一種荷電性的前列腺素E₁脂微球注射液及其制備方法

專利名稱：：一種荷電性的前列腺素E₁脂微球注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，確切的說，它是一種分布于內(nèi)向(油相、油/水界面膜相)的一種前列腺素E,脂微球注射液及其制備方法，并適用于前列腺素類藥物的脂微球制劑制備方法。
背景技術(shù)：
：前列腺素(PNstaglandinum，PG)是-類具有20個碳原子的不飽和脂肪酸，含有不同的亞型，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。前列腺素E！(前列地爾，PGE,)是其中的一種活性極強(qiáng)的生理活性物質(zhì)，具有抑制血小板聚集、血栓素A2生成、動脈粥樣硬化、脂質(zhì)斑塊形成及免疫復(fù)合物的作用。前列地爾脂微球注射液主要成分為前列腺素Ep其化學(xué)名稱為U及，2/{，37)-3-羥基-2[(五)-(350-3-羥基-1-辛烯基]-5-氧代環(huán)戊烷庚酸。分子式C2。H3405,分子量354.49，其化學(xué)結(jié)構(gòu)圖見附圖1。PGE1臨床主要作用為擴(kuò)張外周血管和冠狀血管，治療慢性動脈閉塞癥(血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥)引起的四肢潰瘍及微小血管循環(huán)障礙引起的四肢靜息疼痛，改善心腦血管微循環(huán)障礙。降低外周阻力和血壓，有保護(hù)缺f(JL性心肌，縮小心肌梗死面積。臟舉移植術(shù)后抗栓治療，用以抑制移植后血管內(nèi)的血栓形成。動脈導(dǎo)管依賴性先天性心臟病，用以緩解低氧血癥，保持導(dǎo)管血流以等待時機(jī)手術(shù)治療。用亍慢性肝炎的輔助治療等作用，還有排鈉、利尿及對肝、腎、肺、胃病變均有治療、保護(hù)作用，尤其對老年心血管病的治療有獨特療效，作用機(jī)制如附圖20?，F(xiàn)有注射劑存在的問題目前國內(nèi)前列地爾制劑己有多個劑型，如凍干粉針劑、環(huán)糊精包合的凍干粉針劑、脂肪乳劑注射液等，現(xiàn)在國內(nèi)已有多家藥廠生產(chǎn)PGE,凍干粉針，但對藥品的療效反映不一。報道的副作用主要為靜脈滴注多有不同程度的灼樣脹痛，有的病人沿靜脈皮膚出現(xiàn)"紅線"，這是靜脈及周圍血管擴(kuò)張所致，一般都能耐受若滴注過快，疼痛嚴(yán)重，疼痛和"紅線"停止注射后消失。1997年以來使用澳亞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的前列腺素E-(PGE-)右旋糖酐無菌凍干劑，在靜脈滴注中，對局部靜脈管壁有一定的刺激，輕者病人輸液部位脹痛，嚴(yán)重者出現(xiàn)紅腫熱痛，沿血管走行迅速蔓延，引起靜脈炎癥，甚至靜脈成硬索狀及全身發(fā)熱等癥狀，而被迫終止治療吉雅玲"前列腺素El致靜脈損傷的護(hù)理'現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2003,19(4):491-492.].前列腺素E是廣泛存在于體內(nèi)的生理活性物質(zhì)，具有顯著的擴(kuò)血管和抑制血小板凝集等作用。目前傳統(tǒng)的PGE注射液或粉針劑以P-環(huán)糊精包合的方式制得的真空冷凍干燥制品，存在有效給藥劑量大的缺點，每日劑量高達(dá)100400jig,長時間持續(xù)靜脈維持給藥，由于給藥劑量大，暴露的前列地爾導(dǎo)致靜脈注射時，局部疼痛、腫脹感覺、發(fā)燒、瘙癢感強(qiáng)烈，穿刺部位疼痛、發(fā)紅和沿靜脈走向出現(xiàn)紅線，經(jīng)減慢輸液速度后逐漸才能緩解；而且該制劑在體內(nèi)代謝很快，每經(jīng)一次肺循環(huán)約有70%卯％的前列地爾被滅活，故患者由此產(chǎn)生難以耐受的血管疼痛及全身不良反應(yīng)發(fā)生率相當(dāng)高，嚴(yán)重影響患者的順應(yīng)性和治療的有效性。前列地爾注射液與輸液混合后宜在2h內(nèi)使用，否則制劑中脂微球里包裹的前列地爾會釋放出來，從而產(chǎn)生與傳統(tǒng)PGE粉針劑相同的不良反應(yīng)。靜脈應(yīng)用時也可能有少量的PGE滲漏至脂微球載體外，局部刺激血管，引起輕微的外周靜脈炎，靜脈給藥速度過快、劑量過大時也可出現(xiàn)胸悶、心悸、血壓下降等[張世蓮'33例注射用前列地爾不良反應(yīng)報告分析-首都醫(yī)藥，2006，12:34-35.]。已上市的前列地爾注射液(凱時，北京泰德制藥有限公司)的制定標(biāo)準(zhǔn)中降解產(chǎn)物前列腺素A,的含量限度高達(dá)3ug/ml，達(dá)到主藥的60%，超過主成分前列地爾一半以上的量，不盡合理。本發(fā)明制劑的劑型特點發(fā)明一種又能有效地抑制前列地爾的降解產(chǎn)物的新工藝和制備方法，改變藥物在載體的載藥方式，使降解產(chǎn)物前列腺素A的含量限度為原來的二分之一，僅為1.5ug/ml，同時在劑型和新的釋藥體系上又極大優(yōu)越于市售普通注射劑，為處方組成和制備工藝的研究提供充足的理論依據(jù)，達(dá)到DDS給藥體系和藥物本身存貯條件、雜質(zhì)最低的優(yōu)勢完美結(jié)合；本發(fā)明涉及一種非均相(包含水相、油/水界面膜相、油相)分散系體系的前列腺素&脂質(zhì)微球注射液的制備方法，其脂微球表面可以是荷正電也可以是荷負(fù)電。前列腺素E!的化學(xué)結(jié)構(gòu)是具有一個五碳環(huán)和兩條側(cè)鏈的二十碳脂肪酸的基本骨架，其中一條側(cè)鏈具有親水的羧酸基團(tuán)，因而具有輕微的表面活性作用的特性。應(yīng)用該特性，通過本發(fā)明所描述的處方和制備工藝技術(shù)，使得它在上述非均相的分散系體系"脂微球"溶液中，具有奇特的載藥方式，所制得的脂微球注射液，與已經(jīng)上市的前列地爾注射液(凱時m,應(yīng)用閂本三菱公司技術(shù)制得)具有本質(zhì)的不同，其區(qū)別在于載體的載藥方式完全不一致凱時TM中的藥物被封入微球中的油性基質(zhì)里(附圖21)，本發(fā)明制得的脂微球注射液中藥物則主要分布于油/水界面膜中(附圖22),通過細(xì)胞膜融合及胞飲作用，更加快速沉積血管炎癥組織而快速發(fā)揮療效。上述關(guān)于已經(jīng)上市的前列地爾注射液(凱時頂，北京泰德制藥有限公司出品)載藥方式的描述(CN101049313)及附圖，均轉(zhuǎn)載于北京泰德制藥有限公司和FI本株式會社LTT"'<才77—T關(guān)于前列地爾脂微球注射液的有關(guān)產(chǎn)品信息和圖片(附圖21、23)。制成的前列地爾脂微球注射液，試驗結(jié)果表明，可以最大限度的減少PGE,在液體制劑中的水解，使乳粒在液體制劑中的貯藏期間聚集或分層的現(xiàn)象盡可能減少，臨床應(yīng)用時只須用10-100mL的葡萄糖、氯化鈉或無菌無熱原質(zhì)量可控的脂肪乳注射液與前列地爾注射液配伍使用，仍然保持脂微球注射液的特點，減少了注射液的血管刺激性并可大大提高產(chǎn)品的安全性，改善了以往臨床使用時的諸多問題，可降低前列腺素E1普通注射液注射時的血管刺激性，并可大大提高產(chǎn)品的安全性，極大地方便了患者與醫(yī)護(hù)人員的使用。同時由于滴注量的減少可避免大量輸液輸注時導(dǎo)致的不良反應(yīng)增加。本研究的加速、長期穩(wěn)定性試驗研究結(jié)果表明，在2~5匸下有效期可長達(dá)18個月，優(yōu)于凱時貯存期(12個月)。在制備工藝產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)上也可節(jié)省大量工業(yè)成本。因此前列地爾脂微球注射液是一種有廣闊市場前景的脂微球新制劑。前列腺素E1劑型研究情況目前，研究較多的前列腺素E1劑型有普通的注射液、載藥脂肪乳注射液、凍干粉針、脂質(zhì)體等。CN1872072公開了一種前列地爾納米乳注射劑及其制備方法，與上市的凱時前列地爾注射液，可改變藥物在體內(nèi)的分布，工藝上僅能通過終端滅菌制得；CN1823786公開一種前列地爾脂肪乳劑滅菌工藝及測定的方法，采用了915MHz或2450MHz頻率微波設(shè)備，使安瓿溫度升高至65-140lC,并維持10秒-5分鐘，進(jìn)行滅菌，認(rèn)為可完全殺滅制劑中微生物。該方法雖然認(rèn)為可行，但迄今為止，我國及歐盟、美國等從未有關(guān)于此種滅菌方法的驗證方案，是否能達(dá)到國際公認(rèn)的無菌保證水平,不置可否。CN156204公開了前列地爾凍干乳劑及其制備方法，重復(fù)其實施例中的方法，發(fā)現(xiàn)無法實現(xiàn)，其效果與其權(quán)利說明書相差甚遠(yuǎn)，值得商榷。CN1813764和CN1739525公開了一種制備前列地爾脂質(zhì)體的方法，屬于脂質(zhì)體載藥體系。CN1903177公開前列地爾納米粒及其制備方法，其中載體選用了新輔料脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯(POGC)和脂肪酸PEG膽固醇酯(PEGC),制備的納米粒粒徑Sl^un。CN1857272公開了前列地爾的一種小輸液的制備方法，用藥體積達(dá)到100ml,增加非均相注射液產(chǎn)業(yè)化成本，延長臨床輸注時的給藥時間，無疑延長病患者忍受前列地爾固有的血管刺激性反應(yīng)的痛楚時間。上述已公開的專利技術(shù)，不同程度的存在著藥物滲漏及體內(nèi)藥物的突釋行為，并且制劑過程中用到了非水溶劑，會導(dǎo)致溶劑殘留。盡管已公開的專利技術(shù)在某種程度上與本發(fā)明或多或少存在一定的交集，并不影響本發(fā)明權(quán)利特征，而且，尚無專利或文獻(xiàn)揭示前列地爾的載藥特性，及其在非均相體系，尤其是三相并存的分散系體系中，前列地爾在制劑形態(tài)中的分布特性。目前脂微球的形成理論尚未成熟，但乳化劑在乳劑形成過程中的作用已被逐漸認(rèn)識，其中界面吸附膜學(xué)說認(rèn)為，乳化劑在降低兩相界面張力同時，乳化劑被吸附于液滴周圍，有規(guī)律地排列在液滴界面形成吸附膜。界面吸附屏障阻礙液滴合并，使乳劑穩(wěn)定。界面膜的強(qiáng)度與緊密度直接影響乳劑的穩(wěn)定性，乳化劑種類不同，則界面吸附不同。前列地爾的化學(xué)結(jié)構(gòu)為具有一個五碳環(huán)和兩條側(cè)鏈的二十碳脂肪酸的基本骨架，其中一條側(cè)鏈具有親水的羧酸基團(tuán)，因而前列地爾具有輕微的表面活性的作用的特性。由于該特性的存在，使得前列地爾在上述非均相的分散系體系"脂微球"溶液中，具有奇特的載藥方式。非均相體系存在的主要問題是分散相液滴有合并變大的趨勢，因此進(jìn)一步提高制劑的物理穩(wěn)定性是解決該類制劑穩(wěn)定性的先決條件。以上公開專利并沒有闡明此劑型中藥物在油相、6水相和油/水界面膜相的分布特點和作用機(jī)理，本發(fā)明人通過長期對該劑型的深入研究，掌握了此劑型的微觀結(jié)構(gòu)特點并通過試驗在宏觀上闡明此劑型的特點。通過優(yōu)化處方工藝使得此劑型很大程度上提高了油相和油/水界面膜相中的載藥率及包封率，相當(dāng)大的程度上提高了前列腺素在體外的物理穩(wěn)定性及體內(nèi)的化學(xué)穩(wěn)定性，而且提高前列腺素在油相和油/水界面膜相的分布，可以減輕注射時的血管刺激性，能大大提高患者的順應(yīng)性，并可進(jìn)一歩形成產(chǎn)業(yè)化規(guī)模。另外，目前還沒有專利對前列腺素E,在體內(nèi)或外部刺激所表現(xiàn)的行為與反應(yīng)進(jìn)行廣泛、深入地研究。由于前列地爾脂微球注射液在臨床上通常用少數(shù)幾種輸液稀釋后使用，因此闡明其在這些輸液的分布行為十分重要。因為在輸液中的水相里，它可以從脂質(zhì)微球中被釋放。Minakuchi等人報道了當(dāng)PGE,用IO倍量的鹽水或緩沖鹽(pH5.6)稀釋后，大部分的PGE!被直接釋放至水溶液介質(zhì)中，基于這個結(jié)果，他們認(rèn)為PGE1乳劑并沒有發(fā)揮出作為脂質(zhì)微球在臨床治療應(yīng)用上的優(yōu)勢。本研究的目的是為了從藥劑學(xué)觀點解釋PGE1高效并確定考慮到PGE1在脂微球注射液的分布。此外，本發(fā)明還包含了不同荷電性的前列地爾脂微球注射液，是本發(fā)明的獨到之處。關(guān)于本發(fā)明在技術(shù)方案和效果以及闡明藥物在該劑型中分布特點方面明顯優(yōu)于上述專利申請，并適用于前列腺素類藥物的制劑工藝。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是提高前列地爾的水溶性和穩(wěn)定性、降低刺激性，提供一種制備工藝簡單，可供工業(yè)化髙效率大生產(chǎn)的前列地爾脂微球注射液及其制備方法并闡明其制劑的藥物分布特點。本發(fā)明通過從微觀及宏觀上闡明了前列地爾在此劑型上的分布特點，證明其能改善或提高藥物在油相和油/水界面膜相中的包封率，具有控制藥物釋放，耙向定位釋放，降低靜脈給藥的血管刺激性并進(jìn)一歩提高了制劑的物理穩(wěn)定性等優(yōu)點。本發(fā)明以中鏈油、大豆油、維生素E、油酸乙酯等含6-24個碳原子的脂肪酸甘油脂作為油相，采用適當(dāng)?shù)奶幏胶凸に?，制備出平均粒徑小?00nm的一種前列地爾脂微球注射液制劑，從而大大提高藥物的穩(wěn)定性，增加患者的順應(yīng)性。前列地爾脂微球注射液是將有效劑量的前列腺素E1作為藥物，并配以藥用輔料，藥用輔料包括注射用油、乳化劑、助乳化劑、pH調(diào)節(jié)劑、等滲調(diào)節(jié)劑、抗氧劑藥物注射用油為l:1~1:500。一種荷電性的前列J3^素El脂微球注射液的處方如下前列腺素El0.0001-0.1份重量注射用油5-20份重量乳化劑0.2-5份重量助乳化劑0.1-5份重量等滲調(diào)節(jié)劑0.5-3份重量抗氧劑適量pH調(diào)節(jié)劑適量注射用水適量所述的注射用油可以是精制大豆油、辛葵酸甘油脂、麻油、紅花油、橄欖油、花生油、棉子油、維生素E、、油酸乙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、亞油酸乙酯、油酸山梨醇酯、油酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯、椰子油C8/C10丙二醇雙酯、椰子油C8/C10甘油三酯、純化乙?；膯胃视王?、純化向閂葵油單甘油酯、魚油及其它動物油脂中的一種或幾種混合物。所述的乳化劑可以是磷脂、泊洛沙姆、聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS-15)、(x-生宵酚琥珀酸酯-聚乙二醇酯(TPGS)、聚乙二醇琥珀酸酯、乙酸單甘油酯、聚甘油棕櫚酸二醇酯、中的一種或幾種混合物；所述的助乳化劑可以是油酸或其鹽、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、膽酸、去氧膽酸或其鹽、二十二碳六烯酸(DHA)、無水乙醉、正丁醇、正己醇、乙二醇或丙二醉中的一種或幾種混合物；所述的等滲調(diào)節(jié)劑可以是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、山梨醇中的一種或幾種混合物；所述的抗氧劑可以是惰性氣體、EDTA及其鹽類、維生素E、a-生宵酚、a-醋酸生宵酚、a-硫辛酸、維生素C及其衍生物中的一種或幾種混合物。所述的pH調(diào)節(jié)劑可以是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉等中的一種或幾種混合物。所述的一種荷電性的前列腺素El脂微球注射液制劑的處方工藝如下初乳化工藝(1)油相的配制a.在配制灌中加入注射用油、乳化劑、助乳化劑、抗氧劑混合，加熱溫度至30~9010,攪拌溶解后，加入藥物，攪拌分散至溶解；b.在配制灌中加入注射用油、助乳化劑、抗氧劑，加熱溫度至30^9(TC，攪拌混勻溶解后，加入藥物，攪拌分散至溶解；(2)水相的制備將水、乳化劑、等滲調(diào)節(jié)劑、抗氧劑在30~9010下，同油相溫度攪拌使之完全分散均勻；(3)在2080^C時，將油相加入水相或水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌或高速剪切分散混勻，形成初乳；(4)用一定濃度的pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)到3~8;精乳化工藝(5)用高壓勻質(zhì)機(jī)或用微射流儀，將壓力調(diào)至50~2000bar,將溶液反復(fù)勻化，制得均勻分散的前列地爾脂微球注射劑(6)將上述(5)制得乳劑經(jīng)0.22nm的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，濾液灌封后，既得前列地爾脂微球注射液。(7)上述(1)~(6)全過程，均在在氮氣流保護(hù)下操作。無菌/滅菌工藝依照歐盟滅菌工藝選擇的決策樹原則(1)采用非終端滅菌注射劑的生產(chǎn)流程工藝規(guī)定，全過程可在無菌力'級和局部百級生產(chǎn)條件下，制得的前列地爾脂微球注射液經(jīng)0.22nm的微孔濾膜過濾除菌后，濾液直接灌封，即得。成品符合GMP和無菌保證水平的規(guī)定，臨床應(yīng)用安全有效。(2)采用終端滅菌的生產(chǎn)工藝流程的規(guī)定，全過程可在力'級生產(chǎn)條件下，制得的前列地爾脂微球注射液經(jīng)0.45或0.22fim的微孔濾膜精濾后，灌封，采用過度殺滅法或殘存概率法等歐盟規(guī)定的滅菌樹下的條件，即得。成品符合GMP和無菌保證水平的規(guī)定，保障臨床應(yīng)用的安全性。本發(fā)明所述的一種荷電性的前列腺素E1脂微球注射液，如說明書附圖2所示，該乳劑由油相、水相、和油/水界面膜相組成，其中油相載藥量按重量百分比為0~4%，水相中含量不到15%,油/水界面膜相載藥量為80%~95%之間。所制成的前列地爾脂微球注射液粒徑范圍為1(K500mn，平均粒度80~300nm。優(yōu)選的粒徑范圍為50~500nm，平均粒度10O~200nm。脂微球表面的荷電可以是負(fù)電荷，也可以是正電荷，Zeta電位范圍分別為-10—60mv和+10^50mv之間。所制成的前列地爾脂微球注射液其藥物卯o/。以上被包裹于油相和油/水界面膜相中。所制成的前列地爾脂微球注射液加入藥理允許的配伍溶液使制得的前列地爾脂微球注射液的含量在0.0010.2mg/mL之間，其中的配伍溶液可以為氯化鈉注射液、葡萄糖注射液、空白脂肪乳注射液或其他可注射溶液中的一種或多種，配得的單位注射劑量體積在5mL500mL之間。所制成的前列地爾脂微球注射液降解產(chǎn)物前列腺素A,的含量限度小于15%,使DDS給藥體系和藥物本身穩(wěn)定性、存貯條件、雜質(zhì)最低的優(yōu)勢完美結(jié)合，得到更加穩(wěn)定有效的前列地爾脂微球制劑。9本發(fā)明研制的一種荷電性的前列腺素El脂微球注射液具有以下優(yōu)點1.本發(fā)明的脂微球注射液生理相容性好，解決了前列地爾普通注射液劑量大的問題，降低了毒副作用，提高了機(jī)體耐受性；2.本發(fā)明的脂微球注射劑臨床應(yīng)用時可以與10-20mL的葡萄糖、氯化鈉或無菌無熱源質(zhì)量可控的脂肪乳注射液配伍使用，配伍后各項指標(biāo)均符合要求，無明顯差異，仍然保持脂微球注射液的特點，并可大大提高產(chǎn)品的安全性，極大地方便了患者與醫(yī)護(hù)人員的使用；3.本發(fā)明的脂微球注射液通過相分布試驗結(jié)果表明該前列地爾脂微球注射液制劑提高了物理及化學(xué)穩(wěn)定性，可以減小注射時引起的靜脈刺激性并減小了用藥劑量，給藥劑量僅為傳統(tǒng)注射液的十分之一，但有著與普通大劑量注射劑同樣的臨床療效，同時由于滴注量的減少可避免大量滴注脂肪乳劑時導(dǎo)致的中樞神經(jīng)損壞、脂肪超載綜合征等不良反應(yīng)；見附圖134.本發(fā)明的脂微球注射液具有靶向性，改善了藥物的釋放性質(zhì)，提高了藥物的生物利用度和患者的順應(yīng)性；5.本發(fā)明的脂微球注射液制備工藝簡單，成熟，便于工業(yè)化生產(chǎn)。圖l前列地爾化學(xué)結(jié)構(gòu)圖圖2前列地爾脂微球注射液相分布示意圖，A前列地爾藥物，B磷脂，C油(C6~C24脂肪酸甘油酯)，D水相，E油/水界面膜相，I油相載藥(04%)，II水相載藥(3~15%)，m油/水界面膜相載藥(80~95%)圖3~圖12實施例1~實施例IO前列地爾脂微球注射液中藥物在各相的分布圖圖13前列地爾脂微球注射液給予同等療效下給藥劑量示意圖圖14前列地爾脂微球注射液實施例6粒徑圖圖15前列地爾脂微球注射液實施例6顯微鏡檢圖(油鏡)圖16前列地爾脂微球注射液實施例6電鏡照片圖17前列地爾脂微球注射液實施例6體外釋放度曲線圖圖8前列地爾脂微球注射液血管刺激性試驗比較圖圖19前列地爾脂微球注射液與傳統(tǒng)制劑對抑制血栓形成效果的比較圖圖20前列地爾脂微球注射液作用機(jī)制示意圖圖21凱時m中的藥物被封入微球中的油性基質(zhì)里(OIL油，PC磷脂，PGE1前列地爾)示意22本發(fā)明制得的脂微球注射液中藥物主要分布于油/水界面膜中(OIL油，PC憐脂，PGE1前列地爾)示意圖圖23凱時TM中的藥物被封入微球中的油性基質(zhì)里資料截圖(H本株式會社LTT八*4才77—7網(wǎng)頁資料)圖24荷負(fù)電的脂質(zhì)微球示意圖(實施例19:A油，B前列地爾，C表面活性物質(zhì)，D負(fù)電荷物質(zhì))，Zeta電位-10~-60mv圖25荷j下電的制脂微球示意圖(實施例10:A油，B前列地爾，C表面活性物質(zhì)，DTH電荷物質(zhì))，Zeta電位+10~4"50mv具體實施例方式實施例1:處方前列腺素0.5mg，蛋黃卵磷脂1.5g，注射用中鏈油8g，氫氧化鈉適量，甘油2.58，其余為注射用水，共100ml。工藝(1)油相的配制在配制灌中加入注射用中鏈油，控制注射用中鏈油的溫度在40X:，加入蛋黃卵磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至30TC加入藥物，攪拌混勻；(2)水相的制備將水和甘油在40X:下攪拌5min，使之完全混溶；(3)在30n時，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至500bar，第二步再調(diào)至1000bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。實施例2:處方前列腺素0.5mg，大豆磷脂l,5g，注射用大豆油10g，葡萄糖5g,檸檬酸鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油，控制注射用大豆油的溫度在60TC，加入大豆磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解；(2)水相的制備將水和葡萄糖在55r下攪拌5min，使之完全混溶(3)在60'C時，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5,8;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600bar，第二歩再調(diào)至1500bar，將溶液反復(fù)勻化；11(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22urn的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。.實施例3:處方前列腺素O.Smg，蛋黃卵磷脂1.28，注射用大豆油6g，辛葵酸甘油酯4g，甘露醇5g，油酸0.01g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。(附圖23)工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油、辛葵酸甘油酯和油酸，控制溫度在60TC，加入蛋黃卵磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至501C加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻；(2)水相的制備將水、甘露醇在50TC下攪拌5min,使之完全混溶；(3)在30匸時，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到6;(5)過勻質(zhì)儀第一歩調(diào)節(jié)勻化壓力至400bar，第二歩再調(diào)至2000bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾，在氮氣流保護(hù)下灌封后，采用過度滅殺法滅菌后即得。實施例4:處方前列腺素5.0mg,蛋黃磷脂0.8g，泊洛沙姆O.Sg,油酸乙酯5g，甘油2.5g，維生素E0.01g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入油酸乙酯、維生素E，控制溫度在70"C,加入蛋黃磷脂和泊洛沙姆，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至401C加入藥物，攪拌混勻；(2)水相的制備將水、泊洛沙姆、甘油、在40TC下攪拌5min，使之完全混溶；(3)在40^C時，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5.4;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至300bar，第二歩再調(diào)至1000bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下，用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。實施例5:處方前列腺素10.0mg,蛋黃磷脂l,5g,油酸0,3g，注射用大豆油10g，甘油2,5g，a-硫辛酸0.01g,氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油，控制溫度在70X:，加入蛋黃磷脂和油酸，12強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至60"C加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻；(2)水相的制備將水、甘油和a-硫辛酸在60X:下攪拌5min，使之完全混溶；(3)在60匸時，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5,5;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至500bar，第二步再調(diào)至1200bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾，在氮氣流保護(hù)下灌封后，采用殘存概率法滅菌即得。實施例6:處方前列腺素0,5mg，蛋黃磷脂l,2g,注射用大豆油6g,辛葵酸甘油脂6g，油酸2.1g,木糖醇5g，維生素E0.05g，泊洛沙姆0.15g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油、維生素E和辛葵酸甘油脂，控制溫度在60TC，加入蛋黃磷脂和油酸，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至40"加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻(2)水相的制備將水、木糖醇、泊洛沙姆在40lC下攪拌5min,使之完全混溶；(3)在40T時，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600bar，第二步再調(diào)至2000bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。實施例7:處方前列腺素5.0mg，蛋黃磷脂2g，注射用大豆油3g，純化向日葵油單甘油酯3g，亞油酸2,lg，甘油2,5g，維生素EO.OSg，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油、維生素E和純化向閂葵油單甘油酯，控制溫度在80"，加入蛋黃磷脂和亞油酸，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至50r加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻；(2)水相的制備將水、甘油在40"下攪拌5min,使之完全混溶；(3)在4or時，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5;(5)過勻質(zhì)儀第一歩調(diào)節(jié)勻化壓力至700bar，第二歩再調(diào)至l卯0bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封13后，流通蒸汽滅菌30分鐘即得。實施例8:處方前列腺素l.Smg，大豆磷脂O.Sg，純化向R葵油單甘油酯6g，辛葵酸甘油脂8g，油酸2,lg,山梨醇5g,維生素EO.OSg，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入辛葵酸甘油脂、維生素E和純化向閂葵油單甘油酯，控制溫度在701C，加入大豆磷脂和油酸，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至50TC加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻;(2)水相的制備將水、山梨醇在50r下攪拌5min,使之完全混溶；(3)在501C時，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到6;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600bar,第二歩再調(diào)至1800bar,將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。實施例9:處方前列腺素l，2mg，蛋黃磷脂L2g，泊洛沙姆2.28，注射用中鏈油10g,甘油2.5g，，a-硫辛酸0.01g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入注射用大豆油，控制溫度在80"U，加入蛋黃磷脂和泊洛沙姆，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至30TC加入藥物，攪拌混勻(2)水相的制備將水、(i-硫辛酸、甘油在30TC下攪拌5min，使之完全混溶；(3)在30TC時，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到5;(5)過勻質(zhì)儀第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至500bar，第二歩再調(diào)至1100bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下，用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌后，即得。實施例10:處方前列腺素1.5mg，聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS-15)5g，聚乙二醇月桂酸甘油酯2,5g，油酸甘油酯3g,月桂酸L8g，山梨醇6g,維生素EO.OSg，油胺0.24g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml，制得荷正電的脂微球注射液。(附圖25)工藝全程氮氣保護(hù)下(1)油相的配制在配制灌中加入聚乙二醇月桂酸甘油酯和油酸甘油酯，控制溫度在701C,加入聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS-15)、維生素E和月桂酸，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至40X:加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻；(2)水相的制備將水、山梨醇在40'C下攪拌5min，使之完全混溶；(3)在40"C時，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳；(4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值到6;(5)過勻質(zhì)儀第一歩調(diào)節(jié)勻化壓力至600bar，第二歩再調(diào)至1800bar，將溶液反復(fù)勻化；(6)上述制得乳劑在無菌條件下用0.22um的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，在氮氣流保護(hù)下灌封后，即得。實施例11:本發(fā)明制劑的相分布測定試驗試驗條件241C,相對濕度58%。試驗樣品由實施例l、2、3、4、5、6、7、8、9、IO所得制劑。試驗方法與結(jié)果由于本品實際為脂微球制劑，藥物在各相分布的試驗結(jié)果是重要的質(zhì)量指標(biāo)之一。脂微球制劑具有油相、水相和油/水界面膜相。測定藥物相分布的關(guān)鍵是將這三相從乳劑中分離出來，以考察脂微球中藥物在各相的分布。采用破乳和離心的方法使微觀的乳滴發(fā)生聚集形成宏觀的分層現(xiàn)象，并分離出油相、水相、油/水界面膜相。用高效液相色譜法對其進(jìn)行含量測定，色譜條件為以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，C18色譜柱(粒徑5jun,柱長4.6x25cm)，以0.0067mol/L磷酸鹽緩沖液(pH為6.3)—乙腈(3:1)為流動相柱后衍生反應(yīng)液為lmol/L的氫氧化鉀溶液，柱后反應(yīng)管為聚四氟乙烯管(0O.5mmxlOm);柱溫60t!;檢測波長為278nm，進(jìn)樣量20^;流速lmL/min。系統(tǒng)適用性試驗結(jié)果表明理論塔板數(shù)為符合要求；檢測限為0.9ng，定量限為2.7ng;通過酸、堿、氧化和熱破壞試驗結(jié)果表明其分離度符合要求按內(nèi)標(biāo)法分別計算前列腺素E,與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值，以前列腺素E,濃度為橫坐標(biāo)，峰面積的比值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性方程為A=0.1579C+0.0452(r=0.9994)。結(jié)果表明，在0.4518.0ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；精密度試驗結(jié)果RSDW為0.86%;閂內(nèi)穩(wěn)定性試驗結(jié)果RSD。/。為1.48%，回收率試驗結(jié)果表明其平均回收率為102.25%，RSD。/。為1.29%，均符合要求。精密吸取上述油相適量加甲醇、內(nèi)標(biāo)溶液定容至刻度，作為油相含量測定溶液，取水相適量加入內(nèi)標(biāo)溶液作為水相含量測定溶液，分別吸取水相及油相含量測定溶液20nL注入液相色譜儀，照含量測定項下的方法，以內(nèi)標(biāo)法分別計算藥品總量、油相和水相中藥物的含量，油/水界面膜相中的量以公式為藥物在油/水界面膜相中的量=總藥量一(水相中的藥物+油15相中的藥物)計算即可得到。具體的測定結(jié)果見表1和圖212。表1前列腺素El脂微球制劑相分布試驗結(jié)果制劑總藥量(%)油相中藥量(%)水相中藥量(%)油/水界面膜相中藥量(%)包封率(o/o)實施例1112.64.97.39890.30292.78947實施例2105.24.46.0106卯.689494.0548實施例3101.55.27.068988.231192.96627實施例4100.14.66.036789.463393.鄰933實施例5104.33.77.0175卯.882593.09301實施例6108.45.16.098389.501793.94409實施例7101.34.77.0147卯.585393.14301實施例8103.84.56.8212卯.478893.29941實施例9102.55.37.368789.531392.78992實施例10100.84.28.011588.188592.02042結(jié)果表明，藥物幾乎全部分布在油相和油/水界面膜相中，進(jìn)一歩證明了本發(fā)明可將前列腺素El包裹于油相和油/水界面膜相中，經(jīng)計算在90%左右，這樣就減少了主藥游離于水溶液中的幾率，不僅可以提高前列腺素E1的物理及化學(xué)穩(wěn)定性，而且可以減輕注射時引起的剌激性，達(dá)到劑型設(shè)計的目的和意義。計算公式如下包封率％=(總藥量—水相中的藥量)xl00%總藥量我們將前列地爾脂微球的分布采用三相模型進(jìn)行分析。也就是PGE,分布在水合相、油相和油/水膜界面。這種假設(shè)的分配示意圖通過定義d、C2、C3分別為水合相、磷脂相(油/水界面膜)和油相的平衡濃度。磷脂/水相和油/磷脂相的濃度比率分別定義為戶07W)和戶(0/U。當(dāng)藥物的濃度低于各相的溶解度時，尸O/W,和尸(0/U的值接近常數(shù)。因此C2、C3可以寫成如下公式L2—Lj廠Hx"o〃，一4r0〃，(10)、(11)微粒相由大豆油和磷脂組成。因此，通過測定微粒相和水相之間的濃度比率，以及油水分配系數(shù)，藥物在三相的濃度比率就可以被計算出。從表上述的數(shù)據(jù)上可以計算出PGEi在三相(水、磷脂膜、油)的油水分配系數(shù)。此外，還可以從而獲得不同溫度下PGR在脂微球的分布比率。大多數(shù)的PGE,在脂微球的分布于磷脂層中，其比率不受溫度影響。由于圓形部分(脂微球)的PGE,被發(fā)現(xiàn)在油/水界面面膜里,因其具有一個五碳環(huán)和兩條側(cè)鏈的二十碳脂肪酸的基本骨架，其中一條側(cè)鏈具有親水的羧酸基團(tuán)，因而具有輕微的表面活性作用的特性，而被轉(zhuǎn)運到與其有更高親和力的磷脂中。這些結(jié)果考慮了相似于分布在脂質(zhì)體類脂材料里。這種分布的變化受溶液中離子的影響。實施例14:本發(fā)明制劑的粒度測定試驗試驗樣品由實施例l、2、3、4、5、6、7、8、9、IO所得制劑。試驗方法與結(jié)果取本品，用純化水(通過0.22拜膜濾過)分別稀釋至5000倍，混勻，作為供試液，用動態(tài)激光散射粒徑議測定法測定。見表2，測定實施例6粒徑并用顯微鏡和透射電鏡觀察其微觀形態(tài)，結(jié)果表明粒45無明顯變化，見圖14至圖16。表2前列腺素El脂微球注射液粒度測定試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結(jié)果表明，本發(fā)明所制成的前列地爾脂微球注射液粒徑范圍為5(^500nm，平均粒度100~200咖。實施例15:本發(fā)明制劑實施例6的體外釋放度試驗-試驗樣品實施例6試驗方法與結(jié)果采用反相透析法測定前列地爾脂微球注射液的體外釋放度。取本品，用pH7.4的磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋，制成濃度為lpg/mL的藥液，取預(yù)處理好的透析^6個，里面分別裝有pH7.4的磷酸鹽緩沖液作為釋放介質(zhì)，在371C下攪拌，于0.5、1、2、6、12、24小時取樣測定，并同時補(bǔ)充等量的pH7.4的磷酸鹽緩沖液。同法進(jìn)行六份樣品的釋放度試驗，釋放度測定方法同實施例13，計算累積釋放度，結(jié)果見表3，圖17。表3前列地爾脂微球注射液體外釋放度試驗結(jié)果時間^mx^123456平均累積籽放度(％)0.523.332.1528.9525.75521.62821.97525.626144.44647.1944.18449.66350.44243.37346.551257.32853.4657.99359.86862.06357.19157.984674.45375.6474.95373.06575.5569.16773.8041282.50186.2679.60681.22581.86673.718肌8622490.59597.0793.147卯.544卯.37790.3592.014前列地爾脂微球注射液的體外釋放度試驗結(jié)果表明，本發(fā)明所制得的制劑在2小時內(nèi)可釋放50。/n以上的藥物，可以迅速地達(dá)到一定的給藥劑量，使藥效得到迅速的發(fā)揮，在兩次給藥間隔時間內(nèi)可完全釋放藥物，并維持了近18h的80。/。以上的釋放度，達(dá)到了釋藥平衡，使藥物緩慢釋放并維持一定的平衡。體外釋放度試驗可以為體內(nèi)釋放度試驗的預(yù)測提供依據(jù)。實施例16:本發(fā)明制劑實施例6與輸液配伍后包封率試驗試驗樣品實施例6試驗方法與結(jié)果取本品分別與適量的0.9%氯化鈉、5%葡萄糖、空白脂肪乳輸液配伍后，于0.5、1、2、4、6、8、12小時后取樣;精密吸取前列地爾脂微球注射液，加入以注射用水洗去甘油的MilliporeYM-10超濾離心管中(截留分子量8000-10000)，離心30min。取濾出液加內(nèi)標(biāo)液(5.0mg'mL'1P-萘酚溶液)，搖勻，精密吸取2(HiL溶液，進(jìn)樣，測定峰面積，照相分布試驗測定方法，用內(nèi)標(biāo)法前列地爾的含量，記為M,;另吸取前列地爾脂微球注射液，按含量測定方法處理進(jìn)樣，測得含量計為Mo;按下式計算包封率包封率(％)=風(fēng)—MlxlOO%M、為脂微球注射液中游離的前列地爾的量；Mo為脂微球注射液中前列地爾的總量，結(jié)果見表4。表4前列地爾脂微球注射液配伍后包封率試驗結(jié)果18<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>前列地爾脂微球注射液的配伍試驗結(jié)果表明，本發(fā)明所制得的制劑在12小時內(nèi)包封率無明顯變化，與脂肪乳注射液配伍使用可抑制藥物從脂微球中游離出來，提高了藥物配伍后的包封率，有利于降低臨床使用時產(chǎn)生的血管刺激性，從而緩解靜脈注射時的疼痛。實施例17:本發(fā)明制劑的安全性試驗。具體包括血管刺激性試驗；溶血與凝聚試驗資料；肌肉刺激性試驗；全身主動過敏試驗資料。試驗方法與結(jié)果如下取前列腺素El脂微球注射液1支稀釋在10ml的5%葡萄糖注射液中，制成供試品溶液。1.血管刺激性試驗本品l[ig/mL家兔耳靜脈注射給藥，2ml/kg，每FI—次，連續(xù)給藥3天。結(jié)果家兔耳靜脈給藥部位肉眼觀察無明顯變化；組織病理切片顯微鏡檢顯示距注射部位lcm處血管、5cm處血管內(nèi)皮連續(xù)、完整，未見增生、腫脹；血管周圍組織未見炎性細(xì)胞浸潤及壞死；管腔內(nèi)無血栓形成。前列腺素E1脂微球注射液對家兔耳靜脈血管未見明顯刺激作用。并與上市制劑做比較，結(jié)果見圖18。2.溶血與凝聚試驗采用常規(guī)體外試管法(肉眼觀察法)，將ljig/mL本品與2。/。紅細(xì)胞混懸液混合，3小時內(nèi)未見溶血與凝聚現(xiàn)象。4.肌肉刺激性試驗本品lHg/mt家兔股四頭肌注射給藥，lmL/每側(cè)。48小時是取給藥部位肉眼觀察并作病理組織學(xué)檢查。結(jié)果表明，本品對家兔股四頭肌無刺激性。5.全身主動過敏試驗本品高劑量2jig/mL、低劑量lng/mL分別隔日給豚鼠腹腔注射該溶液致敏隔閂l次，連續(xù)3次，并于末次致敏后第13天，各組分別靜脈注射相應(yīng)濃度的本品，結(jié)果表明，本品的高、低劑量組均未見過敏反應(yīng)。實施例18:本發(fā)明制劑對大鼠體內(nèi)血栓形成的影響的試驗。試驗方法與結(jié)果如下19體外旁路循環(huán)法試驗Wister大鼠60只，體重280il5g，雄性，按照體重隨機(jī)分為PGE1粉針劑空白及脂肪乳空白祖、PGE1粉針劑5、10fig/kg及PGE1脂微球注射液5、10pg/kg共6個組，每組10只。按照自身對照方法進(jìn)行大鼠體內(nèi)血栓形成試驗。用戊巴比妥鈉30mg/kgip麻醉，分離右頸總動脈及左頸外靜脈，從頸總動脈至頸外動脈插入一個帶有絲線并且充滿肝素-生理鹽水的聚乙烯套管，連接形成體外旁路循環(huán)。首先從舌下靜脈注射生理鹽水2ml/kg，5min后開放血流，血液從右頸動脈流向左頸外靜脈，15min后中斷血流，迅速取出中間套管中絲線，放于濾紙上，然后稱重，總重剪去絲線重計為給藥前血栓濕重(mg)。然后各組舌下靜脈注射藥物，更換帶有絲線充滿肝素-生理鹽水的聚乙烯套管，每組動物分別在給藥后60min開放血流，其他方法同上，所得血栓為給藥后血栓濕重。依下列公式計算血栓形成率，比較PGE1粉針劑及脂肪乳劑抑制大鼠體內(nèi)血栓形成的作用強(qiáng)度及持續(xù)時間。抑制率=Mf^l^llliM5纖給藥Blf血栓重量結(jié)果表明，本發(fā)明所制得的前列地爾脂微球注射液較市售的環(huán)糊精包合物凍干粉針劑在抑制大鼠體內(nèi)血栓形成的作用強(qiáng)度及持續(xù)時間上顯現(xiàn)了較大的優(yōu)勢，見附圖19。.實施例19前列地爾注射液治療下肢慢性動脈閉塞癥、慢性肝炎有效性及安全性的隨機(jī)雙盲、陽性藥平行對照、多中心臨床觀察(臨床研究批件號2005L01810):1、有效性結(jié)果本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ITT人群考慮中心效應(yīng)的CMH>x檢驗，兩組間總體療效的差別無統(tǒng)計學(xué)意義。兩組總體療效臨床有效率分別為57.55°/。和60.95%,經(jīng)CMH-X2檢驗差別亦無統(tǒng)計學(xué)意義，P=0.663。PP人群結(jié)果和ITT人群結(jié)果相近。2、安全性結(jié)果:本次臨床研究未發(fā)生嚴(yán)重不良事件兩組患者研究結(jié)束時患者不良事件發(fā)生率分別為11.11%和7.34%。與藥物相關(guān)的(研究者判斷為肯定有關(guān)、可能有關(guān)或無法判定)不良事件發(fā)生率分別為5.56%和5.50%。導(dǎo)致脫落的不良事件發(fā)生率分別為0和1.83%。結(jié)論通過治療下肢慢性動脈閉塞癥14天的觀察，由本溪雷龍藥業(yè)有限公司(本發(fā)明委托生產(chǎn)單位)的前列地爾注射液與北京泰德制藥有限公司生產(chǎn)的前列地爾注射液，都是一樣的有效和安全的藥物。權(quán)利要求1、一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是治療有效量的前列腺素加入輔料后，通過乳化劑或助乳化劑的作用，被包裹于油相和油/水界面膜相中制成的水性分散體，分散相中藥物的包封率在90％以上，含有0.0001-0.1份重量的前列腺素E1、所述的輔料有5-20份重量的注射用油、0.2-5份重量的乳化劑、0.1-5份重量的助乳化劑、0.5-3份重量的等滲調(diào)節(jié)劑、適量的抗氧劑、pH調(diào)節(jié)劑和適量的注射用水。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是該非均相分散系體系由油相、油/水界面膜相、水相組成，其中油相載藥量按重量百分比為0~4%，水相中含量為3~15%，油/水界面膜相載藥量為80°/。~95%之間，藥物的包封率為83~97%。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是加入藥理允許的配伍溶液使制得的注射劑中前列腺素El的含量在0.0010.2mg/mL之間，其中的配伍溶液可以為氯化鈉注射液、葡萄糖注射液、脂肪乳注射液或其他可注射溶液中的一種或多種，配得的單位注射劑量體積在1mL500mL之間。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種荷電件前列腺素El脂微球注射液，其特征是所述的注射用油為含624個碳原子的脂肪酸甘油酯，可以是精制大豆油、辛葵酸甘油脂、麻油、紅花油、橄欖油、花生油、棉子油、維生素E、、油酸乙酯、業(yè)油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、亞油酸乙酯、油酸山梨醇酯、油酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯、椰子油C8/C10丙二醇雙酯、椰子油C8/C10甘油三酯、純化乙?；膯胃视王?、純化向R葵油單甘油酯、魚油或其他動物油脂中的一種或幾種混合物。5、根據(jù)權(quán)利要求1一所述的任一項一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是所述的乳化劑可以是大豆卵磷脂和蛋黃卵磷脂，天然或人工合成的具有磷脂酰膽堿結(jié)構(gòu)的衍生物、泊洛沙姆、聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS-15)、a-生育酚琥珀酸酯-聚乙二醇酯(TPGS)、聚乙二醇琥珀酸酯、乙酸單甘油酯、聚甘油棕櫚酸二醇酯、中的一種或幾種混合物；乳化劑中可以根據(jù)需要加入助乳化劑，助乳化劑可以是油酸或其鹽、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、膽酸、去氧膽酸或其鹽、二十二碳六烯酸(DHA)、無水乙醇、JH丁醇、正己醇、乙二醇或丙二醇、l八胺或油胺中的一種或幾種混合物；所述的等滲調(diào)節(jié).劑可以是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、山梨醇中的一種或幾種混合物所述的抗氧劑可以是惰性氣體、EDTA及其鹽類、維生素E、d-生育酚、a-醋酸生宵酚、ci-硫辛酸、維生素C及其衍生物中的一種或幾種混合物；所述的pH調(diào)節(jié)劑可以是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉中的一種或幾種混合物。6、根據(jù)權(quán)利要求15所述的任一項一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是所制成乳劑的粒徑范圍為10500nrn，平均粒度80~300nm。脂微球表面的荷電Pj以是負(fù)電荷，也可以是正屯荷，Zeta電位范闈分別為-l(K-60mv和+10—50mv之間。7、根據(jù)權(quán)利要求16所述的仟一項前列腺素E1脂微球注射液的制備方法，其特征是初乳化工藝(1)油相的配制a.在配制灌中加入注射用油、乳化劑、助乳化劑、抗氧劑混合，加熱溫度至30~卯"，攪拌溶解后，加入藥物，攪拌分散至溶解；b.在配制灌中加入注射用油、助乳化劑、抗氧劑，加熱溫度至30"卯。0,攪拌混勻溶解后，加入藥物，攪拌分散至溶解；(2)水相的制備將水、乳化劑、等滲調(diào)節(jié)劑、抗氧劑在30卯TC下，同油相溫度攪拌使之完全分散均勻；(3)在2(K80TC時，將油相加入水相或水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌或高速剪切分散混勻，形成初乳；(4)用一定濃度的pH調(diào)節(jié)劑將pH值調(diào)節(jié)到3~8;精乳化工藝(5)用高壓勻質(zhì)機(jī)或用微射流儀，將壓力調(diào)至5(K2000bar,將溶液反復(fù)勻化，制得均勻分散的前列腺素E1脂微球注射劑；(6)將上述(5)制得乳劑經(jīng)0.22jmi的微孔濾膜進(jìn)行過濾除菌，濾液灌封后，既得前列腺素E1脂微球注射液。(7)上述(1)~(6)全過程，均在在氮氣流保護(hù)下操作。8、根據(jù)權(quán)利要求17所述的一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是采用非終端滅菌注射劑的生產(chǎn)流程工藝規(guī)定，全過程可在無菌萬級和局部百級生產(chǎn)條件下，制得的前列腺素El脂微球注射液經(jīng)0.22^irn的微孔濾膜過濾除菌后，濾液直接灌封，即得。成品符合GMP和無菌保證水平的規(guī)定，臨床應(yīng)用安全有效。9、根據(jù)權(quán)利要求17所述的一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是采用終端滅菌的生產(chǎn)工藝流程的規(guī)定，全過程可在力'級生產(chǎn)條件下，制得的前列腺素E1脂微球注射液經(jīng)0.45或0.22^1111的微孔濾膜精濾后，灌封，采用過度殺滅法或殘存概率法等歐盟規(guī)定的滅菌樹下的條件，即得。成品符合GMP和無菌保證水平的規(guī)定，保障臨床應(yīng)用的安全性。10、根據(jù)權(quán)利要求1—所述的一種荷電性前列腺素E1脂微球注射液，其特征是臨床上可用于治療慢性動脈閉塞癥(血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥)引起的四肢潰瘍及微小血管循環(huán)障礙引起的四肢靜息疼痛，改善心腦血管微循環(huán)障礙；臟器移植術(shù)后抗栓治療，用以抑制移植后血管內(nèi)的血栓形成；動脈導(dǎo)管依賴性先天性心臟病，用以緩解低氧血癥，保持導(dǎo)管血流以等待時機(jī)手術(shù)治療；用于慢件肝炎的輔助治療。全文摘要本發(fā)明涉及一種荷電性非均相(包含水相、油/水界面膜相和油相)分散系體系的前列腺素E₁脂質(zhì)微球注射液的制備方法，其脂微球表面可以是荷正電也可以是荷負(fù)電。前列腺素E₁即前列地爾，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是具有一個五碳環(huán)和兩條側(cè)鏈的二十碳脂肪酸的基本骨架，其中一條側(cè)鏈具有親水的羧酸基團(tuán)，因而具有輕微的表面活性作用的特性。應(yīng)用該特性，通過本發(fā)明所描述的處方和制備工藝技術(shù)，使得它在上述非均相的分散系體系“脂微球”溶液中，具有奇特的載藥方式，所制得的脂微球注射液，與已經(jīng)上市的前列地爾注射液(凱時^TM，應(yīng)用日本株式會社LTTバイオフア一マ技術(shù)制得)具有本質(zhì)的不同，其區(qū)別在于載體的載藥方式完全不一致，制劑中的雜質(zhì)等降解產(chǎn)物低于凱時^TM的一半以上，具有本質(zhì)不同。本發(fā)明中涉及前列腺素E₁脂微球注射液制備方法及其在三相體系的載藥特性，處方中含有0.0001-0.1份重量的前列腺素E₁作為藥物，所述的前列腺素E₁加入藥用輔料制成前列地爾脂微球注射液，所述的藥用輔料包括5-20份重量的注射用油、0.2-5份重量的乳化劑、0-5份重量的助乳化劑、0.5-3份重量的等滲調(diào)節(jié)劑、適量的抗氧劑、適量的pH調(diào)節(jié)劑和適量的注射用水。本發(fā)明從宏觀及微觀上探討了前列腺素E₁脂微球注射液在水包油型分散體系中形成的脂質(zhì)微球，包含油、油/水界面膜、水中的藥物分布，可以將85％以上的藥物包裹于油相和油/水界面膜相中，游離在水相中的藥物不到15％，提高了其制劑的穩(wěn)定性，還極大減輕了靜脈注射時的血管刺激性，使藥物更多沉積于炎癥血管壁中，提高療效降低劑量，大大提高患者的順應(yīng)性。本發(fā)明適用于前列腺素類藥物脂微球的制備方法。文檔編號A61P1/00GK101496787SQ20091001016公開日2009年8月5日申請日期2009年1月20日優(yōu)先權(quán)日2009年1月20日發(fā)明者健宋,李淑斌申請人:李淑斌