載藥物，提高了藥物的包載量，同時提高了磁含量。
文檔編號A61K9/127GK101564380SQ20091002271
公開日2009年10月28日 申請日期2009年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月26日
發(fā)明者洋 于, 盧婷利, 宏 張, 雯 趙, 濤 陳 申請人:西北工業(yè)大學(xué)