治療實體腫瘤的卡莫司汀緩釋植入劑的制作方法

專利名稱：：治療實體腫瘤的卡莫司汀緩釋植入劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療實體腫瘤的卡莫司汀緩釋植入劑，屬于藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
。(二)
背景技術(shù)：
：關(guān)于癌癥的研究雖已取得了較大進展，但其死亡率仍居各種常見死因的前列。在我國每年約有160萬人患癌癥，近130萬人死于癌癥，占總死亡人數(shù)的五分之一。癌癥發(fā)病率逐年上升且呈年輕化趨勢，有資料顯示，在不到20年的時間里，我國癌癥發(fā)病率上升了69%，死亡率增長了29.4%。據(jù)世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計，到2020年全球癌癥發(fā)病率將增加百分之五十，發(fā)病人數(shù)增到一千五百萬。因此，探討一種有效的治療癌癥的方法或藥物已經(jīng)成為目前研究的熱點。多年來，卡莫司汀一直被作為作為治療腦瘤的首選藥物。單獨用于治療其它腫瘤的效果不清楚。雖然與其它抗癌藥聯(lián)合對某些腫瘤具有一定的作用，但通過常規(guī)途徑給藥所引起的全身毒副作用限制了其臨床應用。為改善其全身毒性和對多種腫瘤的治療效果，局部緩慢釋放表現(xiàn)出極大的優(yōu)越性，見中國專利(ZL200410035923.7;ZL200410035926.0;ZL200410035924.1;ZL200410035927.5;ZL200510042434.9;ZL200510042433.4;ZL2005100424800)。然而，現(xiàn)有的緩釋劑以PLA及PLGA等聚酯(polyesters)類高分子為緩釋載體，其釋藥周期較短，對于進入休眠期的腫瘤細胞作用較差，因此對殘存腫瘤細胞的作用較差，易突釋，因而毒性反應較重。(三)
發(fā)明內(nèi)容基于對現(xiàn)有技術(shù)的考査，本發(fā)明對現(xiàn)有輔料和可能影響藥物釋放的緩釋調(diào)節(jié)劑進行了大量比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)卡莫司汀在聚酯(polyesters)類高分子中，特別是當PLA及PLGA等聚酯與緩釋調(diào)節(jié)劑存在的條件下，具有較穩(wěn)定的釋放行為，對宮頸癌、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌及直腸癌等實體腫瘤具有較為明顯的作用效果。進一步研究發(fā)現(xiàn)卡莫司汀局部緩釋對甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實體腫瘤也具有很好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用無論是體內(nèi)外釋藥行為還是全身毒性或治療效果，特定劑量的緩釋調(diào)節(jié)劑的添加均表現(xiàn)出意想不到的效果。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種緩釋植入劑，用于治療多種實體腫瘤。本發(fā)明治療實體腫瘤的緩釋植入劑，包括抗癌有效成分和緩釋輔料，其中抗癌有效成分為卡莫司汀(Carmustine)。該緩釋植入劑由下列之一的成份組成，均未重量百分比(1)卡莫司汀1%-40%(2)緩釋輔料45%-98.9%(3)釋放調(diào)節(jié)劑0.1%-15%總量為100%。其中，卡莫司汀可為其各種鹽，以其鹽酸鹽為優(yōu)選；卡莫司汀在緩釋植入劑中的重量百分比為1%-40%，以2%-20%為優(yōu)選，以5%-15%為最有選緩釋輔料選自聚乳酸或乳酸和乙醇酸的共聚物，其中，聚乳酸的分子量峰值為500-5000、5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000，以5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000為優(yōu)選，以10000-25000、25000-35000或30000-50000最有選；聚乳醇和聚乙醇酸共聚物的的分子量峰值為500-5000、5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000，以5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000為優(yōu)選，以10000-25000、25000-35000或30000-50000最有選；其中，聚乳醇和聚乙醇酸的重量百分比為90:10、70-80:20-30、60-40:40-60、75:25、25:75或50:50，以90:10為優(yōu)選，以75:25和50:50為最有選。釋放調(diào)節(jié)劑選自甘露醇、山梨醇、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合；以甘露醇、山梨醇、甲殼素、鈉鹽、軟骨素為優(yōu)選，以甘露醇、山梨醇為最優(yōu)選；釋放調(diào)節(jié)劑在緩釋植入劑中的重量百分比為0.1%-15%，以0.5%-10%為優(yōu)選，以1%-8%為最有選。緩釋植入劑的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進展情況及治療反應。但其原則是在能夠降低腫瘤細胞的修復能力，增加化療作用效果的同時并不明顯增加藥物的毒性反應。有效劑量為O.01-300毫克/患者，以l-100毫克/患者為理想，以2-50毫克/患者為最理想。本發(fā)明可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定?？芍瞥筛鞣N劑型，如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及植入緩釋劑等，其中植入劑主要為緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、微球、納米球、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及模樣；可經(jīng)各種途徑給藥，如動脈、皮下、肌肉、皮內(nèi)、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，如腫瘤所在部位、是否手術(shù)或轉(zhuǎn)移、腫瘤體積大小、腫瘤類別、病人年齡、身體狀況、生育狀況及要求等。為于腫瘤所在部位獲得有效藥物濃度，可選擇性地動脈灌注，腔內(nèi)灌注(intracavitary),腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管內(nèi)(intraspinal)給藥，也可臟器內(nèi)放置，如腸腔內(nèi)、膀胱內(nèi)、宮腔內(nèi)、陰道內(nèi)、胃內(nèi)及食道內(nèi)等。在各種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內(nèi)、瘤周注射為主，以瘤內(nèi)、瘤周或瘤腔放置緩慢釋放的形式為優(yōu)選，如可選用可種緩釋泵、緩釋膠囊、緩釋劑、植入劑及緩釋植入劑。可用任意的方法制備。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法:如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌緩釋植入劑也可包裝脂質(zhì)體中。緩釋植入劑的有效成分可均勻地包裝于整個緩釋輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散或經(jīng)多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。緩釋植入劑中各組份及其在緩釋植入劑中的重量百分含量優(yōu)選下列之一(1)1%-5%的卡莫司汀、90%-98。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(2)5%-10%的卡莫司汀、80。/。-93。/。的PLGA、2%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(3)10%-15%的卡莫司汀、75%-89。/。的PLGA、1%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(4)15%-20%的卡莫司汀、84%-85。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(5)20%-35%的卡莫司汀、60%-79。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚；(6)1%-5%的卡莫司汀、90。/。-98。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(7)5%-10%的卡莫司汀、80%-93。/。的PLA、2%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(8)10%-15%的卡莫司汀、75%-89。/。的PLA、1%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(9)15%-20%的卡莫司汀、84%-85。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(10)20%-35%的卡莫司汀和和60%-79。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚。其中，聚乳酸(PLA)的分子量峰值為500-5000、5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000;聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為IOOO-IOOOO、10000-25000、25000-40000或40000-60000;聚乳醇和聚乙醇酸的重量百分比為90:10、70-80:20-30、60-40:40-60、75:25、25:75或50:50;上述緩釋植入劑為顆粒樣、微球、納米球、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀或模樣。緩釋植入劑中各組份及其在緩釋植入劑中的重量百分含量以下列之一為最優(yōu)選(1)1%的卡莫司汀、95。/。的PLGA、4%的甲殼素、甘露醇或山梨醇；(2)5%的卡莫司汀、90。/。的PLGA、5%的氯化鈉、甘露醇或軟骨素；(3)10%的卡莫司汀、80。/。的PLGA、10%的甲殼素、甘露醇或山梨醇；(4)15%的卡莫司汀、80。/。的PLGA、5%的氯化鈉、甘露醇或軟骨素；(5)20%的卡莫司汀、75。/。的PLGA、5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚；(6)2%的卡莫司汀、90。/。的PLA、8%的甲殼素、甘露醇或山梨醇；(7)7.5%的卡莫司汀、85。/。的PLA、7.5%的氯化鈉、甘露醇或軟骨素；(8)10%的卡莫司汀、75。/。的PLA、5%的甲殼素、甘露醇或山梨醇；(9)12.5%的卡莫司汀、70。/。的PLA、12.5%的氯化鈉、甘露醇或軟骨素；(10)25%的卡莫司汀、70。/。的PLA、5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚。其中，聚乳酸(PLA)的分子量峰值為10000-25000、25000-35000或30000-50000;乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為10000-25000、25000-40000或40000-60000;乳醇和乙醇酸的重量百分比為75:25、25:75或50:50。最優(yōu)選的緩釋植入劑中各組份及其在緩釋植入劑中的重量百分含量還包括下列之一(1)5%的卡莫司汀、90。/。的PLGA、5%的甘露醇或山梨醇；(2)10%的卡莫司汀、80。/。的PLGA、10%的甘露醇；(3)10%的卡莫司汀、80。/。的PLGA、10%的山梨醇;(4)15%的卡莫司汀、80。/。的PLGA、5%的氯化鈉或甘露醇；(5)20%的卡莫司汀、75。/。的PLGA、5%的甘露醇;(6)5%的卡莫司汀、90。/。的PLA、5%的甘露醇或山梨醇；(7)7.5%的卡莫司汀、85。/。的PLA、7.5%的甘露醇;(8)10%的卡莫司汀、75。/。的PLA、5%的甲殼素、甘露醇或山梨醇；(9)12.5%的卡莫司汀、70。/。的PLA、12.5%的甘露醇或軟骨素;(10)15%的卡莫司汀、75。/。的PLA、5%的甘露醇或山梨醇聚。其中，聚乳酸的分子量峰值為15000-30000;乳酸和乙醇酸的共聚物的分子量峰值為15000-30000;乳醇和乙醇酸的重量百分比為50:50。緩釋植入劑用于治療實體腫瘤，包括腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。因此，本發(fā)明的應用是用于制造治療上述腫瘤的上述各種藥物制劑，其中以針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及緩釋植入劑為優(yōu)選，以緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑為最優(yōu)選。該抗癌緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。本發(fā)明抗癌緩釋植入劑可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術(shù)療法合用，從而使其抗癌效果進一步加強。當與上述非手術(shù)療法合用時，本發(fā)明抗癌緩釋植入劑可與非手術(shù)療法同時應用，也可在非手術(shù)療法實施前幾天內(nèi)應用，其目的在于盡可能增強腫瘤的敏感性，從而為根治各種人體及動物原發(fā)和轉(zhuǎn)移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應用價值及顯著的經(jīng)濟和社會效益。當局部應用時，該緩釋植入劑可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤周圍或瘤體內(nèi)，也可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內(nèi)。本發(fā)明的主要成份以生物可容性物質(zhì)為支持物，故不引起異物反應。支持物體內(nèi)放置后可降解吸收，故不再手術(shù)取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應。對顱外實體腫瘤具有明顯的治療作用。本發(fā)明抗癌緩釋植入劑可通過許多方案予以實施，其目的只是為了進一步說明，并非對本發(fā)明的實施加以任何限制。研究表明將卡莫司汀對多種實體腫瘤細胞生長具有明顯的抑制作用。對肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、皮膚癌和睪丸癌等腫瘤細胞生長的抑制率在60%-96%。進一步研究表卡莫司汀對骨肉瘤及上述腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤的生長均有明顯抑制作用(P〈0.05)。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為遠處轉(zhuǎn)移的實體腫瘤的治療提供了新的選擇。本發(fā)明緩釋植入劑的制備方法如下1、將稱重的緩釋輔料放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解均勻，有機溶劑的量不嚴格限定，以充分溶解為宜；2、加入稱重之緩釋調(diào)節(jié)劑重新?lián)u勻?？拱┯行С煞菖c緩釋輔料的用量比例因具體要求而定；3、加入稱重之抗癌有效成份重新?lián)u勻?？拱┯行С煞菖c緩釋輔料的用量比例因具體要求而定；4、去除有機溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。5、將干燥后的固體緩釋植入劑根據(jù)需要制成各種形狀。6、分裝后射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。第2和3步可同時或以不同的順序進行，主要取決于藥物的穩(wěn)定性。具體實施方式實施例一、將稱重的緩釋輔料(分子量為15000-25000PLGA，50:50)和緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)分別放入不同的容器中，然后加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)后再加入不同重量的卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體緩釋植入劑立即成形，得到以下緩釋植入劑(A)1%的卡莫司汀，含lmg卡莫司汀、99mgPLGA(a)1%的卡莫司汀，含lmg卡莫司汀、95mgPLGA、4mg甘露醇；(B)5%的卡莫司汀、含5mg卡莫司汀、95mgPLGA;(b)5%的卡莫司汀、含5mg卡莫司汀、91mgPLGA、4mg甘露醇；(C)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、90mgPLGA;(c)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、80mgPLGA、10mg甘露醇；(D)15%的卡莫司汀、含15mg卡莫司汀、85mgPLGA;(d)15%的卡莫司汀、含15mg卡莫司汀、80mgPLGA、5mg甘露醇；(E)20%的卡莫司汀、含20mg卡莫司汀、80mgPLGA;(e)20%的卡莫司汀、含20mg卡莫司汀、75mgPLGA、5mg甘露醇。實施例二將實施例一中的10個緩釋植入劑分別放入溶出儀中測定其不同時間的藥物累積釋放量(%)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)緩釋植入劑中(A)、(B)、(C)、(D)和(E)五個不含緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯，其突釋現(xiàn)象多發(fā)生在第26-30天，約占總含藥量的40-60%，而(a)、(b)、(c)、(d)和(e)等含有緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯不明顯，藥物緩慢釋放3-5周。實施例三將稱重的緩釋輔料(分子量為20000-30000的PLGA，75:25)和緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)分別放入不同的容器中，然后加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)后再加入不同重量的卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體緩釋植入劑立即成形，得到以下緩釋植入劑(A)1%的卡莫司汀，含lmg卡莫司汀、99mgPLGA(a)1%的卡莫司汀，含lmg卡莫司汀、95mgPLGA和4mg山梨醇；(B)5%的卡莫司汀、含5mg卡莫司汀、95mgPLGA;(b)5%的卡莫司汀、含5mg卡莫司汀、91mgPLGA和4mg山梨醇；(C)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、90mgPLGA;(c)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、80mgPLGA和10。/。山梨醇；(D)15%的卡莫司汀、含15mg卡莫司汀、85mgPLGA;(d)15%的卡莫司汀、含15mg卡莫司汀、80mgPLGA、5mg山梨醇；(E)20%的卡莫司汀、含20mg卡莫司汀、80mgPLGA;(e)20%的卡莫司汀、含20mg卡莫司汀、75mgPLGA、5mg山梨醇。實施例四將實施例三中的1O個緩釋植入劑分別放入溶出儀中測定其不同時間的藥物累積釋放量(%)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)緩釋植入劑中(A)、(B)、(C)、(D)和(E)五個不含緩釋調(diào)節(jié)劑(山梨醇)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯，其突釋現(xiàn)象多發(fā)生在第26-32天，約占總含藥量的40-50%，而(a)、(b)、(c)、(d)和(e)等含有緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯不明顯，藥物緩慢釋放28-36天。實施例五將稱重的緩釋輔料(分子量為15000-25000的聚乳酸(PLA))和緩釋調(diào)節(jié)劑(氯化鈉)分別放入不同的容器中，然后加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)后再加入不同重量的卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體緩釋植入劑立即成形，得到以下緩釋植入劑(A)2%的卡莫司汀，含2mg卡莫司汀、98mgPLA;(a)2%的卡莫司汀，含2mg卡莫司汀、90mgPLA、8mg氯化鈉；(B)7.5%的卡莫司汀、含7.5mg卡莫司汀、92.5mgPLA;(b)7.5%的卡莫司汀、含7.5mg卡莫司汀、85mgPLA、7.5mg氯化鈉;(C)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、90mgPLA;(c)10%的卡莫司汀、含10mg卡莫司汀、85mgPLA、5mg氯化鈉；(D)12.5%的卡莫司汀、含12.5mg卡莫司汀、87.5mgPLA;(d)12.5%的卡莫司汀、含12.5mg卡莫司汀、75mgPLA、12.5mg氯化鈉；(E)25%的卡莫司汀、含25mg卡莫司汀、75mgPLA;(e)25%的卡莫司汀、含25mg卡莫司汀、70mgPLA、5mg氯化鈉。實施例六將實施例五中的10個緩釋植入劑分別放入溶出儀中測定其不同時間的藥物累積釋放量(%)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)緩釋植入劑中(A)、(B)、(C)、(D)和(E)五個不含緩釋調(diào)節(jié)劑(氯化鈉)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯，其突釋現(xiàn)象多發(fā)生在第24-32天，約占總含藥量的40-50%，而(a)、(b)、(c)、(d)和(e)等含有緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)的卡莫司汀緩釋植入劑的突釋現(xiàn)象明顯不明顯，藥物緩慢釋放28-36天。實施例七將稱重的緩釋輔料(分子量為25000-40000PLGA，75:25)和緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)分別放入不同的容器中，然后加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)后再加入不同重量的卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體緩釋植入劑立即成形，得到以下緩釋植入劑(1)5%的卡莫司汀、90。/。的PLGA、5%的甘露醇或山梨醇；(2)5%-10%的卡莫司汀、80%-93。/。的PLGA、2%-10%甘露醇或山梨醇；(3)10%-15%的卡莫司汀、75%-89。/。的PLGA、1%-10%甘露醇或山梨醇；(4)15%-20%的卡莫司汀、84%-85。/。的PLGA、1%-5%甘露醇或山梨醇；(5)20%%的卡莫司汀、75。/。的PLGA、5%甘露醇或山梨醇聚。實施例八按實施例一、三、五所述方法制成緩釋植入劑，所不同的是所含之抗癌有效成分為下列之一(1)1%-5%的卡莫司汀、90%-98。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(2)5%-10%的卡莫司汀、80。/。-93。/。的PLGA、2%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(3)10%-15%的卡莫司汀、75%-89。/。的PLGA、1%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(4)15%-20%的卡莫司汀、84%-85。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(5)20%-35%的卡莫司汀、60%-79。/。的PLGA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚；(6)1%-5%的卡莫司汀、90。/。-98。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(7)5%-10%的卡莫司汀、80%-93。/。的PLA、2%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(8)10%-15%的卡莫司汀、75%-89。/。的PLA、1%-10%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(9)15%-20%的卡莫司汀、84%-85。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇；(10)20%-35%的卡莫司汀和和60%-79。/。的PLA、1%-5%的氯化鈉、甘露醇或山梨醇聚。其中，聚乳酸(PLA)的分子量峰值為500-5000、5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000;聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為1000-10000、10000-25000、25000-40000或40000-60000;聚乳醇和聚乙醇酸的重量百分比為90:10、70-80:20-30、60-40:40-60、75:25、25:75或50:50。實施例九將稱重的緩釋輔料(分子量為15000-25000PLGA，50:50)和緩釋調(diào)節(jié)劑(甘露醇)分別放入不同的容器中，然后加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)后再加入不同重量的卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體緩釋植入劑立即成形，得到以下緩釋植入劑(1)5%的卡莫司汀、90。/。的PLGA、5%的甘露醇;(2)10%的卡莫司汀、83。/。的PLGA、7%甘露醇；(3)15%的卡莫司汀、75。/。的PLGA、10%甘露醇；(4)20%的卡莫司汀、77.5。/。的PLGA、2.5%甘露醇;(5)25%%的卡莫司汀、70。/。的PLGA、5%甘露醇。以上緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為25-35天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-40天。均無突釋。實施例十將實施例一中的植入劑小鼠皮下植入后，與不同時間取出放在室溫生理鹽水中浸泡，測不同時間藥物(卡莫司汀)的釋放J表l并計算累計釋放百分數(shù)(％)。見表l所示-<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表l釋放數(shù)據(jù)表明，不含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(A)、(B)、(C)、(D)和(E)在兩周內(nèi)釋放較少，不超過18%，在2-3周間集中釋放超過50%;而含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(a)、(b)、(c)、(d)和(e)在釋放緩慢平穩(wěn)，平均釋放周期在3-6周，無突釋現(xiàn)象。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的又一主要技術(shù)特征，為更好控制藥物釋放時間提供了新的指導。在此基礎上，本發(fā)明進一步發(fā)現(xiàn)體內(nèi)植入卡莫司汀對骨腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、直腸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實體腫瘤具有更好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀植入劑對實體腫瘤的抑制作用方法和步驟腫瘤細胞接種于小鼠的右側(cè)腋窩皮下，當腫瘤直徑生長至O.8cm左右時(接種后第14天)，將動物隨機分為ll組，每組10只。即生理鹽水組、不含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀植入劑組(以下簡稱卡莫司汀組)、含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀局部注射組(簡稱卡莫司汀調(diào)節(jié)劑)。用70%酒精消毒腫瘤表面皮膚，選擇距腫瘤下緣lcm處，剪開lmm長切口，用穿刺針將植入劑植入腫瘤組織中?？p合切口防止植入劑漏出。每3天用游標卡尺測量腫瘤大小，植入劑包埋后20天處死動物，稱體重后完整剝離腫瘤并稱瘤重。計算腫瘤抑制率％，DAS.verl.O藥理學軟件做統(tǒng)計學處理。腫瘤抑制率=(i-給藥組平均瘤重/生理鹽水組平均瘤重)X100%實施例十一腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀汀緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用按照上述方法和步驟檢驗實施例一制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用。本次實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系?？就〗M(A)、(B)、(C)、(D)和(E)的腫瘤抑制率分別為23呢、49%、60%，70%和76%;而含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(a)、(b)、(c)、(d)和(e)的腫瘤抑制率分別為40%、59%、75%，86%和92%。P值均小于O.001。重復實驗P值均小于O.001，差異有高度統(tǒng)計學意義。含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑的抑瘤率明顯超過不含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑組，兩次實驗結(jié)果重復性好。特別值得注意的是，卡莫司汀組(A)、(B)、(C)、(D)和(E)中，動物的平均體重較含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(a)、(b)、(c)、(d)和(e)組明顯減輕，其中(C)、(D)和(E)中分別有20。/。、40%和50%動物提前死亡，且死亡多集中在20-30天之間。因此說明藥物的突釋可能是導致毒性反應的主要原因。而在含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(a)、(b)、(c)、(d)和(e)組，無動物死亡。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的又一主要技術(shù)特征，為應用卡莫司汀緩釋植入劑治療實體腫瘤的提供了又一新的選擇和指導。實施例十二腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用按照上述方法和步驟檢驗實施例三制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。含調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑(a)、(b)、(c)、(d)和(e)的腫瘤抑制率分別為44%、58%、74%，80%和84%。P值均小于O.001。重復實驗P值均小于O.001，差異有高度統(tǒng)計學意義。實施例十三腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入小鼠肝癌(H22)實體腫瘤中能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為43%、56%、68%、74%和80%。與對照組比較，P值等于或小于O.001。實施例十四腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人食管癌(9706)實體腫瘤中，均能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為40%、54%、68%、74%和80%。與對照組比較，P值均小于0.001。實施例十五腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為32%、40%、57%、68%和78%，與對照組比較，P值均小于0.001。實施例十六卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠皮下種植卵巢癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠下種植卵巢癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入小鼠肝癌(H22)實體腫瘤中能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為40%、56%、66%、74%和82%。與對照組比較，P值等于或小于O.001。實施例十七腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠宮頸癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠宮頸癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人食管癌(9706)實體腫瘤中，均能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為43%、52%、72%、78%和88%。與對照組比較，P值均小于0.001。實施例十八腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠前列腺癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠前列腺癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為28%、44%、57%、64%和78%，與對照組比較，P值均小于0.001。實施例十九腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胃癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胃癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人食管癌(9706)實體腫瘤中，均能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為44%、50%、76%、78%和86%。與對照組比較，P值均小于0.001。實施例二十腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠結(jié)腸癌的抑瘤作用按照實施例十一和十二所述方法和步驟檢驗實施例九制得的卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠結(jié)腸癌的抑瘤作用。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。5%、10%、15%、20%和25%卡莫司汀植入劑的腫瘤抑制率分別為分別為30%、35%、46%、56%和68%，與對照組比較，P值均小于0.001。另外，腫瘤內(nèi)植入含緩釋調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑對膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、骨肉瘤、鼻咽癌、腎癌等其它實體腫瘤也具有很好的治療作用，其作用明顯超過等量不緩釋調(diào)節(jié)劑的卡莫司汀緩釋植入劑及卡莫司汀腹腔注射組和局部注射組。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的又一主要技術(shù)特征，為實體腫瘤的治療提供了又一新的選擇。上述實施例是用來說明而并非限制本發(fā)明，具體的實施情況以權(quán)力要求為主。權(quán)利要求1.一種治療實體腫瘤的卡莫司汀緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑由下列之一的成份組成，均未重量百分比(1)卡莫司汀1％-40％(2)緩釋輔料45％-98.9％(3)釋放調(diào)節(jié)劑0％-15％總量為100％，其中，緩釋輔料選自聚乳酸或乳酸和乙醇酸的共聚物，釋放調(diào)節(jié)劑選自甘露醇、山梨醇、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合。全文摘要一種治療實體腫瘤的卡莫司汀緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑含抗癌有效量的卡莫司汀、緩釋輔料和釋放調(diào)節(jié)劑。緩釋輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，主要為PLA、PLGA；釋放調(diào)節(jié)劑選自甘露醇、山梨醇、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合；該抗緩釋植入劑在其降解吸收的過程中能將卡莫司汀緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度，因此，單獨或與化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法聯(lián)合，可廣泛應用于各期實體腫瘤的治療，不僅能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，還可增強化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法的治療效果。文檔編號A61K9/00GK101176713SQ20071020289公開日2008年5月14日申請日期2007年12月6日優(yōu)先權(quán)日2007年12月6日發(fā)明者娟孫,穎陳申請人:濟南帥華醫(yī)藥科技有限公司