專利名稱：用抗cd20抗體治療累及骨髓的非霍奇金淋巴瘤患者的制作方法
用抗CD20抗體治療累及骨髓的非霍奇金淋巴瘤患者發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及在放射免疫治療之前降低B細(xì)胞淋巴瘤患者骨髓中的癌 性B細(xì)胞數(shù)的方法，該方法包括施用抗CD20抗體。還提供治療累及相 關(guān)骨髓的淋巴瘤患者的聯(lián)合治療方法。發(fā)明背景B細(xì)胞淋巴瘤的方文射免疫治療(radioimmunotherapy )由于累及骨 髓(marrow involvement),即癌性B淋巴細(xì)胞對骨髓的浸潤，而受到限制。 這在兩個(gè)方面使放射免疫治療復(fù)雜化(1)與骨髓中的患病細(xì)胞結(jié)合的 抗體會遞送一定劑量的輻射到骨髓中，從而引起不必要的骨髓抑制；(2) 正常細(xì)胞和祖先細(xì)胞在骨髓中的擁擠(marrow crowding)將減弱健康骨 髓儲備，以致患者實(shí)際上比沒有骨髓累及的患者更接近第3或4級血細(xì) 胞減少。在任一種情況下，當(dāng)例如采用偶聯(lián)同位素如卯Y或mi的B細(xì) 胞損耗抗體時(shí)，患者都可能對放射免疫治療有較差的耐受性。因此，骨 髓累及程度超過25%的患者一般被排除在放射免疫治療之外。Wiseman和同事發(fā)現(xiàn)，臨床參數(shù)基線血小板計(jì)數(shù)和骨髓累及程度， 是接受Y2B8 ( —種與9DY偶聯(lián)的抗CD20抗體)治療的低級濾泡型非霍 奇金淋巴瘤患者體內(nèi)血液毒性的準(zhǔn)確預(yù)測指標(biāo)。例如，在不累及骨髓的 患者中出現(xiàn)第4^U6l小板咸少的患者占8% (2/25),而這在有0.1-5% 骨髓累及的患者中占25%(1/4)，在有5-20%骨髓累及的患者中占45% (5/11),在有20-25%骨髓累及的患者中占100%(6/6) (Wiseman等， IDEC-Y2B8放射免疫治療基線的骨髓累及和血小板計(jì)數(shù)比劑量測定法 是更好的血液毒性預(yù)報(bào)者。血液(Blood) 1998, 11月增刊，92 (10) : 417a (1721) Poster Board #/ Session: 393-III )。有用的是，開發(fā)降低非霍奇金淋巴瘤患者中骨髓的累及程度的方法，以便這些患者可以從新的放射免疫治療中受益，并籍此提供另 一途徑的 療法和減少復(fù)發(fā)的可能性。本發(fā)明提供了這些方法。發(fā)明概述本發(fā)明涉及治療伴隨有骨髓累及的B細(xì)胞淋巴瘤患者的方法，該方 法包括施用單克隆抗體或其片段，以便降低或緩解所述骨髓累及。具體 地，本發(fā)明包括在放射免疫治療前降低非霍奇金淋巴瘤患者骨髓中的癌 性B細(xì)胞數(shù)的方法，其包括給所述患者施用有效量的治療性抗體。這些 方法也可以用于在施用被細(xì)胞毒性部分(如毒素)標(biāo)記的抗體、或任何 可能損害位于浸潤骨髓的靶細(xì)胞附近的健康骨髓祖先細(xì)胞的免疫治療劑 前，降低骨髓累及。盡管也可以采用針對其它B細(xì)胞表面標(biāo)志的抗體如抗CD19抗體， 但優(yōu)選采用抗CD20抗體。作為靶標(biāo)的細(xì)胞表面蛋白質(zhì)應(yīng)具有主要在癌 性B細(xì)胞上表達(dá)而且一般不在正常細(xì)胞或B細(xì)胞前體上表達(dá)的特性，并 且當(dāng)與抗體結(jié)合時(shí)優(yōu)選不脫落、內(nèi)化或調(diào)制(modulate )。術(shù)語抗體"片段"包括治療性抗體的任何在治療上有效的部分或衍 生物，其能有效地結(jié)合目的靶標(biāo)并產(chǎn)生預(yù)期結(jié)果。這包括Fabz片段、Fab 片段、Fv片段、域缺失抗體等。優(yōu)選地，本發(fā)明所用抗體是人抗體、嵌 合抗體或人源化抗體，以便該抗體含有能夠刺激人效應(yīng)子功能(effector functions)的人恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域。優(yōu)選的抗體是嵌合抗CD20抗體 Rituximab (美國市場上為Rituxan ,英國市場上為Mabthera )。本發(fā)明的最大受益患者將是在采用本公開的免疫治療處理前骨髓累 及程度超過25%的患者。這些患者可以通過采用釋放y射線的同位素(如 mIn)放射性標(biāo)記的抗體進(jìn)行預(yù)先的診斷顯像來確定。這些患者也可以 通過骨髓活組織檢查來確定。根據(jù)Wiseman等的研究，這些患者會由于放射免疫治療而有很高的 機(jī)率發(fā)生血小板減少。然而，由于在放射免疫治療后發(fā)生此不良反應(yīng)的 才幾率將根據(jù)骨髓累及的程度而增加，所以具有任何骨髓累及程度的任何 患者都將受益于本發(fā)明，因?yàn)樗麄儗⒂捎诒尽ㄛ涕_治療后放射免疫治療誘發(fā)血小板減少的危險(xiǎn)性降低而得益。本發(fā)明所用劑量可以隨患者、骨髓累及的程度和所用抗體而改變。嵌合抗CD20抗體如Rituximab可以按每周至少約50 mg/m2的劑量持續(xù) 至少4周給藥。優(yōu)選的劑量給藥方案是每周約375mg/m2，持續(xù)4周。由于本發(fā)明方法的目的在于降低預(yù)備接受放射免疫治療的淋巴瘤患 者中的骨髓累及，所以本發(fā)明的治療方法自然包括在骨髓凈化后采用放 射性標(biāo)記抗體進(jìn)行治療。該放射性標(biāo)記抗體也可以指向通常出現(xiàn)在癌細(xì) 胞而非正常細(xì)胞上的任何B細(xì)胞表面標(biāo)志。優(yōu)選地，該放射性標(biāo)記抗體 是抗CD20抗體。優(yōu)選的放射性標(biāo)記是釋放P射線的同位素如9GY或1311，但也可以采 用任何放射性同位素，只要它可以有效地與該抗體偶聯(lián)、具有相對短的 衰變射程(decay range )、并能成功地殺傷附近細(xì)胞(即它所把向的細(xì)胞) 即可。優(yōu)選的放射性標(biāo)記抗CD20抗體是Y2B8?；颊咭话銘?yīng)在損耗抗體施用后一周內(nèi)接受治療，只要他們沒有嚴(yán)重 的血細(xì)胞減少(如血小板<150，000 )即可。如果該患者在損耗抗體治療 后出現(xiàn)血細(xì)胞減少，則應(yīng)允許在放射免疫治療前進(jìn)行恢復(fù)，例如最低 AGC >1000或血小板>150，000。在允許外周血和/或骨髓中細(xì)胞恢復(fù)的情 況下，可以直接在免疫治療前再次施用損耗抗體。例如，可以直接在免 疫治療前或與之重疊的時(shí)期按約250mg/m2的量持續(xù)大約2周施用此第二 劑量。放射性標(biāo)記抗體的劑量也將隨患者、抗體的特異性、半衰期、穩(wěn)定 性等、當(dāng)然還有疾病的程度而改變?！氛缮湫詷?biāo)記抗CD20抗體如YAB8 按約0.1 - 0.5 mCi/kg的劑量施用。應(yīng)當(dāng)明了 ，本文公開的治療方法可以與其它已知的治療方法如化療 或放療聯(lián)合。為了在放射治療后實(shí)現(xiàn)自體骨髓或干細(xì)胞移植，可以在采 用抗CD20抗體治療后、采用所述》文射性標(biāo)記抗體治療前，從所述患者 收集骨髓或外周血干細(xì)胞。為了在損耗抗體或放射性標(biāo)記抗體施用前上調(diào)CD20或其它耙蛋白 質(zhì)在癌性B細(xì)胞表面上的表達(dá)，采用細(xì)胞因子治療患者可能也是有用的。對于CD20的上調(diào)，可以用于此目的的細(xì)胞因子有IL-4、 GM-CSF和 TNF-a。細(xì)胞因子也可以在損耗抗體或放射性抗體施用的同時(shí)、之前或 之后施用，以便刺激免疫效應(yīng)子功能。用于此目的的細(xì)胞因子包括a干 擾素、GM-CSF和G-CSF?？梢圆捎没瘜W(xué)療法方案補(bǔ)充本文公開的治療方法，并且化學(xué)療法方 案可以與所述放射性抗體的施用同時(shí)地或相繼地按4壬4可順序進(jìn)行。該化 學(xué)療法方案可以選自CHOP、 ICE、米托蒽醌(MUozantrone )、阿糖胞 普、DVP、 ATRA、伊達(dá)比星、hoelzer化學(xué)療法方案、La La化學(xué)療法 方案、ABVD、 CEOP、 2-CdA、 FLAG & IDA (聯(lián)合或不聯(lián)合隨后的 G-CSF治療)、VAD、 M&P、 C-Weekly、 ABCM、 MOPP和DHAP。 優(yōu)選的化學(xué)療法方案是CHOP。本發(fā)明方法可以用于治療各種B細(xì)胞淋巴瘤，但在所述B細(xì)胞淋巴 瘤是非霍奇金淋巴瘤(NHL)時(shí)尤其有用。Rituximab已經(jīng),皮批準(zhǔn)用于治療 4氐分級濾泡性NHL，但本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)Rituximab對于中分級和高 分級的NHL(包括大體積疾病(bulkydisease)在內(nèi))也是有益的。因此，可 以通過本發(fā)明方法治療的淋巴瘤包括低分級/濾泡性非霍奇金淋巴瘤 (NHL)(low grade/ follicular non醒Hodgkin，s lymphoma)、小淋巴細(xì)胞(SL) NHL 、中分級/濾泡性NHL(intermediate grade/ follicular NHL)、中分級 彌漫性NHL(intermediate grade diffuse NHL)、 'lt性淋巴細(xì)胞白血病 (CLL)、高分級免疫母細(xì)胞性NHL(high grade immunoblasticNHL)、高 分級淋巴母細(xì)胞性NHL(Wgh grade lymphoblastic NHL)、高分級小無裂 細(xì)胞NHL(high grade small nondeaved cell NHL)、 大體積疾病 NHL(bulky disease NHL)、套細(xì)胞淋巴瘤、AIDS相關(guān)淋巴瘤和瓦爾登斯 特倫巨球蛋白血癥，只要是這些淋巴瘤伴隨有使放射免疫治療的可用性 復(fù)雜化的骨髓累及即可?，F(xiàn)在我們通過以下數(shù)據(jù)舉例說明示例性治療條件。復(fù)發(fā)性或頑固性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的放射免疫治療Y2B8的I/II期 9。Y試驗(yàn)此I/II期試驗(yàn)包括58名復(fù)發(fā)性或頑固性NHL患者，平均年齡60歲、 43%的骨髓累及、60。/。大體積損傷〉5cm (White等，第七屆國際惡性淋 巴瘤會議上的海報(bào)展示，Lugano，瑞士。腫瘤學(xué)年刊(Annals of Oncology),增刊3 (1999) 10:64 (215))。所有患者在接受5mCi mIn標(biāo)記 的抗體In2B8后均通過Y攝像測量及系列尿和血液采樣進(jìn)行了劑量測 定。在顯像和治療前，采用Rituximab清潔外周B細(xì)胞并優(yōu)化放射性標(biāo) 記抗體的分布。 一周后，給第2和3組的患者施用Y2B8 ( 0.2、 0.3或0.4 mCi/kg)。未進(jìn)行骨髓或干細(xì)胞的收集。結(jié)果MTD為0.4 mCi/kg (對于血小板輕孩i減少的患者為0.3 mCi/kg )。大 體上不良反應(yīng)是血液性的、暫時(shí)的和可逆的。整體而言，5名患者(10%) 出現(xiàn)最低血小板計(jì)數(shù)<10，000/mm3 ，而14名患者(28%)出現(xiàn)最低 AGC<500。 3名患者(6%)在一年的觀察期中出現(xiàn)需要進(jìn)行住院治療的感 染。僅2。/。的患者出現(xiàn)HAMA/HACA。平均血清免疫球蛋白在一年的觀 察期內(nèi)保持正常。在所有的組織學(xué)研究中ORR為67% (26% CR和41 % PR)，而對于患有低級NHL的患者為82%。按Kaplan Meier的方法 學(xué)，對于反應(yīng)者平均TTP為12.9+個(gè)月，反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間為11.7+個(gè)月。 在患有基線脾腫大的患者中，4/8 (50%)患者有反應(yīng)，相對地，在無脾腫 大的患者中為74% (29/39) (p= 0.1761)。兩個(gè)臨床參數(shù)，即基線活組 織檢查中的基線血小板計(jì)數(shù)和骨髓累及程度，比劑量測定參數(shù)更好地預(yù) 測了血液毒性的嚴(yán)重性。
權(quán)利要求
1. 治療伴隨有骨髓累及的B細(xì)胞淋巴瘤患者的方法，其包括施用抗CD20抗體或其片段，以便降低或緩解所述骨髓累及。
2. 權(quán)利要求l的方法，其中所述骨髓累及最初超過25%。
3. 權(quán)利要求2的方法，其中所述治療可將所述骨髓累及降低至不到 25 % 。
4. 權(quán)利要求1的方法，其中所述抗CD20抗體是人抗體、嵌合抗體 或人源化抗體。
5. 權(quán)利要求4的方法，其中所述抗CD20抗體是嵌合抗CD20抗體。
6. 權(quán)利要求5的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體是Rituximab 。
7. 權(quán)利要求6的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 50mg/m2的劑量施用至少4周。
8. 權(quán)利要求7的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 375mg/m2的劑量施用4周。
9. 權(quán)利要求l的方法，其還包括隨后施用放射性標(biāo)記抗體。
10. 權(quán)利要求9的方法，其中所述放射性標(biāo)記抗體是抗CD20抗體。
11. 權(quán)利要求10的方法，其中所述放射性標(biāo)記抗CD20抗體是Y2B8。
12. 權(quán)利要求11的方法，其中所述放射性標(biāo)記抗CD20抗體按約0. 1 -0. 5 mCi/kg的劑量施用。
13. 權(quán)利要求9的方法，其中與所述放射性標(biāo)記抗體同時(shí)或相繼地以 任何順序再次施用抗CD20抗體。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中按約250mg/m2的劑量給予至少一個(gè)劑 量的所述再次施用的抗CD20抗體。
15. 權(quán)利要求9的方法，其中在采用抗CD20抗體治療之后、采用所 述放射性標(biāo)記抗體治療之前從所述患者收集骨髓或外周血干細(xì)胞。
16. 權(quán)利要求1的方法，其中在施用所述抗CD20抗體之前通過施用 至少一種細(xì)胞因子使癌性B細(xì)胞表面上CD20的表達(dá)上調(diào)。
17. 權(quán)利要求16的方法，其中所迷細(xì)胞因子選自IL-4、 GM-CSF和TNF- a 。
18. 權(quán)利要求9的方法，其還包括與所迷放射性標(biāo)記抗體的施用同時(shí) 或相繼地以任何順序采用化學(xué)療法治療。
19. 權(quán)利要求19的方法，其中所述化學(xué)療法選自CHOP、 ICE、米托 蒽醌、阿糖胞苷、DVP、 ATRA、伊達(dá)比星、hoelzer化學(xué)療法、La La化 學(xué)療法、ABVD、 CEOP、 2-CdA、 FLAG & IDA (聯(lián)合或不聯(lián)合隨后的G-CSF 治療)、VAD、 M & P、 C-Weekly、 ABCM、 MOPP和DHAP。
20. 權(quán)利要求19的方法，其中所述化學(xué)療法是CHOP。
21. 權(quán)利要求1的方法，其還包括與所述抗CD20抗體同時(shí)或相繼地以任何順序施用至少 一種細(xì)胞因子。
22. 權(quán)利要求22的方法，其中所述至少一種細(xì)胞因子選自a干擾素、 GM-CSF和G-CSF。
23. 權(quán)利要求1的方法，其中所述B細(xì)胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤 (NHL)。
24. 權(quán)利要求23的方法，其中所述NHL選自低級/濾泡型非霍奇金淋 巴瘤(NHL)、小淋巴細(xì)胞(SL) NHL、中等級別/濾泡型NHL、中等級別彌 散性NHL、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、高級別免疫母細(xì)胞性NHL、高級 別淋巴母細(xì)胞性NHL、高級別小無裂細(xì)胞NHL、大體積疾病NHL、套細(xì)胞 淋巴瘤、AIDS相關(guān)淋巴瘤和瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥。
25. 在放射免疫治療之前降低非霍奇金淋巴瘤患者骨髓內(nèi)癌性B細(xì)胞 數(shù)的方法，其包括給所迷患者施用有效量的抗CD20抗體。
26. 權(quán)利要求25的方法，其中所述抗CD20抗體是人抗體、嵌合抗體 或人源化抗體。
27. 權(quán)利要求26的方法，其中所述抗體是嵌合抗體。
28. 權(quán)利要求27的方法，其中所述嵌合抗體是Rituximab 。
29. 權(quán)利要求25的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 50mg/in2的劑量施用至少4周。
30. 權(quán)利要求29的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 375mg/m2的劑量施用4周。
全文摘要
本發(fā)明涉及在放射免疫治療前通過施用靶向癌性B細(xì)胞的單克隆抗體降低B細(xì)胞淋巴瘤患者中的骨髓累及的方法。
文檔編號A61K38/00GK101259270SQ200810092138
公開日2008年9月10日 申請日期2000年7月25日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月11日
發(fā)明者W·H·拉斯泰特 申請人:拜奧根Idec公司