生物膠原對(duì)抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性改善方法

專(zhuān)利名稱(chēng)：生物膠原對(duì)抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性改善方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明用牛膠原并修飾，對(duì)抗生藥物鹽酸米諾環(huán)素的化學(xué)穩(wěn)定性的改善 方法，適用口腔醫(yī)學(xué)的藥物緩釋系統(tǒng)，屬于藥劑領(lǐng)域。
技術(shù)背景藥物緩釋系統(tǒng)是控制釋放給藥系統(tǒng)(Controled Releases Drug Delivery System)，簡(jiǎn)稱(chēng)CRD。 CRD比傳統(tǒng)劑型有其優(yōu)越性。牙周炎是口腔常見(jiàn)病，發(fā)病率為70-80%。在牙周局部用藥是牙周治療中 重要的一項(xiàng)。目前牙周炎局部有效緩釋劑有多種。合成的聚合物載體材料越 來(lái)越受重視。如半合成高分子，常用的是纖維素衍生物，如甲基纖維素醚。 合成高分子材料，常用的有聚乙烯醇、聚乳酸，還有美國(guó)的FDA。在我國(guó)臨 床上使用的是日制派麗奧鹽酸米諾環(huán)軟膏。但他們的共同特點(diǎn)為不可吸收的 物質(zhì)，在深牙周、冠周袋內(nèi)載體可成異物，經(jīng)緩釋后如不修復(fù)，異物被吸收， 加重再感染，增加治療費(fèi)用和患者的痛苦，如氰基丙烯酸烷基酯P(ACA)，它 可生物降解，但在體內(nèi)反應(yīng)會(huì)生成甲醛，酯解生成水溶液的P(ACA)，產(chǎn)物有 毒性，這一點(diǎn)限制了它的應(yīng)用?？傊壳皫垐?chǎng)及臨床使用的為不可吸收物質(zhì)， 載體僅起到緩釋作用。我們研究的是一種膠原生物載體，它不僅起到緩釋作 用，而且有組織可吸收，對(duì)牙周有修復(fù)功能。發(fā)明內(nèi)容膠原作為一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)，其特性有別于上述合成高分子。這種特性 就在于膠原與人體接觸模式于其他高分子不同。膠原作載體，則接近人體組 織成分，是人細(xì)胞間質(zhì)物質(zhì)。膠原在組織與器官形成過(guò)程中所起到的重要作用，是與許多不同細(xì)胞表達(dá)功能相關(guān)的。研究表明膠原在組織再生過(guò)程中 起到作用，膠原同時(shí)也表現(xiàn)出生物可降解性、弱抗原性和優(yōu)越的生物相容性。本發(fā)明用牛皮膠原作可吸收的、促進(jìn)組織修復(fù)的牙周炎緩釋系統(tǒng)載體。 但膠原的a >^112具有活躍的化學(xué)性質(zhì)，活躍的氨基基團(tuán)就會(huì)與醛類(lèi)化合物發(fā) 生反應(yīng)，生成弱堿，即所謂西夫堿，反應(yīng)產(chǎn)物會(huì)進(jìn)一步生成有色物質(zhì)，該反 應(yīng)式如下所示<formula>formula see original document page 4</formula>而口腔醫(yī)學(xué)常用的抗生素鹽酸米諾環(huán)素含有兩個(gè)醛基如下圖，很容易與 膠原的氨基基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，從而使得藥物變色繼而變性失效，療效降低，治 療效果大打折扣。<formula>formula see original document page 4</formula>本發(fā)明首先將膠原通過(guò)酶法水解制成可溶性膠原；膠原在溶液中與酸酐 進(jìn)行膠原氨基化學(xué)修飾，將膠原的"-NH2〃基蒙蔽，膠原結(jié)構(gòu)由H2N-R-COOH 生成R-OOH成為W相；另外，把鹽酸米諾環(huán)與油混合，藥物外層包有油層 增加其與膠原化學(xué)反應(yīng)難度成為0相；再用增稠劑加入到修飾膠原W相與油 混鹽酸米諾環(huán)0相制成0/W均一溶液，因W相中為R-00H，所以0/W乳 液具有低pH值。本發(fā)明利用膠原氨基化學(xué)修飾，增強(qiáng)了生物膠原對(duì)鹽酸米諾 環(huán)抗生素的化學(xué)穩(wěn)定性，制成0/W系統(tǒng)。膠原載體的鹽酸米諾環(huán)素緩釋劑能 夠在口腔醫(yī)學(xué)中得到應(yīng)用。本發(fā)明改善生物膠原對(duì)鹽酸米諾環(huán)素抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性，分四個(gè)步驟1)可溶性膠原的調(diào)制；2)膠原修飾；3)油相調(diào)制；4) OAV系統(tǒng)調(diào)制。 步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，加入質(zhì)量百分濃度為2 4。/。的浸灰劑Ca(OH)2，以 及10倍于灰皮質(zhì)量的水進(jìn)行浸灰，室溫反應(yīng)24 48h后，充分水洗；再用質(zhì)量百分濃度為4 8。/。的脫灰劑NH4Cl或(NH4)2S04，以及5倍于灰皮 的水進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)3 10h后，充分水洗；破碎；用質(zhì)量百分濃度為1 5。%。的胃蛋白酶或胰蛋白酶之一或者兩者混合 進(jìn)行酶水解；離心，轉(zhuǎn)速為10000 20000rpm;用NaOH調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì) 量百分濃度為4。/。的NaCl進(jìn)行鹽析，室溫靜置24h以上；二次離心，轉(zhuǎn)速為 10000 20000rpm;用0.5mol/L的醋酸，進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原；步驟2)膠原修飾將可溶性膠原溶液用NaOH或NaHC03調(diào)至pH7 9，加入丁二酸酐使 pH=3~4，室溫反應(yīng)18h以上，將膠原的a-NH2蒙蔽，修飾成為羧基化合物， 反應(yīng)式如下<formula>formula see original document page 5</formula>其中P代表膠原蛋白冷凍干燥，l(TC以下保存； 步驟3)油相調(diào)制將鹽酸米諾環(huán)抗生素與三乙酸甘油酯以質(zhì)量比1:5 1:10，在室溫下混合， 調(diào)制成油相；步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制將上述步驟2)冷凍干燥物采用0.5mol/L的醋酸或鹽酸進(jìn)行酸溶解，成 為水相，將調(diào)制油相分散到水相中，再用增稠劑丙三醇配制成相對(duì)質(zhì)量比^^^^=5%的O/W系統(tǒng)。 丙二醇+水相+油相制備成以膠原為載體的鹽酸米諾環(huán)素緩釋劑?；瘜W(xué)穩(wěn)定性改善說(shuō)明對(duì)膠原氨基進(jìn)行修飾，膠原分子上側(cè)鏈氨基轉(zhuǎn)變 為酰氨基，改變氨基活性，改善膠原的化學(xué)穩(wěn)定性。將膠原分子上側(cè)鏈氨基 轉(zhuǎn)變?yōu)轷０被瑫r(shí)衍生出羧基，增加了側(cè)鏈的羧基基團(tuán)，使系統(tǒng)的pH值降 低，創(chuàng)造了鹽酸米諾環(huán)素的穩(wěn)定環(huán)境；膠原為水相，鹽酸米諾環(huán)素為油相， 膠原與藥相互蒙蔽，又使系統(tǒng)增加了化學(xué)穩(wěn)定性。以上提高生物膠原對(duì)鹽酸 米諾環(huán)素抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性，適用口腔醫(yī)學(xué)的藥物緩釋劑系統(tǒng)。本發(fā)明的效益膠原材料在藥物緩釋載體有廣闊的應(yīng)用空間。就其良好 的生物相容性和生物降解性來(lái)說(shuō)，是金屬、陶瓷和其他高分子材料不可比擬 和代替的一種優(yōu)良天然高分子材料。近年來(lái)，蛋白質(zhì)修飾技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用 于改善膠原蛋白生物材料的機(jī)能和生物穩(wěn)定性。對(duì)膠原進(jìn)行定量可控的化學(xué) 修飾，研制出新一代生物醫(yī)用材料，可以賦予膠原新的特性。在提高生物醫(yī) 用材料科技含量的基礎(chǔ)上，擴(kuò)大了我國(guó)醫(yī)用生物材料市場(chǎng)份額，為我國(guó)人民 的生活健康質(zhì)量提供保證?？梢哉f(shuō)，本發(fā)明的原料由于使用制革廢棄物，不僅緩解了制革產(chǎn)業(yè)的環(huán)境壓力，實(shí)現(xiàn)了生物資源的再生循環(huán)利用，具有重大 的經(jīng)濟(jì)及社會(huì)意義，而且為實(shí)現(xiàn)生物材料的更廣泛應(yīng)用開(kāi)辟了新的道路。


圖1用蛋白酶去除非螺旋區(qū) 圖2膠原修飾前后的紅外線(xiàn)圖譜 圖3膠原修飾前后的等電點(diǎn)具體實(shí)施方式
鹽酸米諾環(huán)抗生素在低pH范圍里較穩(wěn)定.但其分子結(jié)構(gòu)含有"=0〃化學(xué) 鍵易與膠原中的"-NH/基發(fā)生"西夫堿〃 化學(xué)反應(yīng)生成物為黑色，失去藥 效。本發(fā)明膠原在溶液中與酸酐進(jìn)行膠原氨基化學(xué)修飾，將膠原的、、-NH/ 基蒙蔽，膠原結(jié)構(gòu)由H2N-R-COOH生成R-OOH成為W相；另外，把鹽酸米 諾環(huán)與油混合，藥物外層包有油層增加其與膠原化學(xué)反應(yīng)難度成為O相；再 用增稠劑加入到修飾膠原W相與油混鹽酸米諾環(huán)O相制成0/W均一溶液， 因W相中為R-00H，所以O(shè)/W乳液具有低pH值。本發(fā)明利用膠原氨基化 學(xué)修飾，增強(qiáng)了生物膠原對(duì)鹽酸米諾環(huán)抗生素的化學(xué)穩(wěn)定性，制成0/W系統(tǒng)。例采用NH4C1 -胃蛋白酶-NaHC03調(diào)制的0/W系統(tǒng) 步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為3%的浸灰劑 Ca(OH)2，水100ml，浸灰，在室溫反應(yīng)24h后，充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度 為6。/。的脫灰劑NH4Cl，水50ml，進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)6h;充分水洗；絞碎； 用質(zhì)量百分濃度3^的胃蛋白酶水解，4"72h;離心，轉(zhuǎn)速為15000rpm;用NaOH 調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì)量百分濃度為4。/。的NaCl鹽析，靜置24h; 二次離心，轉(zhuǎn) 速為15000rpm;用0.5mol/L的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原，10g 灰皮得到0.9g膠原。酶水解提取膠原蛋白的原理如圖l所示(a)為前膠原蛋白的原始存在狀 態(tài)，中間是規(guī)則的螺旋區(qū)域，兩端是非螺旋區(qū)，正是由于兩端非螺旋區(qū)域的 存在導(dǎo)致膠原蛋白不可溶，所以需要選擇合適的方法除去非螺旋區(qū)以使膠原能夠溶解。本發(fā)明選用胃蛋白酶作催化劑，該酶能夠有選擇性地切斷非螺旋 區(qū)域的N-端和C-端伸展肽，如圖(b)，規(guī)則螺旋區(qū)的膠原得以成可溶性膠原。 步驟2)膠原修飾將可溶性膠原溶液用NaHC03調(diào)至pH8，加入丁二酸酐，使溶液pH-3.5， 室溫反應(yīng)24h，溶液冷凍干燥，l(TC以下保存。由圖2可以看出未修飾膠原 中酰胺I帶位于1641cm—1，為C二O鍵伸縮振動(dòng)峰，酰胺II帶位于1539cm"， 為N-H彎曲和C-N伸縮振動(dòng)峰的混頻峰，酰胺II—帶位于1235cm—1 ，為C-N伸 縮振動(dòng)峰。這些膠原蛋白的FT-IR特征吸收峰證明了膠原的結(jié)構(gòu)。修飾后膠 原位于3430 cm—處N-H伸縮振動(dòng)峰向短波方向發(fā)生位移，這主要與膠原中 NH及H鍵有關(guān)，在一定程度上破壞了螺旋之間的氫鍵，-NH2被蒙蔽，氨基 轉(zhuǎn)變?yōu)轷０坊瑫r(shí)衍生出羧基，-COOH數(shù)量增加，系統(tǒng)的pH值向酸性方 向移動(dòng)，故等電點(diǎn)由pH5.5降低至pH4.5，如圖3。膠原中的氨基得到了修飾， 修飾率達(dá)到85%。步驟3)油相調(diào)制將鹽酸米諾環(huán)抗生素與三乙酸甘油酯以1:5的質(zhì)量比室溫混合，調(diào)制成油相。步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制上述2)修飾膠原凍干物用0.5mol/L的醋酸充分溶解，制成2%的膠原溶 液，將調(diào)制油相分散到水相，再用添加劑丙三醇配制成相對(duì)質(zhì)量比^i^/L韭=5%的Q/W系統(tǒng)。制成以膠原為載體的鹽酸米諾環(huán)素緩釋 丙二醇+水相+油相劑。例2:采用NH4C1 -胃蛋白酶-NaOH調(diào)制的0/W系統(tǒng) 步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為"/。的浸灰劑 Ca(OH)2，水100ml，浸灰，在室溫反應(yīng)48h后，充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度 為4%的脫灰劑,4(:1，水50ml，進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)10h;充分水洗；絞碎； 用質(zhì)量百分濃度2^的胃蛋白酶水解，4。C72h;離心，轉(zhuǎn)速為15000rpm;用NaOH 調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì)量百分濃度為4。/。的NaCl進(jìn)行鹽析，靜置48h; 二次離心， 轉(zhuǎn)速為15000rpm;用0,5mol/L的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原。步驟2)膠原修飾將可溶性膠原溶液用NaOH調(diào)至pH7，加入丁二酸酐，使溶液pH=4,室 溫反應(yīng)18h，溶液冷凍干燥，l(TC以下保存。修飾前后膠原的紅外圖譜與例1 中圖2的紅外圖譜大致相似。且修飾后膠原的等電點(diǎn)由原來(lái)的pH5.3降低至 pH4.4。說(shuō)明膠原中的氨基得到了修飾。在本例中用NaOH替代例1弱堿性 NaHC03目的是為了提高系統(tǒng)的溶液濃度，但是帶來(lái)了負(fù)面影響，修飾率為 66%。這是由于NaOH的堿性較強(qiáng)，破壞了膠原的一級(jí)結(jié)構(gòu)。步驟3)油相調(diào)制及步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制同例1步驟3) 、 4)。例3:采用(NH4)2S04-胃蛋白酶-NaHC03調(diào)制的0/W系統(tǒng) 步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為4%的浸灰劑 Ca(OH)2，水100ml，浸灰，室溫反應(yīng)24h后，充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度4% 的脫灰劑(NH4)2S04，水50ml，進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)5h后，充分水洗；絞碎； 用質(zhì)量百分濃度5^的胃蛋白酶水解，4°C36h;離心，轉(zhuǎn)速為20000rpm;用NaOH 調(diào)節(jié)pH值至7，釆用質(zhì)量百分濃度為4。/。的NaCl鹽析，靜置36h; 二次離心，轉(zhuǎn) 速為20000rpm;用0.5mol/L的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原。相對(duì) 例l，得到相同的可溶性膠原，制備工藝縮短了25h，工業(yè)成本下降，但是排 除水中增加了SO/.離子，增加了廢水處理的難度及費(fèi)用。步驟2)膠原修飾同例1步驟2)。紅外檢測(cè)結(jié)果表明修飾前后膠原的紅外圖譜與例1中 圖2的紅外圖譜大致相似。且修飾后膠原的等電點(diǎn)由原來(lái)的pH5.4降低至 pH4.2。說(shuō)明膠原中的氨基得到了修飾，修飾率為83%。步驟3)油相調(diào)制.-將鹽酸米諾環(huán)抗生素與三乙酸甘油酯以1:10的質(zhì)量比室溫混合，調(diào)制成 油相。步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制 同例1步驟4)。例4:采用(NH4)2S04-胃蛋白酶-NaOH調(diào)制的0/W系統(tǒng)步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為3%的浸灰劑Ca(OH)2，水100ml，浸灰，室溫反應(yīng)48h后，充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度6% 的脫灰劑(NH4)2S04，水50ml，進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)3h后；充分水洗；絞碎； 用質(zhì)量百分濃度為1%。的胃蛋白酶水解，4"C72h;離心，轉(zhuǎn)速為10000rpm;用 NaOH調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì)量百分比4。/。的NaCl進(jìn)行鹽析，靜置12h; 二次離 心，轉(zhuǎn)速為10000rpm;用0.5mol/L的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原。 步驟2)膠原修飾將可溶性膠原溶液用NaOH調(diào)至pH9，加入丁二酸酐，使溶液pEN3，室 溫反應(yīng)20h，溶液冷凍干燥，l(TC以下保存。修飾前后膠原的紅外圖譜與例1 中圖2的紅外圖譜大致相似。且修飾后膠原的等電點(diǎn)由原來(lái)的pH5.6降低至 pH4.8。說(shuō)明膠原中的氨基得到了修飾，修飾率達(dá)到63%。步驟3)油相調(diào)制及步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制同例1步驟3) 、 4)。例5:采用NH4C1 -胰蛋白酶-NaHC03調(diào)制的0/W系統(tǒng) 步驟l)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為4%的浸灰劑 Ca(OH)2，水100ml，浸灰，室溫反應(yīng)48h后；充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度為 8e/。的脫灰劑NH4Cl，水50ml，脫灰，室溫反應(yīng)6h后，充分水洗；絞碎；用質(zhì) 量百分濃度為3%。的胰蛋白酶水解，4°C96h;離心，轉(zhuǎn)速為15000rpm;用NaOH 調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì)量百分比4。/。的NaCl鹽析，靜置24h; 二次離心，轉(zhuǎn)速為 15000rpm;用0.5mol/L的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原。各種酶具有專(zhuān)一性，胃蛋白酶對(duì)苯丙氨酸、亮氨酸和谷氨酸作用力較強(qiáng)， 消化力為14.06，而胰蛋白酶對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸作用力較強(qiáng)，消化力為11.32， 對(duì)于本實(shí)驗(yàn)胰蛋白酶和胃蛋白酶在膠原酶解的得率上區(qū)別不大。步驟2)膠原修飾同例1步驟2)。紅外檢測(cè)結(jié)果表明修飾前后膠原的紅外圖譜與例1中 圖2的紅外圖譜大致相似。且修飾后膠原的等電點(diǎn)由原來(lái)的pH5.5降低至 pH4.3。說(shuō)明膠原中的氨基得到了修飾，修飾率為84%。步驟3)油相調(diào)制以及步驟4) OAV系統(tǒng)調(diào)制 同例1步驟3) 、 4)。例6:采用NH4C1 -胃蛋白酶順蛋白酶-NaHC03調(diào)制的0/W系統(tǒng)步驟1)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，稱(chēng)取10g，破碎。加入質(zhì)量百分濃度為3%的浸灰劑 Ca(OH)2，水100ml，浸灰，室溫反應(yīng)24h后，充分水洗，再用質(zhì)量百分濃度為 6。/。的脫灰劑NH4C1，水50ml，進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)6h后，充分水洗；絞碎；用質(zhì)量百分濃度為3%。的胃蛋白酶和胰蛋白酶水解，二者質(zhì)量比為l: l的混合酶，4'C72h;離心，轉(zhuǎn)速為15000rpm;用NaOH調(diào)節(jié)pH值至7，采月j質(zhì)量百分 比4。/。的NaCl進(jìn)行鹽析，靜置24h; 二次離心，轉(zhuǎn)速為15000rpm;用0.5mol/L 的醋酸200ml進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原。膠原的產(chǎn)率相對(duì)例l提高將近八 個(gè)百分點(diǎn)，10g灰皮得到1.5g膠原，比單獨(dú)一種酶提取膠原的優(yōu)越性大。 步驟2)膠原修飾同例1步驟2)。紅外檢測(cè)結(jié)果表明修飾前后膠原的紅外圖譜與例1中 圖2的紅外圖譜大致相似。且修飾后膠原的等電點(diǎn)由原來(lái)的pH5.6降低至 pH4.2。說(shuō)明膠原中的氨基得到了修飾，修飾率為87%。步驟3)油相調(diào)制以及步驟4) 0/W系統(tǒng)調(diào)制同例1步驟3) 、 4)。
權(quán)利要求
1、一種生物膠原對(duì)抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性的改善方法，其特征在于，包括以下步驟步驟1)可溶性膠原的調(diào)制將牛二層皮制成灰皮，加入質(zhì)量百分濃度為2～4％的浸灰劑Ca(OH)2，以及10倍于灰皮質(zhì)量的水進(jìn)行浸灰，室溫反應(yīng)24～48h后，充分水洗；再用質(zhì)量百分濃度為4～8％的脫灰劑NH4Cl或(NH4)2SO4，以及5倍于灰皮的水進(jìn)行脫灰，室溫反應(yīng)3～10h后，充分水洗；破碎；用質(zhì)量百分濃度為1～5‰的胃蛋白酶或胰蛋白酶之一或者兩者混合進(jìn)行酶水解；離心，轉(zhuǎn)速為10000～20000rpm；用NaOH調(diào)節(jié)pH值至7，采用質(zhì)量百分濃度為4％的NaCl進(jìn)行鹽析，室溫靜置24h以上；二次離心，轉(zhuǎn)速為10000～20000rpm；用0.5mol/L的醋酸，進(jìn)行酸溶解，得到可溶性膠原；步驟2)膠原修飾將可溶性膠原溶液用NaOH或NaHCO3調(diào)至pH7～9，加入丁二酸酐使pH＝3～4，室溫反應(yīng)18h以上，將膠原的α-NH2蒙蔽，修飾成為羧基化合物，反應(yīng)式如下其中P代表膠原蛋白冷凍干燥，10℃以下保存；步驟3)油相調(diào)制將鹽酸米諾環(huán)抗生素與三乙酸甘油酯以質(zhì)量比1∶5～1∶10，在室溫下混合，調(diào)制成油相；步驟4)O/W系統(tǒng)調(diào)制將上述步驟2)冷凍干燥物采用0.5mol/L的醋酸或鹽酸進(jìn)行酸溶解，成為水相，將調(diào)制油相分散到水相中，再用增稠劑丙三醇配制成相對(duì)質(zhì)量比的O/W系統(tǒng)。
全文摘要
生物膠原對(duì)抗生藥物的化學(xué)穩(wěn)定性改善方法屬藥劑領(lǐng)域。鹽酸米諾環(huán)抗生素在低pH較穩(wěn)定，但結(jié)構(gòu)含有“＝O”化學(xué)鍵易與“-NH₂”基發(fā)生“西夫堿”反應(yīng)，而膠原具有“-NH₂”、“-COOH”基的兩性蛋白質(zhì)做其載體易發(fā)生如上反應(yīng)。本發(fā)明首先將膠原通過(guò)低溫酶法水解制成可溶性膠原；膠原在溶液中與酸酐進(jìn)行膠原氨基化學(xué)修飾，將膠原的“-NH₂”基蒙蔽，膠原結(jié)構(gòu)由H₂N-R-COOH生成R-OOH成為W相；另把鹽酸米諾環(huán)與油混合，藥物外層包有油層增加其與膠原化學(xué)反應(yīng)難度成為O相；再用增稠劑加入到修飾膠原W相與油混鹽酸米諾環(huán)O相制成O/W均一溶液，O/W乳液具有低pH值。本發(fā)明利用膠原氨基化學(xué)修飾，增強(qiáng)了生物膠原對(duì)鹽酸米諾環(huán)抗生素的化學(xué)穩(wěn)定性，有望應(yīng)用在生物醫(yī)用材料中。
文檔編號(hào)A61K31/65GK101239188SQ200810057378
公開(kāi)日2008年8月13日 申請(qǐng)日期2008年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月1日
發(fā)明者劉晶冰, 張文熊, 芳 武, 長(zhǎng)南康正, 馬明霞 申請(qǐng)人:北京工業(yè)大學(xué)