專利名稱：：肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，特別是用于治療乙型肝炎、重型肝炎和重度黃疸型肝炎的肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：苦參素是中藥苦參、山豆根和苦豆子的主要有效成分，研究證實(shí)治療慢性乙型肝炎效果顯著，具有直接抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的作用，能有效抑制肝細(xì)胞異常凋亡，同時(shí)阻斷和減輕肝纖維化程度，并對(duì)重型肝炎及重度黃疸型肝炎有一定療效。主要指標(biāo)優(yōu)于或等同于a干擾素，但價(jià)格比干擾素低得多。苦參素現(xiàn)有劑型主要有注射劑(粉針、水針以及輸液)和口服制劑(片、膠囊、軟膠囊)?？鄥⑺刈⑸鋭┐嬖谥胨テ诙毯驮诎衅鞴?肝臟)分布量少的問題藥物進(jìn)入體內(nèi)后消除迅速，健康人的T1/2P僅為130.4min;原型藥物及其代謝物主要分布于腎臟，進(jìn)入肝臟的量非常小。為了保證療效，臨床上給藥劑量較高，這樣會(huì)增加藥物的不良反應(yīng)?？诜苿┦褂梅奖悖s86.8%的苦參素會(huì)在腸道菌群作用下，代謝為療效相對(duì)較低、副作用較大的苦參堿，使治療效果下降。納米制劑由于主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取，并迅速進(jìn)入肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞，使藥物高選擇性地分布于肝臟，、從而降低毒副作用和提高療效，是實(shí)現(xiàn)肝臟靶向的有效手段。同時(shí)還兼具緩釋作用，因而是實(shí)現(xiàn)苦參素對(duì)肝臟靶向治療和減緩釋放、延長(zhǎng)半衰期的最佳選擇之一。此外，類脂材料還具有保護(hù)肝細(xì)胞和免疫佐劑活性的作用。這樣從靶向給藥、免疫調(diào)節(jié)和保護(hù)肝細(xì)胞三方面三管齊下，不僅可以提高療效，還可以減少給藥劑量，降低毒副作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有肝細(xì)胞耙向作用的注射用苦參素納米粉針。與非納米制劑(如水溶液)相比，應(yīng)能減緩藥物的釋放，延長(zhǎng)藥物體內(nèi)停留時(shí)間，并使藥物趨向并集中于肝臟，提高療效。本發(fā)明注射用苦參素納米粉針劑，由苦參素1份，硬脂酸0.22份，注射用卵磷脂14份，甘草次酸02份，表面活性劑02份，凍干輔料26份組成。制備方法為苦參素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有機(jī)溶劑，加熱，形成有機(jī)相。將油相在攪拌下緩慢滴入至水相中，并在加熱狀態(tài)下攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液。該膠體溶液在冰浴下用冰水分散并攪拌，用微孔濾膜過濾，形成均勻納米級(jí)分散體。加入凍干輔料，混勻超聲，凍干保存即得。肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法的水分散液粒徑為50450nm，苦參素包封率為2085%。為解決上述問題，提供如下技術(shù)方案。肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米粉針劑，包括苦參素1份，硬脂酸0.22份，注射用卵磷脂14份，甘草次酸02份，表面活性劑02份，凍干輔料26份組成。其中表面活性劑選擇泊洛沙姆或吐溫80、PEG10006000。凍干輔料選擇甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖，較好的選擇為苦參素l份，硬脂酸0.41.2份，注射用卵磷脂2.83.6份，甘露醇35份。凍干輔料選擇甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖；表面活性劑選擇泊洛沙姆或吐溫80、PEG10006000。肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法為苦參素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有機(jī)溶劑，加熱，形成有機(jī)相。將油相在攪拌下緩慢滴入至水相中，并在加熱狀態(tài)下攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液。該膠體溶液在冰浴下用冰水分散并攪拌，用微孔濾膜過濾，形成均勻納米級(jí)分散體。加入凍干輔料，混勻超聲，凍干保存即得。較好的制備方法中，有機(jī)溶劑采用乙醇，有機(jī)相與水相分別加熱至5060°C，攪拌速度為8001400rpm，506(TC保溫?cái)嚢铦饪s，形成的膠體溶液分散于04。C的水中，并在冰浴下攪拌分散。用0.22um的微孔濾膜過濾，加入甘露醇作為凍干骨架，并凍干保存即得。本發(fā)明的制備方法，具體步驟如下(1)苦參素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有機(jī)溶劑，加熱，形成油相。(2)將表面活性劑，甘草次酸溶于熱水，形成水相。(3)將步驟1所得油相在攪拌下緩慢滴入至步驟2所得水相中，并在加熱狀態(tài)下攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液。(4)將步驟3所得膠體溶液在冰浴下用冰水分散并攪拌，用微孔濾膜過濾，形成均勻納米級(jí)分散體。(5)將凍干輔料加入至步驟4所得分散體，混勻超聲，凍干保存即得。肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法水分散液的粒徑為50450nm，苦參素包封率為2085%。本發(fā)明肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑，與非納米制劑(如水溶液)相比，藥物釋放減緩，制得的制劑具有肝細(xì)胞趨向性。本發(fā)明通過制劑學(xué)手段，減緩藥物的釋放，延長(zhǎng)苦參素在體內(nèi)的停留時(shí)間，并使藥物趨向并集中于肝臟，提高療效，并制備簡(jiǎn)單，不僅具有緩釋作用，而且可增加藥物在體內(nèi)滯留時(shí)間，具有較好的趨肝作用，發(fā)揮更好的療效。圖1為本發(fā)明制備流程示意2為本發(fā)明電鏡3為本發(fā)明粒徑分布4為本發(fā)明藥物釋放曲線圖5為本發(fā)明大鼠尾靜脈注射100mg/ml后的藥-時(shí)曲線圖具體實(shí)施方式實(shí)施例1A.苦參素lgB.卵磷脂3.6gC.硬脂酸0.4gD.甘露醇4g攪拌速度1000rpm攪拌溫度60°C滴入速度0.lml/min分散液溫度04°C稱取苦參素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加熱溶解，攪拌下緩慢滴入至加熱保溫的水中，攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液，用冰水分散，形成SLN懸液，0.22p微孔濾膜過濾，加甘露醇混勻，定容至100ml，超聲，凍干后保存。獲得的苦參素納米凍干粉針加水分散后，粒徑分布范圍為104士34nm，表面電位-32.6mV，包封率為81%。采用透析法進(jìn)行體外釋放研究，釋放時(shí)間長(zhǎng)達(dá)12小時(shí)，8小時(shí)時(shí)釋放約80%。大鼠尾靜脈給藥100mg/kg后，體內(nèi)過程符合二室開放模型，與水溶液相比，苦參素在體內(nèi)吸收和消除減慢，生物利用度增加；藥物自中央室的消除明顯減緩，藥物向組織分布的量增加；體內(nèi)清除速率顯著降低，藥物在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間延長(zhǎng)(見表l)。表1大鼠尾靜脈注射苦參素水溶液和苦參素-SLN的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>小鼠尾靜脈給藥100mg/kg后，與水溶液相比，藥物在肝和血中的分布有明顯提高。肝臟的趨向性增強(qiáng)，肝臟的相對(duì)靶向指數(shù)為360%，對(duì)心、脾、肺、腎、血的相對(duì)耙向指數(shù)降低，表明減少了藥物在其他器官的分布(見表2)。表2小鼠尾靜脈注射苦參素水溶液和苦參素SLN后組織中的藥物分布<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以上結(jié)果可見，實(shí)施例l制備的苦參素納米粉針具緩釋作用，可增加藥物在體內(nèi)時(shí)間，具較好的趨肝作用。實(shí)施例2(2-18號(hào))肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法(見表3)。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>具體步驟如下稱取苦參素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加熱溶解，攪拌下緩慢滴入至加熱保溫的水中，攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液，用冰水分散，形成SLN懸液，0.22ii微孔濾膜過濾，加甘露醇混勻，定容至100ml，超聲，凍干后保存。制備的肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的粒徑(見表4)。表4制備的肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的粒徑<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例3(1925號(hào))肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法(見表5)。表5肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>稱取A、B、C，加乙醇10ml，加熱溶解，攪拌下緩慢滴入至含有E的加熱保溫的水中，攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液，用冰水分散，形成SLN懸液，0.22P微孔濾膜過濾，加D混勻，定容至100ml，超聲，凍干后保存。實(shí)施例4(2628號(hào))肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法(見表6)表6肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法No.A苦參素(g)B卵磷脂(g)c硬脂酸(g)D甘露醇(g)260.43.60.442723.60.442843.60.44稱取苦參素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加熱溶解，攪拌下緩慢滴入至加熱保溫的水中，攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液，用冰水分散，形成SLN懸液，0.22p微孔濾膜過濾，加甘露醇混勻，定容至100ml，超聲，凍干后保存。例(2628號(hào))包封率分別為90.0%，76%，51%。表明載體的量增加可增加包封率。實(shí)施例5(2934號(hào))肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法(見表7)表7肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑的制備方法A苦參素B卵磷脂C硬脂酸D凍干輔料No.(g)(g)(g)2913.60.4甘露醇lg3013.60.4甘露醇2g3113.60.4乳糖2g3213.60.4乳糖4g3313.60.4右旋糖酐2g3413.60.4右旋糖酐4g稱取苦參素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加熱溶解，攪拌下緩慢滴入至加熱保溫的水中，攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液，用冰水分散，形成SLN懸液，0.22"微孔濾膜過濾，加甘露醇混勻，定容至100ml，超聲，凍干后保存。權(quán)利要求1.一種肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米制劑，它由苦參素1份，硬脂酸0.2～2份，注射用卵磷脂1～4份，甘草次酸0～2份，凍干輔料2～5份，表面活性劑0～2份組成，2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦參素納米粉針制劑，其特征在于凍干輔料選擇甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦參素納米粉針制劑，其特征在于表面活性劑選擇泊洛沙姆或吐溫80、PEG10006000。4、根據(jù)權(quán)利1所述的苦參素納米制劑的制備方法，其特征包括以下步驟(1)苦參素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有機(jī)溶劑，加熱，形成油相。(2)將表面活性劑，甘草次酸溶于熱水，形成水相。(3)將步驟1所得油相在攪拌下緩慢滴入至步驟2所得水相中，并在加熱狀態(tài)下攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液。(4)將步驟3所得膠體溶液在冰浴下用冰水分散并攪拌，用微孔濾膜過濾，形成均勻納米級(jí)分散體。(5)將凍干輔料加入至步驟4所得分散體，混勻超聲，凍干保存即得。5、根據(jù)權(quán)利4所述的苦參素納米制劑的制備方法，其水分散液的粒徑為50450nm，苦參素包封率為2085%。6、根據(jù)權(quán)利1或4所述的苦參素納米制劑，與非納米制劑如水溶液相比，藥物釋放減緩，制得的制劑具有肝細(xì)胞趨向性。全文摘要本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，特別是用于治療乙型肝炎、重型肝炎和重度黃疸型肝炎的肝細(xì)胞靶向注射用苦參素納米粉針劑及其制備方法。本發(fā)明注射用苦參素納米粉針劑，由苦參素，硬脂酸，注射用卵磷脂，甘草次酸，表面活性劑，凍干輔料組成。經(jīng)溶解，加熱，形成有機(jī)相，并在加熱狀態(tài)下攪拌蒸發(fā)溶劑，形成膠體溶液。再經(jīng)攪拌，過濾，形成均勻納米級(jí)分散體，加入凍干輔料，混勻超聲，凍干保存。通過制劑學(xué)手段，減緩藥物的釋放，延長(zhǎng)苦參素在體內(nèi)的停留時(shí)間，并使藥物趨向并集中于肝臟，提高療效。本發(fā)明制備簡(jiǎn)單，具有緩釋作用，而且可增加藥物在體內(nèi)滯留時(shí)間，具有較好的趨肝作用，療效顯著。文檔編號(hào)A61P1/00GK101264079SQ20081006139公開日2008年9月17日申請(qǐng)日期2008年4月25日優(yōu)先權(quán)日2008年4月25日發(fā)明者放劉,周芝芳,孫潔胤,鄭曉亮申請(qǐng)人:浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院