專利名稱：丹酚酸b結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用的制作方法
丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)合成及應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及新化合物——丹酚 酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用。背景技術(shù)：
丹參始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中常用藥之一， 具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩的功效，具有悠久的臨床應(yīng)用史。丹參 具有擴(kuò)張血管、降血脂及抗動脈粥樣硬化、抑制血小板凝聚及抗血栓形成、 保護(hù)心肌、增加冠脈流量、抗菌消炎、抗腫瘤等作用，有著廣泛的藥用前景。 丹酚酸B為丹參中有效成分之一。丹酚酸B3-Benzofurancarboxylic acid， 4-〔(1E)-3-[(1R)-卜caxboxy- 2-(3， 4-dihydroxyphenyl) ethoxy] --3-oxo-l-propenyl〕 _2_ (3，4- dihydroxy -phenyl)-2，3-dihydro-7-hydroxy-, 3-[(IR)-I- caxboxy -2_ (3， 4 -dihy- droxyphenyl) ethyl] ester， (2S，3S)-，C36H3Q016，其分子結(jié)構(gòu)式為丹酚酸B是目前研究較多的丹酚酸之一，其對心、腦、肝等器官均有重要藥理作用。丹酚酸B具有很強(qiáng)的抗氧化作用，是目前己知的抗氧化作用最強(qiáng)的天然產(chǎn)物之一。動物實驗研究表明-
(1) 丹酚酸B能減輕缺血再灌注損傷模型動物的心肌缺血程度，減小心肌梗死范圍，減少LDH、 CPK從胞體的溢出，降低缺血心肌組織中MDA的含量，提高S0D的活性，對抗氧自由基對心肌細(xì)胞的損害作用，保護(hù)心肌細(xì)胞，對心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有延遲保護(hù)作用。
(2) 丹酚酸B對大鼠和小鼠腦缺血和缺血再灌注引起的腦損傷具有保護(hù)作用，可縮小缺血區(qū)面積，減少腦組織中MDA的含量，緩解由于腦缺血引起的行為學(xué)障礙，對腦缺血引起的記憶功能障礙有顯著的改善作用。
(3) 丹酚酸B還具有抗動脈粥樣硬化、抗肝纖維化、抗衰老、抗腫瘤的作用。
但是，動物實驗研究也表明在大鼠靜脈注射丹酚酸B后，其在體內(nèi)分布很快，腎臟中的藥物濃度最高，很難通過血腦屏障，消除快，半衰期短。因此，丹酚酸B的藥效和生物利用度就受到影響。
為了提高丹酚酸B的藥效和生物利用度，華東理工大學(xué)通過對丹酚酸B結(jié)構(gòu)上的修飾，提出新的化合物——丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物，并已就丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物及其制備方法向中國知識產(chǎn)權(quán)局申請了專利，專利申請?zhí)枮?00710044685. X, 200710044683. 0。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用；
實際上，本發(fā)明涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗心肌缺血藥物中的應(yīng)
用；
涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備保護(hù)心肌缺血再灌注心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞藥物中的應(yīng)用；
涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腦缺血藥物中的應(yīng)用；涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗動脈粥樣硬化藥物中的應(yīng)用； 涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗血栓藥物中的應(yīng)用 涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗衰老藥物中的應(yīng)用 涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用 還涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗肝損傷和肝纖維化藥物中的應(yīng)用。 為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為:
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其中，R為烷基、烯基、芳基、環(huán)垸基、雙環(huán)垸基等，特別是
<formula>formula see original document page 5</formula><formula>formula see original document page 6</formula>可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗心肌缺血藥物中的應(yīng)用。 可選的、所述的丹酚酸.B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備保護(hù)心肌缺血再灌注心臟
微血管內(nèi)皮細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。
可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腦缺血藥物中的應(yīng)用。 可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗動脈粥樣硬化藥物中的應(yīng)用。
可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗血栓藥物中的應(yīng)用。 可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗衰老藥物中的應(yīng)用。 可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用?？蛇x的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗肝損傷和肝纖維化藥物
中的應(yīng)用。
可選的、所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用，劑型包括片劑、 膠囊、粉針劑、輸液和滴丸等劑型。
所述丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物的一種合成方法為在有機(jī)溶劑中，溫度0
IO(TC，壓力O. 1 30MPa，反應(yīng)時間1 500小時，原料丹酚酸B與催化劑的 質(zhì)量比為1:0.01 1:100，在反應(yīng)器皿中持續(xù)的通入氫氣，氫氣的濃度為l 100%，所述有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、乙酸乙酯、四氫呋 喃、丙酮，所述的催化劑選自鈀炭(Pd/C)催化劑、鈀氧化鋁(Pd/Al203) 催化劑、釕碳催化劑、氯化鈀催化劑和Pd/Ti02加氫催化劑。
所述丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物的另一種合成方法為在有機(jī)溶劑中，-5°C 至回流溫度下，原料丹酚酸B與一元醇反應(yīng)O. 1 50小時，原料丹酚酸B與 一元醇的摩爾比為1: 1 90，所述的有機(jī)溶劑選自乙醇、正丙醇、異丙醇、 乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮。
本發(fā)明的積極效果是
(1 )對已知的新化合物——丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物發(fā)掘了新的醫(yī)療用途， 開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。
(2) 明確了丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥上的應(yīng)用范圍由丹酚酸B結(jié) 構(gòu)修飾產(chǎn)物制得的藥物可顯著抑制血清中CK、 LDH的升高，顯著降低MDA水 平，提高S0D活性，具有抗氧化、清除氧自由基作用，顯著改善心肌缺血的 狀況，使心肌梗塞的病情顯著減輕，可顯著延長血栓形成的時間。
(3) 使制備比丹酚酸B的藥理活性和生物利用度更高的新藥成為可能。
具體實施方式
以下通過實施例對本發(fā)明丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用作進(jìn)一 步的說明，提供兩個實施例，但本發(fā)明不限于以下的實施例。
實施例1 雙氫丹酚酸B對冠狀動脈結(jié)扎所致心肌缺血的保護(hù)作用Wistar大鼠50只，雌雄各半，體重220 250g，隨機(jī)分為三組第一組 為缺血模型組，第二組為丹酚酸B組，第三組為雙氫丹酚酸B組，給藥劑量 均為靜脈注射50mg/kg;測定手術(shù)前以及結(jié)扎30分鐘后的II導(dǎo)心電圖，觀察 心電圖ST段及T波變化。
除缺血模型組外，另兩組于冠狀動脈結(jié)扎30分鐘后按劑量給藥一次，4 小時后再給藥一次，24小時后腹靜脈取血，測血清LDH、 CK、 MDA、 SOD;同 時摘取大鼠心臟，用生理鹽水洗盡殘血，用濾紙吸干，稱重，冷凍后將左心 室均勻橫切成5份，置于1%TTC液(氯化三苯基四氮唑)中染色15分鐘(溫 度37°C±0.5°C);取出后切下未被染色的心肌梗死區(qū)，用濾紙吸干，稱重， 除以左心室或全心重得到梗塞范圍占左心室和全心重的百分率。
實驗結(jié)果-
各組心電圖ST段抬高明顯，T波高尖明顯，說明心肌缺血造模成功。
表l心臟梗塞范圍占左心室和全心重的百分率
缺血模型組丹酚酸B組雙氫丹酚酸B組
(n=9)(n=9)(n=10)
梗塞區(qū)重/左心室重(％)36. 08±9. 3822. 56±8. 41"20. 06±5. 61"
梗塞區(qū)重/全心重(％)27. 72±7. 7516. 97±6. 57"14. 87±4. 14"
注與模型組比較，▲ <().01
表2大鼠冠狀動脈結(jié)扎后血清酶學(xué)指標(biāo)
血清酶缺血模型組(n二9)丹酚酸B組 (n=9)雙氫丹酚酸B組 (n二10)
LDH (U/L)5638. 85±862. 984609. 38 ±601. 50"4477. 21 ±568. 37"
CK (U/ml)1.92±0. 621. 32±0. 43A0. 92±0. 34"*
SOD (U/ml)165. 75±17. 44185. 40±8. 96"202. 05 ±15. 36" ★
MDA (腦l/ml)4. 65±1. 023. 30±0. 73"3. 14±0. 80"
注與模型組比較， <0.05， ▲ <().01，與丹酚酸B組比較， <0.05。 結(jié)論
1、 雙氫丹酚酸B可顯著改善大鼠冠狀動脈結(jié)扎所致心肌缺血，使梗塞區(qū) 范圍顯著減小(p<0.01)。
2、 雙氫丹酚酸B可顯著抑制血清CK、 LDH的升高(p<0.01)，提示其對 心肌有保護(hù)作用。
3、 雙氫丹酚酸B可顯著降低MDA水平(P<0.01)，提高S0D活性(p< 0. 01),提示雙氫丹酚酸B對因缺血引起的心肌組織損傷的保護(hù)作用是與其抗 氧化、清除氧自由基作用有關(guān)。
實施例2雙氫丹酚酸B對大鼠血栓形成的影響
Wistar大鼠30只，雌雄各半，體重180 220g，隨機(jī)分為三組第一組 為空白對照組，第二組為丹酚酸B組，第三組為雙氫丹酚酸B組，給藥的劑 量均為靜脈注射50mg/kg;第一組靜脈注射同體積的蒸餾水，另兩組給藥3.5 小時后再給藥一次，共給藥兩次；于末次給藥2小時后麻醉，大鼠仰臥位固 定，分離頸總動脈，置于BT87-3型實驗性體內(nèi)血栓形成測定儀的刺激電極和 溫度探頭鉤上，溫度探頭測得遠(yuǎn)端動脈血管溫度驟降時報警，計時器記錄從 刺激開始到動脈血管溫度驟降所需的時間(s)，作為動脈血栓形成的時間。
實驗結(jié)果
表3對大鼠體內(nèi)血栓形成的影響'
空白對照組丹酚酸B組雙氫丹酚酸B組
(n=10)(n二10)(n=10)
血栓形成時間(s)774. 50±65. 19905. 80±148. 73A1040. 30±140. 30"*
時間延長率(％)_16.9534. 32
注與空白對照組比較， <0.05， "p<0,01，
與丹酚酸B組比較，*p<0.05。
9結(jié)論
雙氫丹酚酸B可顯著延長大鼠體內(nèi)血栓形成的時間(p<0.01)。
實施例3丹酚酸B乙酯對冠狀動脈結(jié)扎所致心肌缺血的保護(hù)作用 Wistar大鼠，雌雄各半，體重180 240g，隨機(jī)分為兩組第一組為缺 血模型組，第二組為丹酚酸B乙酯組，給藥劑量為灌胃100mg/kg;測定手術(shù)
前以及結(jié)扎30分鐘后的n導(dǎo)心電圖，觀察心電圖ST段及T波變化。
于冠狀動脈結(jié)扎30分鐘后按劑量給藥一次，4小時后再給藥一次，24小 時后摘取大鼠心臟，用生理鹽水洗盡殘血，用濾紙吸干，稱重，冷凍后將左 心室均勻橫切成5份，置于1%TTC液(氯化三苯基四氮唑)中染色15分鐘(溫 度37°C±0.5°C);取出后切下未被染色的心肌梗死區(qū)，用濾紙吸干，稱重， 除以左心室或全心重得到梗塞范圍占左心室和全心重的百分率。
實驗結(jié)果
各組心電圖ST段抬高明顯，T波高尖明顯，說明心肌缺血造模成功。
表4心臟梗塞范圍占左心室和全心重的百分率
梗塞區(qū)重/左心室重(％)梗塞區(qū)重/全心重(％)
缺血模型組(n=3)38. 68±7. 2028. 84±4. 92
丹酚酸B乙酯組(n二3)26. 87±10. 3919. 66±8. 69
結(jié)論:
丹酚酸B乙酯可顯著改善大鼠冠狀動脈結(jié)扎所致心肌缺血，使梗塞區(qū)范 圍顯著減小。
10
權(quán)利要求
1、丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗心肌缺血藥物中的應(yīng)用。
2、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備保護(hù)心肌缺血再灌注心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。
3、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腦缺血藥物中的應(yīng)用。
4、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗動脈粥樣硬化藥物中的應(yīng)用。
5、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗血栓藥物中的應(yīng)用。
6、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗衰老藥物中的應(yīng)用。
7、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
8、 丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制備抗肝損傷和肝纖維化藥物中的應(yīng)用。
9、 根據(jù)權(quán)利要求1至8所述的丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用， 其特征在于，丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物的劑型包括片劑、膠囊、粉針劑、輸液 和滴丸等劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中新用途。丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物能顯著抑制血清中CK、LDH的升高，可顯著降低MDA水平，提高SOD活性，具有抗氧化、清除氧自由基作用，可改善心肌缺血的狀況，使心肌梗塞的病情明顯減輕；可顯著延長血栓形成的時間；能在制備抗心肌缺血藥物、保護(hù)心肌缺血再灌注心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞藥物、抗腦缺血藥物、抗動脈粥樣硬化藥物、抗血栓藥物以及在制備抗衰老藥物、抗腫瘤藥物、抗肝損傷和肝纖維化藥物中得到應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點是明確了丹酚酸B結(jié)構(gòu)修飾產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用范圍，使制備比丹酚酸B的藥理活性和生物利用度更高的新藥成為可能。
文檔編號A61K31/343GK101627988SQ200810040769
公開日2010年1月20日 申請日期2008年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月18日
發(fā)明者俊 侯, 倪力軍, 張立國, 王曉影, 程曉亮, 郭美蘭 申請人:華東理工大學(xué)